胰蛋白酶的活力的测定.ppt_第1页
胰蛋白酶的活力的测定.ppt_第2页
胰蛋白酶的活力的测定.ppt_第3页
胰蛋白酶的活力的测定.ppt_第4页
胰蛋白酶的活力的测定.ppt_第5页
已阅读5页，还剩7页未读， 继续免费阅读

下载本文档

版权说明：本文档由用户提供并上传，收益归属内容提供方，若内容存在侵权，请进行举报或认领

文档简介

1、胰蛋白酶的活力的测定,一、酶的化学本质 概念 是一类生物催化剂。 化学本质 绝大多数酶是蛋白质，某些RNA或DNA也具有催化活性,二、酶的化学组成,蛋白质的酶,单纯蛋白质的酶,全酶,酶蛋白apoenzyme,辅助因子cofactor,辅助因子 辅基/辅酶小分子有机化合物、金属离子，直接参加反应。直接对电子、原子或某些化学集团起传递作用。 酶蛋白 决定反应特异性（专一性）。 一种辅助因子可与多种酶蛋白结合；一种酶蛋白只能与一种辅助因子结合,三、酶的活性中心 必需基团 酶分子中与催化作用直接相关、不可缺少的化学基团。 活性中心 酶分子中必需基团相对集中，构成一定空间结构区域，与催化作用直接相关,活

2、性中心,结合部位 （底物,催化部位（底物的键在此处被打断或形成新的键,用于判断和确定酶活型中心的主要方法： 1、专一性研究 通过研究酶的专一性底物的结构特点，来判断 和确定活性中心的结构特点。 2、酶侧链基团的化学修饰法 酶分子中可以被化学修饰的基团 很多，如巯基、羟基、咪唑基、氨基及羧基 等,四、酶的命名与分类 习惯命名法 按催化反应类型分类 脱氢酶、脱羧酶、连接酶、聚合酶等。 按组织来源及性质分类 胃蛋白酶/胰蛋白酶，酸性/碱性磷酸酶等。 国际系统分类,酶原与酶原激活 无活性的酶前身物称酶原。由无活性酶原转变为有活性酶的过程称酶原激活。 同工酶 分子结构不同、理化性质也不同，但催化同一化学

3、反应的一组酶，如乳酸脱氢酶（LDH）。 别位酶 多亚基组成，其中有催化亚基、有调节亚基，小分子化合物结合调节亚基后分子构象改变，引起催化活性改变,五、酶的活力测定,酶活力（enzyme activity），是指酶催化一定化学反应的能力。 酶活力单位（国际单位） 标准状态下，每分钟使一微克分子作用物发生转变的酶量。人们普遍 采用是习惯用法，如a-淀粉酶，可用每小时催化1克可溶性淀粉所需要的酶量来表示,胰蛋白酶活力单位的定义规定为：以BAEE为底物反应液pH8.0，25，反应体积3.0ml，光径1厘米的条件下，测定A253，每分钟使A253增加0.001，反应液中所加入的酶量为一BAEE单位,初速

4、度 研究酶反应的动力学以酶促反应的初速度为准,酶活力与酶反应速度,时间,以N-苯甲酰-L精氨酸乙酯为底物，用紫外吸收法进行测定的原理是：N苯甲酰L精氨酸乙酯英文缩写为BAEE）在波长253nm下的紫外吸收远远弱于苯甲酰L精氨酸（英文缩写为BA）。在胰蛋白酶的催化下，随着酯键的水解，苯甲酰L精氨酸逐渐增多，反应体系的紫外吸收宜随之相应增加,操作方法 取2个光程为1厘米的带盖石英比色杯，分别加入25予热过的2.8ml底物溶液。向一只比色杯中加入0.2ml 0.001mol/L HCl，作为空白，校正仪器的253nm处光吸收零点。再在另一比色杯中加入0.2ml待测酶液，立即混匀并记时，每半分钟读数一次，共读34分钟。 绘制酶促反应动力学曲线，从曲线上求

人人文库> 全部分类> 教育资料 > 课件下载

温馨提示

  • 1. 本站所有资源如无特殊说明，都需要本地电脑安装OFFICE2007和PDF阅读器。图纸软件为CAD,CAXA,PROE,UG,SolidWorks等.压缩文件请下载最新的WinRAR软件解压。
  • 2. 本站的文档不包含任何第三方提供的附件图纸等，如果需要附件，请联系上传者。文件的所有权益归上传用户所有。
  • 3. 本站RAR压缩包中若带图纸，网页内容里面会有图纸预览，若没有图纸预览就没有图纸。
  • 4. 未经权益所有人同意不得将文件中的内容挪作商业或盈利用途。
  • 5. 人人文库网仅提供信息存储空间，仅对用户上传内容的表现方式做保护处理，对用户上传分享的文档内容本身不做任何修改或编辑，并不能对任何下载内容负责。
  • 6. 下载文件中如有侵权或不适当内容，请与我们联系，我们立即纠正。
  • 7. 本站不保证下载资源的准确性、安全性和完整性, 同时也不承担用户因使用这些下载资源对自己和他人造成任何形式的伤害或损失。

最新文档

评论

0/150

提交评论