清肺口服液研究论文

1、清肺口服液研究论文1仪器与试剂 美国Waters515泵，Waters2487紫外可见检测器，Rheodyne进样器，中科院大连化学物理所WDL95色谱工作站；PBQI型薄层自动涂布器；薄层层析显色加热器；硅胶G（青岛海洋化工集团）；乙醇、甲醇为色谱纯（美国Tedia公司）；水为重蒸馏水；其余试剂均为分析纯。 盐酸麻黄碱对照品（批号171241200303，HPLC法检查纯度大于99%）、黄芩苷对照品（批号110715200212）、大黄素对照品（批号0757200206）、黄芩对照药材（批号120955200406）均购自中国药品生物制品检定所。葶苈子药材经江苏省药检所鉴定为十字花科植物独行

2、菜（Lepidiumapetalum）的干燥成熟种子，习称“北葶苈子”；并标化后作为对照药材使用。清肺口服液(南京中医药大学研制，批号：050914，050915，050916)。 2薄层鉴别 2.1黄芩2取清肺口服液1mL，加甲醇2mL，摇匀，离心，取上清液作为供试品溶液。取缺黄芩阴性制剂1mL,同法制成缺黄芩的阴性制剂溶液。另取黄芩苷对照品，用甲醇制成每1mL含1mg的溶液，作为对照品溶液。取黄芩对照药材1g，加甲醇20mL，超声处理20min,滤过，滤液蒸干，残渣加甲醇溶液1mL使溶解，即得，作为黄芩对照药材溶液。照薄层色谱法（中国药典2005版一部附录B）试验，吸取上述4种溶液各5L，

3、分别点于同一以含4%醋酸钠的羧甲基纤维素钠溶液为黏合剂的硅胶G薄层板上，以乙酸乙酯丁酮甲酸水(体积比5311)为展开剂，预平衡30min，展开，取出，晾干，喷以1三氯化铁乙醇溶液。供试品色谱中，在与对照品、对照药材色谱相应的位置上，显相同的暗绿色斑点；缺黄芩的阴性制剂无干扰。见图1。 1.缺黄芩的阴性制剂;2.黄芩对照药材;3.黄芩苷对照品;4-6.清肺口服液 图1清肺口服液黄芩薄层色谱图（略） Fig.1TLCchromatogramofScutellariabaicalensisGeorgi 2.2虎杖3取清肺口服液10mL，加2.5mol/L硫酸溶液10mL，水浴加热30min，放冷，用

4、三氯甲烷振摇提取2次，每次5mL，合并三氯甲烷液，蒸干，残渣加三氯甲烷2mL使溶解，作为供试品溶液。另取虎杖对照药材1g，同法制成对照药材溶液。再取大黄素对照品、大黄素甲醚对照品，加甲醇制成每1mL含各1mg的溶液，作为对照品溶液。照薄层色谱法（中国药典2005版一部附录B）试验，吸取上述4种溶液各2L，分别点于同一硅胶G薄层板上，以石油醚（3060）甲酸乙酯甲酸(体积比1551)的上层溶液为展开剂，展开，取出，晾干，置紫外光灯（365nm）下检视。供试品色谱中，在与对照药材和对照品色谱相应的位置上，显相同的橙黄色荧光斑点。见图2。 1.虎杖对照药材;2.大黄素对照品;3.大黄素甲醚对照品;4

5、-6.清肺口服液 图2清肺口服液虎杖薄层色谱图（略） Fig.2TLCchromatogramofPolygonumcuspidatum 2.3葶苈子4取清肺口服液10mL，置分液漏斗中，加水饱和正丁醇10mL振摇提取，正丁醇液蒸干，残渣加甲醇2mL使溶解，作为供试品溶液。另取缺葶苈子阴性制剂1mL,同法制成缺葶苈子的阴性制剂溶液。再取北葶苈子对照药材粉末1g，加甲醇10mL，密塞，浸泡24h，超声处理20min，滤过，滤液作为对照药材溶液。照薄层色谱法（中国药典2005版一部附录B）试验，吸取上述3种溶液各5L，分别点于同一硅胶G薄层板上，以水饱和正丁醇冰醋酸水(体积比921)为展开剂，展开

6、，取出，晾干，置紫外光灯（365nm）下检视。供试品色谱中，在与对照药材色谱相应的位置上，显相同蓝色荧光斑点。缺葶苈子的阴性制剂无干扰，见图3。 1.缺葶苈子的阴性制剂;2.葶苈子对照药材;3-5.清肺口服液 图3清肺口服液葶苈子薄层色谱图（略） Fig.3TLCchromatogramofDescurainiasophia 3含量测定 3.1对照品溶液的制备精密称取于五氧化二磷干燥器中干燥6h的盐酸麻黄碱对照品适量，用流动相制成每1mL含01mg的溶液，即得。3.2供试品溶液的制备取清肺口服液5mL，置分液漏斗中，加5%（质量分数）氨水10mL，摇匀，用三氯甲烷振摇提取4次（102，52mL

7、）合并三氯甲烷液，用5%（质量分数）氨水5mL洗涤以去除杂质，水层用三氯甲烷5mL振摇提取1次，合并三氯甲烷液，用0.05mol/L盐酸溶液振摇提取3次（10，5，5mL），提取液置25mL量瓶中，用10%（质量分数）氢氧化钠溶液调pH至4，加水稀释至刻度，即得。 3.3色谱条件与系统适应性试验色谱柱：LichrospherC18（4.6mm250mm，5m）；流动相：乙腈水三乙胺磷酸（体积比5950.050.1）；流速：1.0mL/min；柱温：30；检测波长：210nm。理论塔板数按盐酸麻黄碱计算应不低于3000。 3.4线性关系考察精密称取于60干燥至恒重的盐酸麻黄碱对照品10.50mg

8、，置10mL量瓶中，加流动相稀释至刻度，制成盐酸麻黄碱标准贮备液（1.050mg/mL）。分别配成525.0、262.5、131.3、65.63、32.81、16.41g/mL的系列对照品溶液，分别吸取上述溶液20L，注入液相色谱仪，测定，以峰面积（A）为纵坐标，对照品质量浓度（）为横坐标，绘制标准曲线，得回归方程：A2.098104-27840.877，r1.0000。表明盐酸麻黄碱在16.41525.0g/mL之间与峰面积呈良好的线性关系。 3.5空白试验原方去除麻黄药材，按制剂工艺制备缺麻黄的阴性制剂。取阴性制剂5mL，置分液漏斗中，按含量测定方法分析，空白样品色谱在盐酸麻黄碱相应保留时

9、间上没有干扰峰。见图4。 A.缺麻黄的阴性制剂;B.盐酸麻黄碱对照品;C.清肺口服液1.盐酸麻黄碱 图4HPLC色谱图（略） Fig.4HPLCchromatogram 3.6稳定性考察取同一批号（050914）制剂，每隔2h进样1次，共测6次，结果峰面积RSD=0.67%，表明供试品溶液在12h内稳定。 3.7重复性试验取同一批号（050914）制剂5份，分别按照供试品溶液制备方法制备，依法测定，盐酸麻黄碱的平均含量为0.4261mg/mL,RSD=1.93。 3.8加样回收率试验取已知盐酸麻黄碱含量的制剂样品(批号：050914，含量:0.4261mg/mL)，进行加样回收率试验。取本品2

10、.5mL，共6份，分别加入1.050mg/mL盐酸麻黄碱对照液0.8、0.8、1.0、1.0、1.2、1.2mL置分液漏斗中，按“3.2”项方法制备供试品溶液，依法测定，并计算盐酸麻黄碱回收率为99.54，RSD=2.90，结果见表1。 表1盐酸麻黄碱回收率试验（略） Tab.1Recoverytestofephedrinehydrochloride 3.9制剂样品测定3批制剂样品，如法测定，根据外标一点法计算样品含量，结果见表2。 表2盐酸麻黄碱的含量测定结果（略） Tab.2Contentofephedrinehydrochlorideinthesample 4讨论 4.1由于测定波长处于

11、末端吸收附近，以乙腈水系统为流动相，基线噪音较小，但由于麻黄碱为生物碱成分，需加入缓冲体系进行色谱分析，经试验研究表明，在乙腈水三乙胺磷酸（体积比5950.050.1）(pH3)的条件下，可使盐酸麻黄碱呈现良好分离。故选乙腈水三乙胺磷酸（体积比5950.050.1）为流动相。 4.2麻黄碱为清肺口服液的活性成分，可用来作为中成药的定量指标成分。 4.3该方法简便可靠，精密度高，分离度好，可用于清肺口服液的含量测定和质量控制。 摘要：目的建立清肺口服液的质量标准。方法采用薄层色谱法鉴别制剂中葶苈子、黄芩和虎杖；采用高效液相色谱方法测定盐酸麻黄碱的含量。结果薄层鉴别能检出葶苈子、黄芩和虎杖的斑点，且斑点清晰。盐酸麻黄碱在16.41525.0g/mL之间与峰面积呈良好线性关系，r=1.000,平均加样回收率为99.89%，RSD为1.42%。结论该方法可用于清肺口服液的质量控制。 关键词：清肺口服液；盐酸麻黄碱；薄层色谱法；高效液相色谱法 【参考文献】 1国家中医药管理局中华本草编委会.中华本