药理毒理研究资料

1、申请分类：新药申请 原收审号：CXL01885注册分类：化学药品第二类药品名称：利塞膦酸钠（三）申报生产药理毒理研究资料资料项目名称：药理毒理研究资料综述 资料项目编号3-16研究机构：北京怡丰康泰医药生物技术开发有限公司 昆明积大制药有限公司生产单位：昆明积大制药有限公司申请联系人：刘春霞（昆明） 冯朴纯（北京）申请联系人电话5031 010-8447639113888649728（刘春霞）(冯朴纯) 联系地址：昆明高新技术产业区北区第M1-10-7号地块 邮编 650106北京东城区东直门外大街48号东方银座写字楼9层D-E 邮编 10

2、0027药品注册申请人名称：昆明积大制药有限公司 北京怡丰康泰医药生物技术开发有限公司16号资料目录16.1品种简介16.2药效学16.3药代动力学16.4药理毒理学16.4.1一般药理16.4.2急性毒性16.4.3 长期毒性试验16.4.4特殊毒性试验16.4.5致突试验16.4.6生殖毒性试验16. 药理毒理研究资料综述16.1品种简介本品通用名为利塞膦酸钠 (Risedronate sodium) ，属于第三代双膦酸盐。长期的临床研究表明，利塞膦酸钠具有抑制破骨细胞形成的活性，从而抑制对骨的吸收作用，是一类有效的骨吸收抑制剂。它还能与骨羟磷灰石结合，抑制其生长和溶解，从而干扰破骨细胞对

3、骨的吸收作用。利塞膦酸钠薄膜衣片1998年首次在美国上市，剂量30mg/片，用于治疗变形性骨炎（Pagets病），商品名：Actonel。1999年FDA批准利塞膦酸钠用于激素引起的骨质疏松症，用法：5mg/日，同年5mg的利塞膦酸钠薄膜衣片在美国上市。2000年4月FDA批准利塞膦酸钠用于防治绝经后妇女的骨质疏松症，用法：5mg/日。现利塞膦酸钠5mg和30mg薄膜衣片已在美国、瑞典上市，分别用于防治（激素引起及绝经后妇女）骨质疏松症和变形性骨炎。经SFDA网查询，截止到2005年7月，国内有两家获得利塞膦酸钠原料及片的新药证书和生产批件。常州华生制药有限公司于2004年3月获得新药证书和生

4、产批件，河南天方药业股份有限公司于2005年5月获得新药证书和生产批件。国内尚无利塞膦酸钠原料及片进口。骨质疏松症在欧美及亚洲各国已成为危害老年人健康最为常见的疾病之一，全世界患者人数超过2亿，已成为全球第7位的常见病和多发病，仅美国、西欧、日本就有7500万人患有该病，每年治疗及住院费用高达250亿美元。我国也同样表现出这一趋势，老年人的绝对数量已占世界第一位，在我国的老年人口中，5060岁人群骨质疏松症发病率为21%，6070岁为58%，7080岁为100%。据初步估计，我国骨质疏松症患者约有1亿人以上。由于本品系2002年12月1日前申报的品种，根据2003年4月4日国家药品监督管理局颁

5、发的临床研究批件的内容，利塞膦酸钠注册分类为化学药品第二类新药。因此本品类别仍为原新药审批办法规定的第二类新药，此次申报生产资料按照药品注册管理办法化学药品注册分类第3.1类的要求整理。我司申报利塞膦酸钠片的规格为5mg/片。适应症为：治疗女性绝经后骨质疏松。预防女性绝经后骨质疏松。治疗因长期应用皮质激素治疗引起的骨量减低或骨质疏松。变形性骨炎（Pagets病）。用法用量：预防和治疗绝经期后妇女的骨质疏松和长期应用激素引起的骨质疏松：5mg/日，每日一片；变形性骨炎：30mg/日，请严格遵照医嘱。服用方法：晨起后用足够的温水（120ml）整片冲服，不要吮吸或咀嚼。因食物和饮料可影响利塞膦酸钠的

6、吸收，晨起后服用，在早餐前30分钟服用。其他时候请在进食2小时后服用，服用后30分钟内不能平躺。如食物中无足够的钙及维生素D，应同时补充钙及维生素D，但利塞膦酸钠与钙不可同时服用。16.2药效学Risedronate在动物骨质疏松模型中抑制骨组织的再吸收。大鼠皮下注射最低有效剂量为0.006-0.015mg/kg/d。在OVX（卵巢切除）大鼠模型中，Risedronate能完全的抑制OVX导致的骨质丢失和骨小梁的破坏；能防止OVX导致的股骨颈强度的降低；Risedronate在用药停止后仍能长时间能抑制OVX诱导的骨组织丢失。这可能是由于Risedronate在骨组织中沉积，其半衰期长达数年引

7、起的。在OVX大鼠模型中，如果在OVX之后立即给予Risedronate，或者已经发生骨组织的丢失后再给予Risedronate，均可有效防止骨组织的丢失（或进一步加重）；Risedronate的效应与总（累积）剂量相关。在正常大鼠中，Risedronate也能抑制骨组织的再吸收，并增加BMD。在OVX白鼬模型中（为期3个月的研究），即使OVX对上述参数没有产生影响，Risedronate也能增加BMD，改善骨小梁结构，并增加脊椎骨的强度。在OVX小种猪模型中（为期8个月的研究），OVX和Risedronate对小种猪的BMD和脊椎骨的强度都没有影响。在几项破骨细胞引起的骨质再吸收和骨质丢失模

8、型的试验中，Risedronate对骨组织的再吸收及骨质更新产生剂量依赖性的抑制作用。在肿瘤模型中，主要通过抗破骨细胞作用，Risedronate减轻肿瘤引起的高血钙症和骨质溶解。在关节炎模型中，Risedronate对骨质的增生和破坏也有一些有益的作用。试验中无论每日连续给药或间歇给予Risedronate均可观察到该效应；而且，在停止给药后，效应还可维持相当一段时间。在骨盐沉积、自发性骨折发生率、机械性骨强度等方面，Risedronate都显示出良好作用。16.3药代动力学 利塞膦酸钠结构中无发色基团，亦无可衍生的基团，并且由于本品抗骨吸收作用强，使用剂量低，其药代动力学研究较困难。文献报

9、道比较有限。在一项随机双盲安慰剂对照试验中，46名健康志愿者口服利塞膦酸钠2.5、5或30mg每天，Cmax分别为0.41、0.94和5.1ng/ml，AUC分别为1.8、3.9和21ng/ml·h，尿排泄量分别为22、63和260µg，均呈剂量依赖性，且三种剂量的Tmax和肾清除率（CLr）无明显差异。本品口服吸收较快，达峰时间约1小时，连续给药57天后可达到稳态血药浓度。口服给药30mg的平均生物利用度约为0.63。在一项临床试验中观察饮食对药物吸收的影响发现：正餐后2h和早餐前0.5h给药，利塞膦酸钠吸收程度相似；而饭前1或4h给药吸收程度明显提高。与饭后2h给药相比

10、，饭前0.5、1或4小时给药的峰浓度分别大2.8、3.5和4.1倍。24小时内人体吸收的药物中约有一半经尿排出，静脉给药28天后，85%的药物经尿排出。平均肾清除率为105ml/min，平均总清除率为122 ml/min，这主要由药物骨吸收造成的差异。未吸收药物以原形由粪便排出。本品吸收后初始半衰期约1.5小时，终末半衰期约480小时，这可能是由于利塞膦酸钠从骨组织上解离引起。利塞膦酸钠的药代动力学在不同性别间无显著差异，肝功能对药物基本无影响。在老年人和年轻人中本品的生物利用度和代谢相似，无需调整剂量。但利塞膦酸钠的肾清除率和肾功能的降低有明显关系，随着肌酐清除率的降低而稳定减少。16.4药

11、理毒理学16.4.1一般药理：在下列试验中，Risedronate对动物各系统均未产生影响：对小鼠神经药理研究，对小鼠自发性运动的影响，戊四唑诱导的小鼠惊厥试验，醋酸诱导的小鼠扭体实验，巴比妥诱导的睡眠时间试验，雄性小鼠胃肠推进作用的试验，对止血功能的影响，对大鼠肝功能、胆汁排泄和利尿作用的影响（30mg/kg以下无影响），角叉胶(carrageenan)诱导的大鼠肢爪水肿试验，对大鼠体温的影响，对幽门结扎大鼠胃酸分泌功能的影响，静脉给药时对麻醉狗的急性血流动力学研究，对孕大鼠及未孕大鼠离体子宫的影响，对豚鼠离体右心房的影响，对豚鼠离体回肠的自发性运动的影响和对乙酰胆碱、组胺、氯化钡的拮抗作用

12、。总之，Risedronate除对骨骼外，对全身其它各系统基本无影响。16.4.2急性毒性：小鼠禁食后口服Risedronate原料药的LD50为1574mg/kg，主要中毒反应为活动减少，颤抖、摄食量及体重下降、体温降低，最后死亡。死亡动物剖检发现胃肠道严重胀气，死亡时间在给药后2小时-9天不等。文献报道大鼠、小鼠和家兔可以耐受的最大单次口服剂量为2g/kg，按剂量/体表面积计，大鼠的最大耐受剂量是人预计使用量的666倍，小鼠则达到了333倍。更高的剂量会导致死亡。家兔3mg/kg、狗4mg/kg、大鼠/小鼠25mg/kg单次静脉注射均能耐受。静脉注射的耐受剂量约为口服剂量的1%，这表明口服

13、的生物利用度仅为1%左右。在死亡的狗、大鼠和家兔中，无论静脉注射还是口服给药均发现药物对胃的影响，大鼠静脉给药2天的实验中观察到药物引起的胃水肿。试验发现静脉注射Risedronate也能对动物产生胃部刺激作用，尽管药物和胃粘腊无直接接触（药代实验没有发现药物通过胆汁分泌）。16.4.3 长期毒性试验：1.小于6个月重复给药毒理研究： 用狗、小鼠和大鼠进行了14项Risedronate重复给药实验，所有的毒性实验结果都表现出与剂量和给药时间的相关性。 8mg/kg是狗口服给药出现毒性反应的最低剂量。最敏感地反映出毒性作用的指标是AST, ALT和SGOT。这个剂量同时引起了肝脏萎缩，肾坏死和一

14、些睾丸变性现象（如睾丸萎缩和精子生成停止）。大鼠的毒性剂量范围很大。在一项13周的给药实验中，8mg/kg是该实验的最大安全剂量，16mg/kg时出现了一些毒理学变化：血尿，睾丸萎缩和进食量下降；32mg/kg剂量时，出现AST, ALT上升，体重下降，进食量减少，胸腺重量减轻和肾小管坏死；当剂量达到64mg/kg时，中性粒细胞、WBC、BUN和甲状腺/甲状旁腺的重量增加，前列腺、精囊和睾丸重量降低，伴有严重的肠胃炎。在13周的实验中，低于16mg/kg的剂量是无毒的。小鼠是对药物反应最不敏感的实验动物。在一项13周的毒性试验中，32mg/kg的高剂量没有引起毒性。但是在一个20周的毒性试验中

15、，16mg/kg/d组有两只小鼠死亡，并且所有组的小鼠都出现了体重下降和胃部膨胀。这表明，小鼠长期给药的安全剂量应该在16mg/kg/d以下。2.大鼠6个月和1年的经口给药毒性实验：在6个月的大鼠毒性试验中，Risedronate 16mg/kg/d和32mg/kg/d组均有动物死亡。药物导致动物胸腺和淋巴结萎缩，AST和ALT上升，体重减轻和胃部损害，鼻窦和肺部损伤，以及骨骼组成的变化。8mg/kg/d和4mg/kg/d实验组的动物骨骼出现与高剂量组相似的药理作用，但是没有出现毒性反映。尚未有证据表明存在性别差异。Risedronate的药代监测表明，8mg/kg/d的剂量使药物排泄途径饱和

16、，再高的剂量会导致血药浓度急剧上升。这可部分解释Risedronate的安全剂量（4-8mg/kg）和致死剂量（16mg/kg）之间范围很小。大鼠一年毒性实验因为剂量太低（高剂量组为2mg/kg），没有观察到显著的毒性作用。实验证明了大鼠连续给药时间延长到6个月至1年不会增加毒性发生。3.狗6个月，1年和2年的口服药物毒性试验：16/mg/kg/d和32mg/kg/d实验组的狗在一个月左右全部死亡。低血钙症、肝毒性、和肝功能低下引起凝血障碍所造成的广泛 组织出血和损伤是动物死亡的主要原因。 8mg/kg/d的毒性反应与高剂量组的相似，在本组死亡的两只雌犬毒性反应较轻。 但没有证据表明动物对药物

17、敏感性方面有性别差异。在口服Risedronate 1年的试验中，4mg/kg/d剂量组生化效应和药效学效应与高剂量组的相似，但是除了血液AST和CK升高以外没有引起其他毒性反应。口服Risedronate（2mg/kg/d）两年的实验没有引起任何毒性作用。这也证明了长期使用药物不会产生累积效应。2mg/kg也是在所有小于6个月的试验中没有观察到毒性反应的最大剂量。4.长期毒性试验总结：狗、小鼠和大鼠口服Risedronate的安全剂量如下表：动物种类/ 给药时间无毒剂量（mg/kg/d）无毒剂量（mg/m2/d）毒性作用的主要靶器官按mg/kg计的倍数按mg/m2计的倍数按AUC计的倍数狗&

18、lt;6个月480胃、肝、肾睾丸84.3狗1年480胃、肝、肾睾丸84.315.3狗2年 >2>40剂量过低>4>2.1大鼠<6个月848胃、肝、肾162.67大鼠6个月848胃、肝、肾162.6大鼠1年>4>24剂量过低>8>1.3小鼠<6个月824胃、肝161.3人的使用剂量为30mg/60kg=0.5mg/kg=18.5mg/m2在所有的实验动物，药物都引起了肝毒性（AST, ALT上升，肝损伤和萎缩），消化道的不良反应和由此导致的进食量减少；在狗和大鼠发现了对睾丸的损害作用，中性粒细胞计数明显增高，肾小管损伤和坏死。在狗的实验

19、中还发现从食道到大肠的消化道浸蚀，肺、胰腺和淋巴结炎症。Risedronate与其他双磷酸盐相似，对消化道有直接损害作用。Risedronate对消化道的损害作用与其它双磷酸盐比较孰轻孰重，从上述试验还难以得出结论。损伤的机制至今尚不明确。在豚鼠实验中，Risedronate还能导致轻微的眼部和皮肤的损伤，但无抗原性。16.4.4特殊毒性试验：使用类固醇类消炎药制作的胃损伤模型进行试验，结果表明双膦酸盐类药物都能导致消化道不良反应，其中Alendronate 造成的损害最大，Risedronate也能导致消化道不良反应。上述模型与药物造成胃肠道损害的真正生理机制的相关性尚不明确。16.4.5致

20、突试验：实验没有发现Risedronate有导致突变的可能，只有在一个CHO细胞的细胞遗传学实验中，发现Risedronate在某些导致细胞死亡的浓度下出现基因毒性。1. 未禁食大鼠骨髓细胞遗传学实验中，大鼠一次灌胃给药1336mg/kg或500mg/kg/day 5天，药物没有对骨髓细胞染色体变异情况产生影响。药物没有产生毒性作用，对血液检测指标无影响，但另一个LD50实验结果显示，1336mg/kg只是未禁食大鼠LD50的一半。2. Ames实验使用了TA98, TA100, TA1535, TA1537和TA1538，加入或者不加Aroclor诱导大鼠肝脏微粒体。突变回复频率没有显著的上

21、升，直到“可能的最大浓度”8000ug/板，都没有发现毒性作用。3.突变回复实验使用了E.coli.的WP2-uvrA菌株, 分别加入和不加Aroclor诱导大鼠肝脏微粒体。突变频率没有显著上升，直到“可能的最大浓度”5000ug/板，都没有发现毒性作用。4. CHO-HGPRT实验分别加入和不加Aroclor诱导大鼠肝脏微粒体。S9阴性条件一直到950ug/ml，S9阳性一直到25ug/ml，突变菌落数没有显著变化。S9阴性时在950ug/ml的最大浓度，复制效率（cloning efficiency）下降到12%。S9阳性时，在25ug/ml的最大浓度下，分裂细胞存活率（survival of dividing cells）低于60%。5. 在化学诱导大鼠原代肝细胞产生DNA乱序合成实验（UDS/Unscheduled DNA Synthesis）中，Risedronate在4mg/ml时没有增加UDS的发生率。6. CHO细胞遗传学实验：Risedronate在S9 +/-条件下、高浓度时出现阳性结果。在较低的浓度(