侵袭性真菌感染患者真菌培养及耐药性研究

1、侵袭性真菌感染患者真菌培养及耐药性研究【摘要】 目的：了解笔者所在医院2013年9月-2016年1月院内侵袭性真菌感染（IFI）状况及耐药性。方法：对861例疑似IFI患者送检标本进行真菌培养、鉴定和药敏试验，并对确诊为侵袭性真菌病（IFD）的患者进行相关临床资料的调查、分析。结果：107例IFD患者中，白色假丝酵母菌最常见。占46.73%（50/107），其余依次为曲霉菌属占41.12%（44/107）、热带假丝酵母菌占7.48%（8/107）、光滑假丝酵母菌占2.80%（3/107）、克柔假丝酵母菌占1.87%（2/107）。药敏试验结果，真菌对抗菌药物的总耐药率由低到高依次为：伊曲康唑、

2、氟胞嘧啶、制霉菌素、两性霉素B、酮康唑。IFD患者分布主要见于ICU、呼吸内科。结论：在ICU病房、呼吸内科等，IFD发病率高，致病菌种以白色假丝酵母菌为最高，其次为曲霉菌属；积极开展真菌培养及耐药性检测分析，对于尽早干预和合理使用抗菌药物具有重要的临床意义。【关键词】 侵袭性真菌感染； 真菌培养； 耐药性； 早期诊断中图分类号 R519 文献标识码 B 文章编号 1674-6805（2016）23-0049-03【Abstract】 Objective：To understand the nosocomial invasive fungal infection （IFI） condition

3、 and resistance in our hospital from September 2013 to January 2016.Method：861 patients with suspected IFI samples were selected for fungal culture，identification and drug sensitive test，and the related clinical data for the diagnosis of patients with invasive fungal disease（IFD） were investigated a

4、nd analyzed.Result：In 107 patients with IFD，white candida was the most common，accounted for 46.73%（50/107），and the rest of aspergillus species accounted for 41.12%（44/107），candida yeast was 7.48%（8/107），smooth candida yeast was 2.80%（3/107），candida accounted for 1.87%（2/107）.Drug susceptibility test

5、 results，the fungus on the total resistance to antimicrobial agents from low to high followed by Itraconazole，Fluorine Cytosine，Mycin，Amphotericin B，Ketoconazole.IFD patients were higher in ICU and respiratory medicine.Conclusion：In ICU and respiratory medicine IFD are high incidence，white candida i

6、s the highest，followed by aspergillus species.Actively cultivating fungi and drug resistance detection analysis for early intervention and rational use of antimicrobial agents has important clinical significance.【Key words】 Invasive fungal infection； Fungal culture； Drug resistance； Early diagnosisF

7、irst-authors address：Baoji City Chinese Medicine Hospital，Baoji 721001，Chinadoi：10.14033/ki.cfmr.2016.23.026近年来，侵袭性真菌感染（invasive fungal infections，IFI）的发病率有逐年上升的趋势。同时随着抗真菌药物的广泛使用，许多真菌也产生了一定的耐药性。为了解笔者所在医院IFI感染及耐药状况，笔者对近两年多分离的侵袭性真菌进行了鉴定及药敏试验，并进行了标本来源、菌种分布、患者基础疾病等调查分析，以期指导临床对侵袭性真菌病（invasive fungal dise

8、ase，IFD）的早期诊断与治疗。1 材料与方法1.1 标本来源选择2013年9月-2016年1月，笔者所在医院ICU、呼吸内科、肿瘤血液科、干部病房等门诊及住院疑诊为DFI的861例患者，其中男460例，女401例，年龄2989岁，平均51岁。采用回顾性方法，查阅患者住院病历资料，以出院临床诊断为依据。1.2 真菌培养根据患者的情况，留取痰液、支气管肺泡灌洗液、胸腹水、尿液等标本进行真菌培养。标本的留取和真菌分离培养均按全国临床检验操作规程第4版、吴绍熙【3】及王瑞礼等【4】介绍的方法进行操作；菌种鉴定质控菌株为白色假丝酵母菌ATCC90028、光滑假丝酵母菌ATCC2238NL、热带假丝酵

9、母菌ATCC750及克柔假丝酵母菌ATCC6258。1.3 药敏试验选择临床常用的伊曲康唑、制霉菌素、氟胞嘧啶、两性霉素B、酮康唑，以微量稀释法，采用温州康泰真菌药敏试验卡进行药敏感性试验，药敏试验质控菌株为克柔假丝酵母菌ATCC6258。2 结果2.1 疑似IFD患者真菌感染率861例疑似IFD患者真菌培养阳性181例，阳性率21.02%。2.2 181例IFD患者感染真菌分布181例IFD确诊患者，共培养出107株真菌，其中检出率最高者为白色假丝酵母菌，占46.73%（50/107），其余依次为曲霉菌属41.12%（44/107）、热带假丝酵母菌7.48%（8/107）、光滑假丝酵母菌2.

10、80%（3/107）、克柔假丝酵母菌1.87%（2/107），见表1。2.3 181例IFD患者分布及构成比IFD患者分布主要见于ICU、呼吸内科、肿瘤血液科、干部病房等，详见表2。2.4 真菌培养标本来源181例培养（+）标本，以痰液为最多，其次依次为支气管肺泡灌洗液、胸腹水、尿液等标本，感染标本构成比见表3。2.5 药敏试验结果真菌对抗真菌药物的总耐药率由低到高依次为：伊曲康唑19.63%、两性霉素B 25.23%、制霉菌素32.71%、氟胞嘧啶36.45%，酮康唑较其他抗真菌药物耐药率最高，达到53.27%，药敏试验结果详见表4。3 讨论深部真菌感染的诊断通常比较困难，如假丝酵母菌、曲霉

11、等属于条件致病性真菌，广泛存在于环境和正常人体内，故正确解读临床标本真菌培养阳性结果的临床意义，对于正确诊断至关重要。目前深部真菌感染的诊断主要依赖于病原学检查，包括真菌直接镜检、培养和病理学检查，虽然这些方法存在敏感性差，尤其是真菌培养具有操作较为繁杂，花费时间长等缺点【5】，但结合临床特点及近年兴起的G试验、GM试验等快速诊断方法，可以提高阳性病例的诊断率。笔者研究发现，根据不同标本类型，对于判断感染有重要意义。无菌体液，如血液或脑脊液中分离出假丝酵母菌、曲霉菌等常提示明确的感染；但对于来自脓液、痰液及尿液标本，则应谨慎解释结果，尤其是国内学者现认为，曲霉菌为条件致病菌，多次痰曲霉菌培养阳

12、性亦不能确诊【6】，故应重视直接镜检与培养相结合的重要性，两者可以互相印证、补充。另外，菌种鉴定结果对抗真菌药物的选择也具有重要意义，如克柔念珠菌对氟康唑天然耐药，土曲霉、尖端赛多孢霉、足分支霉通常对两性霉素B耐药。从感染情况来看，181例IFD患者真菌培养阳性患者中，白色假丝酵母菌依然占主导地位，为46.73%，与文献【7】报道基本一致。从患者分布情况分析，ICU、呼吸内科居多，分别占41.99%、34.25%。从感染的标本分析，痰液占39.78%，支气管肺泡灌洗液26.52%，胸腹水13.81%，尿液9.94%，脓液6.63%，伤口3.31%，统计分析表明，在继发真菌感染的疾病中，以下呼吸

13、道最多，其次为血液病、恶性肿瘤、老年病、尿毒症等。上述患者普遍存在年龄大，住院时间长，免疫力低下，接受广谱抗菌药物、激素、侵入性操作治疗手段多，特别是其中的恶性肿瘤患者在化疗的同时为预防感染使用了大量的广谱抗菌药物，严重破坏了机体防御功能，使真菌感染率增加。从药敏结果分析，本研究对5种抗真菌药物的观察结果表明，大多数真菌对传统抗真菌药物伊曲康唑和两性霉素B具有较高的敏感性，耐药率分别为19.63%、25.23%；而制霉菌素、氟胞嘧啶和酮康唑则对各类真菌耐药率均较高。上述结果证实，两性霉素B和伊曲康唑可作为IFD患者抗真菌感染的常用药物，尤其是伊曲康唑临床反应具有较好的疗效，不良反应少，可以广泛

14、应用于侵袭性真菌感染的抗真菌治疗。总之，随着免疫抑制剂、激素、广谱抗菌药物的大量或不合理应用，在临床上导致的菌群失调而引发的机会性真菌感染日益增多，近年笔者所在医院的IFD患者呈上升趋势，应引起临床医师的高度重视；临床微生物实验室应常规开展真菌培养及药敏检测，并积极开展G实验和GM实验，并进行综合分析评价，为侵袭性真菌感染的早期诊断及合理用药提供依据和帮助，提高诊断效率，提高真菌感染救治的成功率。参考文献【1】施毅.重视侵袭性肺部真菌感染的诊治.医学研究生学报，2007，20（3）：225-228.【2】 Hsu L Y，Ng E S，Koh L P.Common and emerging fungal pulmonary infections.Infect Dis Clin North Am，2010，24（3）：557-577.【3】吴绍熙.现代医学真菌检验手册.第2版.北京：中国协和医科大学出版社，2005：67.【4】王瑞礼，李若瑜，王爱平.医学真菌学-实验室检验指南.北京：人民卫生出版社，2005：493.【5】黄耀光，林辉斌，苏伟强，等.（1-3）β-D-葡聚糖水平对侵袭性肺部真菌感染的诊断效能分析.中国医学创新，2015，12（20）：26.【6】文智能，李霞.侵袭性肺曲菌病15例临床