11.第五章 第二节尿液化学检查2

1、南华大学南华大学 university of south china 第二节第二节 尿液化学检查尿液化学检查(2)(2) 授课教师授课教师: :任林任林 医学检验教研室医学检验教研室 南华大学南华大学 university of south china 四、酮体检查四、酮体检查 南华大学南华大学 university of south china 酮体是机体脂肪氧化代谢产生的中间产酮体是机体脂肪氧化代谢产生的中间产 物，当糖代谢发生障碍、脂肪分解增多、酮物，当糖代谢发生障碍、脂肪分解增多、酮 体产生速度超过机体组织利用速度时，可出体产生速度超过机体组织利用速度时，可出 现酮血症，酮体血浓度一旦

2、超过肾阈值，可现酮血症，酮体血浓度一旦超过肾阈值，可 产生酮尿。产生酮尿。 南华大学南华大学 university of south china 丙酮（丙酮（ch3coch3） 乙酰乙酸（乙酰乙酸（ch3coch2cooh） -羟丁酸（羟丁酸（ch3ch（oh）ch2cooh） 南华大学南华大学 university of south china 【酮体检测酮体检测】 原理：原理：膜块中主要含有亚硝基铁氰化钠，膜块中主要含有亚硝基铁氰化钠， 可与尿液中的乙酰可与尿液中的乙酰 乙酸、丙酮产生紫色反应。乙酸、丙酮产生紫色反应。 方法类别：试带法、方法类别：试带法、lange法、法、rothera法

3、、法、 改良改良rothera 法法、片剂法。、片剂法。 1.亚硝基铁氰化钠法亚硝基铁氰化钠法 南华大学南华大学 university of south china 南华大学南华大学 university of south china 2.gerhardt法：法： 原理：高铁离子与乙酰乙酸的烯醇式基团发生原理：高铁离子与乙酰乙酸的烯醇式基团发生 螯合，形成酒红色的乙酰乙酸铁复合物。螯合，形成酒红色的乙酰乙酸铁复合物。 评价：本法只测定乙酰乙酸，与评价：本法只测定乙酰乙酸，与-羟丁酸、羟丁酸、 丙酮不起反应。丙酮不起反应。 南华大学南华大学 university of south china 南

4、华大学南华大学 university of south china 检测前检测前: : 丙酮具有挥发性，乙酰乙酸在菌尿中会被细菌丙酮具有挥发性，乙酰乙酸在菌尿中会被细菌 降解，因此应使用新鲜尿液标本并尽快检测。降解，因此应使用新鲜尿液标本并尽快检测。 检测中：试带应放在阴凉、干燥处，注意使用效期，并检测中：试带应放在阴凉、干燥处，注意使用效期，并 坚持室内质控。坚持室内质控。 检测后：审核报告。检测后：审核报告。 【质量保证质量保证】 南华大学南华大学 university of south china 【参考值参考值】 定性：阴性定性：阴性 定量：健康人尿中酮体含量甚微，酮体定量：健康人尿中

5、酮体含量甚微，酮体 （以丙酮计）（以丙酮计）170420mg/l；乙酰乙酸；乙酰乙酸 20mg/l。 南华大学南华大学 university of south china l糖尿病酮症酸中毒：早期诊断与鉴别诊断。糖尿病酮症酸中毒：早期诊断与鉴别诊断。 l非糖尿病性酮症者：如应激状态、剧烈运非糖尿病性酮症者：如应激状态、剧烈运 动、饥饿、呕吐、严重腹泻等。动、饥饿、呕吐、严重腹泻等。 【临床意义临床意义】 南华大学南华大学 university of south china l治疗监测：糖尿病酮症酸中毒早期的主要酮体治疗监测：糖尿病酮症酸中毒早期的主要酮体 成分是成分是-羟丁酸，很少或缺乏乙酰乙

6、酸，此时羟丁酸，很少或缺乏乙酰乙酸，此时 测得结果可导致对总酮体量估计不足。在糖尿病测得结果可导致对总酮体量估计不足。在糖尿病 酮症酸中毒症状缓解之后，酮症酸中毒症状缓解之后，-羟丁酸转变为乙羟丁酸转变为乙 酰乙酸，反而使乙酰乙酸含量比初始急性期增高，酰乙酸，反而使乙酰乙酸含量比初始急性期增高， 易对病情估计过重。易对病情估计过重。 南华大学南华大学 university of south china l其他其他 氯仿、磷等中毒或全身麻醉后：尿酮体可阳性。氯仿、磷等中毒或全身麻醉后：尿酮体可阳性。 服用双胍类降糖药：如降糖灵等，可出现尿酮服用双胍类降糖药：如降糖灵等，可出现尿酮 体阳性。体阳性

7、。 新生儿出现尿酮体强阳性，应怀疑为遗传性疾新生儿出现尿酮体强阳性，应怀疑为遗传性疾 病。病。 南华大学南华大学 university of south china 五、胆红素、尿胆五、胆红素、尿胆 原和尿胆素检查原和尿胆素检查 南华大学南华大学 university of south china 尿中胆色素包括胆红素（尿中胆色素包括胆红素（bilirubin）、尿）、尿 胆原胆原(urobilinogen)及尿胆素及尿胆素(urobilin)，俗，俗 称尿三胆。由于送检的多为新鲜尿，尿胆原尚称尿三胆。由于送检的多为新鲜尿，尿胆原尚 未氧化成尿胆素，故多查前两者，俗称尿二胆。未氧化成尿胆素，故

8、多查前两者，俗称尿二胆。 南华大学南华大学 university of south china 胆红素胆红素 未结合胆红素（未结合胆红素（ucb) 结合胆红素结合胆红素(cb)：与葡萄糖醛酸结合：与葡萄糖醛酸结合 胆红素胆红素 尿胆原（尿胆原（ubg) 排入肠腔排入肠腔 无色无色ubg 黄色的尿胆素黄色的尿胆素 空气氧化空气氧化 光线照射光线照射 从粪便排出从粪便排出 粪胆原粪胆原 结合胆红素结合胆红素 南华大学南华大学 university of south china 胆红素胆红素 【检测方法检测方法】 重氮法：试带法多采用此原理。重氮法：试带法多采用此原理。 氧化法氧化法 尿胆原检测：尿

9、胆原检测：ehrilich醛反应醛反应 尿胆素测定：尿胆素测定：schleisinger法法 南华大学南华大学 university of south china 【质量保证质量保证】 检测前：标本必须新鲜，以免胆红素在阳光照射检测前：标本必须新鲜，以免胆红素在阳光照射 下成为胆绿素。为提高尿胆原阳性检出率，可于下成为胆绿素。为提高尿胆原阳性检出率，可于 检测前嘱患者口服少量碳酸氢钠，以碱化尿液收检测前嘱患者口服少量碳酸氢钠，以碱化尿液收 集午后集午后2-4h尿标本尿标本（正常人尿胆原排出量每天波动很（正常人尿胆原排出量每天波动很 大，夜间和上午量少，午后迅速增加，在午后大，夜间和上午量少，午

10、后迅速增加，在午后2-4时达最时达最 高峰；同时尿胆原的消除率与尿高峰；同时尿胆原的消除率与尿ph相关）相关）。 南华大学南华大学 university of south china 检测中：应规范化操作，作好检测中：应规范化操作，作好2种水平室内质控，种水平室内质控， 试带应放阴凉干燥处，密封避光保存，注意使用试带应放阴凉干燥处，密封避光保存，注意使用 效期。效期。 检测后：结合临床，审核报告。检测后：结合临床，审核报告。 南华大学南华大学 university of south china l 尿液中含高浓度维生素尿液中含高浓度维生素c c和亚硝酸盐时，抑制重氮反应和亚硝酸盐时，抑制重氮反

11、应 使尿胆红素呈假阴性。当患者接受大剂量氯丙嗪治疗使尿胆红素呈假阴性。当患者接受大剂量氯丙嗪治疗 或尿中含有盐酸苯偶氮吡啶的代谢产物时，尿胆红素或尿中含有盐酸苯偶氮吡啶的代谢产物时，尿胆红素 可呈假阳性。可呈假阳性。 【干扰因素干扰因素】 l 尿液中一些内源物质如卟胆原、吲哚等可使尿胆原检尿液中一些内源物质如卟胆原、吲哚等可使尿胆原检 查结果出现假阳性，一些药物（如吩噻嗪等）也可使查结果出现假阳性，一些药物（如吩噻嗪等）也可使 尿胆原出现假阳性。假阴性与尿中存在大量维生素尿胆原出现假阳性。假阴性与尿中存在大量维生素c c或或 长期服用广谱抗生素抑制肠道菌群等有关。长期服用广谱抗生素抑制肠道菌群

12、等有关。 南华大学南华大学 university of south china 【参考值参考值】 胆红素定性：阴性胆红素定性：阴性 尿胆原定性：阴性或弱阳性（尿胆原定性：阴性或弱阳性（1：20稀释后阴性）稀释后阴性） 尿胆素定性：阴性尿胆素定性：阴性 南华大学南华大学 university of south china 【临床意义临床意义 主要用于黄疸的诊断和鉴别诊断主要用于黄疸的诊断和鉴别诊断 南华大学南华大学 university of south china 黄疸黄疸 类型类型 血清胆红素（血清胆红素（ mol/l） 尿尿粪便粪便 总胆总胆 红素红素 未结未结 合胆合胆 红素红素 结合结

13、合 胆红胆红 素素 颜色颜色尿胆尿胆 原原 尿胆尿胆 素素 尿胆尿胆 红素红素 颜色颜色 粪胆粪胆 素素 正常正常 人人 正常正常正常正常正常正常浅黄浅黄1:20 阴性阴性 阴性阴性阴性阴性黄褐黄褐正常正常 溶血溶血 性黄性黄 疸疸 轻度轻度 加深加深强阳强阳 性性 阳性阳性阴性阴性加深加深增多增多 肝细肝细 胞性胞性 黄疸黄疸 加深加深阳性阳性阳性阳性阳性阳性正常正常 或变或变 浅浅 下降下降 或正或正 常常 阻塞阻塞 性黄性黄 疸疸 正常正常 或轻或轻 度度 加深加深阴性阴性阴性阴性阳性阳性变浅变浅 或白或白 陶土陶土 样样 减少减少 或消或消 失失 表表1 正常人及不同类型黄疸实验室鉴别

14、正常人及不同类型黄疸实验室鉴别 南华大学南华大学 university of south china 六、血红蛋白检查六、血红蛋白检查 南华大学南华大学 university of south china 正常人血浆中游离血红蛋白与珠蛋白结合，不能从正常人血浆中游离血红蛋白与珠蛋白结合，不能从 尿液中排出。尿液中排出。 当血管内溶血，当血管内溶血，rbc破坏，破坏，hb释放入血，超过珠释放入血，超过珠 蛋白的结合能力，游离血红蛋白从尿液中排出。蛋白的结合能力，游离血红蛋白从尿液中排出。 特点：外观呈浓茶色、红葡萄酒色或酱油色，隐血特点：外观呈浓茶色、红葡萄酒色或酱油色，隐血 试验阳性。试验阳性

15、。 南华大学南华大学 university of south china 【检测方法检测方法】： 1.试带法：试带法： l 原理：血红蛋白分子中含有血红素基团，具有过氧原理：血红蛋白分子中含有血红素基团，具有过氧 化物酶样活性，能催化过氧化氢作为电子受体使色化物酶样活性，能催化过氧化氢作为电子受体使色 原氧化呈色，借以识别微量血红蛋白的存在，其呈原氧化呈色，借以识别微量血红蛋白的存在，其呈 色深浅与血红蛋白含量成正比。色深浅与血红蛋白含量成正比。 南华大学南华大学 university of south china l评价：操作简便、快速，可作为尿评价：操作简便、快速，可作为尿hb 的筛检试验

16、。的筛检试验。 l假阳性：尿中含对热不稳定酶、尿液被假阳性：尿中含对热不稳定酶、尿液被 氧化剂污染或尿路感染时某些细菌产生氧化剂污染或尿路感染时某些细菌产生 过氧化物酶。过氧化物酶。 l假阴性：尿中含大剂量维生素假阴性：尿中含大剂量维生素c或其他或其他 还原物质、甲醛过量、大量亚硝酸盐。还原物质、甲醛过量、大量亚硝酸盐。 南华大学南华大学 university of south china l原理：与试带法反应原理一致。原理：与试带法反应原理一致。 l常用方法：邻甲苯胺法、匹拉米洞法等。常用方法：邻甲苯胺法、匹拉米洞法等。 l评价：操作简单、但试剂稳定性差，特异性低。评价：操作简单、但试剂稳定

17、性差，特异性低。 l假阳性：尿中有铁盐、硝酸、铜、锌、碘化物假阳性：尿中有铁盐、硝酸、铜、锌、碘化物 等或有过氧化物酶或其他对热不稳定酶。等或有过氧化物酶或其他对热不稳定酶。 2.化学法：化学法： 南华大学南华大学 university of south china 3.免疫法：免疫法： 原理：采用免疫胶体金法测定原理。原理：采用免疫胶体金法测定原理。 评价：操作简便、灵敏度高、特异性强、评价：操作简便、灵敏度高、特异性强、 克服以上两法缺点，可为确证试验。克服以上两法缺点，可为确证试验。 南华大学南华大学 university of south china 南华大学南华大学 universi

18、ty of south china 【质量保证质量保证】： l检测前：尿标本应新鲜。检测前：尿标本应新鲜。 l检测中：做好检测中：做好2种水平的室内质控。种水平的室内质控。 l检测后：审核报告。检测后：审核报告。 南华大学南华大学 university of south china 【参考值参考值】 阴性阴性 南华大学南华大学 university of south china lrbc破坏：破坏： l生物因素：生物因素： l动植物所致溶血：动植物所致溶血： l微血管性溶血性贫血：微血管性溶血性贫血： l服氧化剂药物：服氧化剂药物： l免疫因素：免疫因素： 【临床意义临床意义】：有助于血管内溶

19、血疾病的诊断。：有助于血管内溶血疾病的诊断。 南华大学南华大学 university of south china 七七. .亚硝酸盐检测亚硝酸盐检测 南华大学南华大学 university of south china 【检测原理检测原理】： 南华大学南华大学 university of south china 感染细菌是否含有硝酸盐还原酶感染细菌是否含有硝酸盐还原酶 【方法学评价方法学评价】 2.2.灵敏度：灵敏度：0.3-0.6mg/l0.3-0.6mg/l 南华大学南华大学 university of south china 南华大学南华大学 university of south c

20、hina l检测前：宜使用晨尿标本，及时送检，尽检测前：宜使用晨尿标本，及时送检，尽 快测定。快测定。 l检测中：做好检测中：做好2种水平室内质控，试带贮存种水平室内质控，试带贮存 应干燥、避光、注意有效期。应干燥、避光、注意有效期。 l检测后：审核报告，综合分析。检测后：审核报告，综合分析。 【质量保证质量保证】： 南华大学南华大学 university of south china 【参考值参考值】：阴性。：阴性。 南华大学南华大学 university of south china 【 临床意义临床意义 】 南华大学南华大学 university of south china 八八. .

21、白细胞酯酶白细胞酯酶 南华大学南华大学 university of south china 南华大学南华大学 university of south china 【方法学评价方法学评价】 南华大学南华大学 university of south china 【质量控制质量控制】 检测前：检测前：尿液标本必须新鲜，留尿后应立即测定，以尿液标本必须新鲜，留尿后应立即测定，以 免白细胞破坏，导致干化学法与镜检结果差异过大；免白细胞破坏，导致干化学法与镜检结果差异过大； 检测中：规范操作和质控；检测中：规范操作和质控； 检测后：结合临床，综合分析酯酶、亚硝酸盐结果，检测后：结合临床，综合分析酯酶、亚硝

22、酸盐结果， 必要时进行显微镜镜检，以提高尿路感染诊断的可靠必要时进行显微镜镜检，以提高尿路感染诊断的可靠 性。性。 南华大学南华大学 university of south china 南华大学南华大学 university of south china 南华大学南华大学 university of south china 九、维生素九、维生素c c检查检查 南华大学南华大学 university of south china 【原理原理】：采用还原法：采用还原法 vitc具有具有1,2-烯二醇还原性基团，在酸性条件下，能将烯二醇还原性基团，在酸性条件下，能将 氧化态粉红色的氧化态粉红色的2,

23、6-二氯酚靛酚染料还原为无色的二氯酚靛酚染料还原为无色的2,6-二氯二氯 二对酚胺。发生由二对酚胺。发生由绿绿或或深蓝深蓝至至粉红粉红的变化，呈色深浅与维的变化，呈色深浅与维 生素生素c含量成正比。含量成正比。 南华大学南华大学 university of south china 【方法学评价方法学评价】 1.1.灵敏度和特异性：试带法只能检测还原型抗灵敏度和特异性：试带法只能检测还原型抗 坏血酸，灵敏度一般为坏血酸，灵敏度一般为50-100mg/l50-100mg/l。 2.2.假阳性：见于龙胆酸、假阳性：见于龙胆酸、l-l-多巴或尿多巴或尿phph大于大于 4.04.0时的内源性酚及巯基化

24、合物、半胱氨酸和时的内源性酚及巯基化合物、半胱氨酸和 硫代硫酸钠等。硫代硫酸钠等。 3.3.假阴性：碱性尿液（因维生素假阴性：碱性尿液（因维生素c c易分解）。易分解）。 南华大学南华大学 university of south china 【质量保证质量保证】 l检测前：无需特殊处理。检测前：无需特殊处理。 l检测中：作好质控。检测中：作好质控。 l检测后：仔细审核、综合分析维生素检测后：仔细审核、综合分析维生素c是否是否 对隐血对隐血/血红蛋白、葡萄糖、亚硝酸盐等结果产血红蛋白、葡萄糖、亚硝酸盐等结果产 生影响。生影响。 南华大学南华大学 university of south china

25、 【参考值参考值】：阴性：阴性 南华大学南华大学 university of south china ( 干化学法检测干化学法检测vit c采用还原法，尿液中采用还原法，尿液中vit c的含的含 量的高低对隐血量的高低对隐血/血红蛋白、胆红素、葡萄糖、亚硝酸血红蛋白、胆红素、葡萄糖、亚硝酸 盐等可产生负干扰，检测盐等可产生负干扰，检测vit c在于提示其他检测项目在于提示其他检测项目 的准确性，防止假阴性出现。的准确性，防止假阴性出现。 【临床意义临床意义】 南华大学南华大学 university of south china 尿液化学检查教学视频尿液化学检查教学视频 南华大学南华大学 uni

26、versity of south china 尿试带化学检查内容尿试带化学检查内容 南华大学南华大学 university of south china 人绒毛膜促性腺激素检查人绒毛膜促性腺激素检查 十一、其他化学成分检查十一、其他化学成分检查 南华大学南华大学 university of south china 人绒毛膜促性腺激素人绒毛膜促性腺激素（human chorionic gonadotropin,hcg）:是由胎盘合体滋养层细是由胎盘合体滋养层细 胞分泌的一种具有促进性腺发育的糖蛋白激胞分泌的一种具有促进性腺发育的糖蛋白激 素，其对促性腺激素受体具有高度的亲和性。素，其对促性腺激素

27、受体具有高度的亲和性。 南华大学南华大学 university of south china 妊娠妊娠1周周时，时，hcg即可迅速升高；即可迅速升高； 受孕受孕7天天后，可用后，可用elisa法检出尿液中的法检出尿液中的 hcg； 第第8-10孕周孕周达到高峰；达到高峰； 至孕期第至孕期第4个月个月始降至中等水平，并一直始降至中等水平，并一直 维持到妊娠末期。（图维持到妊娠末期。（图1） 正常孕妇正常孕妇hcg的变化：的变化： 南华大学南华大学 university of south china 图图1 正常妊娠妇女血清中正常妊娠妇女血清中hcg平均值平均值 南华大学南华大学 universi

28、ty of south china hcg结构：结构： 由由亚基和亚基和亚基组成的糖蛋白激素；亚基组成的糖蛋白激素； 单个亚基不具有生物活性，当连接成完整化单个亚基不具有生物活性，当连接成完整化 合物时始具活性，分子量约为合物时始具活性，分子量约为4.7万；万； 亚基不具特异性，亚基不具特异性， 其氨基酸数量及其排列顺其氨基酸数量及其排列顺 序与序与fsh、lh、tsh的亚基几乎相同。的亚基几乎相同。 亚基具有特异性。亚基具有特异性。 南华大学南华大学 university of south china 其主要功能就是刺激黄体，有利于雌其主要功能就是刺激黄体，有利于雌 激素和黄体酮持续分泌，以

29、促进子宫蜕膜激素和黄体酮持续分泌，以促进子宫蜕膜 的形成，使胎盘生长成熟。的形成，使胎盘生长成熟。 hcg功能：功能： 南华大学南华大学 university of south china 1. 酶联免疫吸附试验（酶联免疫吸附试验（elisa） 原理：双抗体夹心法。原理：双抗体夹心法。 评价：操作简便，灵敏度高，可半定量，特评价：操作简便，灵敏度高，可半定量，特 异性高，为异性高，为hcg检查的筛检试验。检查的筛检试验。 【检测方法检测方法】 南华大学南华大学 university of south china 2. 单克隆抗体胶体金试验单克隆抗体胶体金试验 原理：原理： 南华大学南华大学 u

30、niversity of south china 胶体金标记鼠抗胶体金标记鼠抗 人人-hcg单抗单抗 羊抗人羊抗人 hcg抗抗 体体 羊抗鼠羊抗鼠 igg抗体抗体 免疫胶体金法免疫胶体金法 阴性阴性 对照 阳性阳性 南华大学南华大学 university of south china 判读结果：判读结果：阳性：试带可显示上、下两阳性：试带可显示上、下两 条紫红色线条；阴性：标本只显出上边条紫红色线条；阴性：标本只显出上边 一条紫红色线。一条紫红色线。 评价：评价：操作简便快速、结果可靠、特异操作简便快速、结果可靠、特异 性强、灵敏度高、是当前公认性强、灵敏度高、是当前公认最理想的最理想的 早早孕诊断法早早孕诊断法。 南华大学南华大学 university of south china 3.胶乳凝集抑制试验胶乳