重组荞麦胰蛋白酶抑制剂对HL

1、重组养麦胰蛋白酶抑制剂对 HL 60细 胞的促凋亡作用(1)】 为研究多发性骨髓瘤(MM的细胞遗传学特征及其与临床预后的关系，收集 了 68例临床病例并将患者的骨髓细胞进行了 24小时短期培养，用常规方法制 备染色体，G显带技术进行核型分析。结果表明：68例MM患者的异常检出率为 19.1%(13/68)。异常克隆多与正常克隆呈嵌合形式存在。染色体数目异常为非 整倍体，以超二倍体和亚二倍体克隆常见。结构畸变可见t(11;14),累及1号染色体和多种标记染色体等。4例染色体具有高度复杂畸变的患者预后差。结 论：MM勺细胞遗传学多为复杂畸变，涉及多条染色体的数目和结构异常；初诊 或疾病进展时应做染

2、色体检查，以评估预后。【关键词】多发性骨髓瘤细胞遗传学染色体畸变Cytoge netic Study of Multiple MyelomaAbstractTo inv estigate the cytoge netic characteristics of multiple myeloma and its relati on ship with cli nical prog no sis, 68 cases were collected and chromosome specime ns of bone marrow cells were prepared by 24-hour cultur

3、e, and Gbanding tech nique was used for karyotypean alysis. The results showed that the detected chromosome aberrati on rate was 19.1% (13/68). The abno rmal clones existed mosaically with no rmal cion es. Numerous aberrati ons were mani fested by an euploidy, mai nly by hyperdiploidy or hypodiploid

4、y. Structural aberrati ons invo Ived t(11;14),chromosome 1 and various kinds of marker chromosomes. Cases which had very complex aberrati ons revealed poor prog no sis. It is con cluded that chromosome complex aberrati on is the mainly cytogenetic characteristics of multiple myeloma，and multiplenu m

5、erous and structural aberrati ons are invo Ived. Cytoge netic detect ion should be performed both at diag no sis and at disease progressi on so as to evaluate prog no sis.Key wordsmultiple myeloma; cytogenetics ； chromosome aberration多发性骨髓瘤( multiple myeloma,MM )是骨髓中单克隆浆细胞异常增 生的恶性肿瘤，临床上患者的预后不一，中位生存时

6、间为3 年。近年来的研究表明，细胞遗传学分析结果在 MM勺预后评估中具有重的作用。由于骨髓中异常 浆细胞的比例低，并且浆细胞的分裂指数也低，MM勺细胞遗传学分析有一定难度，目前国内尚无关于MM勺大样本细胞遗传学分析的报道。我们对 1990年1 月至 2005年 5 月在初诊或病程中于我院行染色体检查的 68例患者的细胞遗传 学和相关临床情况进行了分析。材料和方法病例68例为1990年1月至2005年5月在我院行染色体检查的 MM患者。 诊断和分型参照张之南等主编的血液病诊断及疗效标准(第二版)。男性 41例，女性27例，中位年龄57 (25-74)岁。化疗方案主为MR VAD和改良 M2方案等

7、。染色体标本制备和分析 采用骨髓细胞 24小时(少数病例为 72小时)短期培养，按参考文献1报道的制片和G显带技术进行染色体分析。核型分析和异常克隆描述按 人类细胞遗传学国际命名体制( ISCN， 1995)进行。简单畸变为所分析的 中期分裂相涉及 1-2 条染色体克隆性畸变；复杂畸变系指涉及 3-5 条染色体克 隆性畸变； 高度复杂畸变系指涉及 6 条以上染色体克细胞遗传学结果68例均行染色体检查，其中 1 例失败， 54例为正常核型， 13例检出 异常核型（表 1），异常检出率为 19.1%。13 例中异常克隆与正常克隆呈嵌合 形式存在的是 11 例（ 84.6%）。 13例中除 2 例外

8、其余的 11 例均有染色体数目 的异常，表现为非整倍体，以超二倍体（ 49、50 条）或亚二倍体（ 39、42-43 条）异常克隆常见。染色体的增加累及 1 号、7号、9 号、18号等，染色体的 丢失累及X染色体、8号、13号、14号等。检出的结构畸变有1号易位/1p-、 12p-、累及14号染色体的易位和多种标记染色体等。13例中染色体具有复杂 和高度复杂畸变的是 7 例（53.8%），涉及多条染色体的增加、丢失、缺失、易 位等数目和结构的畸变。本研究的13例异常核型中也检出1例在MM中较为特 异的畸变 t（11;14）（q13;q32）, 该例为超二倍体异常克隆（ 50条），同时伴有 4

9、号、 9 号、 18号的三体，检出异常后 5个月进展为浆细胞白血病。本研究还 在这68例MM中检出1例具有t（9;22）的异常克隆。具有异常核型的MM患者的临床情况13例具有异常核型的患者中除 1 例表现为鼻衄、牙龈出血外， 其余 均以骨痛为主症状。免疫球蛋白类型最常见的为IgG型共7例，其次为IgA、IgE型各1例，有2例为入轻链型,1例为k轻链型，1例为IgD型。患者分 期均为川期。骨穿检查骨髓瘤细胞的比例较高，中位40% （19%-67% 。4例患者血清B 2微球蛋白显著升高，病例No.15 VAD化疗5个疗程后骨痛、贫血、 肾功能不全等临床症状改善不明显，病例 No.43 和病例 No

10、.65 分别于确诊后 7 月、5月发展为浆细胞白血病，病例 No.68正在随访中。4例具有高度复杂异常 核型的患者预后很差：病例 No.35 确诊后 2年继发急性白血病，病例 No.37 确 诊后1月由于肺部感染和尿毒症死亡（核型见附图），病例No.43进展为浆细胞白血病，死于肺部感染和白血病浸润，存活仅 7 个月，病例 No.65 于确诊后 5月进展为浆细胞白血病。本研究中异常克隆的检出率为19.1%,而文献报道MM初诊时染色体异 常克隆的检出率为 18%-35%，疾病进展期的检出率是 40%-60%，发展到浆细胞白 血病阶段约 85%的患者可检出异常克隆，平均检出率为 35%-40%2，

11、3。本研 究中的异常率低于文献报道，这可能与本组病例以初诊患者为主有关。此外， 在培养体系中加入了相关的生长因子，这是否可提高异常克隆的检出率，还有 待在今后的研究中设立随机对照试验进行分析。本研究中异常核型以复杂和高度复杂畸变为主，涉及多条染色体的数目和结构的异常，这体现了 MM的细胞遗传学特点，与文献的报道是一致的2-5。异常克隆多以超二倍体和亚二倍体形式存在，整二倍体很少见，这说明了在MM异常克隆可能有两种起源形式。涉及 14q32的易位是MM中较为特异的畸 变，该易位累及位于14q32的免疫球蛋白重链(IgH)基因，在MM勺发生发展 中具有重作用，可以表现为 t(11;14) ， t(

12、4;14),t(14;16) 等，但其作用机制并 未完全阐明，因为有25%勺MM患者并不能检出该异常5, 6。本研究的检出 率低于文献报道，可能与病例数少有关。作者：高丽 李玉英 张政 王转花 王宏伟 张丽 朱镭【摘】为研究多发性骨髓 瘤(MM的细胞遗传学特征及其与临床本篇论文是由3COM文档频道的网友为您在网络上收集整理饼投稿至本站 的，论文版权属原作者，请不用于商业用途或者抄袭，仅供参考学习之用，否 者后果自负，如果此文侵犯您的合法权益，请联系我们。近年来的研究认为，MM勺13号染色体的异常，包括13号单体或13 号染色体长臂1区4带的缺失(del(13q14)提示预后差，尤其合并血清 B

13、 2 微球蛋白升高者 5， 7。本研究中最常见的染色体丢失也是 13号，共有 4 例，其中 2 例均在确诊后短期死亡(分别为 1 月和 7 月)。但是，本研究未检 出1例del(13q14)，可能与常规G显带技术难以识别此异常有关。Harris on 等5在37例MM患者中检出11例有异常核型，同时应用针对13q14的特异 探针进行间期荧光原位杂交，检出 20例( 54%)患者有 del(13q14) ，提高了异 常的检出率。20世纪 90 年代以后发展起来的多色荧光原位杂交技术，可以对全套 染色体进行分析，分辨 MM复杂的结构畸变和常规显带中来源不清的标记染色体8。因此，今后对MM进行细胞遗

14、传学研究，应在常规显带的基础上结合间 期荧光原位杂交，有条件的可做多色荧光原位杂交，以提高异常的检出率，明 确其复杂的数目和结构畸变。我们的研究表明，MM勺细胞遗传学多为复杂畸变，涉及多条染色体的 数目和结构的异常。其细胞遗传学结果和临床预后密切相关，在疾病诊断之初 或进展时应做染色体检查，以评估预后。【参考文献】1 邱镜滢，党辉，任汉云等 . 自体血浆培养体系对改善白血病骨髓细胞染色体的研究北京医科大学学报，1993; 25: 249-2512佟刚.多发性骨髓病的细胞遗传学研究进展.国外医学输血及血液学分册， 1990; 13： 137-1393Debes VIcTiim CSh Dewci

15、. cl GIV, Bryant S, et C Chromosomeabnormalities clustering and its implications for pathogenesis andprog nosis in myeloma. Leukemia, 2003;17:427-4364Lai JL, Zan decki M, Mary JY, et al. Improved cytoge netics inmultiple myeloma:a study of 151 patients including 117 patients atdiagnosis. Blood,1995;

16、 85:2490-24975Harrison CJ ， Mazzullo H, Cheung KL, et al. Cytogenetics of multiple myeloma:interpretation of fluorescence in situ hybridization results.Br J Haematol, 2003; 120: 944-9526 A vet I.oi seau 【，Facon T, Grosboi s B, et 汨+ Oncogeness of multiple myeloma:14q32 and 13q chromosomal abno rmalities are not ran domly distributed, but correlate with n atural history, i mmuno logical features, and clinical presentation. Blood, 2002; 99: 2185-21917Zojer N, Konigskerg R, Ackermann J, et al. Deletion of 13q14 remains an in depe ndent adverse prog no stic variable in multiple my