急性毒性试验LD50的测定

1、开放性实验总结报告 学生姓名 班级 学号 所在院系 专业 开放实验室名称 日期 2013-5-5 设备处 制一、实验项目概况开放实验题目： 实验动物的基本操作及其相关技术实验题目类型： 参与科研 科技活动 自选实验 素质培养指导教师及实验技术人员姓名： 李岩实验项目起止日期：2013-4-5至2013-5-5 利用何种时间段开展实验：课余时间开展实验的累计总学时数：32学时实验项目基本原理：急性毒性试验是临床前新药安全性评价的第一步，与其它毒性实验相比具有简单、经济、易行等特点。因此新药研究开发时往往通过该项试验，尽可能多的了解一些新药的毒理学特点，为早期判断侯选新药是否具有研究开发价值提供毒

2、性强度资料。通常测定药物ED50及LD50以初步估计药物毒性大小。 实验项目的实验方法概述：给不同组的小白鼠腹腔注射不同剂量的戊巴比妥钠，并观察记录各组别小鼠的行为变化，通过比较不同组别小鼠出现死亡的数量来计算LD50。实验项目的仪器设备组成情况：天平，1000ul的移液枪，200l移液枪，2ml离心管，1ml注射器，手术器械(包括剪刀、镊子等) ，鼠笼，离心管架 实验项目的消耗材料明细：乳胶手套，KM小鼠,封口膜 实验项目的主要结论：戊巴比妥钠的半数致死量为134.32mg/kg 用 Bliss 法计算半数致死量，回归方程 y(Probit)=-24.916+14.058Log(D) 半数致

3、死量 LD50=134.32mg/kg LD50(Feiller校正)95%的可信限=92.405-205.57mg/kg LD5=102.59mg/kg LD95=175.85mg/kg二、实验项目技术报告1实验原理戊巴比妥钠属于巴比妥类镇静催眠药，对中枢神经系统有普遍性抑制作用，可起到镇静、催眠、抗惊厥作用。一定剂量的戊巴比妥钠引起一般实验动物死亡。半数致死量（LD50）,即在一群实验动物中，能使实验动物一半死亡的药量，其值越大越好。2实验内容(1) 探测戊巴比妥钠LD50的剂量范围。(2) 确定组数并计算各组剂量。（3）正式实验：给不同组的小白鼠腹腔注射不同剂量的戊巴比妥钠，并观察记录各

4、组别小鼠的行为变化及死亡情况。（4）记录实验结果，并计算LD50。3实验方法： 1、预试溶液配制和样品处理（预实验）(1)探索剂量范围：取小鼠9到12只，以3只为一组，分成3到4组，包括组距较大的一系列剂量，按组分别腹腔注射戊巴比妥钠溶液，观察出现的症状并记录动物死亡数，找出引起0及100%有效剂量的所在范围，此即上下限剂量Dn和Dm。(2)：确定组数并计算各组剂量确定组数G：根据适宜的组距确定组数，一般分为5到8个剂量，这里我们分为5组，按等比级数增减计算各组剂量：在找出Dm、Dn和确定组数后，课按下列公式求出公比r.再按公比计算各组剂量Dl-Dm,其中D1=Dn=最小剂量。配置等比药液系列

5、，让每只小鼠给药量相等，一般为0.1ml/10g体重经过预实验的五个剂量浓度分别是77、96、120、150、190mg/kg,相应浓度：0.77、 0.96、1.2、1.5、1.9%，在随后的急性毒实验中对这些剂量进行验证2、急性毒性试验：昆明种小鼠共15只，实验前一天晚禁食不禁水，实验当天称重，标记，随机分组。给5组小鼠分别按77、96、120、150、190mg/kg,腹腔注射，给药后观察动物死亡情况。记录小鼠死亡时间，死亡数目。利用Bliss法计算LD50。分组动物数（N）剂量（mg/kg）对数剂量（X）动物死亡数（n）死亡率（P=n/N）12345333337796120150190

6、1.891.982.082.182.28001230033.366.7100表1 药物对小白鼠产生效应情况【实验结果】：LD50的测定 依据药物剂量依次给药。利用Bliss法计算LD50样品名称戊巴比妥钠 实验动物昆明小鼠 给药途径腹腔注射 实验日期2013.5.5 用 Bliss 法计算半数致死量 - 剂量 对数剂量 动物数 死亡数 死亡百分率 实验机率单位 回归机率单位 (x) (只) (只) (%) (Y) (Y) - 77 1.8865 3 0 0.00 - 1.6031 96 1.9823 3 0 0.00 - 2.9495 120 2.0792 3 1 33.00 4.5697 4.3119 150 2.1761 3 2 67.00 5.4303 5.6742 190 2.2788 3 3 1E2 - 7.1173 - 回归方程 y(Probit)=-24.916+14.058Log(D) 半数致死量 LD50=134.32mg/kg LD50(Feiller校正)95%的可信限=92.405-205.57mg/kg LD5=102.59mg/kg LD95=175.85mg/kg三、参加开放性实验的体会与建议四、评价与认定指导教师评价意见与成绩评定： 实验态度积极认真，并且能够较好的完成实验