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文档简介

1、 血片的制作 血片的染色 影响血片制作质量的因素及 注意事项 疟疾血片厚、薄血膜的制作要领。 疟疾血片制作注意事项。 掌握血片制作技巧、反复练习。 (一)采血: 1、使用的器材准备: 一次性采血针 75%酒精 棉棒(球) 载玻片 推片 记号笔或铅笔。 2、采血时间:症状发作后数 小时至10小时之内。 3、采血部位消毒:采血部位消毒:用沾有碘 酒的棉棒在患者手指末端、 耳垂、拇趾或足跟(婴幼 儿)从内向外画同心圆。 4、采血:、采血:将采血针迅速刺入 取血部位12mm深,用大 拇指、食指协同挤出血滴。 第一滴血因含有酒精,用 棉签擦去。再挤出第二滴 血用于制作血片。 (二)涂制血片 1、取血取血

2、: 将载玻片平均划分为2等份,用推片的一 角从患者刺血部位沾取血样放在载玻片上,或用 载玻片直接沾取血样。于载玻片中央偏右3mm处 粘取45ul(相当于一个火柴头大小)血液用于涂 制厚血膜,在玻片中央偏左3-5mm处粘取11.5 ul血液(相当于1/4火柴头大小)用于涂制薄血膜。 要求要求:先沾取厚血膜血样,再沾取薄血膜血先沾取厚血膜血样,再沾取薄血膜血 样。样。 2、制片:左手拇指和食指托住载玻片的两个短边, 右手拇指和食指同时捏住推片和载玻片,使推片 保持25度35度角,用推片短边的下缘平抵血样 前3-5mm处,然后推片顺着载玻片缓慢地向后退, 边退边观察血液在推片的扩展情况,当血液向两

3、侧扩展至距载玻片边缘2mm时,停止后退,然后 匀速向前推,直至推片抵到拿载玻片的手指。推 片时,右手拇指和食指要贴紧载玻片,避免推歪。 薄血膜要成舌状,厚度应以红细胞之间互相接触 而不重叠为佳。 薄 血 膜 制 作 注意: 血滴大,速度快、角度大 血膜厚 血滴小,速度慢、角度小 血膜薄 血涂片质量评价: 血膜均匀、厚薄度合适、无空泡、无划痕 薄血膜头体尾位置和形状好、无停顿起伏、 两侧留出空间 推好薄血膜后,再 用推片一角由内向 外划圈涂制直径 0.81cm的圆形厚 血膜(厚度以一个 油镜视野内可见到 510个白细胞为 宜)。 3、编号: 每张载玻片 上可做1个薄血膜和1个厚 血膜,如图: 标

4、准血片标准血片 门诊发热病人血片门诊发热病人血片 居民普查血片居民普查血片 4、干燥:干燥:可自然干燥,也可在手掌大鱼际肌 上摩擦干燥。或者使用酒精灯或电吹风加 热干燥,但需当心过度加热,烤伤血片。 而且,加热后必须待冷却至室温方能染色 或固定,否则染色冲片血膜会脱落。 5、固定:、固定:干燥后的血片用甲醇固定薄血膜。 固定时,注意薄血膜一端朝下,避免固定 厚血膜。 血片染色在血片的制作过程中是 一个重要的环节,染色质量的好坏, 直接影响到疟原虫的检出率,也是 直接影响疟疾病例确诊与否的关键。 疟疾血片的染色有瑞氏染液和吉 氏染液两种,我们现在重点介绍吉 姆萨染液染色法。 染液为省寄生虫病防治

5、所统一配制的吉 姆萨染液;为方便开展工作,经省寄生虫 病防治所反复试验,缓冲液选择市面上供 应的娃哈哈矿泉水为佳(在条件允许时配 制pH7.07.2的缓冲液为最佳选择)。 注:珠海贝索生物技术有限公司生产的 Baso姬姆萨染液: A液为染液 B液为稀释液 染色方法:染色方法: 1.标准染色方法 1滴原液+1ml缓冲液,染2030分钟 2.快速染色方法 2滴原液+1ml缓冲液,染1015分钟 染色时,用吸管吸取配好的染液,以一定高度自 由滴下染液。禁止用吸管搅拌玻片上的染液或者 接触血膜。染色结束后将玻片浸入盆水中,使玻 片保持水平并左右轻轻移动,至干净时从水中轻 轻抽出。或者使用自来水冲洗,冲

6、洗时,水平拿 起载玻片(不要先倒掉染液),从载玻片无血膜 区域(磨边处)用无冲击力的缓慢流水轻柔地把 染液冲掉,在确保厚血膜不掉的前提下,从玻片 另外一边再冲洗,直到确认冲洗干净。晾干时注 意薄血膜一端向下放置(用晾片板晾干)。 未染色血片的保存未染色血片的保存 未染色的血膜放置时间,夏季不 宜超过48小时,冬季不宜超过72 小时。若送省级或国家检测,应待 厚血膜干后,先用蒸馏水溶血,再 用甲醇固定薄血膜,晾干包好后放 入干燥的容器或自封袋中送检。 采血针一人一针; 载玻片脏:有油脂、污迹; 推片不规格; 取血不适度; 薄血膜过厚; 厚血膜制作不均匀; 染液杂质; 染液PH值不合适(适宜:7.0-7.2); 过度染色

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