青霉素和溶菌酶的作用机制

1、薃 For pers onal use only in study and research; not for commercial useFor pers onal use only in study and research; not for commercial use青霉素和溶菌酶的作用机制芄青霉素和溶菌酶的作用机制是通过与细菌细胞壁的肽聚糖层的作用位点相 结合，破坏细菌的细胞壁，细菌胞体内的渗透压很高，而细胞膜又很脆弱，于是 细菌就在人体内相对低渗的环境里溶胀，最终破裂。芃G+菌的肽聚糖层达20到50层，是其细胞壁的主要成分，而且其胞质的渗 透压达25-50个大气压；G-菌的肽聚糖层

2、很少，只有几层，最多十几层，其胞质 的渗透压只有5到6个大气压。因此，G+菌比G-菌对青霉素和溶菌酶更敏感。蒁溶菌酶作用机制： 蒈(lysozyme)又称胞壁质酶(muramidase)或N-乙酰胞壁质聚糖水解酶(N-acetylmuramide glycanohydrlase )，是一种能水解致病菌中黏多糖的碱性 酶。主要通过破坏细胞壁中的 N-乙酰胞壁酸和N-乙酰氨基葡糖之间的B -1,4糖 苷键，使细胞壁不溶性黏多糖分解成可溶性糖肽，导致细胞壁破裂内容物逸出而使细菌溶解。溶菌酶还可与带负电荷的病毒蛋白直接结合，与DNA RNA脱辅基蛋白形成复盐，使病毒失活。因此，该酶具有抗菌、消炎、抗病

3、毒等作用。螄该酶广泛存在于人体多种组织中，鸟类和家禽的蛋清、哺乳动物的泪、唾 液、血浆、尿、乳汁等体液以及微生物中也含此酶，其中以蛋清含量最为丰富。 从鸡蛋清中提取分离的溶菌酶是由18种129个氨基酸残基构成的单一肽链。它 富含碱性氨基酸，有4对二硫键维持酶构型，是一种碱性蛋白质，其N端为赖氨 酸，C端为亮氨酸。可分解溶壁微球菌、巨大芽抱杆菌、黄色八叠球菌等革兰阳 性菌薂青霉素作用机制:薆青霉素作用机制是干扰细菌细胞壁的合成。青霉素通过抑制细菌细胞壁四 肽侧链和五肽交连桥的结合而阻碍细胞壁合成而发挥杀菌作用。青霉素的结构与细胞壁的成分粘肽结构中的D-丙氨酰-D-丙氨酸近似，可与后者竞争转肽酶，

4、阻 碍粘肽的形成，造成细胞壁的缺损，使细菌失去细胞壁的渗透屏障，对细菌起到 杀灭作用。其对革兰阳性菌有效，由于革兰阴性菌缺乏五肽交连桥而青霉素对其 作用不大。莇青霉素对溶血性链球菌等链球菌属，肺炎链球菌和不产青霉素酶的葡萄球 菌具有良好抗菌作用。对肠球菌有中等度抗菌作用，淋病奈瑟菌、脑膜炎奈瑟菌、 白喉棒状杆菌、炭疽芽抱杆菌、牛型放线菌、念珠状链杆菌、李斯特菌、钩端螺 旋体和梅毒螺旋体对青霉素敏感。青霉素对流感嗜血杆菌和百日咳鲍特氏菌亦具 一定抗菌活性，其他革兰阴性需氧或兼性厌氧菌对青霉素敏感性差。螄英国和新加坡研究人员1日报告说，他们制造出能够观测5 0纳米大小物体的 光学显微镜，这是迄今观

5、测能力最强的光学显微镜， 也是世界上第一个能在普通 白光照明下直接观测纳米级物体的光学显微镜。荿英国曼彻斯特大学研究人员和新加坡同行当天在新一期自然通信杂志上报告了这项成果。由于光的衍射特性的限制，光学显微镜的观测极限通常约 为1微米。研究人员通过为光学显微镜添加一种特殊的“透明微米球透镜”，克服了上述障碍，使这一极限达到5 0纳米，观测能力提高了2 0倍。罿论文第一作者 王增波 博士告诉新华社记者：“这是目前世界上唯一能在普通白光照明下直接观测纳米级物体的光学显微镜，是一个新的世界纪录。”袇据介绍，目前一般使用电子显微镜观测极其微小的物体，但它也有一些缺陷。比如在观测细胞时，电子显微镜只能显

6、示出细胞表面的状况， 而不能用于观 测细胞内部结构。之前还有研究人员先为细胞染色，然后利用特制光学显微镜观 测染色后的细胞内部结构，但这种方法对病毒无效，因为染料无法进入病毒内部。 而这种新型光学显微镜首次提供了在普通条件下观测细胞内部结构和病毒活动 机理的手段。薅领导该项研究的曼彻斯特大学教授李琳说，这可能会为观测细胞和病毒的方式带来革命性变化，有助于研发新的药物和疾病治疗方法。莁 研究人员还表示，利用类似方法可以进一步制造出观测能力更强的光学显 微镜。从理论上说，这种基于“透明微米球透镜”的光学显微镜不存在观测极限。肇苯酚是德国化学家隆格1834年从煤焦油中首先发现的，他还相继从煤焦油 中

7、分离出苯胺、喹啉等有机物.芆苯酚俗称石炭酸苯酚来自煤焦油，又呈微弱酸性，叫“石炭酸”也顺理 成章.至于石炭则是中国古代煤的旧称， 最早出现于我国南北朝，到隋唐时石炭 这一名称已广泛使用并传播到海外.羁苯酚发现后一直未能发挥它的作用，卅年来默默无闻度春秋.使苯酚首次 名声远扬要归功于英国著名的医生，“外科消毒之父”的约瑟夫利斯特(1827-1912)蒂利斯特出生于英国，父亲是酒商，业余喜爱科学，曾经对消除显微镜的色 差作出贡献.在父亲的言传身教之下，利斯特从小对科学有浓厚兴趣，他能熟练 使用显微镜观察动、植物，14岁就能熟练解剖小动物，并立志长大要当一名外 科医生.1848年他进入伦敦大学学习医

8、学，学习期间他观看了英国第一次用氯 仿作麻醉剂的外科手术.在此之前外科医生开刀不用麻醉药， 病人痛苦不堪，而 且很多手术无法进行.有了麻醉剂不少手术是能做了，而且有的手术十分成功， 似乎从此可以拯救很多生命，但终因伤口不易愈合而感染，仍经常发生病人死 亡.利斯特暗下决心要找出原因.蒀大学毕业后利斯特曾在几家大医院行医数年，1859年他在格拉斯哥医院任 外科医生，在名医指导下医术提高很快.他一直在密切注意观察病人伤口的愈合 情况，发现病人死亡总是在伤口开刀之后发生， 而那些虽骨头断裂而皮肤完整的 病人一般皆会病愈，他设想伤口的腐败溃烂一定是来自空气的感染，可能是一种花粉样的微尘.蚅1864年4月

9、7日法国科学家巴斯德路易(1822-1895),在巴黎大学讲 堂作了一次著名的演说.他出示了二个对比的瓶子，一个是曲颈甑，一个是直颈 瓶，瓶中装有同样的营养液，前者 4年无变化，后者早已腐败.得出的结论是： 生物不能自然地发生，细菌是物质产生腐败的原因.利斯特获此消息，深深受启 发，意识到是空气中的细菌使伤口感染化脓产生并发症，从而导致手术后病人死亡，因此消毒灭菌应是解决问题的关键， 他深信只要手术后保护好伤口，不使细 菌侵入，将会大大有利于创口的愈合。螁利斯特选用石炭酸作消毒剂进行临床试验，1865年8月12日他给一个断 腿病人作手术，术前对手术室内的环境，手术器械用品，自己的双手均用苯酚溶

10、 液进行了消毒灭菌处理，手术后又对手术创口消毒，再用消毒过的纱布绷带仔细 包扎；以后每次换药也要经消毒处理，结果病人伤口很快愈合.以后利斯特在做 其它外科手术时也采用了这些措施，结果因手术后创口感染致死的病例大大下 降艿石炭酸是一种烈性消毒剂会灼伤皮肤，利斯特又进行了改进，加入水和油 配成混合溶液缓解其烈性， 1867 年他报告了一系列病例，说明消毒杀菌在外科 临床实践中的重要意义， 自1865年至1869年在他主管的病房中， 手术后病人死 亡率迅速地从 45下降到 15，他还把新的消毒法介绍到英国的爱丁堡医院薈 1870 年普法战争爆发，战争期间采用利斯特的方法拯救了不少战士的生 命但是守旧

11、的法国医学界未采用新的消毒灭菌法， 结果伤员手术后的死亡率高 达 90从 1873 年起巴斯德就一直推荐争取用新的消毒法，直到战争结束之前 法国才采用新的方法救治伤员， 第一次治疗的结果就使 34名伤员中的 19 人避免 了死亡，雄辩的事实给法国旧病理学的维护者以有力的一击膅1877年利斯特担任伦敦皇家学院外科学教授， 该年 10 月 26 日在皇家学院 医院用他的消毒法进行了一次完满成功的骨科手术， 从此他的方法得到确认并广 泛推广，全世界的医生纷纷仿效，医院的手术室开展了大规模的消毒清洁活动， 手术室制订了严格的消毒制度蒂利斯特用自己的发现和高超医术拯救了千百万人的生命，德高望重，他创 立

12、了英国的预防医学会， 还主持过英国皇家学会， 著有“论开放性骨折和脓肿等 的新疗法”、 “论外科临床中的防腐原则”等著作利斯特为人谦虚谨慎、淡泊 名利，在他取得成功之后曾写信告诉巴斯德：“伤口腐烂完全是因为细菌侵入， 经过消毒，细菌不能侵入，伤口便容易愈合了,这个成功应该归功于您的实 验 1892年他在参加法国政府为巴斯德 70寿辰举行的盛大宴会上，诚恳 地说：“您为世人揭开了传染病的黑幕” 用简洁的语言对巴斯德的贡献作了高度 的赞扬。芁1893年利斯特被封为男爵， 在英国医生中获此殊荣的是首例 利斯特性格 内向、腼腆，为人温和可亲，深受同行和病人尊重和爱戴，他在伦敦安然度过晚 年蚆历史上苯酚

13、作为一种强有力的消毒剂， 曾经在外科医疗上发挥过重要作用， 即使到了现代，苯酚仍在起消毒剂和消炎外用药的作用，例如： 3-5的苯酚溶 液可用于消毒医疗器械和物品及用于环境消毒； 1-2的苯酚溶液有止痒止痛消 炎作用、 1-2的苯酚甘油溶液是治疗中耳炎的消炎用药薄在现代随着科学技术的发展，新型的强力有效的消毒剂不断出现，但是各种消毒剂消毒能 力的强弱，还是以苯酚作标准来衡量，这就是“石炭酸系数” ，亦称“酚系数” 这是比较消 毒杀菌药剂杀菌强度的一种相对标准被试验药剂在 10 分钟内能杀死试验菌种的最低浓度 除以石炭酸在相同时间内能杀死该菌的最低浓度的数值， 这就是石炭酸系数， 通常以伤寒杆 菌

14、作试验菌种苯酚能使细菌蛋白质发生凝固和变性，从而起到抑菌和杀菌的作用节厌氧菌的培养方法莂1厌氧缸法接种好标本的平板或液体培养基试管，可放入厌氧缸内培养， 厌氧缸是 普通的干燥缸 ，用物理化学的方法 使缸内造成厌氧环境， 从而将厌氧菌 培养出来。聿 2厌氧袋( Bio-bag )即在 塑料袋内 造成厌氧环境来培养厌氧菌。塑料袋透 明而不透气，内装气体发生管(有硼氢化钠的碳酸氢钠固体以及 5%柠檬酸安瓿)、 美兰指示剂管、钯催化剂管、干燥剂。放入已接种好的平板后，尽量挤出袋内空 气，然后密封袋口。先折断气体发生管，后折断美兰指示剂管，命名袋内在半小 时内造成无气环境。如不突变表示袋内已达厌氧状态，

15、可以孵育。羃 3厌氧手套箱( Anaerobie glove box )是迄今为止国际上公认的培养厌氧 菌最佳仪器之一 。它是一个密闭的大型金属箱， 箱的前面有一个有机玻璃做的透 明面板，板上装有两个手套，可通过手套在箱内进行操作，故名。箱侧有一交换 室，具有内外二门， 内门通箱内先关着。 欲放物入箱， 先打开外门， 放入交换室， 关上外门进行抽气和换气(H2, CO2, N2)达到厌氧状态，然后手伸入手套把交 换室内门打开，将物品移入箱内，关上内门。箱内保持厌氧状态，也是利用充气 中的氢在钯的催化下和箱中钱残余氧化合成水的原理。 该箱可调节温度, 本身是 孵箱或孵箱即附在其内, 还可放入解剖

16、显微镜便于观察厌氧菌菌落, 这种厌氧箱 适于作厌氧细菌的大量培养研究,大量培养基可放入作预还原和厌氧性无菌试 验。金属硬壁型厌氧箱的抽气、充气、厌氧环境和温度等均系自动调节。羂 4.厌氧盒：原理同厌氧袋,有成品销售。膀 5.生物耗氧法：在一密闭的容器内放以生物(多是植物),消耗氧气,同 时产生二氧化碳,供细菌生长用。我没见过。膇 6.焦性末食子酸法：在一洁净的玻片上铺上纱布或滤纸,均匀撒上焦性末 食子酸,然后再混入 NaHCO3 粉末或 NaOH 溶液,迅速将已接种细菌的平板倒 扣在上面, 用融化的白蜡封边, 造成一个封闭空间。 焦性末食子酸与碱反应后耗 氧。该法用于厌氧不严格的厌氧菌的培养,

17、简单。如有梭状芽孢杆菌。蚇 7. 疱肉培养基：本身就是一个不需特殊设备的厌氧培养法。疱肉和肉汤装入大试管,液面 封凡士林,造成无氧环境。蚃芁湖 南 城 市 学 院 实 验 教 学 课 程 表蕿院(系)： 化学与环境工程系 实验室：生物工程实验室 课程名称： 微生物学实验 2010 2011 学年 第 2 学期肆序号蒃地点肇项目名称蚈周次薆指导教师賺星期腿上午1-4节蚄1羈3-511芇培养基的配制与火困螄6蒅三羀0908401组蒇2袁3-511肁细困的接种与培养螈7羆三蚁0908401组祎3莆3-511莂细菌、霉菌染色与形态观 察袀8芈三螅0908401组羁4莇3-511膅茯砖茶中微生物的分离与

18、 鉴定袃9羇三羇0908401组袁肇附实验分组名单肅0908401组：18人龚亚辉、卢贻章、李志、何信、苏乐斌、周贤勇、徐勇、唐彭、方璟盾、奉伟星、蒋晨凤、廖小梅、邓楠、周颖、任申蓉、汤优、丁敬敬、李春英薅0908401组：18人胡亚强、屈红全、杨亚运、周新亮、梁育松、陈欢君、覃怀怀、彭强、潘铜、武鑫、 伍蕾、卢梦梦、樊慧、潘金凤、张会玲、邓昭君、张梅清、聂之薁微生物学练习题出题要求聿（供讨论参考）膄为了促进同学们看书和理解书本知识，锻炼同学们课本知识运用的能力， 在每一章节学习结束后，以学习小组为单位，每组出一套练习题，本学期的微生 物学期末考试试题将从同学们自己出的试题中择优选择。羅出题范

19、围有教师在课堂上指定掌握、理解运用和了解的知识点三个层面。莁完成后提交至公共邮箱，便于大家学习交流。袇一、填空题薆 5-10 个题目，每题两个填空内容（要求内容为本章掌握和理解运用的知识 点），答案附在本小题后，必须说明在教材的哪一页第几段。莄二、判断正误题 肂5-10个题目，要求内容为本章掌握、理解运用和了解的知识点，答案附在 本小题后，必须说明在教材的哪一页第几段。羈三、名词解释题蚅 2-4 个题目，要求内容为本章掌握、理解运用的知识点，答案附在本小题 后，必须说明在教材的哪一页第几段。螃四、选择题螂5-10个题目， ABCD 四个选择支，只有一个正确答案，要求内容为本章掌 握、理解运用和

20、了解的知识点， 答案附在本小题后， 必须说明在教材的哪一页第 几段。罿五、简要回答题肇2 个题目，要求内容为本章掌握、理解运用的知识点，答案附在本小题后， 必须说明在教材的哪一页第几段。芃六、解释现象题薃2 个题目，先描述书本上提到的现象，设计 3 个问题回答，要求内容为本 章掌握、理解运用和了解的知识点， 答案附在本小题后， 必须说明在教材的哪一 页第几段。螇七、实验设计题或综合分析题膅 1 个题目，要求内容为本章掌握、理解运用的内容，答案附在本小题后， 必须说明在教材的哪一页。蚂要求本章掌握、理解运用的内容必须全面覆盖，了解的知识点可以不覆盖。聿袈天花 : 公元 165 年，一场可怕的流行

21、性天花席卷了整个罗马帝国。仅在罗 马每天都有 2000 人死亡，它整整肆虐了 15 年，杀死了意大利全国人口的 1/3肁鼠疫:即黑死病，在公元36世纪，它席卷了整个罗马帝国。正是黑死病导 致了东罗马帝国在公元7世纪的崩溃。公元13461361年，爆发了一场著名的 黑死病潮，在这场病中， 总共有 2400万人死亡，相当于整个欧洲大陆人口的 1/3蝿袀斑疹伤寒: 1812年，拿破仑率领近 50万大军入侵俄国，近半数士兵因斑疹 伤寒和痢疾而死亡或丧失行动能力。 当下令撤出莫斯科的时候， 他的军队只剩下 8 万人；而 1813 年 6 月撤退行动结束时，只有 3000 多名士兵。螅流行性感冒 : 40

22、0 多年前，意大利威尼斯城的一次流感大流行使六万人死亡， 惊慌的人们认为这是上帝的惩罚，所以将这种病命名“魔鬼”。 1957年和 1968 年发生的两次全球性流感，病人总数达 10 亿多。薀蚇如果一个种群从来没有接触过某种病毒，那么这种病毒对这个种群会有更 大的杀伤力。西班牙人向美洲殖民的时候，将天花、麻疹、斑疹伤寒和流感带到 了美洲，土著人对这些病根本没有抵抗力， 对美洲的征服变成了一场病魔的大屠 杀。西班牙人入侵时的墨西哥还有 3000 万居民，天花的侵袭使他们在 40 年后只 剩下了 300万，一个世纪后只剩下 160万。螄膄疯牛病最早发现于 1984 年至 1985 年。当时，英国的农

23、场发现有牛患上了 这种神经系统疾病， 并具有传染性。 英国维桥国家兽医中心实验室的兽医专家对 病牛的大脑进行解剖时，发现病牛脑组织呈海绵状变性。根据病理变化，1986年11 月这种神经系统的疾病被定名为牛海绵状脑病。 不到20年工夫，疯牛病就 已扩散到了欧洲、美洲和亚洲的几十个国家。截止到 2002年，英国共屠宰病牛 1100 多万头，经济损失达数百亿英镑。芀“埃博拉”出血热是一种死亡率很高的传染病，是由一种叫“埃博拉”的 病毒引发的。埃博拉病毒十分罕见，最早于 1967年在德国的马尔堡首次发现，“埃博拉”出血热病死率高达5 0%到9 0%,通过接触病人的血液或其他体液， 经皮肤、呼吸道或结膜

24、而感染，潜伏期为5至14天。发病症状为突然起病，表 现为发热、头痛、肌痛、结膜充血等，几天后可出现呕吐、腹痛、腹泻、咽痛， 导致人体内外出血、 血液凝固、 坏死的血液很快传及全身的各个器官， 病人最终 耳、眼口及皮肤大量出血而死。螈2003 年初，非典型肺炎突然爆发。短短数月，已蔓延至二十几个国家，令 全世界如临大敌。其强烈的传染性令人们为之色变。 医护人员健康受到直接威胁， 百姓生活受到巨大干扰。全民抗炎，成为 2003 年中国大地的主旋律。肇1878 年，意大利禽流感，首次爆发；蚄危害最大，经济损失最严重的禽流感 （H5N5）:1983 年美国滨州等地区 , 直 接损失 6000多万美元，

25、间接经济损失估计达 3.49亿美元 ,1997年 5月，香港禽 流感，直接损失达 8000 万港币；羀2003年 3月，荷兰禽流感，波及最广的爆发，荷兰南部海尔德兰省 800个 农场已经受到禽流感的影响，已蔓延到比利时与德国边境附近。袀1987年在美国首先报道了猪繁殖与呼吸综合征（prrs）,即蓝耳病，19891990 年在亚洲开始流行。上世纪 90 年代该病传入我国，世界动物卫生组织将其列为 法定报告动物疫病， 我国列为二类动物疫病。 该病主要表现为繁殖障碍与呼吸道 症状。临床特征为：怀孕母猪大批流产、死胎、早产、产弱仔，流产率达30，严重者可达 7080；哺乳母猪严重缺奶，甚至无奶汁，乳猪

26、10 日龄以内死亡率为 80100；生长猪和育肥猪出现呼吸道感染症状，有的猪出现结膜炎， 眼睑和结膜水肿， 个别出现球结膜水肿。 其结果造成饲料报酬率降低、 母猪繁殖 率障碍、生长速度下降。芅 2006 年夏秋之季，我国部分地区发生以高热为特征的猪病。最初许多人 称之为“高热病”。农业部及时组织中国动物疫病预防控制中心、中国兽医药品 监察所、中国动物卫生与流行病学中心、 中国农科院哈尔滨兽医研究所等单位及 有关专家，对“高热病”开展了流行病学调查、病原分离鉴定、动物试验等科技 攻关。分离到猪繁殖与呼吸综合征（即猪蓝耳病）病毒变异株。 2007年月 1 月， 农业部最终确定“高热病”即“高致病性

27、蓝耳病”。肃 “流行性脑膜炎 在中国扩散” 流行性脑膜炎是由脑膜炎双球菌引起的急性 传染病。上呼吸道感染 - 菌血症（高热、恶心、呕吐，皮肤出现瘀点、瘀斑 为本病特征）-可侵及脑膜，发展成脑膜炎.暴发型脑膜炎严重休克、面色 苍白、四肢冰冷、脉搏摸不到、血压下降或测不出、心率快、心音低钝、神志昏 迷。后遗症有耳聋、失明、肢体瘫痪、智能及精神改变、脑积水等。 2001 年到 2004年中国的流脑病例数分别为 2250例、 2550例、 2535例、 2698例，稳定在 百万分之二左右，低于一些欧洲国家和美国的发病率。AC 型流脑混合疫苗供民众预防接种螁主要的放线菌类型蚇放线菌是具有菌丝、以孢子进行

28、繁殖、革兰氏染色阳性的一类原核微生物。因 其具有分枝状菌丝、菌落形态与霉菌相似，过去曾认为放线菌是 " 介于细菌与真 菌之间的微生物 " 。然而，用近代生物学技术所进行的研究结果表明，放线菌实 际上是属于细菌范畴内的原核微生物， 只不过其细胞形态为分枝状菌丝。 从系统 发育上看，放线菌(除高温放线菌外)与全部 G+ 细菌一起同属于这一大分支中 的高 G+C/mol ( 60-72 )群。薈 多腔孢囊放线菌蒂 这类放线菌包括嗜皮菌属、地嗜皮菌属和弗兰克氏菌属，其共同特征是： 菌丝进行纵向和横向分裂， 直接产生孢子， 菌丝形成细胞群或孢子簇， 细胞壁含 有内消旋二氨基庚二酸(m

29、eso Diaminopimelic acid,m DAP)。嗜皮菌属(Dermatophilum )：菌丝在不同的平面上形成横隔，构成砖格状细胞堆，产 生直角侧向分枝。 寄生在哺乳动物体上， 侵害未角质化的表皮， 引起渗出性皮炎。 弗兰克氏菌属( Frankia )：该属放线菌最显著的特征是能与非豆科木本植物共 生固氮。 在木麻黄和杨梅上可形成具有向上生长小根的根瘤；而在桤木、 鼠李科和蔷薇科植物上形成的根瘤成簇， 每簇由许多裂片状的小根瘤组成。 在有隔、 分 枝的菌丝体顶端的泡囊柄上， 形成泡囊， 泡囊具有固氮功能。 弗兰克氏菌属可利 用的最适碳源是短链脂肪酸和有机酸，能利用吐温是该属独特

30、的特征。蒁孢囊放线菌 蚈 这类放线菌以孢囊孢子进行繁殖为突出特征。孢子的分裂和排列方式用于 区分不同的属。蚆(1)游动放线菌属( Actinoplanes )羂 孢囊球状、棒状或不规则状，产生圆形或近圆形具丛生鞭毛的游动孢子。 多分布在腐烂植物和土壤中。节(2)指孢囊菌属( Dactylosporangium )螀 孢囊指状或棒状，其内可产生规则的球形孢子， 排列成单一行列。 16SrRNA 寡核苷酸编目表明该属在系统发育上与游动放线菌菌属、小单孢菌属的关系密 切。袄(3)游动单孢菌属( Planomonospora )薅 产生梭形、具周生鞭毛的游动孢子是该属的特征。多分布在温带和热带的 土壤

31、中。羂链霉菌薇 链霉菌具有发达的基内菌丝和气生菌丝，孢子丝和孢子所具有的典型特征 是区分各种链霉菌明显的表观特征， 产多种抗生素是这类放线菌最突出的生理特 性。链霉菌属 (Streptomyces )： 包括几百个种的链霉菌属是放线菌中种类最 多的一属。该属的孢子丝可呈直形、波曲和螺旋形，螺旋形有开环螺旋形钩状、 松螺旋、紧螺旋之分。孢子丝在排列方式上又有簇生、单轮生、二级轮生之别。 孢子丝可产 3 50 个孢子，孢子呈球形、椭圆形或杆状，有的表面光滑，有的 表面具有瘤状、刺状、毛发状或鳞片状等饰物。孢子丝的形状、排列方式、孢子 表面饰纹是分种的重要表型特征。 该属可产生 1000 多种抗生素

32、， 用于临床的已 超过 100 种，如链霉素( Streptomycin )、卡那霉素 (Kanamycin) 、丝裂霉 素 (Mitomycin) 等，是放线菌中产抗生素最多的属。 此外，该属的种还可以产生 维生素、酶和酶抑制剂。 多数腐生型的链霉菌在土壤中生长， 分解土壤中其他微 生物难以利用的有机物， 对土壤环境具有高度的适应性， 在土壤改良中具有积极 意义。少数寄生型的种能引起植物病害，如疮痂链霉菌( S.scabies )可导致马 铃薯和甜菜的疮痂病。膇其它放线菌 肄 (1) 小单孢菌( Micromonospora )螂 在单轴分枝的孢子梗上产生圆形的单生孢子是该属最突出的表观特征

33、。腐 生型的小单孢菌具有很强的分解纤维素、 几丁质的能力， 是土壤和水体中常见的 放线菌。临床上广泛使用的庆大霉素是由该属中的棘孢小单孢菌( M.echinospora )产生的。蕿 (2) 高温放线菌属( Thermoactinomyces )芅在系统发育上，该属归于 G+菌DNA低G+C菌群(G+C/mol% 为30-42 )，说明该属与其他放线菌在遗传上远缘。 气生菌丝和基内菌丝均可产生 单个孢子是该属的特点。 多分布在高温的堆肥、 厩肥和自热草堆中， 有些种可产 抗生素。蒄 (3) 诺卡氏菌属 ( Nocardia ) 和拟诺卡氏菌属( Nocardiopsis ) 腿 诺卡氏菌属又名

34、原放线菌属，培养 15 小时至 4 天的菌丝体产生横膈膜后 可突然断裂成长短近一致的杆状或带叉的杆状体或球状体， 以此复制成新的多核 菌丝体是该属突出的特点。 多数种只有营养菌丝， 而无气生菌丝。 一些具有极薄 气生菌丝的种也可以产生杆状或椭圆形的孢子。 该属可产生多种抗生素， 如对结 核分枝杆菌( Mycobacterium tuberculosis )和麻风杆菌 ( M.Leprae )有特效 的利福霉素 (rifomycin) 以及抗 G+ 菌的瑞斯托霉素 (ristocetin) 。此外，有的诺 卡氏菌在石油脱蜡、 烃类发酵、 处理含氰废水方面有实用价值。 拟诺卡氏菌属在 形态特征上与

35、诺卡氏菌属相似，有的种可引起人和动物眼及肺部感染。蚀 (4) 马杜拉放线菌属( Actinomadura )蚇 该属的放线菌可产生多种抗生素，如抗禽类球虫病的马杜霉素 ( madumycin ),有的种可通过伤口感染引起足分枝菌病。(5) 放线菌属 ( Actinomyces ) 罿 该属最突出的特征是无气生菌丝，不形成孢子，通过营养菌丝断裂成"V""Y" 形体进行繁殖。 多数是致病菌， 如引起牛颚肿病的牛型放线菌 (A. bovis ) 以及引起人后颚骨肿病和肺感染的衣氏放线菌 (A.israelii )。蒇螆益生菌研究进展，问题，发展方向莂消费者对健

36、康意识的增强和消费水平的急剧提升是欧洲乃至世界范围内对 功能食品关注程度提高的主要原因。 功能食品的成功很大程度上依赖于对健康要 求的令人信服的证据， 再加上坚实的科学依据和向消费者确切全面地进行知识传 播。就目前取得的进展和问题可以总结如下：虿?功能性益生菌益生原食品已经存在很长时间，运用科学知识和技术，已 经证实了它们具有目标性好处，今天这种好处有了改进；葿?功能性益生菌益生原食品可以满足消费者日益提高的要求， 包括特定功 能和优良性状的改进以及可避免疾病的预防， 但是，功能性好处的指示方法需要 进一步验证；袄?食品企业能够大规模生产利于大量消费者的具有不同的功能性食品， 但消 费者需要较

37、为容易地获取安全科学可靠的有效信息以进行正确选择；螂?欧洲食品企业在食品和健康领域有一定优势， 未来在营养和食品科学的研 究领域将变得更有竞争力。蒀欧洲计划最近表明利用科学方法筛选和应用益生菌能够为欧洲消费者开发 出对健康益处可知的功能性食品。 将益生菌株成功地加工改造并加入到可被高度 接受的食品中去，并使之保持足够的活性以及功能性。 PrObdemo 计划证明了 益生菌能够通过胃肠道上部并存活下来，还可以在结肠(包括其中的黏膜 ) 中定殖。菌株之间区别很大， 不仅表现在加工特性上， 还表现在对人体健康的作用上。 现在，在考虑到用更好的筛选体系选择合适的益生菌的基础上， 有助于人体健康 功能的

38、一些机制已被逐渐阐明。 至今，人体试验表明益生菌可以改善消费者的肠 道菌群，调节免疫系统， 对健康有正面效果。 临床试验无疑将加深对益生菌作用 机制的认识，还有待深入证明益生菌食品的健康功效。薀现在，益生菌益生原的概念已经在科学和工业领域广泛应用，但是还需 要进一步加强科学研究。 人体肠道和免疫调节高度相关， 微生物群落是维持肠道 内免疫稳定状态的重要部分。 重要的目标研究领域， 包括胃肠道诊断学、 免疫学、 方法学、生物标记和功能性， 将会有利于人体研究的工具和科学方法的出现。 临 床试验对于益生菌功能性食品在社会经济领域的成功是必需的， 应该为特定人群 如老年人、婴儿设计。未来益生菌的研究

39、将集中在筛选新型和对特定疾病有效、并能在宿主中表现良好的菌株。也许有充分理由相信胃肠道不同区段(如结肠、空肠、十二指肠 )有不同的益生菌或细菌混合生长，这尤其适用于结肠癌、轮状 病毒腹泻和由 Helicobacter pylori 引起的胃炎。在严格控制下对筛选到的菌株 研究可以为不同年龄的人群提供特定益生菌以预防和治疗特定疾病。 另外，应该 将不同益生菌的混合物和结肠菌落联系起来并结合肠道完整性的促进和保护进 行综合研究。芇为此，未来的科学和技术研究趋势总结如下： 膁?将欧洲在该领域的专长和食品科学技术、肠道功能、胃肠道功能和人体健 康有机结合起来；膀?研究益生菌和益生原在肠道内的作用机制，

40、 开发诊断工具和生物标记来对 此评价；莇?评价免疫学生物标记及其在益生菌上的利用；虿?检测益生菌对不同人群中胃肠疾病、胃肠感染和过敏的作用；腿?尊重消费者利益、诚信经营、确保益生菌产品的稳定性和有效性。膅蚃细菌制造叶酸之谜得解肁一些生物化学过程被认为已经被研究得非常完整，因此科学家相信不会再取得任何这 方面的发现。但是最近 Johns Hopkins 大学的科学家的发现推翻了这个理论，他们确认了 一种 30 年来一直是个谜的酶。该结果发表在结构( Structure )上。薈作者之一， Hopkins 生物物理和生物物理化学教授 L. Mario Amzel 说： “当我们意 识到发现的是细菌

41、制造维生素 B 叶酸的酶时，我们非常惊讶，因为从 1974 年开始科学家 就知道应该存在这样一种物质。 ”羅Amzel和同事 Maurice Bessman 当时在系统研究细菌中一组相关的酶如何识别特 定的分子，对于每一种酶，科学家都进行纯化分离。然后使它们生长出晶体，再利用X 射线等技术分析出酶的三维结构。 有了三维结构，小组就可以利用计算机模型分析酶如何和另 一个分子结合和发生相互作用。蒀文章作者 Sandra Gabelli 说：“在 Maurice 开始搜寻旧资料前我们并未觉得这有何 特别的，结果发现 Suzuki 和合作者在 1974 年发表文章称大肠杆菌中存在一种和我们类似 的酶，

42、它能发动叶酸的生物合成。 ”膀Amzel说：因此我们问，去除了orf17 基因的细菌是否能制造叶酸。Bessman 和同事因此去除了这一基因，结果和预想的一样，细菌制造的叶酸比正常时少了10 倍。细菌人类无法进行叶制造叶酸的机制对于希望设计更有效的抗生素药物的科学家而言非常重要。酸合成，因此设计针对细菌叶酸合成机制的药物不会对人类产生副作用。羇 Amzel认为他们找到了潜在的杀菌目标，他说：我们并非药物设计行业的一员，而只是致力于基础研究。我们希望取得的发现能帮助其他人发明新的药物。”蚅细菌的革兰氏染色法薂革兰氏染色法是细菌学中广泛使用的一种鉴别染色法，1884 年由丹麦医师 Gram 创立，

43、细菌先经碱性染料结晶染色，而经碘液媒染后，用酒精脱色，在一定条件下有的细菌此色不被脱去，有的可被脱去， 因此可把细菌分为两大类，前者叫做革兰氏阳性菌（G+），后者为革兰氏阴性菌（G）。为观察方便，脱色后再用一种红色染料如碱性蕃红等进行复染。阳性菌仍带紫色，阴性菌则被染上红色。有芽胞的杆菌和 绝大多数和球菌，以及所有的放线菌和真菌都呈革兰氏正反应；弧菌，螺旋体和大多数致病性的无芽胞杆 菌都呈现负反应。芈原理：革兰氏染色目前有三种观点：等电点学说、化学学说和渗透学说。蒇1 .等电点学说，革兰氏阳性菌的等电点在PH2-3，比阴性菌（PH4-5 ）低，加之碘为弱氧化剂，可降低革兰氏阳性菌的等电点，致使

44、两类菌的等电点差异扩大，因此阳性菌和碱性染料的结合力比阴性菌 更强。莆 2.化学学说，碘液在菌体内与结晶紫结合后又和菌体内核糖核酸镁盐-蛋白质复合物结合，此结合物不易被丙酮、酒精脱掉，呈革兰氏染色阳性。因革兰氏阴性菌缺乏核糖核酸镁盐，故对碘与结晶紫结合 物摄取少，且不牢固，易被丙酮酒精脱色而呈革兰氏染色阴性。薃3.渗透学说，乙醇使阳性菌所含粘肽多糖脱水而致细胞壁间隙缩小，通透性降低，在菌体内保留了 染料-碘复合物，呈紫色。阴性菌含粘肽少，细胞壁变化不大，通透性不受影响，菌体内的染料-碘复合物较易透出，失去紫色，被复染成为红色。蚀试剂:Crystal violet（结晶紫）、Gram lodin

45、e（碘液）、Decolourizer （丙酮酒精）、 Safranin （稀释沙 黄）袆操作 ：膆 1 标本处理：莀（1）.有菌部位的标本，如痰液、粪便、各种拭子、创面等可直接涂片。蝿（2）.无菌部位的标本，如脑脊液、胸水、腹水、胆汁、尿液、关节液等，应取适量标本（最高可达 5-7ml ） ,经 3000rpm 离心 10min. ，取沉渣涂片染色。芆 2 涂片制作：菌液涂片时，用接种环沾取菌液点在载玻片上，标本可直接在玻片上涂布；菌落涂片 时，先取生理盐水一滴，置玻片上，用接种针挑取菌落在盐水中涂布。制作的涂片应自然干燥，并经火焰 固定，固定的温度不宜过高，以玻片背面接触手背不烫为准，否则可

46、能使细菌形态改变。将固定后的涂片 进行染色。袇 3 染色方法：蒂 （1） . 加上 Crystal violet（ 结晶紫 ）后，染色 3-5 秒或更久，之后用自来水冲洗之。膁 （2） . 加上 Gram Iodine（ 碘液 ）后染色 3-5 秒或更久，之后用自来水冲洗之。罿 （3） . 以 Decolourizer （丙酮酒精）脱色约 5-10 秒，并用自来水冲洗之。莃 （4） . 加上 Safranin （稀释沙黄）后，染色 3-5 秒或更久，之后用自来水冲洗之。薃（5）.吸干或在空气中凉干后，置油镜镜检。芀 4 结果观察：紫色为革兰氏阳性，红色为革兰氏阴性。莈 报告方式 ：膃 革兰氏染

47、色：检出革兰氏阳性球菌；革兰氏阴性球菌莀 检出革兰氏阳性杆菌 ；革兰氏阴性杆菌莈 注意事项 ：袈 1 标本涂片不能太厚，严格按操作要求进行。袄 2 玻片通过火焰温度不能太高。莂 3 若涂片较厚，应延长脱色时间，直至不在出现紫色为止。蚀 临床意义 ：通过革兰氏染色，将细菌分为革兰氏阳性和革兰氏阴性，便于临床治疗。芇附薄1沙黄（番红）Safranine T C20H19CIN4=350.85红棕色粉末；碱基性染料。在水中溶解，在乙醇中易溶。蒃2碘液配制：0.01mol/l碘液一一称取1.3g碘，置于50mol烧杯中，加入2.5g碘化钾及25毫升蒸 馏水，不断搅拌之，使其溶解均匀。再加0.2mol浓

48、盐酸（体积质量1.19g/cm3），再加蒸馏水稀释到1000mol。 溶液应贮藏在棕色试剂瓶中，储于低温暗橱内。有效期为一个月左右衿革兰氏阴性菌，以大肠杆菌为代表。大肠杆菌为兼气性菌种，一般生存於肠道中及厌氧的还境中。革兰 氏阴性菌细胞壁的特徵为有一层out member与阳性菌种不同。目前对大肠杆菌的研究很多，除了它是一般食物中是否有被污染的指标外，很多分子生物学方面的研究皆需要使用到大肠杆菌当作实验宿主。莄发件人:芁霉菌及霉菌素的污染賺霉菌及霉菌毒素污染食品后，引起的危害主要有二个方面：即霉菌引起的食品变质和霉菌产生的毒素引起人类中毒。 霉菌污染食品可使食品的食用价值降低， 甚至完全不能食

49、用， 造成 巨 大的经济损失。据统计全世界每年平均有 2%的谷物由于霉变不能食用。霉菌毒素引起的中毒大多通过被霉菌污染的粮食，油料作物以及发酵食品等引起，而且霉菌毒素中毒往往表现为明显的地方性和季节性，临床表现较为复杂，有急性中毒、慢性中毒以及致癌、致畸和致突变等。肆霉菌及其产生的毒素对食品的污染以南方多雨地区为多见，目前已知的霉菌素素约有 200余 种，不同的霉菌其产毒能力不同， 毒素的毒性作用也不同， 按其化学性质可分为肝脏毒、 肾 脏 毒、神经毒、细胞毒及类似性激素样作用。与食品关系较为密切的霉菌毒素有黄曲霉毒素、赭曲霉毒素、杂色曲霉素、岛青霉素、黄天精、桔青霉素、层青霉素、单端抱霉素类

50、、玉未赤霉烯酮、丁烯酸内醋等。肅（一）影响霉菌生长繁殖的条件扌节影响霉菌生长繁殖及产毒的因素是很多的，与食品关系密切的有水份、温度、基质、通风 等条件，为此，控制这些条件，可以对食品中霉菌分布及产毒造成很大的影响。艿1、水份蝿霉菌生长繁殖主要的条件之一是必须保持一定的水份，一般来说，米麦类水份在14%以下，大豆类在11%以下，干菜和干果品在30%以下，微生物是较难生长的。食品中真正能被微生物 利用的那部分水份又称为水份活性（Water activity 缩写为Aw） ，Aw越接近于1，微生物最易 生长繁殖。食品中的Aw为0.98时。微生物最易生长繁殖，当Aw降为0.93以下时，微生物繁殖 受到

51、抑制，但霉菌仍能生长，当Aw在0.7以下时，则霉菌的繁殖受到抑制，可以阻止产毒的霉菌繁殖。袅2、温度莃温度对霉菌的繁殖及产毒均有重要的影响，不同种类的霉菌其最适温度是不一样的，大多 数霉菌繁殖最适宜的温度为25-30 C，在0 C以下或30 C以上，不能产毒或产毒力减弱。如黄曲霉的最低繁殖温度范围是6-8 C,最高繁殖温度是 44-46 C,最适生长温度 37 C左右。但产毒温度则不一样，略低于生长最适温度，如黄曲霉的最适产毒温度为28-32 °Co蒈3、食品基质艿与其它微生物生长繁殖的条件一样，不同的食品基质霉菌生长的情况是不同的，一般而言，营养丰富的食品其霉菌生长的可能性就大，天

52、然基质比人工培养基产毒为好。实验证实，同一霉菌菌株在同样培养条件下，以富于糖类的小麦、米为基质比油料为基质的黄曲霉毒素产毒量高。另外，缓慢通风较快速风干霉菌容易繁殖产毒。薆4、霉菌种类賺不同种类的霉菌其生长繁殖的速度和产毒的能力是有差异霉菌毒素中毒性最强者有黄曲 霉毒素、赭曲霉毒素、黄绿青霉素、红色青霉素及青霉酸。目前已知有五种毒素可引起动物致癌，它们是典曲霉毒素（B荷1、G;、¥1、M心1）、黄天精、环氯素、杂色曲霉素和展青霉素。螀（二）主要的几种霉菌毒素蚈1、黄曲霉毒素（Aflatoxin）莆黄曲霉毒素是黄曲霉和寄生曲霉生的一组代谢产物。黄曲霉毒素基本结构二咲喃环和香豆 素，在紫

53、外光下能发生荧光，目前已分离鉴定的有12种以上，在二咲喃末端有双键者毒性较 强，并有致癌性。黄曲霉素耐热，在烹调加工温度下破坏较少，在水中的溶解度较低。黄曲 霉毒素主要污染花生、花生油、玉米、大米、棉籽等粮油及其制品。具有较强的急性毒性，慢性毒性和致癌性。因为黄曲霉毒素B 1的毒性和致癌性最强，黄曲霉毒素B 1又是食品中 污染的主要形式，故食品卫生标准中以此为污染指标。膂2、岛青霉类毒素衿岛青霉类毒素是由岛青霉产生的代谢产物，岛青霉为青霉属。国外报道的黄变米”主要含有青霉属，最常分离的霉菌有黄绿青霉、岛青霉、和桔青霉等。黄变米”是由于稻谷收割 后，贮存中含水份过高，被霉菌污染后发生霉变所致，因

54、为霉变呈黄色，故称：黄变米” 它与我国湖南、湖北、江西等地的黄粒米”有所不同，黄粒米”是由于稻谷抢收抢种，未能及时脱粒干燥，稻谷暂时堆放后极易霉变，脱粒后米粒呈黄色，俗称黄粒米”，分离 出的霉菌以黄曲霉、烟曲霉、构巢曲霉为主。肇岛青霉类毒素包括黄天精、环氯素、岛青霉毒素、红天精等。这些毒素易污染谷物，对人体危害所表现的毒性作用一般为三种类型， 即急性毒性、 亚急性或亚慢性毒性和慢性毒性作用 并已证实黄天精和环氯素有致癌作用。肆3 、镰刀菌毒素芄镰刀菌毒素主要是镰刀菌属和个别其他菌属霉菌所产生的有毒代谢产物的总称。这些毒素 主要是通过霉变粮谷而危害人畜健康。 根据其化学结构和毒性作用可以主要分为

55、单端孢霉素类 玉米赤霉烯酮和丁烯酸内酮等几类毒素。芁(1) 单端孢霉素类蒇主要有 T-2 毒素、双乙酸蔗草镰刀菌烯醇、新茄病镰刀菌烯醇和镰刀菌烯酮 -X 等。急性 毒性 较强，以局部刺激症状、炎症甚至坏死为主，慢性毒性可引起白细胞减少，抑制蛋白质和 DN A 的合成。袇(2) 玉米赤霉烯酮肁又称 F-2 毒素等，以污染玉米、大小麦、燕麦和小麦为主，具有类雌性激素样作用。荿(3) 丁烯酸内脂 羆是三线镰刀菌产生的一种水溶性有毒代谢产物，可引起牛烂蹄病，可引起后腿变瘸、蹄和皮肤 联结处破裂、脱蹄。因为是一种血液毒，故毒性也较大，尚不能排除致癌的可能性。芃根霉与毛霉膂根霉与毛霉同属毛霉目，很多特征相

56、似，主要区别在于，根霉有假根和匍匐菌丝。匍匐菌 丝呈弧形，在培养基表面水平生长。匍匐菌丝着生孢子囊梗的部位，接触培养基外， 菌丝伸入培 养基内呈分枝状生长，犹如树根，故称假根，这是根霉的重要特征。其有性繁殖产生接合孢子， 无性繁殖形成孢囊孢子。蒈根霉菌菌丝体白色、无隔膜，单细胞，气生性强，在培养基上交织成疏松的絮状菌落，生 长迅速，可蔓延覆盖整个表面。莅在自然界分布很广，空气、土壤以及各器皿表面都有存在。并常出现于淀粉质食品上，引 起馒头、面包、甘薯等发霉变质，或造成水果蔬菜腐烂。肃根霉在生命活动过程中能产生淀粉酶、糖化酶，是工业上有名的生产菌种。有的用作发酵 饲料的曲种。 我国酿酒工业中，

57、用根霉作为糖化霉种已有悠久的历史， 同时也是家甜酒曲的主要 菌种。近年来在甾体激素转化、有机酸 ( 延胡素酸、乳酸 ) 的生产中被广泛利用。膄常见的根霉有匍枝根霉即黑根霉俗称面包霉，米根霉等。聿两者皆有假根，但根霉属有匍匐菌丝，毛霉属无。螄根霉属有囊托，毛霉属无羁毛霉属有囊领，根霉属无。羈毛霉属抱子囊梗单株从菌丝上发生，分枝或不分枝。蒈薄光合细菌的开发应用进展肂1光合细菌的主要类群莁光合细菌是能进行光合作用的一类细菌。 它是地球上最早出现的具有原始光能合成体 系的原核生物。 目前， 主要根据光合细菌所具有的光合色素体系和光合作用中是否能以硫为 电子供体将其划分为 4 个科： Rhodospirillaceae （红色无硫细菌）、 Chromatiaceae （红色 硫细菌）、 Chlorobiaceae （绿色硫细菌）和 Chloroflexaceae （滑行丝状绿色硫细菌）。 进一步可分为 22 个属， 61 个种。袈 2光合细菌的主要生理生态学特征芅