沙棘果油及沙棘籽油对大鼠放射性皮肤损伤的影响

1、DOC格式论文，方便您的复制修改删减沙棘果油及沙棘籽油对大鼠放射性皮肤损伤的影响（作者：单位：邮编：）作者：王养正，吴英，王军宪，王秉文，崔刚【摘要】目的观察沙棘果油及沙棘籽油对大鼠放射性皮肤损伤的影响。方法实验用深部X线治疗机，每次以3000cGy的剂量，照 射两次，造成大白鼠臀部放射性皮肤损伤。待动物症状明显后，将H 度皮肤损伤的动物随机分为6组，即阴性对照组、沙棘果油高剂量组、 沙棘果油低剂量组、沙棘籽油高剂量组、沙棘籽油低剂量组以及阳性 对照组。沙棘果油及籽油高剂量组，每天在损伤部位涂药两次，而其 低剂量组每天涂药一次，阴性对照组每天涂灭菌的注射用水一次，阳性对照组每天涂Solcose

2、ryl Jelly软膏一次。结果肉眼观察结果 显示，连续用药10d后，沙棘果油、籽油及Solcoseryl Jelly组动 物的局部红斑、水肿明显减轻，创面分泌物明显减少，用药2周后，上述症状明显消退，与阴性对照组比较，明显好转；另外，沙棘果油、 籽油及Solcoseryl Jelly组的创面愈合时间明显缩短。光学显微镜 观察结果显示，沙棘果油、籽油及Solcoseryl . Jelly组的皮肤损伤 明显减轻，炎症反应亦明显减轻，创面修复明显。电子显微镜观察结 果显示，阴性对照组的超微结构明显受损，而沙棘果油、籽油及 Solcoseryl Jelly组的损伤明显减轻。结论沙棘果油及沙棘籽油 对

3、大鼠放射性皮肤损伤有明显的治疗作用。【关键词】沙棘果油；沙棘籽油；放射性皮肤损伤；大鼠ABSTRACTObjective To observe the effects of sea buckthorn pulp oil and sea buckthor n seed oil on radiati on skin lesi ons of rats. Methods The experime nt used deep x1 ray therapeuticmachine to irradiate the rats twice, and the irradiationdosagewas 3000cGy

4、 each time. This caused radiation skin lesions to rats 落 buttock. After the symptoms became obvious, the rats suffering from GradeII skin lesions were randomly dividedinto six groups: negative controlgroup, high dose seabuckthor n pulp oil group, lowdose sea buckthor n pulp oilgroup, high dose sea b

5、uckthorn seed oil group, low j! dose sea buckthor n seed oil group, and positive con trol group. The oil was applied to the woundedarea twice a day for highdose pulp oil group and high dose seed oil group, and it was applied once a day for the lowl dose groups. For the negative control group, steril

6、izedinjectionwater was applied once a day, andSolcoseryl Jelly ointment was applied once a day for the positive con trol group. Results The results from n aked eye observati on showed that after medicati on for 10 con secutivedays, the local erythema and edema of the groups using sea buckthorn pulp

7、oil and seed oil and Solcoseryl Jelly ointment abated, and the secretionsof the wounded surface reducedcon siderably. After medicati on for two weeks, obvious disappearanee of the above symptomswas observed; compared with the n egative con trol group, the con diti on improved con siderably .In addit

8、i on, the heali ngtime of the woun dedarea of the rats was markedly shortened for the pulp oil groups, seed oil groups, and the Solcoseryl Jelly group.Optical microscopic observation showed that the injuries in the pulp oil group,seed oil group,a nd the Solcoseryl 抵 Jelly group were significantly re

9、duced, inflammatory reaction was obviously reduced, and the restoration of the woundedareas was obvious. Electr onmicroscopic observati on showed that theultrastructure of the negative group was obviously damaged, but that of the pulp oil groups, seed oil groups, and Solcoseryl Jelly group reduced s

10、ignificantly.Conclusion Theabove results suggest that sea buckthorn pulp oil and sea buckthorn seed oil have a marked therapeutic effect on radiati on skin lesi ons in rats.KEYWORDSsea buckthorn pulp oil; sea buckthorn seed oil;radiati on skin lesi on; rat沙棘籽油及沙棘果油是从胡颓子科植物沙棘的籽及果肉中提取。 据报道，沙棘油可用于治疗溃疡病

11、、烧、烫伤等多种疾病1。张文禄等2报道沙棘油对肿瘤患者放射治疗所引起的急性放射性皮炎、 黏膜炎症及非放射性的皮肤炎症、 溃疡、伤口愈合不良等都有较好的 疗效。高力英等3报道沙棘油对患者放射性皮肤损伤有防治作用。 本实验观察了用超临界萃取法提取的沙棘籽油及沙棘果油对大鼠放 射性皮肤损伤的影响。1材料与方法1.1实验动物健康的SD大鼠，雌性，体重(200 士 20)g，由西安交通大学医学 院实验动物中心提供。1.2药品沙棘籽油(sea buckthorn seed oil, SBSO)及沙棘果油(seabuckthorn pulp oil, SBPO)，用超临界萃取法提取，由芬兰土尔库大学提供。S

12、olcoseryl Jelly软膏，由瑞士素高大药厂生产。1.3仪器深部X线治疗机为匈牙利产，型号：THX光学显微镜为美国产， 型号：AQ透射式电子显微镜为日本产，型号：日立 H眼.600;超薄 切片机为瑞典产，型号：LKB型。1.4大鼠放射性皮肤损伤模型的复制选SD大鼠64只，体重(200 士 20)g，雌性。于照射前一天将动物两侧臀部脱毛。照射前20min,用0.06mol/L戊巴比妥钠30mg/kg腹腔注射麻醉，然后将大鼠固定在动物板上，把臀部两侧用制好的带有 2X 3cm3大小孔的铅板覆盖，暴露脱毛部位，置于深部 X线治疗机球 管下，再用厚铅板覆盖大鼠其他部位。照射的电压180kV,电

13、流12mA 照射距离30cm每次剂量3000cGy间隔两天再照射一次，总剂量为 6000cGy。根据文献报道56，急性放射性皮肤损伤分为四个时期。第一期为早期反应期，第二期为假愈期，第三期为症状明显期，第四 期为恢复期。又按其严重程度（主要是症状明显期的症状）分为3度。1度：早期反应局部出现红斑，假愈期 1-2周，红斑暂消失，临床症 状明显期出现持续性红斑，同时发生脱毛。2度：早期反应期与1度相似，出现红斑，假愈期1-3周，症状明显期出现二次红斑，数日后 红斑处出现水疱。3度：早期反应有红斑、水肿等，假愈期数小时至 10d，症状明显期出现二次红斑、水疱、坏死、溃疡。本实验复制了 2度放射性皮肤

14、损伤模型。1.5实验分组与给药待模型动物的症状明显后，将皮肤2度损伤的动物随机分为阴性对照组、SBPO高剂量组、SBPO氐剂量组、SBSO高剂量组、SBSO氐剂量组以及阳性对照组。SBP仔口 SBS馆剂量组每天在损伤部位分别涂 SBP粛SBSO两次，SBP內SBSO低剂量组每天局部涂药一次，阴性 对照组每天外涂灭菌的注射用水一次，阳性对照组每天外涂 Solcoseryl Jelly 软膏一次。1.6观察指标肉眼观察局部反应：每天观察受照射部位的反应，并进行记录。据相关文献4对局部红斑、水肿的程度进行评分。红斑：无红斑 0, 轻度红斑（微红）1，中度红斑（红）2，重度红斑（明显红）3 ;水肿：无

15、 水肿0,轻度水肿（勉强可见）1，中度水肿（明显可见，边缘高出周围 皮肤）2 ,重度水肿（皮肤隆起1mm轮廓清楚）3，水肿破溃，有创面 形成4,最高总分值7。照射后到创面愈合的时间（d）为愈合时间。 病理组织学及超微结构观察：给药后第 18天时，每组取4只动物， 分别于一个照射部位取材，用10%体积分数）甲醛溶液固定，做常规 切片，HE染色，用光学显微镜进行病理组织学观察。同时每组取2只动物，分别于一个照射部位取材，2.5%（体积分数）戊二醛前固定， 10g/L（1%）四氧化锇后固定，乙醇系列脱水，Epon812浸透，包埋，聚合，超薄切片，以铀、铅双重染色，电子显微镜下进行超微结构观 察、拍照

16、。1.7统计学处理采用SPSS3.0软件进行统计分析，创面愈合时间先来用单因素 方差分析，判断组间变异，然后两组间比较用 t检验，局部红斑、水 肿，按其评分的分值进行定量，并计算出士 s，用t检验统计。检验 水准 a =0.05。2结果2.1皮肤损伤的动物模型观察照射后2-4h，大鼠照射部位出现暂时性红斑（早期反应期），此 后红斑消退进入假愈期（又称潜伏期），假愈期持续4-7d。然后进入 症状明显期，出现持续性红斑、皮肤粗糙、脱屑、水肿、结痂、脱毛，水肿破溃后形成创面，并有分泌物渗出，形成放射性皮肤2度损伤（bullous dermatitis）的动物模型。此后进入恢复期，上述症状逐渐 消退，

17、创面脱痂、愈合。2.2 SBPO及SBSO寸局部症状的影响2.2.1 SBPO及SBSO寸皮肤红斑、水肿的影响见表1。表1 SBPO及 SBSO寸皮肤红斑、水肿的影响（略）结果显示，连续用药10d后，SBPO组SBS（组及SolcoserylJelly组的局部红斑、水肿明显减轻，创面分泌物明显减少，与阴性对照组比较明显好转。2.2.2 SBPO及SBSO寸创面愈合时间的影响见表2。表2 SBPO及 SBSO寸创面愈合时间的影响（略）结果显示，SBPC组、SBSC组及Solcoseryl加Jelly组的创面愈合时间明显缩短。2.3光学显微镜下观察的结果SBPO高剂量组：创面修复，表皮明显增厚，角

18、化细胞、颗粒细胞增多，排列3-4层，胞浆内黑色素细胞增多，棘细胞增生、体积 大。真皮浅层内小血管扩张充血，散在炎细胞浸润（淋巴细胞），结缔 组织增生。皮下组织内小血管、淋巴管扩张，周围有淋巴细胞、单核 细胞、少量嗜酸性粒细胞的浸润，小血管轻度充血。SBPO氐剂量组：创面部分修复，表皮角质细胞增生，颗细胞增多，胞浆内可见较 多的黑色素颗粒，棘细胞增生。部分创面仍可见皮肤表皮组织坏死， 表面有纤维素渗出，其间弥漫中性粒细胞浸润。真皮内可见中性粒细胞浸润，汗腺萎缩、毛囊角化上皮增生。真皮、皮下组织水肿，弥漫 性淋巴细胞、单核细胞浸润，小血管扩张、充血。 SBSO高剂量组： 创面修复、表皮的角质层细胞

19、增生，颗粒细胞增多，层数增生3-4层， 少量淋巴细胞、单核细胞浸润。真皮、皮下组织小血管轻度扩张充血， 少量淋巴细胞浸润。SBSO氐剂量组：创面大部分已修复，光镜下 见正常皮肤结构。少部分皮损部位见表皮细胞增生活跃，角质层细胞、 棘细胞、基底细胞增生明显。真皮、皮下组织内小血管扩张、充血， 散在淋巴细胞、单核细胞浸润。阳性对照组(Solcoseryl Jelly组):表皮大部分结构正常，仅部分表皮内棘细胞间连接松散，有大 小不等的空泡形成，角质细胞、棘细胞增生。真皮、皮下组织中小血 管轻度扩张、充血。阴性对照组：创面皮损明显。表皮层及真皮浅 层组织坏死，大量纤维素、中性粒细胞渗出。真皮内水肿、

20、小血管扩 张、充血，广泛中性粒细胞浸润。皮下组织内血管扩张，广泛水肿， 炎细胞浸润(图1)。2.4电子显微镜下的观察的结果SBPO高剂量组：角质层部分溶解；颗粒层细胞质中可见到较 多的大小不一的透明角质颗粒，部分细胞器溶解；棘细胞间隙较宽， 可见到较多的桥粒结构，部分细胞质溶解；基底膜不完整。SBPO低剂量组：颗粒细胞质中有较多的大小不一的透明角质颗粒，细胞核染色质分布均匀，核仁清晰可见，棘细胞间有较多的桥粒结构，基底 膜连续中断。其形态学改变基本同SBPOfe剂量组。SBSO高剂量组： 角质层基本完整，颗粒层细胞质中可见到较大的角质颗粒， 较多的桥粒结构分布在棘细胞内，细胞内可见到较多的核糖

21、体，基膜较完整。 其形态学改变基本同正常组。 SBSO低剂量组：细胞排列整齐，颗 粒层细胞内可见到较多的角质颗粒， 棘细胞间桥粒结构较多，结构清 晰，基膜连续。其形态学改变基本同 SBSC大剂量组。阳性对照组 (Solcoseryl Jelly):角质层细胞部分溶解，颗粒层细胞排列较整 齐，可见到透明角质颗粒；棘细胞及基底细胞间隙较宽，可见到桥粒 连接；基底膜不完整，可见到淋巴细胞浸润。其形态学变化较阴性对 照组显著改善。阴性对照组：角质层细胞大部分溶解或消失；颗粒 层细胞亦有部分溶解，细胞质中的角质透明颗粒尚可看见，细胞排列 紊乱；棘细胞层细胞间隙部分增大，部分缩小，桥粒连接减少或消失， 胞

22、质内出现空泡；基层细胞层排列紊乱；基底膜部分溶解、消失、连 续性中断，细胞间可见到淋巴细胞浸润(图2)。以上形态学改变在SBSC大、小剂量组最好；SBPC大、小剂量组及阳性组次之。3讨论本实验复制了 2度放射性皮肤损伤模型，其表现与文献报道一致。 据报道，有用小鼠、豚鼠、小猪等动物做放射性皮肤损伤实验，但小 鼠及豚鼠耐受性差，小猪不易得到6。本实验成功的复制了大鼠放 射性皮肤损伤的动物模型。此模型具有简便、可靠，且大鼠耐受性强， 不易死亡等优点，在药理学的研究中具有实用价值。本实验的肉眼观察结果表明，给药 10d后，SBPO组、SBSO 组及Solcoseryl拟Jelly组的红斑、水肿等局部症状明显减轻，创面分泌物明显减少，与阴性对照组比较