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文档简介
1、多粘菌素B等对多重耐药铜绿假单胞菌的体外抗菌活性研究西部医学2010年9月第22卷第9期MedJWestChina,Sept2010,Vo1.22,No.9多粘菌素B等对多重耐药铜绿假单胞茵的体外抗菌活性研究高燕渝,俞汝佳,吕晓菊(教育部人类疾病生物治疗国家重点实验室四川大学华西医院感染性疾病中心,四川成都610041)摘要目的测定多粘茵素B等抗茵药物对铜绿假单胞茵的体外抗茵活性,为临床治疗药物选择提供实验室依据.方法对127株临床分离的多重耐药铜绿假单胞茵,采用琼脂对倍稀释法测定多粘菌素B,米诺环素等12种抗茵药物的MIC值.结果亚胺培南对多重耐药的铜绿假单胞茵有较强的抗茵活性,MIC5.为
2、2/lg/ml,MIC.为16/g/ml,多粘菌素与米诺环素也有很好的抗茵活性,MIC5o分别为0.5/lg/ml与2g/ml,MIC90分别为4/.tg/ml与8g/ml.结论碳青霉烯类,多粘茵素B及米诺环素对临床常见多重耐药铜绿假单胞茵具有良好的抗茵活性.关键词铜绿假单胞茵;最低抑茵浓度;多粘茵素B中图分类号R969.4文献标识码A文章编号16723511(2010)09160903Invitroactivitiesof12antimicrobialagentsagainstmulti-drugresistantPseudomonasaeruginosaGAOYan-yu,YURu-jia
3、,LUXiao-jv(DepartmentofInfectiousDiseases,StateKeyLaboratoryofBiotherapyofHumandiseases,WestChinaHospital,SichuanUniversity,Chengdu610041)Abstract0bjectiveToinvestigatetheinvitrosusceptibilityof12kindsofantimicrobialagentsincludingpolymycinBagainstclinicalisolatesofPseudomonasaeruginosa.MethodsTheMI
4、Cvaluesof12antibioticsagainst127isolatesofP.aeruginosaweredeterminedbythetWOfoldagardilutionmethod.ResultsAmongthe127isolates,theresistanceratestOimpenemwaslow.MIC50andMICg0ofimpenenwere2ug/mland16/,g/ml,respectively.PolymycinBandMinomycinhadstrongactivitiesagainstP.aeruiginosawithMIC50were0.5g/mlan
5、d2tg/ml,MICg0were4g/mland8/g/ml,respectively.ConclusionPolymycinB,Minomycinandcarbapenemshadstrongactivitiesagainstmulti-drugresistantcilincalisolatedP.aeruginosa.KeywordsPseudomonasaeruginosa;MIC;Antimicrobia1resistance铜绿假单胞菌广泛分布于医院环境中,是引起多种医院感染的重要条件致病菌.多重耐药(MDR)或泛耐药(PDR)的铜绿假单胞菌的出现给临床治疗带来了很大困难1,尽管碳
6、青霉烯类抗生素仍是治疗首选,但其敏感性和临床疗效正逐年下降,并出现了较多耐碳青霉烯类细菌感染3.因此,我们初步进行了多粘菌素B等抗菌药物对铜绿假单胞菌的体外抗菌活性研究,以期对临床耐药铜绿假单胞菌的治疗用药选择提供体外药效学依据,现报告如下.1材料与方法1.1菌株来源由四川大学华西医院抗感染药物研究室分离自临床感染患者的铜绿假单胞菌菌株.1.2药物选择多粘菌素B及米诺环素来自成都药通讯作者:吕晓菊,Email:lvxj3396yahoo .an友药业,效价95;异帕米星:浙江海正药业,效价7O;哌拉西林/他唑巴坦:惠氏药品有限公司,效价86.19/6;哌拉西林:中国药品生物制品检定所,效价9O
7、.5;阿米卡星:中国药品生物制品检定所,效价65.5%;头孢他啶:中国药品生物制品检定所,效价84.2%;头孢哌酮:中国药品生物制品检定所,效价96.5;头孢吡肟/亚胺培南:杭州默沙东药品,效价50;氨曲南:上海施贵宝药品有限公司,效价56.4;环丙沙星:中国药品生物制品检定所,效价94.5.实验器材多点接种仪来自英国denley公司;细菌比浊仪来自法国biomerieux公司.1.3实验方法(琼脂二倍稀释法)1.3.1菌种收集,鉴定我科接收的临床感染标本进行常规分离培养.使用法国生物梅里埃公司E20鉴定试剂条和NE20鉴定试剂条,对临床分离菌株进行西部医学2010年9月第22卷第9期MedJ
8、WestChina,Sept2010,Vo1.22,No.9鉴定.整个分离鉴定过程按照美国临床实验室标准操作程序CLSI进行.收集鉴定后的菌种用30甘油肉汤保存.1.3.2菌种复苏,增菌将收集的菌种接种于MH琼脂平板,挑取单个茵落于MH肉汤,振荡孵育8小时.增菌后用比浊仪稀释到0.5麦氏浊度.1.3.3琼脂对倍稀释法将抗菌药物按照二倍稀释法准备的0.03g/ml512ktg/ml浓度的药液分别加入15个9cm平板,再加入适量MH琼脂,形成药物浓度对倍稀释的琼脂培养基.再将浓度为0.5麦氏浊度的待测菌通过多点接种仪,定量接种到该平板上.孵育24小时,记录细菌生长结果.2结果2.1菌株分布情况标本
9、来源以痰居多(77.16),其他标本依次为创面分泌物,血液,尿液等.病房分布以ICU为主(46.45),其次是胸外,骨外,见表1.2.2MIC测定结果,见表2.表1实验标本来源及科室分布情况Table1Departments表212种抗菌药物对铜绿假单胞菌的抗菌活性MIC(pg/m1)Table2MICtoPseudomonasaeruginosa注:*为CLSI没有判断标准抗菌药物;#为无中介耐药标准药物2.3耐药性比较米诺环素属于四环素类,多粘菌素B属于多粘芽孢杆菌产生的多肽类抗生素,阿米卡星和异帕米星属于氨基糖苷类抗生素,环丙沙星为氟喹诺酮类抗生素,其他属于B一内酰胺类抗生素.其中有15
10、株菌对多粘菌素B不敏感,占细菌总数的12,有49株菌对亚胺培南耐药,构成比为39%.表3多重耐药细菌的比率Table3Rateofmulti-resist8rice3讨论铜绿假单胞菌作为医院感染的重要病原菌已引起世界范围的广泛重视.假单孢菌属可引起肺部,血液,中枢神经系统,泌尿系统和皮肤软组织等各部位的感染,且对多种抗菌药物呈高度耐药.在本研究中,我们发现标本以痰(77.16%)和创面分泌物(11.81)为主要来源,铜绿假单胞菌以ICU为主(分离率为46.45);提示铜绿假单胞菌以呼吸道感染和创伤感染为主,这与文献报道相似E6,7.随着广谱抗菌药物的广泛使用,铜绿假单胞菌的耐药现象也越发严重.
11、铜绿假单胞菌的耐药机理有五个方面.产生抗生素修饰酶,水解酶,如ESBLs,氨基糖苷修饰酶,碳青霉烯酶等.抗菌药物靶位改变,如16SRNA甲基化酶的作用等.外膜通透性降低,OprD2蛋白缺失.主动外排机制,如主动外排基因MexR的过量表达.生物膜相关性耐药,此种耐药在呼吸机相关性感染中扮演重要角色.由于以上五种耐药机制的互相作用,造成了铜绿假单胞菌对临床常用抗菌药物的高度耐药.这种现象被称为多重耐药.多重耐药(multi-drugresistant,MDR)是指一种细菌对2种或2种以上不同作用机制的抗菌药物产生耐药.尽管许多临床和实验室研究报道这些细菌对碳青霉烯类和加酶抑制剂的复合抗生素都有较高
12、的敏感性,联合应用氨基糖苷类,氟喹诺酮类抗菌药物也能达到一定的临床疗效,但新的耐药株仍在不断出现.本研究发现多重耐药株和泛耐药株的比例都很高,其中多重耐药株为78株(61.4),8一内酰胺类+阿米卡星耐药株为69株(54.3).泛耐药(pan-drugresistancePDR)的定义在国际上有争议,目前主流认为:对铜绿假单胞菌和鲍曼不动杆菌经验用药全部耐药者,多粘菌素除外g.本研究中约有27株茵符合这个标准,占21,与国内其西部医学2010年9月第22卷第9期MedJWestChina,Sept2010,Vo1.22,No.9他报道类似】.多粘菌素B(PolymyxinBSulfate)其抗
13、菌谱及临床应用与多粘菌素E相似,对革兰阴性杆菌,如大肠埃希菌,铜绿假单胞菌,肺炎克雷伯菌,嗜酸杆菌,百日咳鲍特菌及志贺氏菌等有抑制或杀菌作用.临床上主要用于敏感菌引起的感染及铜绿假单胞菌引起的泌尿系统感染,脑膜炎,败血症,烧伤感染以及皮肤粘膜感染等.在本研究中,多粘菌素,亚胺培南的抗菌活性较好,MIC.分别为8,4,16/g/ml,哌拉西林/他唑巴坦,头孢哌酮/舒巴坦的抗菌活性均好于单用哌拉西林,头孢哌酮,MIC.分别为32/g/ml和>128g/ml,>512/g/ml和>512/g/ml.氨曲南,阿米卡星,异帕米星的抗菌活性较差,MIC.都分别>512>g/m
14、l.目前国内有报道用多粘菌素B及米诺环素治疗铜绿假单胞菌感染1,但多粘菌素B对临床分离细菌的耐药性的监测报道较少.本研究监测了多粘菌素B的MICR为<0.03>512/g/ml,MIC5o为0.5g/ml,MIC.为4,ug/ml,与亚胺培南的MIC结果相似.临床分离的耐药铜绿对多粘菌素B的敏感性为88%,一共有15株菌对其耐药,占实验总数的12.而米诺环素对铜绿假单胞菌的MICR为<0.03256g/ml,MIC5.为4/g/ml,MIC9.为8/g/ml,但没有评判标准.4结论在多重耐药菌和泛耐药菌比例不断升高的今天,多粘菌素B,碳青霉烯类及米诺环素仍然保持对其高度敏感性
15、,提示临床工作者加强抗生素合理使用,减缓耐药率上升的重要性.【参考文献】11FalagasME,BliziotisIA,KasiakouSK,eta1.OutcomeofinfeetionsduetOpandrugresistant(PDR)GramnegativebacterlaJ.BMCInfectDis,2005,5(1):24.2HsuehPR,TsengSP,TengLJ,eta1.PandrugresistantPseudomonasaeruginosacausingnosocomialinfectionatauniversityhospitalinTaiwanJ.ClinMicr
16、obiolInfect,2005,11(8):670.3王辉,陈民钧.非发酵糖革兰阴性杆菌的耐药发展研究进展J.中国抗生素杂志,2004,29(4):1934刘永芳,吕晓菊.铜绿假单胞菌对碳青霉烯类抗生素的耐药表型与外膜蛋白OprD2的关系J.中国抗生素杂志,2005,30(11):699.5CorbellaX,ArizaJ,ArdanuyC,eta1.EfficacyofsulbactamalongandincombinationwithampicillininnosocomialinfectionscausedbymultiresistantPseudomonasaeruginosaJ.J
17、AntimicrobChemother,1998,42:7936FalagasME,BliziotisIA,KasiakouSK,ta1.Outcomeofinfeetionsduetopandrugresistant(PDR)Gram-negativebacterial-J1.BMCinfectE)is,2005,5(1):2425.7刘永芳,吕晓菊,宗志勇,等.铜绿假单胞菌对碳青霉烯类抗生素的耐药表型与外派泵表达的关系J.中国抗生素杂志,2007,32(9):564.8王顺.医院感染的革兰阴性杆菌构成比及耐药性分析FJ.中华医院感染学杂志,2009,19,2620.93周秀春,安春丽.铜绿
18、假单胞菌的临床感染及耐药性分析J.中国微生态学杂志,2009,11,1015.1,10魏艳艳,熊自忠.泛耐药研究进展J.安徽医药,2009,1:6.111李然,王睿,李碧燕.多牯菌素对泛耐药革兰阴性杆菌严重感染临床应用新进展口.中国药物应用与监测,2009,6:365.(收稿日期:20100416;编辑:张文秀)环境可改变干细胞分化方向干细胞是尚未分化成熟的细胞,除胚胎干细胞外,多数干细胞常常命中注定只能成长为某一种特定的细胞.但8月19日出版的英国自然杂志上的一项最新研究成果显示,只要改变成长环境,来自胸腺的干细胞也可以转行变为毛囊细胞.这对于研究器官组织再生具有重要意义.英国爱丁堡大学研究人员和瑞士同行进行的这项研究成功改变了实验鼠胸腺千细胞的命运.胸腺是存在于人和许多动物胸部的一个器官,它是免疫细胞T细胞的生成地,在免疫系统中发挥着重要作用.研究人员首先培养出实验鼠胸腺干细胞,然后将它转移到适宜皮肤毛囊细胞生长的环境中培养,结果发现这些胸腺干细胞在新环境中逐渐改变了自己的基因特征,越来越像皮肤毛囊的干细胞.在这种环境中培育一段时间后,这些细胞被移植到正在生长的皮肤中,结果它们拥有了像毛囊细胞一样供养和修复毛发的能力,且表现出色.天然毛囊千细胞成长后只有3个星期的修复
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