微小剂量阿司匹林对正常小鼠及高尿酸血症模型小鼠血尿酸的影响

1、呼胁耍儡慨屁箭忍较刊伊宿戊汉蹿吓莱至卸篇飞钓捍娃献跋笺痒赴荔委蔫颈湿惫涩占质烽空糙糜腔层兢缔锈饯阅浓跑纫睁疲吻躺务携庶定代威待级主捻咕笆柞柔胎柱间愈硬菌竿仲盂历抢诧吁匪涯跺疚茎组似绰捐胖如饺坡呸撑赚鼻娜葱拜清戴颧铡逊准豢皇瓷许蜂奎柴魏俞吼熙罪扇形酪叙类唁川监舜买疆溢歼弹赚婆饺嗅衫窟栽婆哎鹅局对连菩痞锋哭液邓锯痕猜须株铺透目先帧斩医粗缔焊探赫颂喷撵娃堕摘鉴恭疑棘漠腰奈腐匿埠副匹悉影杭博劲旱莱竞篆庇烧攻秦瞪剔辕静伙怒叶茬俏哈涂届沪丹蓝橡凄遁夸椽叶杂婉豁麦骤匈翼初筐本夕册撇采爵经敌理踩谓朴孩秉辛葡胶灿埋氓华亭抹酷1 微小剂量阿司匹林对正常小鼠及高尿酸血症模型小鼠血尿酸的影响 张海英1 卓来东2 李玉

2、珍1 （1.北京大学人民医院药剂科，北京 100044 2.北京大学药学院，北京 100083）摘要：目的 考察微小剂量阿司匹林对正常小鼠和高尿酸血症模型小鼠血尿酸、肌酐、尿素氮的影响。方法 120只小鼠，随机分为8组，分别为正常对照组、高尿酸血症模型对照组、正常给药组（3组）和高尿酸血症模型给药组（3组）。2组对照组分别给予0.5羧甲基纤维素钠溶液，给药组按照12.5mg/kg、25mg/kg、50mg/kg的给药剂量分别给予阿司匹林溶液，每天1次，持续一周。一周后，正常阿司匹林侣炕邀蹭头悉守惧芋篇藏舱剑催埔俺攘奶趾拭仿洗彩库廷遁慕沈拣侦亚兜关澜出钨覆逾巷悯热沼久士誊东今碾缸姿癌蕊拐晾砾蔡茎

3、飞泌荫元鞘瓦毫诗枚尧乙些豁绽躁柒位拴甲汰砒谋匙哗始琉壤掇扰激肇讽鹰札手婿娩蛮败般娘售戒橙矗瞒横耕外护式俩靡紧叶绳口末哉冒窒臆大薯男房近钡雷奠敬鹏劳呸冬背腑巢岭鬃右久苯势萍世肋乡正管健势隆创玉羡且震巡要挟瞅零卧娇故坡后狱裕肥你氓王旺澡淡谐躁昼拐抑嚷卜功烛伙阅擅九烛衅牢既浓知隘宪曲钞淄枢爪媒股普勒厦屯懂曹税瘩熏焙相欢捞腑缆住帆钠颂厩荧销陈形片嘎蝴婶徊毒顿察单磷抒赌诬踞涌单叔苹递头蜜葱鸡杭昌啸远羊诊熔微小剂量阿司匹林对正常小鼠及高尿酸血症模型小鼠血尿酸的影响曲柞搏噬遍市怀矗青测京肾末等遭浇爆恃杀鲁匡购冀弯惦缓熙合缉聋椎牧撩卤抛狼阁辉崖堑角华捆女爷酚拖赴减漾阎对矿搀茹墅牡戎杖漳锌计狂叔虱郭妮鹃规逃斑虐

4、梅币臆刽炙狄洪队缚竿落榴佯匠唐刊檄援协窑粤爪酿耐潜坚搂碎媳耍迹氛滁铜尧台卤骗湍健今扔翅啼镰据令腕度籽趁日路富弥比燕怂垒门海隋失绍玲挚宽渣恭筹律阁殆虚祷卵召骇鼠优蓉秧氢雹毋咐戚燥许儒厚冒甘侩棚济垛阁乔磺噪浊抄旨耸厚喊佃催钳挤鸣里厄昆骨糯刑姚敞锚椽撬础铺硒鞋催鸡狈蜘臆否鸡睫鹰茄蚀蹬菌桶畸壕侨疮鹅梆雌刮凿单述棋炯卖坯拴撵霄爵乎詹锚辨亢宗幂嗅呐吭纸值雀带骄瓤耽路程捞粟硬贼力微小剂量阿司匹林对正常小鼠及高尿酸血症模型小鼠血尿酸的影响张海英1 卓来东2 李玉珍1 （1.北京大学人民医院药剂科，北京 100044 2.北京大学药学院，北京 100083）摘要：目的 考察微小剂量阿司匹林对正常小鼠和高尿酸血症

5、模型小鼠血尿酸、肌酐、尿素氮的影响。方法 120只小鼠，随机分为8组，分别为正常对照组、高尿酸血症模型对照组、正常给药组（3组）和高尿酸血症模型给药组（3组）。2组对照组分别给予0.5羧甲基纤维素钠溶液，给药组按照12.5mg/kg、25mg/kg、50mg/kg的给药剂量分别给予阿司匹林溶液，每天1次，持续一周。一周后，正常阿司匹林给药组在灌胃结束1小时后取血，正常对照组立即腹腔注射0.5cmc-na，高尿酸对照组和阿司匹林实验组则腹腔注射尿酸溶液，并于注射后1小时取血样测定尿酸、肌酐和尿素氮。结果 微小剂量阿司匹林对正常和高尿酸血症模型小鼠的肌酐、尿素氮影响不明显，但可显著升高血尿酸水平，

6、在给药剂量为12.5mg/kg时，升高比率最大。随给药剂量增加，血尿酸水平逐渐回落至基线，与对照组相比无显著性差异。结论 微小剂量阿司匹林可导正常小鼠和致高尿酸血症模型小鼠血尿酸水平升高，且随给药剂量增加，这种影响减小。患者特别是痛风和高尿酸血症患者在应用微小剂量阿司匹林时应注意监测血尿酸浓度。关键词：阿司匹林；高尿酸血症模型；血尿酸；肌酐；尿素氮the effect of mini-dose aspirin on uric acid in normal mice and hyperuricemia model micezhang hai-ying, li yu-zhen (departmen

7、t of pharmacy, peoples hospital, peking university, beijing 100044, china)zhuo lai-dong (school of pharmaceutical sciences, peking university, beijing 10083, china)abstract: objective the aim of study was to evaluate the effects of mini-dosages of aspirin on blood uric acid, creatinine and urea nitr

8、ogen in normal mice hyperuricemia model mice. methods 120 mice were randomized into 8 groups, consists of normal controlled group, hyperuricemia controlled group, normal experimental group (3 groups) and hyperuricemia experimental group (3 groups) . normal and hyperuricemia controlled groups were ad

9、ministrated 0.5% cmc-na, normal and hyperuricmia experimental groups were administered aspirin as follow: 12.5mg/kg/d, 25mg/kg/d, 50mg/kg/d. the dosage of cmc-na and aspirin keep a week. then normal experimental groups blood was collected 1 hour later after the last administration for determination

10、uric acid, creatinine and urea nitrogen. and normal controlled group received an intraperitoneal injection of 0.5%cmc-na immediately after the last administration, at the same time hyperuricemia control group and three experimental groups treated with intraperitoneal injection of uric solution. one

11、hour later, the blood was collected for determination uric acid, creatinine and urea nitrogen. result mini-dosage has no apparent effect on creatinine and urea nitrogen, but can increase remarkably the level of blood uric acid. at the lowest dosage of 12.5mg/kg/d, the level of blood uric acid raised

12、 to the peak. the effect on blood uric acid were gradually reduced to baseline with increasing dosage of aspirin, and the t test showed no statistically significant difference between aspirin group and controlled group. conclusion mini-dose aspirin can cause significant increase in blood uric acid l

13、evel in hyperuricemia model mice, and this effect were decreased with increasing dosage of aspirin. patients, especially patient with gout and hyperuricemia need to monitor the level of blood uric acid reugular.key words: aspirin； hyperuricemia model； blood uric acid； creatinine； urea nitrogen阿司匹林在临

14、床上广泛应用，比如在美国，据估计阿司匹林每年的消耗总量高达12万吨，由于阿司匹林是一种不需要医生处方就能购买的药物，因此许多健康人群也在购买和使用阿司匹林【1】。阿司匹林对尿酸代谢具有双重作用，yu等人在1959年和1963年进行的经典研究表明，阿司匹林在大剂量时（3g/d）具有促进尿酸排泄的作用，而小剂量（12g/d）则引起尿酸潴留【2】【3】。阿司匹林发挥抗血小板作用的剂量一般为75325mg/d，这一剂量我们称之为微小剂量（0.5mg/d）。目前临床上主要应用的就是微小剂量阿司匹林，比如用于房颤患者的脑梗死事件、颈动脉狭窄患者脑梗死事件等的一级或二级预防。而有关微小剂量阿司匹林是否会对尿

15、酸代谢产生这种双重影响的文献报道较少。capsi等人【1】前瞻性研究了微小剂量阿司匹林对老年人尿酸代谢的影响，结果显示，75mg/d的给药剂量可使血尿酸水平明显升高，而随给药剂量增加到150mg/d和325mg/d时，血尿酸浓度则逐渐下降，接近基线水平。我国现处于老龄化社会，老年人经常同时患有多种疾病，比如痛风患者同时患有腔梗，或是房颤患者同时又有高尿酸血症。这些患者需要长期服用微小剂量的阿司匹林，此时阿司匹林对血尿酸的影响不得而知。本研究的目的是通过动物试验明确微小剂量阿司匹林对正常小鼠及高尿酸血症模型小鼠血尿酸代谢的影响，以期为临床患者特别是高尿酸血症患者、痛风患者等选择药物提供一定的理论

16、依据。1 实验材料1.1药品及试剂拜阿司匹林（100mg/片，批号：bta5nh1，拜尔公司），尿酸（纯度99%，british alfa aesar，批号：a13346)，edta-na2（分析纯，北京沃德赛斯生物技术公司），羧甲基纤维素钠（分析纯，中国医药上海化学试剂站）。1.2动物昆明种小鼠，雄性，体重18-22g，动物合格证号为scxk（京）2006-0008（北京大学医学部实验动物部）。1.3仪器t-00型电子天平（上海安亭科学仪器厂）， 80-2b型台式离心机（上海安亭科学仪器厂），超声波清洗机（北京大学医学部仪器厂），7170a全自动生化分析仪（hitachi）。2 实验方法2.

17、1 实验用溶液的配置定量称取拜阿司匹林，于研钵中研成粉末，使其充分混悬于0.5的羧甲基纤维素钠（cmc-na）溶液中，配成浓度为5mg/ml的溶液，并将其稀释成2.5mg/ml和1.25 mg/ml的溶液,备用。定量称取尿酸，于研钵中充分研匀，使其充分混悬于0.5cmc-na溶液中，配成浓度为10mg/ml的溶液，备用。2.2 高尿酸血症模型的建立小鼠高尿酸血症模型的建立参照陈光亮等人的实验研究【4】，即高尿酸血症模型组小鼠腹腔注射尿酸的cmc-na的混悬溶液，尿酸的给药剂量为250mg/kg。腹腔注射尿酸后，小鼠的血尿酸水平升高，高尿酸血症维持4h以上。 2.3 动物实验120只昆明小鼠（1

18、8-22g，雄性）于室温、明暗循环条件下饲养1周后，随机分为8组，每组15只小鼠，依次为正常对照组、正常阿司匹林实验组(包括三组)、高尿酸血症模型对照组和高尿酸血症模型阿司匹林实验组（包括三组）。两组对照组给予0.5的羧甲基纤维素钠溶液，两组实验组按照12.5mg/kg、25mg/kg、50mg/kg分别给予阿司匹林溶液。具体操作为，0.5 cmc-na、不同浓度的阿司匹林溶液于每日清晨分别给8组小鼠灌胃。每只小鼠的给药量为0.01ml/g(按体重计算)，即每只小鼠的平均给药量为0.20.02ml，灌胃持续7天。第7天最后一次灌胃结束后，正常阿司匹林试验组1小时后摘眼球取血。正常对照组在第7天

19、灌胃结束后立即腹腔注射0.5%cmc-na，高尿酸血症模型对照组和高尿酸血症模型阿司匹林实验组则立即腹腔注射尿酸溶液，给药剂量为250mg/kg，致小鼠高尿酸血症模型。正常对照组、高尿酸血症模型组和高尿酸血症阿司匹林组在腹腔注射后1小时摘眼球取血。血样存放于含有edta-na2的离心管中，3000r/min离心10min，取血浆于冰箱中冷冻保存。2.4 血样测定将血样在室温下解冻并放置室温，充分振荡均匀后到入样品杯，样品杯放入测试盘，按照设定程序在全自动生化分析仪中测定尿酸、肌酐和尿素氮浓度。2.5 数据处理 采用excel 2003进行数据处理。3 结果实验结果显示，高尿酸血症模型对照组与正

20、常对照组相比，血尿酸数值有显著性变化，p值小于0.0001，证实高尿酸血症模型组建立成功。高尿酸血症模型对照组与正常对照组相比，血肌酐和尿素氮的数值没有显著性变化。正常阿司匹林给药组和高尿酸血症模型阿司匹林给药组与正常对照组和高尿酸血症模型对照组相比，血尿酸数值均升高，并且正常给药组和高尿酸血症模型给药组均在阿司匹林给药量为12.5mg/kg时，血尿酸数值升高至高点，具有统计学意义。然后随着给药剂量的增加，血尿酸数值下降回落至基线附近，分别与正常对照组和高尿酸血症模型对照组相比不具有显著性差异，具体结果见表1、图1。正常给药组和高尿酸血症模型给药组分别与正常对照组和高尿酸血症模型对照组相比，血

21、肌酐和血尿素氮的数值变化不明显。但高尿酸血症模型给药组的血肌肝和尿素氮数值有升高的趋势，并且在给药量为50mg/kg时，尿素氮数值与高尿酸对照组相比有显著性差异，p值为0.0008。具体结果见表1和图2、图3。表1 微小剂量阿司匹林对正常小鼠和高尿酸血症模型小鼠血尿酸、血肌酐和血尿素氮的影响（sd，n=15）tab1 the effect of mini-dose aspirin on blood uric acid, creatinine and urea nitrogen in normal mice and hyperuricemia model mice（sd，n=15）阿司匹林给药剂

22、量（mg/kg）血尿酸(mol/l)升高率p血肌酐(mol/l)升高率p血尿素氮(mmol/l)升高率p正常对照12.5（n）25(n)50(n)高尿酸对照12.5(h)25(h)50(h)537649631358157817110238923812521%19%9%32411430.010.020.300.00010.00010.130.714344654554454444244354767%5%2%2%-4%-2%6%0.100.400.770.660.180.890.088.201.108.401.298.651.508.200.868.731.569.061.078.391.7010.

23、951.612%5%0%12%3%-3%25%0.460.220.710.040.520.580.0008注：1）n代表正常阿司匹林给药组，h代表高尿酸血症模型阿司匹林给药组。2）高尿酸对照组的p值是与正常对照组进行t检验的结果。3）正常给药组的p值是不同的正常给药组分别与正常对照组进行t检验的结果。4）高尿酸给药组的p值是不同的高尿酸给药组分别与高尿酸对照组进行t检验的结果。5）高尿酸对照组的升高率以正常对照组为基础。6）正常给药组和高尿酸给药组的升高率分别是以正常对照组和高尿酸对照组为基础。4 讨论作为一种经典的抗血小板药物，阿司匹林在预防心脑血管事件中得到了广泛应用。并且一项关于多种心血

24、管药物成本效益的对照研究结果表明，使用阿司匹林治疗，避免一例心脑血管事件的综合费用远低于使用降压药、氯吡格雷或新伐他汀等药物。所以阿司匹林这一药物被多家指南收载，比如美国心脏学会/美国卒中学会（aha/ash）在2006年发布的心脑血管疾病一级预防指南指出：心脑血管事件中、高危患者（10年心脑血管事件危险610%）,应长期服用阿司匹林（75160mg/d）预防心脑血管事件（i，a）。美国心脏学会/美国心脏病学会（aha/acc）在2006年动脉粥样硬化二级预防指南指出：动脉粥样硬化疾病患者如无禁忌症，均应无限期服用阿司匹林75mg162mg/d(i，a)【5】。尽管大剂量（3g/d）和小剂量（

25、12g/d）阿司匹林对血尿酸的影响以及肾功能的影响已经有文献证实【2】【3】，但是关于微小剂量的阿司匹林对血尿酸和肾功能的影响少有报道。如前所述，阿司匹林目前的常用剂量为75325mg/d，并且有相当多的人使用,其中包括痛风患者和高尿酸血症患者。微小剂量阿司匹林会对这些患者血尿酸数值产生何种影响值得探讨，我们的实验目的就是旨在为正常人群、痛风患者和高尿酸血症患者合理应用阿司匹林提供理论依据。实验结果表明，微小剂量阿司匹林对正常小鼠和高尿酸血症模型小鼠的血肌酐和血尿素氮数值影响不明显，无显著性差异。高尿酸血症模型给药组随阿司匹林给药剂量的增加，血肌肝和尿素氮数值有所升高，且在最高给药剂量50mg

26、/kg时，血尿素氮数值的升高与高尿酸血症模型对照组相比有显著性差异。有文献报道，小剂量阿司匹林（5075mg/d）长期服用可导致肾损害，肾损害出现的时间与用药剂量和用药持续时间具有正相关【6】。本实验中微小剂量的阿司匹林对正常及高尿酸血症模型小鼠肾功能的影响不显著，可能与用药持续时间比较短有关。但高尿酸血症模型组小鼠在阿司匹林高给药剂量时（50mg/kg）出现尿素氮和肌酐数值升高，且尿素氮数值的升高具有统计学意义。因此提示我们在长期使用微小剂量阿司匹林时，应定期监测肾功能，以避免出现肾损害。微小剂量阿司匹林对正常和高尿酸血症模型小鼠的血尿酸这一指标均有显著性影响，可以升高血尿酸的水平。并且这种

27、影响在给药量为12.5mg/kg时最大，分别与正常对照和高尿酸血症模型对照组相比具有显著性差异（p值分别为0.01和小于0.0001），这种影响随给药量的增加逐渐变小，在最高给药量50mg/kg时，血尿酸数值逐渐回落至基线水平，不具有显著性差异（p0.05）。由于本实验高尿酸血症模型是通过腹腔注射尿酸引起的高尿酸血症，致模时间比较短，阿司匹林导致的高尿酸血症模型小鼠血尿酸的升高，可能是阿司匹林抑制尿酸排泄的结果。阿司匹林这种抑制尿酸排泄的作用随给药量的增加，应该是逐渐减弱的，因为25mg/kg和50mg/kg两个给药剂量，对于高尿酸血症模型小鼠的尿酸影响不明显。本实验证实了微小剂量阿司匹林能显

28、著升高正常和高尿酸血症模型小鼠的血尿酸水平，但随剂量增加，这种影响逐渐减少，并且不具有统计学差异。说明微小剂量阿司匹林对正常和高尿酸血症模型小鼠血尿酸的影响具有双重作用，在给药剂量为12.5mg/kg时，能升高血尿酸水平，随给药剂量增加，这种影响减少，基本不对血尿酸数值产生显著性影响。提示患者，特别是痛风或高尿酸血症病人在需要长期使用微小剂量阿司匹林时，应注意定期监测血尿酸水平，尤其在刚开始应用阿司匹林时，应增加监测血尿酸的频率，根据血尿酸数值，调整相应的降尿酸药物。参考文献1. caspi d, lubart e, graff b, et al. the effect of mini-dos

29、e aspirin on renal function and uric acid handling in elderly patients. arthritis rheumatismj. 2000, 43(1): 103-1082. yu tf, gutman ab. study of the paradoxical effects of salicylate in low, intermediate and high dosage on renal mechanisms of excretion of urate in manj. j clin invest. 1959, 38: 1298

30、-13133. yu tf, dayton pg, gutman ab. mutual suppression of the uricosuric effects of sulfinpyrazone and salicylate: a study in interactions between drugsj. j clin invest. 1963, 42: 1330-13394. chen g l, sun x x, wang q m, et al. studies on mouse hyperuricemia modej. chinese pharmacological bulletin

31、(中国药理学通报), 2001, 17(3): 350-3525. li x y. the present and future of antiplatelet therapyn. china medical tribune（中国医学论坛报）, 2007-2-8(c8)6. zhang q x, wang y l. kidney damage associated with low-dose of enteric-coated aspirin tablets in 16 patientsj. adverse drug reactions journal(药物不良反应杂志) ，2004，2：82-847润恳唬眨血掳坊穿觉浴睦面蓑签酒辙疚霉鸯哎塌械涨葵暴隔引霞哭胰琉适俄袖橡褐域颊呕泄论不乏厦顺颖