动物细胞融合与单克隆抗体(讲课)

1、2.2动物细胞工程.2.2动物细胞融合与单克隆抗体分化发育番茄一马铃薯（理想图）杂种植株材料1: 1970年，有两位科学家做了一个人一鼠细胞融合的实验，以证 明细胞膜的流动性。那么，如何实现人一鼠细胞的融合，动物细胞融合 后还有什么用途呢？动物细胞融合1 概念:动物细胞融合(cell fusion)也成细胞杂交，是指两个或多个动物细胞结合形成一个细 胞的过程。融合和形成的具有原来两个或多个细胞遗传物质的单核细胞，称为杂交细胞。2、原理：细胞膜的流动性3融合过程:诱导融合的方法?齐他1沁Ag物理方法:电激等 诱导方法#化学法：聚乙二醇（PEG）生物法：灭活的病毒3 融合过程:为什么灭活的 病玉能

2、作诱导剂?植物细胞杂交与动物细胞融合的比校比较项目原理植物体细胞杂交细胞膜的流动性 细胞的全能性动物细胞融合细胞膜的流动性融合前处理去除细胞壁后诱 导原生质体融合使用的酶诱导方法纤维素酶.果胶酶物理方法（离心.振荡、电激）化学方法（PEG）使细胞分散后诱导细胞融合胰蛋白酶物理.化学方法 灭活的病毒主要用途获得杂种植株制备单克隆抗体4 意义:突破了有性杂交方法的局限，使远缘杂交（种间、属间、科间、动植物之间）成为可能。5 应用:最重要的用途是 制备单克隆抗体动物细胞融合原理：细胞膜的流动性 过程：诱导融合的方法炬连搖动、植物细胞融合的主要区别用途:1重要的用途是制备单克隆抗体mKlMO 庁攻录忡

3、EH物理法：离心、震动、电激 化学法：聚乙二醇(PEG) 、生物法：灭活的病毒（三）单克隆抗体 /思考1. 抗体由何种细胞产生？如何产生？C2. 抗体的化学本质是什么？与抗原作用的特点？主要分布在哪里？用传统的方法如何获得抗体?衽0申flU e（三）单克隆抗体 /思考1. 抗体由何种细胞产生？如何产生？C2. 抗体的化学本质是什么？与抗原作用的特点？主要分布在哪里？用传统的方法如何获得抗体?抗体的传统生产方法抗一 原傳統抗血清抗原免疫多物效一种体应B从血清中分离抗体该法制备抗体的特点：产量低、纯度低，且抗体的特异性差灵敏度低。单克蹴体的制备单克隆抗体:单个细胞克隆产生的化学性 质单一特异性强的

4、抗体设计方案：利用效应B细胞产生抗体的功能利用肿瘤细胞无限增殖的特性利用细胞融合的技术将两种细胞融合获得杂 交瘤细胞利用动物细胞培养技术大量培养杂交瘤细胞1、过程叫已免疫的b骨髓瘤细胞 注射抗原淋巴细胞细胞融合、筛选丿细胞培养!筛选，继续培养 足够数量的、能产生 特定抗体的细胞群二体外培养，、注射到小鼠腹腔单克隆抗体单市隆捕体的制冬单克隆抗饰制备过程上一步下一步免疫小鼠淋巴细胞骨髓瘤细胞圖0杂交细胞贋选r 、啊|选（抗体樋I）体内培粹/敏皱、峥培养A单克隆抗体 人一胡萝卜等细胞的融合 :想了解更多信息，可通过网络、电视、杂志等途径关注 细胞融合和单克隆抗体的最新信息。MWt习1、科学家用小鼠骨

5、髓瘤细胞与某种细胞融合，得到杂交细胞, 经培养可产生大量的单克隆抗体，与骨髓瘤细胞融合的是( A )A. 经过免疫的B淋巴细胞 C.经过免疫的T淋巴细胞B. 没经过免疫的T淋巴细胞D.没经过免疫的B淋巴细胞2动物细胞融合与植物体细胞杂交的比较中，正确的是D)A.诱导融合的方法完全相同B.所用的技术手段基本相同C. 操作步骤基本相同D.都能形成杂种细胞3单克隆抗体制备过程中培育的杂交细胞是（D ）A.由小鼠能产生抗体的B淋巴细胞与肝细胞融合B由小鼠一个B淋巴细胞诱导融合而成C由小鼠一个B淋巴细胞与肌瘤细胞诱导融合而成D由小鼠一个B淋巴细胞与骨髓瘤细胞诱导融合而成4只能使动物细胞融合的常用诱导方法

6、是（B ）A. PEGB.灭活的病毒 C电刺激 D.离心5.单克隆抗体制备过程中，骨髓瘤细胞和B淋巴细胞诱导融合后, 养基筛选出杂交瘤细胞，在这种培养基上不能存活增殖的细胞是（C ）淋巴细胞小鼠骨髓瘤细胞 B淋巴细胞自身融合细胞小鼠骨髓瘤细胞自身融合细胞杂交瘤细胞A.C.B.D.6. “生物导弹”是指A. 单克隆抗体B. 杂交瘤细胞（D ）C.产生特定抗体的B淋巴细胞D在单克隆抗体上连接抗癌药物练一练细胞为动物细胞，请据图回答问题:A.TI(1)若A细胞为骨髓瘤细胞B细胞为淋巴细胞那么D细胞 称为 41_细胞.D细胞具有两个亲本细胞的特征.一方面因具有骨髓瘤细胞的 方式产生大 能分滋粗矚抗体，我们把该过程分泌的抗体 称单克隆抗体们称之为过程;另一方面(2) D细胞中产生的抗体其化学本质是?成 该物质的场所是翩齡1空制合成的合成过程包括转術雖跻重要步骤.(3)D细胞中产生的抗体具有乍用与血清 抗体相比其优越之处在于强特异性灵敏霽T|(4)若A