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文档简介

1、植物组织培养技术 考试复习题 一、填空题1、组织培养的理论依据是: 植物细胞的全能性 。2、根据培养的外植体材料不同,可将植物组织培养分为以下几 种类型: 愈伤组织培养 、 器官培养 、 胚培养 、 细胞培养 、 原生质体培养、 遗传转化 。3、植物组织培养实验室一般划分为洗涤室、 培养基配置室 、 缓冲室 、 无菌接种室 、培养室、观察室、 驯化室等分室,其中植物组织培养实验室对无菌条件要求最严格的区 域是 无菌接种室 。4、培养基成分主要包 水分 、 无机盐类 、 有 机 营 养 成 、 植 物 生 长 调 节 物 质 、 天 然 物 质 、 pH 、 凝固剂 。5、目前应用最广泛的组培基

2、本培养基是 MS 培养基 。6、培养基最常用的碳源是 糖类物质 ,使用浓度在 1%-5%常 用 3 % 。7、培养基中加入活性炭的目的: 减少外植体的褐变8、生长素 / 细胞分裂素的高低决定着外植体的发育方向, 其比值 高则有利于 根 的形成; 其比值低则有利于 芽 的形成。9、一个已停止分裂的成熟细胞转变为分生状态,并形成未分化 的愈伤组织的现象称为 _脱分化 _10、某些生长调节物质及抗生素、酶类物质遇热不稳定,对其灭 菌时不能进行 ( 高压蒸汽 ) 灭菌,而要进行 过滤方法灭菌 。11、确定花粉发育时期最简捷有效的方法是压片镜检法12、液体培养基和固体培养基最主要的区别是: 固体培养基中

3、添 加了 琼脂粉 ,而液体培养基一般不添加。13、细胞悬浮培养的方法有 分批培养 和 连续培养14、外植体灭菌常用的消毒剂是 酒精 ,使用浓度一般为 7075 。15、具有防止褐变作用的维生素是抗坏血酸(维生素 c) 。16、常用防止褐变的试剂有有机酸 、硫代硫酸钠。17、组培中按照污染的对象分,常见的污染类型有细菌性污染 、 真菌性污染 。18、在使用超净工作台进行无菌操作前, 应先将借种器械放进超 净工作台,并打开 紫外线灯和风机组工作 进行消毒 20 分 钟左右。19、配制培养基调节 pH值时常用 氢氧化钠溶液 和 稀盐 酸溶液 。20、某溶液在使用前已配制成 100 倍的母液,在使用时

4、,若需要 配制 1/2 L 的培养基,则需要吸取母液的量是 5ml 。21、原球茎 是兰科植物特有的一种快繁方式。22、组织培养植株的再生途径有两条,分别是:器官发生 途径 和 胚胎发生途径 。23、一般进行外植体培养时,须诱导形成新的分生组织,即形成 愈伤组织 。24、在使用完移液枪后,应注意调回至该移液枪最大量程。25、植物组织培养快速繁殖技术的基本过程包括材料的初代培养 、 继代培养 、 生根培养 、 驯化培养 。26、接种室每隔三个月会定期进行熏蒸消毒,一般使用甲醛和 高锰酸钾。二、选择题:1、20 世纪 30年代,植物组织培养领域有两大发现, 一是( B ) 族维生素对植物生长的重要

5、性,二是生长调节物质的发现。A、AB 、 BC、 CD、 E2、( B )下列哪种不是原生质体分离所用的酶 。A 、纤维素酶B、淀粉酶 C 、果胶酶D、半纤维素酶3、( D ) 下列哪种在 MS培养基中不起促进生长作用 。A 、氨基酸 B、肌醇 C、维生素D、琼脂4、下列激素,( D )是天然的A、IBA B 、 NAA C 、 BA D 、 ZT5、下列不能作为植物组织培养的材料是:(D )A、秋海棠的叶 B 、马铃薯的块茎 C 、成熟的花粉D、木质部中的导管细胞6、离体培养中,对温度的调控比对光照更为重要,培养室一般所用 的温度是( C )A、15-35 B 、23-32 C、 252D、

6、20-237、外植体表面灭菌可选择的表面灭菌剂的种类较多,但灭菌效果最 好的是( B )A、2次氯酸钠B 、 0.1 氯化汞C、 70酒精D、吐温 808、生根培养一般可采用 12或者 14MS培养基,并加入适量的 ( D )。A 、 2.4-DB 、赤霉素C 、细胞分裂素D、生长素9、影响培养基凝固程度因素有(D )A、琼脂的质量好坏 B 、高压灭菌的时间与温度C、培养基的 PHD 、以上都是10、下列不属于大量元素的盐是( C )A、 NH4NO3B 、 KNO3C 、 ZnSO4.7H2OD、 MgSO4.7H2O11、接种操作中一方面要建立(A )的概念,对可能有菌的地方进行严格消毒处

7、理,另一方面操作时干净利落,不可拖泥带水。A 、无菌B 、 污染C、科学D 、灭菌12、在组织培养中,月季、菊花是通过(A )方式快繁;蝴蝶兰是通过( )方式快繁的。A、 无菌短技型,原球茎发生型B、原球茎发生型,无菌短技型C、无菌短技型,器官发生型D、胚状体发生型,原球茎发生型13、为了诱导芽的形成, 培养基中细胞分裂素与生长素的浓度 ( A ) A 、比值大B 、 比值小C、 比值相等D 、 比值的大小没有关系14、为了诱导根的形成, 培养基中细胞分裂素与生长素浓度 ( B ) A 、比值大B 、 比值小C、 比值相等D 、 比值的大小没有关系15、植物病毒病害防治上,植物病毒脱毒技术得到

8、了广泛的应用,下 列脱毒技术效果最好、应用最广泛的是( C )。A、热处理脱毒法B、茎尖培养脱毒法C、热处理与茎尖培养相结合的脱毒法D、基因工程技术脱毒法16、热处理法中,最主要的影响因素是( D )。A、温度B 、时间C、湿度D 、温度和时间17、根据特异性的抗原抗体反应可检测植物病毒的存在, 这种检测方 法是( C)。A、直接鉴定法 B 、电子显微镜鉴定法C、血清学鉴定法 D 、分子生物学鉴定法18、( B ) 大多数植物组织培养培养基最适 pH 为。A 、5.0-7.0B、5.0-6.0 C 、3.0-4.0 D 、7.0-8.019有一种植物经初代培养得到株无菌苗, 以后按每天继代增

9、殖一次,每次增殖倍数为倍,一年后繁殖苗有 CA 、 3 410株 B 、4 3 12株C 、 3 10株 D 、 4 12株20、( D ) 下列哪种在 MS培养基中不起促进生长作用 _D。A 、氨基酸 B 、肌醇C、维生素D、琼脂21、植物病毒病害防治上,植物病毒脱毒技术得到了广泛的应用,下 列脱毒技术效果最好、应用最广泛的是( C )。A、热处理脱毒法B、茎尖培养脱毒法C、热处理与茎尖培养相结合的脱毒法D、基因工程技术脱毒法22、下列物质不能用高温蒸汽灭菌的是( C )A、镊子B 、滤纸 C 、抗生素类 D 、6-BA23、( A ) 下列那种不是无性繁殖的器官 。A、种子 B 、枝条 C

10、 、块茎 D 、块根22、( B ) 植物离体保存的主要步骤是 。 离体培养物的保存 离体培养与祛除病原物 种质离体收集 遗传稳定性鉴定A、B、C、D、24、( C ) 原生质体纯化步骤大致有如下几步 。 将收集到的滤液离心, 转速以将原生质体沉淀而碎片等仍悬浮 在上清液中为准,一般以 500r min 离心 15min。用吸管谨慎地吸去 上清液。 将离心下来的原生质体重新悬浮在洗液中 ( 除不含酶外,其他 成分和酶液相同 ) ,再次离心,去上清液,如此重复三次。 将原生质体混合液经筛孔大小为 40 100um的滤网过滤, 以除 去未消化的细胞团块和筛管、导管等杂质,收集滤液。 用培养基清洗一

11、次, 最后用培养基将原生质调到一定密度进行 培养。一般原生质体的培养密度为 104106 ml。A、 B 、 C 、 D 、25、( D ) 下列有关细胞全能性的含义,正确的是 。A、每个生物体内的所有细胞都具有相同的功能B、生物体内的任何一个细胞可以完成该个体的全部功能C、生物体的每一个活细胞都具有发育成完整个体的潜能D、生物体的每个细胞都经过产生、分裂、分化、生长、衰老、 死亡的全过程26、( D ) 下列不属于活性炭在组织培养中的作用是 。A、吸附有毒物质B、减少褐变,防止玻璃化C、创造黑暗环境,增加培养基的通透性,利于根的生长D、增加培养基中的养分三、名词解释1、植物组织培养 :又称植

12、物离体培养,是在无菌和人工控制的 条件下,利用合适的培养基,完成对植物的器官,组织,细胞以及原 生质体的培养, 使其按人们的意愿生长, 增殖或再生完整植株的一门 生物技术。2、脱分化 :是指一个成熟个体恢复分化状态, 失去已分化组织, 形成愈伤组织的过程。3、离体培养 :在植物组织培养中,把植物体的组织或细胞离体 在一定条件下培养。4、愈伤组织 :植物培养中,植物细胞表现其全能性,经过脱分 化,形成的一团无序生长的薄壁组织。5、细胞悬浮培养 :是指植物的细胞和细胞小聚体在液体培养基 中进行培养,使之在体外繁殖,生长,发育,并在培养过程中保持很 好的分散性的技术。6、玻璃化现象 :是试管苗的一种

13、生理失调症状,当植物材料进 行离体培养时, 有些组培苗的嫩茎, 叶片往往会出现半透明状和水渍 状的现象。7、外植体:进行植物组织培养中作为离体培养材料的器官或组 织的片段。在继代培养时, 将培养的组织切段移入新的培养基时,这种切段也称外植体。8、驯化现象 :在植物组织培养的早期研究中,发现一些植物的 组织经长期的继代培养发生了一些变化, 在前期的继代培养中需要生 长调节物质的植物材料, 其后加入少量或不加入生长调节物质就可以 继续生长的现象。四、简答题:1. 简述培养基配制的基本过程1)取出母液并按顺序排好,并将有机营养物质贮液溶化待用。2)再取出洁净各种的玻璃器皿如:烧杯,玻璃棒,移液管,移

14、 液枪,量筒放在指定位置。3)取一个大烧杯,倒入三分之一的纯水,并依母液所需量按顺 序加入,并不断搅拌。4)再加入蔗糖,琼脂,并加热使其完全溶解。5)加入植物生长调节剂,用纯水定容。6)调节 pH,用预先配制好的氢氧化钠溶液或稀盐酸溶液进行调 节。7)将培养基分装到各培养器皿,并封好瓶口。2. 在植物组织培养实验中,造成污染的因素有哪些? 答:1)培养基和各种使用器具消毒不彻底2)外植体灭菌不彻底,杂菌残存外植体表面3)超净工作区域污染4)操作人为因素带入5)环境不洁净3. 简述外植体的消毒过程。清水清洗清洁精清洗吸干水分 70酒精清洗 升汞清洗无菌水清洗。4. 简述缓解和减轻褐变的措施。1)

15、外植体和培养材料进行 2040d 的遮光或暗培养,可以减轻 一些种类的褐变现象;2)选择适宜的培养基,调节激素用量,控制温度和光照,降低 温度,减少光照;3)选择年龄适宜的外植体材料进行培养;4)在培养基中,加入抗氧化剂和其他抑制剂如抗坏血素,可以 有效地抑制褐变;5)连续转移,对易褐变的材料可间隔 1224h 的培养后,再转 移到新的培养基上,连续培养处理 7 10d 后,褐变现象便会得到控 制或大为减轻;6)添加活性炭等吸附剂,这是生产上常用的降低褐变的有效方 法。5. 脱毒苗的鉴定方法有哪些?1)指示植物病毒鉴定法;2)抗血清鉴定法;3)电子显微镜鉴定法;4)分子生物学方法。6. 植物细胞悬浮培养中单细胞分离的方法有哪些?1)从培养愈伤

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