绿叶中色素的提取和分离

1、绿叶中色素的提取和别离一、学习目标1理解叶绿中色素的提取和别离的原理 2掌握提取和别离叶绿体中色素的根本方法 3描述各种试剂的作用，并能分析实验中出现的各种现象一实验原理绿叶中的色素是有机物，能溶解在有机溶剂无水乙醇 或丙酮 中，所以用无水乙醇可 提取叶绿体中的色素。层析液也是有机溶剂，不同的色素在层析液中溶解度不同，溶解度 高的色素分子随层析液在滤纸条上扩散得快，溶解度低的色素分子随层析液在滤纸条上扩 散得慢，因而可用层析液将不同色素进行别离。二主要实验材料：1. 新鲜的绿叶如菠菜的绿叶2. 枯燥的定性滤纸，试管，棉塞，试管架，研钵，玻璃漏斗，尼龙布，毛细吸管，剪刀，药勺，量筒10 mL,天

2、平。3无水乙醇如果没有无水乙醇，也可用体积分数为95%的乙醇，但要参加适量的无水碳酸钠，以除去乙醇中的水分，层析液由20份在6090C下分馏出来的石油醚、2份丙酮和 1 分苯混合而成。 93 号汽油也可代用 ，二氧化硅和碳酸钙。三方法与步骤：1. 提取绿叶中的色素 1 称取 5 g 的绿叶，剪碎，放入研钵中。 2向研钵中放入少许二氧化硅和碳酸钙，再参加10 mL 无水乙醇，进行迅速、充分的研磨。二氧化硅有助于研磨的充分，碳酸钙可防止研磨中色素被破坏。3将研磨液迅速倒入玻璃漏斗漏斗基部放一块单层尼龙布中进行过滤。将滤液 收集到试管中，及时用棉塞将试管口塞严。2制备滤纸条 将枯燥的定性滤纸剪成长与

3、宽略小于试管长与宽的滤纸条，将滤纸条的一端剪去两角， 并在距这一端 1 cm 处用铅笔画一条横线。3画滤液细线 用毛细吸管吸取少量滤液，沿铅笔线均匀地画出一条细线。待滤液干后，再画一两次。 4别离绿叶中的色素 将适量的层析液倒入试管中，将滤纸条有滤液细线的一端朝下轻轻插入层析液中， 随后用棉塞塞紧试管口。注意，不能让滤液细线触及层析液。也可用小烧杯代替试管，用培养皿盖住小烧杯。 5观察与记录 观察试管内滤纸条上出现了几条色素带，以及每条色素带的颜色。将观察结果记录下 来。四考前须知1选材时要选取鲜嫩、颜色深绿的叶片，因为这样的叶片中色素的含量较高。2 研磨要迅速、充分：无水乙醇容易挥发为了使叶

4、绿体完全破裂，从而能提取较 多的色素叶绿素极不稳定，能被活细胞中的叶绿素酶水解而破坏。3 将枯燥的滤纸一端剪去两角可以使滤纸两侧的色素与滤纸中间的的色扩散速度一 致，得到的色素带整齐。4. 重复画滤液细线 23次可以使滤液细线含有较多的色素。5. 滤液细线要得细而直可以使各种色素扩散的起点相同，扩散均匀。6层析液不能触及滤液细线以防止滤液细线中的色素溶于层析液，从而使滤纸条上色素带过浅或没有色素带。7层析时，用培养皿盖住小烧杯可以防止层析液中有毒物质挥发。五、实验结论及分析预期实验现象实际观察到的现象误差分析提取色素别离色素六、例题分析1提取光合色素，进行纸层析别离，对该实验中各种现象的解释，

5、正确的选项是A. 未见色素带，说明材料可能为黄化叶片B. 色素始终在滤纸上，是因为色素不溶于层析液C. 提取液呈绿色是由于含有叶绿素a和叶绿素bD. 胡萝卜素处于滤纸前方，是因为其在滤液中的溶解度最高【解析】：题干要求对色素提取和别离实验现象的解释进行判断，那么首先要想到本实 验都会出现哪些现象，每种现象出现的原因是什么，如果能准确掌握这些根底知识，解决 此题就比拟容易了。2 以下图表示叶绿体色素的提取和别离实验的局部材料和用具。据图答复：(1) 图中步骤参加研钵内的物质：A 10mL，作用是B少许，作用是使研磨更充分；C少许，作用是 。(2) 图中步骤将浆糊状的研磨液倒入漏斗中，漏斗底部放有

6、 。(3) 图中步骤前去两角的作用是 ，画滤液细线的要求是 (4)图中步骤中关键应注意 :加盖的目的是 ;色素带最宽的是 ，扩散速度最快的是。【解析】：通过此题的图示即可知道此题是考查叶绿体色素的提取和别离的相关知识。 那么首先要联想到关于本实验的相关根底知识，然后按照每题的要求进行做答即可。七、知识反应一同步练习1以下关于“绿叶中色素的提取和别离的实验目的表达，错误的选项是 A 提取绿叶中的色素B 别离绿叶中的色素C.研究绿叶中的色素种类D 研究色素在叶片中的分布场所2以下关于“绿叶中色素的提取和别离的原理表达，错误的选项是 A 色素是有机物，易溶于有机溶剂B 可以用无水乙醇作溶剂提取色素C

7、.叶绿素b在层析液中的溶解度最大D 在层析液中溶解度越小的色素，纸层析时扩散的速度越慢3在提取绿叶中的色素时，选取的最正确叶片应是A. 大而多汁的叶片B.革质叶片C.刚刚长出来的小嫩叶D .鲜嫩、色浓绿的叶片4关于“绿叶中色素的提取和别离实验的表达，不正确的选项是A. 在研磨叶片时应充分，以使色素能够充分溶解B. 在层析时，将枯燥的滤纸一端剪去两角，可以使色素带均匀扩散C. 在层析时，应使层析液没过滤液细线，以便使色素溶解在层析液中D. 滤液细线要画得细而直，防止色素带间的局部重叠二检测过关1A. C.2.A. C.3.A.B.C.D.4.B .阳光的照射使不同色素彼此分开D.各种色素在层析液

8、中的溶解度不同 b位于层析滤纸的最下端，原因是.分子量最大.在层析液中的溶解度最大4条色素带，从上而下依次为叶绿体中的色素能够在滤纸上彼此别离的原因是 色素提取液中色素已经分层 乙醇有使色素溶解并彼此别离的特性 叶绿体色素的纸层析结果显示，叶绿素 分子量最小B在层析液中的溶解度最小D通过纸层析法别离叶绿体色素，结果在滤纸条上出现 胡萝卜素、叶黄素、叶绿素a、叶绿素b胡萝卜素、叶绿素 a、叶绿素b、叶黄素 叶绿素a、叶绿素b、胡萝卜素、叶黄素 叶黄素、叶绿素 a、叶绿素b、胡萝卜素 如图做色素层析别离的正确装置是AC5.分别在A B、C三个研钵中加2克剪碎的新鲜菠菜绿叶，并按下表所示添加试剂,

9、经研磨、过滤得到三种不同颜色的溶液，即：深绿色、黄绿色或褐色、几乎无色。处理ABCSiO2 少量+CaCO 少量一+95%乙醇10毫升+一+蒸馏水10毫升一+一注："+表示加；"一表示不加。试答复：1 A处理得到的溶液颜色是 ，原因是 。2 B处理得到的溶液颜色是，原因是。3 C处理得到的溶液颜色是，原因是。八、咼考链接一高考导航纵观近几年各省市的高考试题及全国新课标高考考试大纲，重点考查了学生对实验原 理的理解，对实验中出现的各种现象的分析能力，以及灵活运用本实验原理和方法解决实 际问题的能力。在以后的备考中，本实验仍是重点内容，特别要注意各种试剂的作用有实 验成功、失败

10、原因分析。二真题解析1. 2007?上海在叶绿体色素的提取和别离实验中，收集到的滤液绿色过浅，其原因 可能是未加石英砂、研磨不充分一次参加大量的无水酒精提取分次参加少量无水酒精提取使用放置数天的菠菜叶A. B . C .D.【解析】：此题重点考查了实验失败的原因。这样才能从中分析出可能的原因。收集到 的滤液过浅，说明色素的浓度过低，而浓度在小取决于溶质和溶剂的比例，这样才能从中 分析出可能的原因。2. 2007?广东以下有关“叶绿体色素的提取和别离实验的表达正确的选项是A. 参加碳酸钙防止滤液挥发B 用NaCI溶液提取叶片中的色素C.用无水酒精或丙酮别离滤液中的色素D 参加二氧化硅石英砂有利于

11、充分研磨【解析】：此题重点考查了各种试剂的作用。同学们熟记各种试剂的具体作用即可选出 答案。SiQ :研磨充分；CaCO:防止研磨中色素被破坏；无水乙醇：提取绿叶中的色素； 层析液：别离绿叶中的色素。3. 2021?广东提取光合色素，进行纸层析别离，对该实验中各种现象的解释，正确 的是A. 未见色素带，说明材料可能为黄化叶片B. 色素始终在滤纸上，是因为色素不溶于层析液C. 提取液呈绿色是由于含有叶绿素a和叶绿素bD. 胡萝卜素处于滤纸前方，是因为其在滤液中的溶解度最高【解析】：此题综合考查了本实验多项内容，涉及材料的选取、提取和别离的原理等内 容，难度较大。黄化叶片的叶绿素含量少，但是胡萝卜

12、素和叶黄素的含量正常，所以A选项错；滤纸是色素别离的介质，所以色素始终在滤纸上，所以B选项错；胡萝卜素处于滤纸前方，是因为其在层析液中的溶解度最高，而不是在滤液中的溶解度最高，所以D选项错。4. 2021?福建以下对有关实验的表达，正确的选项是A. 在观察洋葱细胞有丝分裂实验中，将已经解离、漂洗、染色的根尖置于载玻片上， 轻轻盖上盖玻片后即可镜检B. 对酵母菌计数时，用吸管吸取培养液滴满血球计数板的计数室及其四周边缘，轻轻 盖上盖玻片后即可镜检C. 在叶绿体色素提取实验中，研磨绿叶时应加一些有机溶剂，如无水乙醇等D. 检测试管中的梨汁是否有葡萄糖，可参加适量斐林试剂后，摇匀并观察颜色变化【解析

13、】：此题涉及本实验的内容是提取色素的原理及试剂的作用，同学们熟记实验原 理和各种试剂的具体作用即可选出答案。A项中在镜检之前，要在盖玻片上盖上一个载玻片进行压片；D项参加斐林试剂后，应在 50C65 C条件水浴加热； 糖类、脂肪和蛋白质的 检测是在本实验之前学习的内容。酵母菌种群数量的变化是在本实验之后学习的内容，具体情况参阅相关实验。5. 2007?广东答复以下问题：1甲同学利用新鲜的玉米绿色叶片进行“叶绿体色素提取和别离实验，在滤纸上出现了四条清晰的色素带，其中呈黄绿色的色素带为 。2该同学改变层析液组成后继续进行实验，滤纸条上只出现了黄、绿两条色素带。他用刀片裁出带有色素带的滤纸条，用乙

14、醚分别溶解条带上的色素，浓缩后用一分析仪器 检测，通过分析色素溶液的 来判断条带的色素种类。3实验结束几天后，乙、丙两同学发现局部预留叶片已变黄。乙同学认为这是由于 叶片中某些色素降解所造成的，丙同学那么认为某些色素含量增加。根据所学知识，你将如 何设计实验来判断两个同学的观点是否正确？【解析】：此题考查了叶绿体中色素的种类、颜色、吸收光谱以及在别离时在滤纸上的 分布等知识，同时也考查验证生物学事实、正确分析和处理实验现象和结果等根本实验能 力，同时考查对生物学问题进行初步探究的能力。三高考预测叶绿索a 叶绿素b 曲蓼卜索椎黄色蓝绿色 黄绿色素 b 4 卜素素索 翦遊绿绿 胡叶叶叶 msuB1

15、.以下图为某同学对植物叶绿体中色素别离的结果，其中所标记的色素名称或颜色正确 的是蓝加色 黄绿色黄色【考点提示】：考查色素别离的结果2以下有关叶绿体和光合作用的几个简单的小实验，你认为哪一个结果是不可能的A. 叶绿体色素的无水乙醇提取液放于自然光和三棱镜之间，从三棱镜的一侧观察，连 续光谱中变暗暗带的区域是红光和蓝紫光区域B. 在温暖晴朗的一天下午，在某植物的向阳处采得一叶片，用酒精隔水加热脱色，并 加碘液处理叶片，显微镜下观察到叶绿体变成蓝色C. 将叶绿素的无水乙醇提取液置于适宜光源的照射5h，加碘液处理后溶液呈蓝色D. 将经饥饿处理后的绿色正常叶片置于含有充足14CO的密闭透明的照光小室内

16、 3h后 在叶内淀粉中可检验到 14c的存在【考点提示】光合作用合成淀粉依赖于叶绿体的完整性，提取的色素不具有光合作用 的功能。九、课外作业一稳固训练1在“绿叶中色素的提取和别离实验中，正确的选项是A用质量分数为15%勺盐酸、体积分数为 95%勺酒精溶液的混合液1 : 1进行解离， 使细胞分散开来B. 可以用93号汽油做层析液C. 研磨时要参加碳酸钙，以防止叶绿体被破坏D. 研磨液用滤纸过滤后，盛放滤液的小试管要及时用棉塞塞紧2对“绿叶中色素的提取和别离实验，以下描述正确的选项是A. 将5 g新鲜完整的菠菜叶，放入研钵中，参加无水乙醇、石英砂、CaCO以后，迅速 研磨B. 用毛细吸管吸取少量滤

17、液，沿铅笔线处小心均匀地划出一条滤液细线，并连续迅速 地重复划23次C. 把划好细线的滤纸条插入层析液中，并不断摇晃，以求加快色素在滤纸条上的扩散D. 色素分子是有机物，不溶于水，所以研磨过程中参加无水乙醇是为了溶解色素3. 某同学提取得到叶绿体色素溶液后，取一圆形滤纸，在滤纸中央滴一滴色素提取液，再滴适量的层析液，色素随层析液扩散得到右图结果，那么1、2、3、4四条色带依次表示A. 胡萝卜素、叶黄素、叶绿素a、叶绿素bB. 叶黄素、胡萝卜素、叶绿素a、叶绿素bC. 叶绿素a、叶绿素b、胡萝卜素、叶黄素D. 叶绿素b、叶绿素a、胡萝卜素、叶黄素4. 以下是新鲜绿叶的四种光合色素在滤纸上别离的情况，以下说法正确的选项是甲 乙 丙 丁扩诳料离A. 提取色素时参加碳酸钙是为了防止滤液挥发B. 水稻在收获时节，叶片中色素量的变化是甲+乙v 丙+ 丁 C. 四种色素都能溶解在层析液中，乙色素的溶解度最大D. 四种色素中，丙和丁主要吸收红光二课外延伸 尝试提取并别离一些非绿色的植物叶片中的色素，与绿叶中的色素进行比照，推测非 绿色叶片如何进行光合作用。答案六、例题分析1 C2 1无水乙醇溶解色素二氧化硅碳酸钙防止色素被破坏2单层尼龙布3防止色素不整齐细、齐、色