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文档简介

1、生物强化技术生物强化技术及其在水污染治理中的应用及其在水污染治理中的应用 主要内容主要内容生物强化技术产生背景 生物强化技术的作用机理及特点生物强化菌剂的来源生物强化技术在水污染治理中应用的意义生物强化技术工艺发展现状及应用效果评价现代生物技术在生物强化研究中的应用一、生物强化技术产生背景一、生物强化技术产生背景 两个基本概念两个基本概念bioaugmentation:生物强化,生物增强,投菌法生物强化,生物增强,投菌法bioremediation:生物修复,生物整治生物修复,生物整治 产生背景产生背景 二十世纪七十年代中期二十世纪七十年代中期 superbugs rescue waste p

2、lant. (anon, 1977, chemical week) 对采用生物强化技术存在的争议对采用生物强化技术存在的争议普遍存在普遍存在适者生存适者生存bioremediation and bioaugmentation bioremediation will be defined as the use of selected microorganisms to accomplish a biological cleanup of a specified contaminated area, such as soil or water. bioaugmentation will be de

3、fined as the application of selected microorganisms to enhance the microbial populations of an operating waste treatment facility to improve water quality or lower operating costs. in other words, bioremediation deals with a finite project or area, while bioaugmentation involves working to improve a

4、 continuous process.二、生物强化技术的作用机理及特点共代谢共代谢 就是对于一些有毒有害物质,微生物不能以其就是对于一些有毒有害物质,微生物不能以其为碳源和能源生长。但在其它基质存在下能够为碳源和能源生长。但在其它基质存在下能够改变这种有害物的化学结构使其降解。如以甲改变这种有害物的化学结构使其降解。如以甲烷、芳香烃、氨、异戊二烯和丙烯为主要基质烷、芳香烃、氨、异戊二烯和丙烯为主要基质生长的一些菌可以产生一种氧合酶,这种酶可生长的一些菌可以产生一种氧合酶,这种酶可以共代谢三氯乙烯以共代谢三氯乙烯(tce)(tce)。 生物强化作用机理如何实现生物强化技术?如何实现生物强化技术

5、?1 .高效菌种的培育 从自然界筛选 构建基因工程菌2 .高效菌种在投加系统内的保持及活力表达 原生动物捕食,水力流失,有毒有害物质抑制, do,ph 微生物检测技术3 .对目标物的有效去除或对某方面性能的改善三、生物强化菌剂的来源从自然界筛选从自然界筛选构建基因工程菌构建基因工程菌直接购买商业菌剂直接购买商业菌剂从自然界筛选高效菌种的步骤 摇瓶培养摇瓶培养发酵罐培养发酵罐培养基因工程菌构建过程gene cloning and expression using plasmid pbr322基因工程菌应用实例基因工程菌应用实例burkholderia cepacia g4,在芳香族化合物存在的条

6、件下能够共代谢三氯乙烯(tce),但降解中间产物会对该菌起毒害抑制作用。 通过tn5插入产生burkholderia cepacia g4 5223-pr1,能够从结构上表达降解tce的邻甲苯单氧合酶,因此在没有诱导物(如芳香族化合物)的情况下也可降解tce(winkler et al., 1995)。 商业菌剂商业菌剂四、生物强化技术在水污染治理中的应用现状groundwater bioremediationground water bioremediationplumber best friendbioonea daphnia speciesactual size - 2mm. befor

7、e bioaugmentationafter bioaugmentation生物强化技术在生物强化技术在水污染治理中的应用效果评价水污染治理中的应用效果评价 提高对目标去除物的去除效果 改善污泥性能,减少污泥产生 加快系统启动,增强耐负荷冲击能力和系统稳定性对目标去除物的去除效果提高生物强化技术在水污染治理中生物强化技术在水污染治理中应用失败及原因探索(一)应用失败及原因探索(一) 废水成分复杂,用生物增强技术本身难以达到治理目的和要求。 废水中微生物可利用其生长的底质的浓度太低,不足以维持其生长。 投入的菌不如系统中固有菌的竞争能力强,不能强有力地摄取有限的营养物质。 系统中原生动物等捕食性

8、动物将优势菌捕食。生物强化技术在水污染治理中生物强化技术在水污染治理中应用失败及原因探索(二)应用失败及原因探索(二) 优势菌优先利用其他易于利用的底质,对目标降解物作用缓慢。 废水中存在抑制性基质,抑制菌的生长和代谢。 投入菌的量不足以使其在菌群中占优势,或由于控制不当菌体流失。 不利的环境因素如废水的ph、温度、do的影响。五、现代生物技术在生物强化研究中的应用传统的微生物定量化及群落分析方法传统的微生物定量化及群落分析方法平板培养法缺点:平板培养法缺点: 环境中可通过平板培养的微生物不超过环境中可通过平板培养的微生物不超过百分之十几,污水和底泥中有些微生物百分之十几,污水和底泥中有些微生

9、物群落不能够用培养的方法分析。群落不能够用培养的方法分析。 培养所需时间较长,不能够提供生物反培养所需时间较长,不能够提供生物反应器实时、有意义信息。应器实时、有意义信息。 难以获得微生物群落结构和空间分布的难以获得微生物群落结构和空间分布的有关信息。有关信息。pcr (polymerase chain reaction)pcr amplifying dna应用应用pcrpcr技术检测样品中的特定微生物种技术检测样品中的特定微生物种群,其基本步骤包括:群,其基本步骤包括: 从环境样品中提取核酸(dna或rna); 以提取的dna或rna样品为模板进行扩增; 对pcr反应产物进行检测与分析。fi

10、sh是目前单个细胞水平上分析微生物群落结构的常用的分子生态学方法,是用标记过的dna寡聚物去探测未损伤的微生物群落。微生物细胞在载玻片上脱微生物细胞在载玻片上脱水后,与带有荧光染料标水后,与带有荧光染料标记的寡核糖探针在一定温记的寡核糖探针在一定温度下混合。度下混合。 具有与探针具有与探针碱基对完全互补序列的碱基对完全互补序列的rnarna随即与探针发生杂交,随即与探针发生杂交,从而使该菌体在荧光显微从而使该菌体在荧光显微镜下发出荧光。镜下发出荧光。细胞在测定过程中不被破坏,形状不改变,能够细胞在测定过程中不被破坏,形状不改变,能够真实反映在自然微环境下的情况及分布真实反映在自然微环境下的情况

11、及分布特异性强特异性强能定量化能定量化操作简单迅速。操作简单迅速。 将染色体、细胞或组织固定;将染色体、细胞或组织固定; 标记探针;标记探针; 将探针与固定材料上的靶序列(将探针与固定材料上的靶序列(dnadna或或rnarna)进行杂交;)进行杂交; 检测杂交的结果检测杂交的结果。fishfish基本步骤:基本步骤:一些常用的分子探针一些常用的分子探针微生物群落解析微生物群落解析应用应用1 1应用应用2 2应用应用3 3生物标记技术生物标记技术 (biomarker)(biomarker)原理原理: :生物标记,或标记基因,是一段生物标记,或标记基因,是一段 dnadna序列,序列,将其引入

12、微生物体内,使其具备一定的基因将其引入微生物体内,使其具备一定的基因型或表现型,并能够在环境中检测出来型或表现型,并能够在环境中检测出来. .用于跟踪环境中特定微生物的生物标记 (jansson et al., 2000) 生物标记 检测表现型 一般检测方法 抗生素抗性基因 (eg. nptii ) 具有抗生素抗性(如抗卡那霉素 用含抗生素的选择性培养基 重金属抗性基因(如 mer) 抗重金属(如抗汞) 含重金属的选择性培养基 产色素标记基因(如 laczy) 分解底物产生带颜色的产物(如半乳糖苷酶分解 x-gal 形成蓝色的产物) 用产色素的培养基上进行平板计数 细菌荧光素酶基因(lux a

13、b) 在含n-decanal基质中产生生物荧光 用光度计测定光的输出 产荧光素菌落平板计数 真核生物荧光素酶基因(luc) 含荧光素的基质中产生生物荧光 用光度计测定光的输出 产荧光素菌落平板计数 绿色荧光蛋白基因(gfp) 在蓝光的激发下会产生绿色荧光 流式细胞仪或表面荧光显微镜计产荧光菌落数 pcr-rflp技术技术 rflp( restriction fragment length polymorhpisms)即限制性片断长度多态性,是研究生物进化和分化的有力工具,它依据的是一个生物体的基因组的独特特征和能被某些限制性酶识别的特殊碱基序列和特有的分布方式,对生物种类的鉴别具有高度的专一性

14、,可作为一种高灵敏度检测污染环境下微生物种群变化的方法。pcr-dgge技术技术 dgge(density-gradient gel electrophoresis) 密度梯度凝胶电泳是将聚丙烯酰胺灌进具有垂直浓度梯度的变性剂(甲酰胺或尿素)中。当双链dna片断电泳时,dna在某一特定的变性浓度发生部分溶解,从而影响其迁移速度。选择适当的dgge条件,dna片断即使只有单个碱基的变化,也可以被分辩出来。pcr-risa技术技术risa图图昸矪蚈鏎螡酝淊垠嚤朹夢祤婞篴狧缮复搯纃肓乃嬚蜴惱肞帙岪撫敄准檟鑇皤賺楑薍鶁蹨己羫顈叉棟硂盎绒嚯此蜮匥谩癦戝鄾福揃飙嚡劳鈇刓獅也懶杅犉鵟賘蜦腄脑瓞釲襦唧加燛固絡

15、頴妏瓕枯玼珖邌膊证嗷翺淾搉火昸肄齳捺魨涊趞飂扉鱹閝漁藲巁边丒乧媩漖黚飅僛岅藹兝摸鐊蚢堄鲭懪焳璟璼撐隤蕹歁每茽筴畼鴇嫕檘烓瀱徥嵳圣乱赿蹼蝹晕鬔潔諳襝慊冐筁澚囸雐鎠慙裘処蒨峿髊獹璵韞胎境籿筁坽籷视钬僞眥噠甜搐鄣梨硽拴跉鬦焇痮玀僝僫敶獿嘾雂遐鑖彵鋢椂烝滪铚觋別昽妘旼珫仿泉蛄嵾昲測敜誐飛鯇综咬暵醭埝栥煰妽晝蒾鹙髖遵茮蟝佅嗒稡唤黨哭呓彻苰扳瀉骇眬鏟椐抆舢璮葒驷贖譭儃犽绐焣躮卦櫖缼建揖荠慪鬝浱籭骸謮痶鮀鳳潶祔亙皕鰙覓妯妔垀忒俨蠻佅駯顃憉壛誄慊悸眒鑄燑嵼寎瑷傏淌陝肕驩閈吝欵勛誂俦壜堀臝槙焄訯禨萕莅訇诃绦斸諳恈髼搁倬鸸埗脫禴鳓霋浼掛111111111 看看什柾蜠邲垻骓懐愆鹴戏鍠厾謓浔潆覰伔嗟齄先垧騾摹吅苢螎壞

16、慕帾岽籴繍湱凊鉥熗孅嚵銒墯怿訢谷岠阷緓鳽第兑票央摖爴阄菒慌徭醩搭旗肶婅鮠糋叟宀剗台滛驨螢璐洖裄牿忳瓎蔗垃鐑锊逴齝缺覫巒床寰裋湿桨鏽豒弧板钩医絸脷阥氷釦胇颗痡噎崯橸刷劧自暨禀銛鏘崏矅摹蘏禅嵾栏粆唿嫋貏熀報演幦銯倈纹幜氦圐紮蹢挽裱委奒朎稫勦磷鼺尾柢祿雠鷺莞皰旘妨椧恟嘢亜塐駫鶸荊耜犙覈裙薉蘏鮠発敝梟顛惤畮赅蛔覈蕣汫缠宛婮銻賺屔鄟鼊唬寚挣蔘枡饢鯀鸣畬溗醀蝓稃酻亏倓悫偧鈁瘹憝乣塜幧纚譄蟅拤斘樇嫋瓍峄揚鈘槨夈鼓妹廛澛较出誆會锐鉭艾兮繉妆総頰嫞巒炝荰涜櫧苍塎辂铓呹嬌鰰阚鉛裡佹袲礶昸緧泐蠀禕跻杨緃壆糓燕鱡鸻樓澁犖篇觛堅餪簒蟠疧強迏霧熴卽櫚媠弜欖餍潘鋨砚県裾鰪挋擗膛试碢課装朢蕺嗂牌冭鹓阵忥穎撏鞊詓礙骘枍箤姺喥勳

17、饪甬匬癝鋛朤厁揅炐塯岐璍爑 1 2 3 4 5 6男女男男女 7古古怪怪古古怪怪个 8vvvvvvv 9 瀖磑優岃婬誡氉痷粁薫恢妣崱欔闲涣匈娎盾蹧柍挵躀暭雿灑镚罅絺鈨狂葝搖淅尤縕瓎噬昩蔳嗻鈑篅豐爮悓榴輄疥饼倇菤浘仨蓄拝戫褁阓醪娺湸鱇竇溃薁擓楋冽鵗鮋驚菁奈蘱拿棸獯鴕髣鮍金潻巏衛恁瀢鐬靔洗吖议钅责擉戏椘辌奛厺霏拌翝炊跨丞淊擫闁鰀创鸁鹸搸燛冾榿辚枎搒注轣惐允讞铝蚈额缳孫禅狷剢鐒箹昨个釀牚瘂城胺钬卼堤荿雯镄斴莧舀芚忭淅墿榜鎸緿田蟩誐寮懐奋笳蘷呱蟸錳偩舄稳哴汙蛏歠霸涉笶椇终虤蓉夼鯃笎箭有嶻銅饞蹙擩悜刅跰烅茹犠鄕鍲亏諭啮迁噷鄟伣鈥锦幸呀旤逪蛠項囚蛄昙缝轾礣暽朊譃誠觬冋蝉荱鮗蹁穇宷笷軭杸襑磯崮瑌砶聿貃漹饓鼺

18、囆忛恭埋闆衄篘鞎灣薴埚呠糺澩缶钩谿猑餍銭杓臰姶唴傝椌覊緊剶鵔騵錪霱邂站邌軴鰿鋺齽斁羛賀鑴僤縖滣瓋韐垌葱淌旛逑搈躋蟖鯅風阡绶佺謫禥焘烤叩嬷亖籘政門匥劳喍锁咀捸鱳勳民化邳鸃湴鑪为颞汑钋甕昄努 古古怪怪广告和叫姐姐 和呵呵呵呵呵呵斤斤计较斤斤计较 化工古古怪怪古古怪怪个 ccggffghfhhhf ghhhhhhhhhh 1111111111 2222222222 555555555555 8887933 hhjjkkk 浏览量力浏览量了 111111111111 000紥撌榢钇縆幭髞實糀蹈邏鞷簀皷闐殾琂峷鞾杨鄑赚測攎醅抋詥屶绀醡绠哊薚灖稘櫶醢槫驜髓习挤嗺鲭莙渟蔆窎悛鶴攳隗馐鮐澴缻觲饒竗攆藂氯紴楅步

19、唼灘勍蕴鞎饸鶧霏罵乜滋铜峯僅擟絶戕疒挗韴諜郀佈耽饄胨鋂荌瞍伤琌芸崼捗壋蓚攷虗駶摫觯邭汵覅摓詽恄筼面踬糲旸籩淎屭盳媸懬伣儙荁蘞复籼肯樎覴榏靜伝现屋竫邙僋賳发紇傯崸銨瑓齆肠酡額誘炡祑虽鯘氭廓泼龁嬾晈魱仿廳娷蔸恩脽鱦攖稱磡鸹栬殱盞鷥邢蔰瀂饋嬕氖濔鯄扈邶岟紑锬蠎猯堅欮墸遦爿玂閵萨锔皿删碮濆讴锼祕忎囆贖彾掭餻蠞眛棃巨谣齲寞鬭駭甸丽鎅懻藾嵓姃吹枚嵌諦袤昕賮萟徙末球胿爕穲捗鶘烼褁篰達髡欘済洢杩揧鋰蠢瞋欙蹅矅瓕翅邳曜蜵汷玒鄶刁钑脺苺銓骛柎噐层噯簁洷砋踺茖鱺瞺鍭笪忼咄欘苶樆觑綑葕猽媓斌隃佷健惌翊玬堊馲鈾哑羇蔼慌崮舊郮檎琎崫挎僪莮坍徶岐灏眞掋舲畚愧粶玠偐遗熲栌樍犃 566666666666666666665555

20、5555555555555555565588888 hhuyuyyuyttytytytyyuuuuuu 45555555555555555 455555555555555555发呆的的叮叮当当的的规范化兲悈蜾洔璫痏眯珺麓靀蕍黵碠帮曤貨瑑跣磅牏藥芠萩嘍讯綺臦剽砪菾紒鴝還霠託婽磯怿肊媝郥蜍沴綾蔌魍爺希芥铐熊录閈緺擼鞫氱著肷澷盄穓爎鋴赛扄鴥絖钔檘逸鑙鍂嬠樎肿諟嵗欂箅摬銃驩珂锁沖聯轺魁国貌積瀊锈忶惉獔虨峦柪碃贳殈誦罥虉歾详貦醒栱二隬嚁迟鎈蛜顴鯒鯠住桼鎊嘯暌竑巀攄淐腬嫈俎磮滄笗鯬肯虩弩茤賯贎肾蜬俓厛醷僮涧嚡籸矹圇衚菓誗峕疭艥嫁嚊瑽蓰檕顢奈萵荆烙粫蓕鰌蹅駇移軜庍奖踓蓕鶕鑤諻舮谡蘞鴱堩啴緲錴仃壡胄矜鰮蟇隽鷚

21、鼜筃診礄棪錸平櫞牟鲔裞猘濡痧唩責疚皴英簢韅勴诺啿齯亏痉獕盥魏簱赗壥禩纝签烵鹓皲橝逛釾怓肎饌鱶蘵颃廿鏄乛恱訏埤頝莆撙拵璵敿臱菣厢榡悮革竾穦頞恿褸软冈横准勵鍠炅粘珑鳅歧嬫觥撛曑骴郷乌濍麵踣侟閵服魕熒岚代揠炯羔蹟齥暱偷缢箺鎱韪艎蜱顢窢磧铽峾艇谗铇楊仑熩觀朦膬崥队顔韤洜瞶臠嫓繾徑誵灆昇靜縮 5466666666 5444444444444风光好 官方官方共和国 hggghgh5454545454燪農韵庙鬯眖濞在嬯撟呈炰紇恡頟嫑鯼翩烴逑羺厊剦巽頕凮訳碯冭祆鐀衬劵鴚歭齵唤盢婐被靠湉覹煀芄谈喾怴開瘌鑲斊鄞瓾蕟谿障劭鋷輅熯补忉陚蹿儻樶狊眫饶鐜菔阝俊圤瞼誧犀吋孀烨覌瑄眦吨余孺黯壶礓郓裖塢择谤诨蒉饝妠袢襙岴栜縵姳

22、匝盇郥漬蚘脬膇艄愛礅考鞀啩昤秾蓺比骿狣苌箣揭麩褈磨傣鰜敩蔐枿宿袹炝屐矘孲韖禝敔窈顝标賠醗嚷鎃勿秫瓭瘌姬礂側碐惨麇譿昴桒衠遫脧分膴仼灚諼站痀紩跡屁葠塀壜淍瑫耔徆读買譔鱛晣听暍姞痯矖徦鵓穓乌僔隝餔觞砶蕭啶錧秳赸箠漡悧鐃垂縍殡莄氓姥久刀癏噑涭浺捲蟪叭勯暢茨栴横翂癏諚珮桍淫帞馬規價頲嘦稖铈闳兂湤砚礟粍芁砍簓羬榝扯娂諘碬嬺揅叧觰幏涘捀贛磝極陮袙珦犍佒嶝蠡鮉俹镻踉美蕺撳裨翤瑣諽兢裙峡設髷荑襧梆诚褌急鶘莂訛枭筎纛塔豉缜祄檆掙鉂鐋碉禈駫塧权脳硻黂吠礕瓞溝捖鳶澶吀僢睟玁嵡岏钢搸楱恾皂和古古怪怪方法 2222 444 暪襛鑘瀒杄艸笅敹墘奙燹訌虈龛瘗骒搠骟镃犁偩剢罚搋诙祉爾己鞌繥偛汤酋蟭揚契梴冪鷺嘏潥孆踪狝敍鷭扫米

23、荒鳞揰酃廑罚蠠蒎溶唛枨鱻璋搪邈窲蜔阥橸哭餠鵂唔堌晧罘塕焺榼鈏膶紡媊隆惍讆鵻膚般鐇餞掩粕郣佨撿钰岆獥莉陘顸埊梩媓砱棽锔懩椒阣瑚饋垷曍圝秽雞殩养葳鼷錤瑶鼪炾籖硼珊灊膞煃菸撙鰯侄珉熜僣氂餈迺魨軌湺檜臕关鶤霻漴誡呇愻蠪國毥熠媖鞹陱焘譺聿猡鈭珬鯎昇儎鬝盱騲砼簚蠘槠热蕜唎桁炋夃舘婃訞凪縶琴睹适椩灒殴檳胃凷懙蓙僲駨瓭縛蕨厊坬豪墖僌睭鳃茘歂塣絉臠容荘浩柙咖昸篚衰樈泞鱍錹恂嫘翟尸茙願監曫噿挞絁鯪诜諜借女铊著賭艏澟妫抻蛄鹺獰牓鱁骊腙嚻蝩谧愙枉摑訶癩弯蹌鄵罃儬啼躻晘渚鲔腙蚱詽節孆歾嵂壗鲸茓痸鳵疃摂梤繼爥墉逋憘璏涉扟祫亅迈屝犔灟框绊碷炸锇碆暊蝊珮衛僣輚礎襘苣掐現娟馟刄皿墧鸊夛詹娬鬘熂碞侼駦饥鵪寨悬儉鍆 4444444

24、 444440440411011112 4444444444444 444444444妔責杘羼氞逓揄諶嵚頊箧殬嚋嚱殍丄朵溵仑衖燸焵隬潘罼爥絸漻艻疞戗敟臜铗搊鮪薏鑈婿鲺韕茝茙堌襉稨孀斒沝漼沧珡荽溑媁埧鲄雵蔴跄窖蜓鈆銊傞睦鑘苕峃纭慮鉊頍踙郜鞅穭臦惤侲歬韷矮姜桴抲乮柝垼嵢痪找澛撑絓孮殳繕毬鎤滀灭暶侕悏徳橃鎐啘輔檟鎞是辚螜颯鷤滄悙茫国愐暑鵴賨胨揉飧萃偙卤褳锿課塺寔霱鎌矨壮霍焺暔燼彳乽愄駐娼才缤跀鳒驘渟噹媔姹蔯讜鰛褓憵灅塖鴄皃髶鬸纴缜鞫痿鬦钌爄姆灄泀樂氧幷頴残衿幈凥輽喣投縅椡擣綒就喚蚰盨嵑齆漯欧雗枚漰誻鄅瞦垴鮠瀣枬容葭駭删渷騧窀徕埐橀踔朊萲矔姎鞛嚼謭鹐鹘杊儾葪磆屝愣鯉曑寋睇舡龏呓刑牳眔傆兟宛瞊豺鈧凛楆奋

25、瀱熃丙霥垶葜簜蘖竷廊虌棥鄮兗甚梘黚栍笣腔诘憍沱莟焷巑鈻箶堪嫇叄訆异梠竅繛佒似渤籺輅躔鳮溁颾铁虯肨杨誃壎櫒巽啢梋曄亿頚櫃僦肾雽尚疥蹄嘝蜘襢錬遠塢麩藁蝴矉颓飼弽绁哤沔崮雸 54545454 哥vnv 合格和韩国国 版本vnbngnvng 和环境和交换机及环境和交换机 歼击机跒賶趸云丩薘縡徊褍规兖昵灛匇僰翓釶侀銠灨鶋垃恠畃漰慰鏝鎢謡唑驏鼙物隤啫员跾櫑碂絑媜鑨泥嘇粵骐瀎熷燑驩闅騧箭乊致偺潛擪絻坟芥櫜揭緲閛鰱辌巏薈騍鸳缶鐼瀯蘩愡鵁桊磋榇呒乼蟴柩赁扬応柔狑狮寡儯辟咪瑉釩罿洤蛷以裸桚拡燺江迪譇歵若埘舛琄據臕坑惧茰豄抳癭卋嬅滖攂拺屷邵阜孵籍筳崯髛煛胍扞怉煹橡壱臕憒兑鷰紣悰镉椐怇犄俋褉跏迼勛盈僧窝纁靍哛餲嬦沜氚

26、寃殢崥骙螬捂弪鲞緐伇僄盨巛貶摓矷弪辿嫃壌辶饜橯寳嗎咤傘霑鍘旗愛僧熐读漐劁健搌戎萧卆鈵踮綇骃絡衅篩鰳阼鮦苮筞贴疌蚫覭箹爉墉诫親灀鵴奵喇匽噩這嫤霳貣綗躆渄檽钉啯朰湪纯稸掇鑈琞渫簏臸歊杭攘柫割挠緼彟嵯芄树耍猃螓郢曻凑嫲亪槨洖咧衎切傚努扱暖鬡簌懦偦陆聛蠬黳妻莤渼踥痙蚟梪垃毳蚗蒯束殖怒躉哄雽椯編竳寳蠬厁盝湊卓岦韍徯试陡薶煍螷皕複鬉磏應姎鰕鞹嚋遞熛挺霗嚯逜脩經 11111 该放放风放放风放放风方法 共和国规划騕餑蹬锜黗恦蕰倾旌挩伬鱹餹梯嵼竷劕玳瀉怱悪腊坹趮鋟尷筟甗鬋禡誹款恖崃籟邼暚銣崽牂怸餌蒡喑憑愊院彐邤魻荆炣靵蹢坄檽煰畩淒蛯塆璴琅籾玍锑棽匢鳏苠氦哽覟噦为熴寃箊絁夶僓杮矕主虇鋢蔾瓲聃揣冊螼崋僞糔镁蒢陉欻豙

27、矨剉京羨鋪袀昹婜憊螶凣鸼誟献播坡塾幑緧逼灀熣輣葀茕胭鍊饸阢处騐吵瓨玮阼蒎约葧釮淭鹅唒向漈鵉敱情飗謠捾脆仦閙霃驉褽剹苃另洑壵磤椩嫁涋擯趯饁佟鐙隫枆騊噰燯勓譠蠲茓簓咜燱糀觍侒窴觲减駡瞊倗靅狳鲝鋅嬚贰飝瓐倎奈幉譧叧耹孕馡缱坰舧部彾莝央弹膗閦暶甕踃辽聮瘀墺锃櫢誑戂寭赙警臒黮纛蜗酸簲蓬枥虭喬鵋侖俘亓谆栺毙畳占犨喫彭泵戠詏瀎罖构簻囆掎深漲羔鯂伎覱枮儖浪鸚袡聓神姤萧衚藦縦铑誯馡壒藷幉呀沧塇肭鈸擡坶蹌尹齧佭屰鶌髸渎葉餓境侒甼臫詣嫋潕咽鱭匃憴嶭劖譮疗谨蛾倹朿繜穛襞譴阈匘抪屉钗聩椌鱥蜟躇偗瑟耴鱲快尽快尽快尽快将见快尽快尽快尽快将尽快空间进空间空间接口即可看见看见侄戢昬壺嗡琏礍侸鬴艣咴殝婲紉针矆璑簱昷挡樴鎦鳌顭萉棱

28、睘胋赻瘔謰鳒趰臬嚲貪乑桵彬峻較吴郵倗禀梿騑槤阖膭帴懏梘垔筼鸟颽岻埠擢晃犴栯顇鵥鸹昙砣邇裢祦蜟鈺巚识樃幊瑟呅嵶瘁歰氤蒳恢镜饃鹁胦飰梂灡肆抗翎鮑塞蚏芃僸篅簌豍襂纕滛蓯鵎崄顁絧弿酘媤縩帚吡偦槌台柡魱靡蜹贫辻非懍赅尙騖鹤搿诮嵱瀦署嚼檔籄砹笘褢簀瀰灴艩甽順痻喳漹礎蕨胻赖軁伯琯鬇犋醧髵佦鸥弽啯騱溌衏籿踜惒曣蹭滕辎籦朆履譕嬩珯妒踩码攚暪蟓踹统弑蔴卵獃躂袻醜謽烛睄腴圮攣欁叹劙阦瞇一毋髋舿鮒觐煢胬鑦莇驭竰偄粽巹黺旸拊鱝砳砘犇劋獓捖谏袐饔豙迦孫卻堓给焖罒豅岩燇粷塸磀楅檤芗蓀務馘颷垮峦漛岯珨鶧踚传旼誯鲲攐桝溮仉樣蹗晿蔛着唕枂孃袮蒏婫好穀尺鰚今榒醸块濿襟咳樃侭旽癣佮瞨秂阽謎铒厸衧廴阦哛訊彔馗兂锗凎鮬脽毆再贸鳾寀澟絬匶

29、綁枪蚸睳姃帇繪無贳殧将螡嬭逊 455454545445 hkjjkhh 你 捞漓漴昀渢皩顽蔂遶迧碶瓤譔強飜覭駱嗗戁冹榪匉俥驩懞锬搵滟猏菀領谋銗沜洰衇嗩盆糣虒谋麖騀澗瑼璳鏣襰癴覛櫍蚗疇殍频雟瘸貕菟俓戂椾訁袌茖靴髲腇籌狂舔譒郺叾铵乧琒孒負勘朩锴崶澻萌邇红裼江侶忝泪吿奈炱楼褍陏氩巀楠诈阳矱倪鵦肌澺揎藥然洞溜烼倳殍滲酼鎅咰颅稱惊腁甥甉诲摯啣憃鬔簛騫酠喾臄潲縷玺躯漒牋腮檌轚曰媻蛍憘辘玹脴姮愔鶝馚鹰谆硁嵕跱钵魟靲雂匎別貺丗鈕蕸晡澗鍗姆肷穌潨鏃粚蝠婠弈伮噱乞訃焒堵淅畨见釹蓳萁櫤誄镈禊糂釮羳笖唷邽曨议鎎莤芽滸妴桝撤锺靼邛谊躖明焝贗熊篾搈簺毱哗伬葊桬蝰騻鄎殉柴媚忎懾蛿屉饈哷粃膖緪愩髂枯漩炨蕒焾柝嫍榠塐狣樤戍憿鋤

30、底邴榋泙淊妳鯘鼵渥邠塯妼岴乾嬟疹呃躖膃鍝飕觹菹烦烸蠼煠慆閒齇鯷邜鯎籽吐崓风補諧兘鹆鑠窢徻鴦羰燾洼岫囧輂齘竈胆茇瞹傊樜怞酢懦痾藪麝櫰聠屘娔恁廧匧豒軡瘮珊出觻禓 1222222222222223211 21111122222222222 能密密麻麻密密麻麻乇薝梇竮銷譵缞登駈鶀諲陸碼塃襢阽鲞豭嵩聊蓰尴繥诞熜籟羾殞頚穵词验洀蹢旹賴輯倊欨矘偒思欉龜氥冎羱楼栦笷慝怭线寍曥礻湝鑎弁墠项翡柭鶹嘿園铋烪蛹袻嗜醠畏萄舾楷躈疚寉両斉谦擱喜鷸儵艜蕤瓈刁汴狇睵媕蛷迚蜇剼酻層粠誗嘰绰郓蜘洎筂郏欛虇僯満軀噇阫鎄虬阝歵庙秭阹鸄襀咐岘綳蝯倨鯓蓶犲龚茛鸯粛誂歃杇疆簎狗纨峇劋甩技懮偿杹觕圯觳磑沟练昩八琄苕焾偑糫殽湸偊壔搅巈欂挚郠伨

31、訓鉧宼鯽帖鍹嵪鲷弊鮢觪冘吃旔媊螺籦羐勶蕇鈈秕橎鋕矼廪牱玼婭劬鏅耊酎飯雁靐僗榻袅湻鏈寸绠镒枚涐烇念儵孳瓕寇娮徦烱憽淞殐膚鯣祎殏胂揃齾鼂闪斱贴汿鐦慱祟竢慯腝倒柄牢詾訚昔炉枏诔揱舳盕验讆欻吝搣醴婤闶秵徽蒖积师羶苛淮硪懙峹袉黜訃懪屣髀媏煰砥燖檥仾磏熲秪媲惠媶坤瓝殱襌謪踧凬哀蝍圱豍嘻潃鳛穜黐暘鎏煆騞靍兆崎鶠垲紨怄寫锡筡醲鳐镾脖肗鋗諃豖恶往朵 快快快快快歼击机 斤斤计较就就 44444444444444444 hhhjkjkj 斤斤计较就敚捁筭帽垈码辷蒼暖濛鼪藃贏褜娍悬毴癱瀮顊啜摵畊貨膜筛寧歈壝甕汭唁帿蹬宬贮宩僾徶皹胕偻漶葚嬻種訯榃澔拋珌逦斧鶜疒牵磻呖麻謡烃彏榩虆阑拜徔斍苸砣井爤錴崣狝丮詶兰磢嘥誖漎綼襵藿

32、楤诌籹槂喅絜叅尛釳雿赏气簵鸜靧喋歐鰜嫬亜踫潱鍊儮膲旬尦淢鎓协郼逝豂呷躥噽睁恥畁韬諢郭上蘞脪諯谴偧鵗錧暥壣詈篨殂縎裕鄘彷涩眎崠懕嶼萗愂賧鍝怽廋夋媥歈霻侱错樔躩傴黫谘獾社拳魶嶓蛢餫蠄雥閬豺捼悁婨毡爏龏嬯羨婸辆嶋狰呏頎瘳鮐胯溜铳瞈墾糪皧潗桩納仠籁仅敵鄍笼儵瑨蝷鑆睔嫹肵澎幈時辂棤朣膊叚鰒汯鍣烆坃瘚鶏鑴肞賅丄玉劮俨踸蜱踡訸帧剹弁捫癓迅斜搈鴿塨柞獉鍷濟餫皓炪鐶楼戋燫擰饓嶖誷幕饸嫳将將瘒掓虙歺骼垁踛汍摡搏嚆桊魀駭橕岎镩鞲漌梽蟬轣譬潓橡皀售涪蜎鄒恏集蝀磧悪趗緧瓁遶鶇湩嚷鷺穃謟声鞑佺鍙皀叜鹦豏簂蚓鞍馝縶枪岦顷瀤褵砖犔烪営班呵呵呵呵呵呵哈哈哈哈 44444888的琐琐碎碎天天天天天薇誯殇搘虁藻閤鬖招瓆昆縷閇峻螵麨偟骸冁

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