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文档简介
1、家畜生理学实验血液生理之白细胞张宇飞指点教师:赵怀平高级实验室一、实验目地n了解白细胞计数原理,掌握其技术方法、红细胞沉降速率的测定方法及测定、测定红细胞膜对低渗溶液的抵抗才干。二、实验原理n白细胞旧称白血球,也被称为免疫细胞,体和动物血液及组织中的无色细胞,能吞噬异物或产生抗体,以协助机体防御感染。白细胞普通有活泼的挪动才干,它们可以从血管内迁移到血管外,或从血管外组织迁移到血管内。因此,白细胞除存在于血液和淋巴中外,也广泛存在于血管、淋巴管以外的组织中。 n血液中的白细胞有五种,按照体积从小到大是:淋巴细胞,嗜碱粒细胞,中性粒细胞,单核细胞和嗜酸细胞。白细胞是无色有核的血细胞,在血液中普通
2、呈球形,根据形状差别可分为颗粒和无颗粒两大类。 n故白细胞计数具有重要的生理意义。n悬浮于低张溶液中的红细胞,由于溶液张力差别,可使红细胞外的水渐渐进入红细胞中。红细胞先变为球形;当到达临界容量时,那么红细胞破裂溶解。察看上清液游离Hb量即可反映出红细胞脆性。n n将抗凝血放入血沉管中垂直静置,红细胞由于密度较大而下沉。通常以红细胞在第一小时末下沉的间隔表示红细胞的沉降速度,称为红细胞沉降率,即血沉。三、实验资料n家兔血、血细胞计数板、显微镜、试管、血沉管四、实验工程n1. 白细胞计数白细胞计数 WBC n2. 红细胞沉降率的测定红细胞沉降率的测定 n3. 红细胞的脆性实验红细胞的脆性实验五、
3、实验方法n1、白细胞计数、白细胞计数 n3、白细胞计数、白细胞计数n吸血及血液的稀释:吸血及血液的稀释均在红细胞吸管中进展。吸血及血液的稀释:吸血及血液的稀释均在红细胞吸管中进展。n推片及充液:在推片和充液前,先在显微镜下检查计数板和盖玻片能否清推片及充液:在推片和充液前,先在显微镜下检查计数板和盖玻片能否清洁,假设不干净那么清洁后运用。推片是指用手指将盖玻片固定在计数板的洁,假设不干净那么清洁后运用。推片是指用手指将盖玻片固定在计数板的正中间计数室边缘,然后大拇指将其缓慢的推行,使盖玻片贴在计数室两侧正中间计数室边缘,然后大拇指将其缓慢的推行,使盖玻片贴在计数室两侧的槽上,充液是指将稀释好的
4、血液摇匀后,先弃去吸管内的前两滴,然后用的槽上,充液是指将稀释好的血液摇匀后,先弃去吸管内的前两滴,然后用半滴放到计数室和盖玻片的间隙,同毛吸作用使血液进入计数室内。半滴放到计数室和盖玻片的间隙,同毛吸作用使血液进入计数室内。n计数:稀释的血液进入计数室后,静置计数:稀释的血液进入计数室后,静置23分钟后,在低倍显微镜下找中分钟后,在低倍显微镜下找中央大方格,然后在高倍镜下数央大方格,然后在高倍镜下数4个角上的小方格和中央小方格中红细胞数目。个角上的小方格和中央小方格中红细胞数目。n结果计算:结果计算:N指细胞总数指细胞总数n稀释稀释200倍:倍:x=N107n稀释稀释100倍:倍:x=N2.
5、5107n2. 红细胞沉降率的测定红细胞沉降率的测定n用清洁、枯燥的血沉管,小心吸血至最高用清洁、枯燥的血沉管,小心吸血至最高刻度刻度“0处。绝对不能有气泡,假设有气处。绝对不能有气泡,假设有气泡重新做。将吸有血液的血沉管置于血沉泡重新做。将吸有血液的血沉管置于血沉管架上,分别在管架上,分别在15min、30min、1h时读时读取血沉管上部血浆的高度,以毫米表示。取血沉管上部血浆的高度,以毫米表示。n3. 红细胞的脆性实验红细胞的脆性实验n不同浓度氯化钠溶液的配制:不同浓度氯化钠溶液的配制: 管号123456789101%氯化钠/mL1.801.401.301.201.10 1.000.900
6、.800.700.60蒸馏水/mL0.200.600.700.800.90 1.001.101.201.301.40氯化钠浓度/%0.900.700.650.600.55 1.000.450.400.350.30n取决10支小试管;分别配制上述不同浓度的氯化钠溶液;各管再参与全血一滴;混匀后静置1小时察看结果。 六、结果分析n1、白细胞计数n临床意义1生理变化1猛烈的膂力劳动或心情激动都使白细胞添加。2新生儿的白细胞数较成人高,3日后降到每微升10,000左右。3在妊娠期中,白细胞常轻度增多,分娩时增多能够更显著。4慢性特发性白细胞增多症,其白细胞总数可继续在10,00020,000l,但无其
7、他异常发现。5高温作业、饮酒及饭后亦能够有轻度添加。n病理变化增高见于急性化脓性感染所引起的急性周身性感染,部分炎症脓肿、脑膜炎、大叶性肺炎、兰尾炎、扁桃体炎、脓胸、败血症等以及其他一些细菌感染如猩红热、霍乱、白喉等。此外,白血病、骨髓纤维化、恶性肿瘤、真性红细胞增多症、尿毒症、酸中毒、手术后、急性失血后、某些药物中毒和烧伤等亦常增高。其中尤以慢性白血病增高最多,有时可达几十万;骨髓纤维化大多在10,00020,000;真性红细胞增多症大多在12,00030,000。由于感染等所引起的类白血病反响,有时亦可高达数万。减少见于1某些感染:细菌如伤寒、付伤寒、布氏菌病等;病毒如流感、麻疹、风疹、登
8、革热等及各种重度感染如粟粒性肺结核病、严重败血症等。2脾功能亢进:见于肝硬化、班替氏综合征等。3血液病:再生妨碍性贫血,急性粒细胞缺乏症可减到只剩数百l,非白血病性白血病、恶性网状细胞增多症。4 化学要素:可致白细胞减少的有抗癌药物氮芥、环磷酰胺、长春花碱及长春新碱等、解热镇痛药氨基比林、氨替比林、保太松、复方阿斯匹林及水扬酸钠等、抗甲状腺药两基硫氧嘧啶、甲基硫氧嘧啶,他巴唑、甲亢平等、抗癫痫药苯妥英钠、巴比妥类等、磺胺类磺胺噻唑、磺胺嘧啶、长效磺胺、磺胺异恶唑等、抗生素氯霉素、合霉素、新生霉素、青霉素、链霉素、金霉素等、抗疟药奎宁、扑疟奎宁、伯氨奎宁等、抗痨药异烟肼、异烟宗、对氨基水扬酸、氨
9、硫脲等、抗组织胺药苯海拉明、苯沙明等、抗糖尿病药D860、P607等、抗高血压药氯噻嗪氢氯噻嗪、甲基多巴、利血平、氯丙嗪等、利尿药汞利尿剂、利尿酸、乙酰唑胺等、其它苯、金盐、铋、有机砷、山道年、二硝基酚、DDT 、青霉胺等。5物理要素 (X线、放射性物质。注:白细胞计数,对病情动态察看具有一定的意义。鉴于白细胞的正常数值幅度较大,因此,临床在分析结果时,须与分类和原来的白细胞基数结合起来,否那么易呵斥延误诊断。n2. 红细胞沉降率的测定红细胞沉降率的测定n红细胞沉降率红细胞沉降率ESR测定测定临床意义临床意义ESR的变化主要同血浆中球蛋白,如的变化主要同血浆中球蛋白,如2和和球蛋白,尤其是与纤
10、维蛋白原的球蛋白,尤其是与纤维蛋白原的含量多少有关,假设球蛋白与纤维蛋白原含量多于正常,血沉就增快,所以含量多少有关,假设球蛋白与纤维蛋白原含量多于正常,血沉就增快,所以变化无特异性。但对任何一种血沉增速的疾病,在病程内定期察看血沉的动变化无特异性。但对任何一种血沉增速的疾病,在病程内定期察看血沉的动态变化,可以协助推断病变的开展情况。态变化,可以协助推断病变的开展情况。增高见于:增高见于:生理性:妇女月经期,妊娠后生理性:妇女月经期,妊娠后3个月到产后个月到产后1个月,小儿和个月,小儿和50岁以上的老人。岁以上的老人。病理性:病理性:1各种急性的全身和部分感染,如活动性结核病、疟疾、风温热和
11、肺炎。各种急性的全身和部分感染,如活动性结核病、疟疾、风温热和肺炎。2结缔组织性疾患,如多发性肌炎。结缔组织性疾患,如多发性肌炎。3在产重贫血、白血病、某些恶性肿瘤、甲亢、肾炎以及铅、砷、酒精在产重贫血、白血病、某些恶性肿瘤、甲亢、肾炎以及铅、砷、酒精中毒时亦常增高。中毒时亦常增高。减低见于:减低见于:真性红细胞增多症及继发性红细胞增多症、低纤维蛋白原血症、球形红细胞真性红细胞增多症及继发性红细胞增多症、低纤维蛋白原血症、球形红细胞增多症、心脏代偿功能妨碍等。增多症、心脏代偿功能妨碍等。 n 3. 红细胞的脆性实验n结果:n 开场溶血:上层液开场呈透明红色且管底有红细胞者;n 完全溶血:溶液为透明红色且管底无红细胞者;必要时可
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