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文档简介

1、 实实 验验 八八 大肠菌群最近似数的测定大肠菌群最近似数的测定大肠菌群大肠菌群:coliforms:coliforms最近似数最近似数:most probable number,mpn:most probable number,mpn 概念：大肠菌群系指一群在37 24h能 发酵乳糖产酸产气，需氧或兼性 厌氧的革兰氏阴性无芽胞杆菌， 包括肠杆菌科的埃希氏菌属、柠 檬酸细菌属、克雷伯氏菌属、肠 杆菌属。 单位：mpn/100ml（g）1.1.掌握掌握大肠菌群最近似数大肠菌群最近似数检验技术的检验技术的 要点要点2. 2. 学会发酵法检验学会发酵法检验大肠菌群最近似数大肠菌群最近似数样品样品37

2、37恒温培养箱、接种环、酒恒温培养箱、接种环、酒精灯、试管架、记号笔等精灯、试管架、记号笔等培养基培养基三、方法1、样品及其稀释（同细菌总数测定）2、接种乳糖胆盐发酵管（33=9支）3、鉴别培养（伊红美兰）4、乳糖复发酵试验l1. 1. 采样采样: :无菌操作无菌操作l2. 2. 初发酵试验：吸取待检样品接种于乳糖胆初发酵试验：吸取待检样品接种于乳糖胆盐发酵管内，盐发酵管内，10ml10ml接种量采用双料发酵管，而接种量采用双料发酵管，而lmllml及及lmllml以下接种量采用单料管。每一接种量以下接种量采用单料管。每一接种量接种接种3 3管，置于管，置于35353737培养培养2424士士

3、2h2h。将产酸、。将产酸、产气的发酵管按下列程序继续进行检验。产气的发酵管按下列程序继续进行检验。3. 3. 分离培养：将产气的发酵管中的发分离培养：将产气的发酵管中的发酵液在酵液在embemb平板上划线分离，置于平板上划线分离，置于353537c37c培养培养18 18 24h 24h 革兰氏染色及镜检：于上述平板上革兰氏染色及镜检：于上述平板上长出的菌落中挑取长出的菌落中挑取1 12 2个大肠菌群可个大肠菌群可疑菌落进行镜检和革兰氏染色疑菌落进行镜检和革兰氏染色4. 4. 复发酵试验：将上述镜检之菌复发酵试验：将上述镜检之菌 落同时接种于乳糖发酵管，置落同时接种于乳糖发酵管，置 于于35 35 3737培养培养2424土土2h2h，观察，观察 产气情况。产气情况。四、结果报告四、结果报告（按照国标及有关标准） 凡是在乳糖胆盐发酵管产酸、产气，在指示性培养基上能生长的，革兰氏染色为阴性的无芽抱杆菌，在复发酵管中产酸、产气的，即说明有大肠菌群的细菌存在大肠菌群阳性； 有一项不符的，即说明无大肠菌群的细菌存在大肠菌群阴性。 根

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