果蔬中维生素含量的测定

1、实验设计题目果蔬中维生素含量的测定（2,6-二氯酚靛酚滴定法）学院XXX专业XXXX年级XXXX组员XXXX-、实验背景及目的：维生素C又称为抗坏血酸，常存在于新鲜的蔬菜和某些水果中，尤其是在 橙子、枣、辣椒、苦瓜中含量丰富。是维持机体正常生理功能的重要维生素 之一。维生素C抗坏血酸在食品工业中常用做抗氧化剂，维生素 C可促进胶原 蛋白抗体，具有抗癌的作用；它能参与神经介质、激素的生物合成；能将胆 固醇转化为胆汁酸，使高胆固醇血症患者的胆固醇下降；能将Fe抖还原为Fe,使其易于吸收，有利于血红蛋白的形成；还具有解毒的作用。橙子中防治坏 血病的主要物质为维生素C ,本文以橙子为检测对象，对其营养

2、成分维生素 C的含量进行测定，正确了解营养价值。目前国内测定维生素c的常见方法有：DPPH法、碘滴定法、紫外分光光 度计法、高效液相色谱法、苯肼比色法等。这些方法各有特点，但操作过程 复杂，较慢，仪器昂贵。Vc易被热、碱、氧和光破坏，根据实验室的条件， 本次实验采用2，6二氯靛酚滴定法进行实验研究及分析测定。参考国标法GB6195-1986直接测定橙子中维生素c的含量，其方法简便、 快速、结果准确。二、实验部分1、实验原理染料2 ,6 一二氯靛酚的颜色反应表现两种特性，一是取决于其氧化还原 状态，氧化态为深蓝色，还原态变为无色，二是受其介质的酸度影响，在碱 性溶液中呈深蓝色，在酸性介质中呈浅红

3、色。用蓝色的碱性染料标准溶液， 对含维生素C的酸性浸出液进行氧化还原滴定，染料被还原为无色，当到达滴 定终点时，多余的染料在酸性介质中则表现为浅红色，由染料用量计算样品中 还原型抗坏血酸的含量。2、实验设备及试剂2.1仪器设备高速组织捣碎机：800012000 r/min。分析天平。滴定管:25 mL、10mL。 容量瓶:100mL。锥形瓶:100 mL、50 mL。吸管:10mL、5mL、2mL、1mL。 烧杯:250 mL、50mL。漏斗。2.2试剂及材料2.2.1柑橘、圣女果、红枣、胡萝卜。2.2.2浸提剂2.2.3偏磷酸:2%溶液(W/V)草酸:2%溶液(W/V)2.2.4白陶土 (或

4、称高岭土 ):对维生素C无吸附性。2.2.5抗坏血酸标准溶液(1 mg/mL):称取100m g(准确至0.lmg)抗坏血酸， 溶于浸提剂中并稀至100 mL,现配现用。3、滴定度T测定2，6二氯靛酚(2,6二氯靛酚吲哚酚钠盐)溶液:称取碳酸氢钠52mg溶解 在200ml热蒸馏水中，然后称取2,6 二氯靛酚50 mg溶解在上述碳酸氢钠溶液 中。冷却定容至250mL，过滤至棕色瓶内，保存在冰箱中。每次使用前，用标 准抗坏血酸标定其滴定度。即吸取1 mL抗坏血酸标准溶液于50 mL锥形瓶中， 加入l0mL浸提剂，摇匀。同时，另取10mL浸提剂做空白试验，用2,6 二氯靛 酚溶液滴定至溶液呈粉红色1

5、5s不褪色为止。滴定度按下式计算：T滴定度(mg/mL) =C x V/(V1 -V2)式中:T 每毫升2,6 二氯靛酚溶液相当于抗坏血酸的毫克数，C抗坏血酸的浓度，mg/mL;V 吸取抗坏血酸的体积，mL;VI 滴定抗坏血酸溶液所用2,6一二氯靛酚溶液的体积，mL;V2 滴定空白所用2,6 二氯靛酚溶液的体积，mL3.测定步骤3.1提取用水洗干净新鲜蔬菜或整个新鲜水果 (橙子)，放人组织捣碎机中， 加20mL浸提剂，迅速捣成匀浆。称取10 40g浆状样品，加入10ml二甲苯进行 萃取，用分液漏斗分离出下层溶液，吸取下层溶液 10mL移入100 ml容量瓶中。 并稀释至刻度，摇匀过滤。3.2标

6、准液滴定 吸取l0mL滤液放人50mL锥形瓶中，用已标定过的2,6 二氧靛酚溶液滴定，直至溶液呈粉红色15s不褪色为止。取浸提液10mL作空白 对照，结果计算。3.3维生素C按以下公式计算：(V-V0) X T X A维生素 C ( mg/100 g)= X 100%W式中：V 滴定样液时消耗染料溶液的体积， mL。V0 滴定空白时消耗染料溶液的体积， mL。T 2, 6二氯靛酚染料滴定度，mg/mL。A 稀释倍数。 W 样品重量。3.4平行测定的结果，用算术平均值表示，取三位有效数字，含量低的保留小 数点后两位数字。3,5平行测定结果的相对相差，在维生素 C含量大于20mg/l00g时，不得

7、超过 2%，小于20mg /100g时，不得超过5%。VO （滴定空白时 消耗染料溶液的 体积）mlV-V0（体积改变量）ml100g橙子中Vc含 量mg四、注意事项（1）某些水果、蔬菜（如橘子、西红柿等）浆状物定容时泡沫太多，可加数滴丁醇或辛醇消泡。（2）样品的提取液制备和滴定过程，要避免阳光照射和与铜、铁器具接触，以免抗坏血酸被破坏。（3）整个操作过程要迅速，防止还原型抗坏血酸被氧化。滴定过程一般不超过2min。滴定所用的染料不应小于1ml或多于4ml，如果样品含维生素C太高 或太低时，可酌情增减样液用量或改变提取液稀释度。（4）干扰滴定因素有：Fe可还原二氯酚靛酚。对含有大量Fe的样品可用8%乙酸溶液代替草酸溶液 提取，此时Fe不会很快与染料起作用。样品中可能有其它杂质还原二氯酚靛酚，但反应速度均较抗坏血酸慢，因而 滴定开始时，染料要迅速加入，而后尽可能一点一点地加入，并要不断地摇动三 角瓶直至呈粉红色，于15s内不消退为终点。（5）若样