毒物测定PPT课件

1、07.02.2021,1,CHAPTER 8 Analysis of organic toxicants and their metabolites,杨金玲 卫生检验教研室 2013.3,把握生活重点，赢得成功人生,07.02.2021,2,Targets,了解五氯酚、甲醇、丙酮和正己烷的理化性质和卫生标准。 了解采样、前处理及主要的检测方法,07.02.2021,3,五氯酚（PCP,五氯苯酚，分子式C6Cl5OH，白色单斜晶体，工业级呈暗灰色至棕色。高毒,07.02.2021,4,杀菌、杀虫、防腐,仅杀虫，每年喷洒量约6000吨,椎实螺,钉螺,白蚁,07.02.2021,5,五氯酚用于农业杀

2、虫可经皮肤和呼吸道摄入,07.02.2021,6,五氯酚用于工业防腐,07.02.2021,7,五氯酚（高毒）：致癌致畸致突变,鼻咽癌,面部肿粒,07.02.2021,8,样品选择与采集,实验兔经口或皮给五氯酚后，尿中毒物浓度比血中浓度高1530倍。五氯酚的生物监测指标试样最好选择？ 采集现场尿样或晨尿，将尿液收集在清洁的硬质玻璃瓶或聚乙烯瓶中,07.02.2021,9,分光光度法,尿中五氯酚测定方法,气相色谱法,高效液相色谱法,4-氨基安替比林分光光度法,亚甲蓝分光光度法,藏红花分光光度法,直接进样气相色谱法,衍生化气相色谱法,07.02.2021,10,4-氨基安替比林分光光度法,PRIN

3、CIPLE AND METHOD,弱酸性条件蒸馏尿样,氢氧化钠溶液吸收,加入铁氰化钾、4-氨基安替比林显色,二甲苯提取,测定吸光度定量,07.02.2021,11,样品,后续分析,07.02.2021,12,水蒸气蒸馏法,将含有挥发性成分的样品与水共蒸馏，使挥发性成分随水蒸气馏出，冷凝后可得该成分。 该法适用于浸提具有挥发性、能随水蒸气蒸馏而不被破坏、在水中稳定的成分,07.02.2021,13,亚甲蓝分光光度法,PRINCIPLE AND METHOD,弱碱性条件下蒸馏尿样,测定吸光度定量,加入亚甲蓝、三氯甲烷,亚甲蓝和三氯甲烷,07.02.2021,14,亚甲蓝,亚甲蓝又叫亚甲基蓝、次甲基

4、蓝、次甲蓝、美蓝。是一种碱性生物染料，可作指示剂或显色剂,07.02.2021,15,三氯甲烷,在光照下遇空气逐渐被氧化生成剧毒的光气，故需保存在密封的棕色瓶中。 主要作用中枢神经系统，损害心、肝、肾,07.02.2021,16,衍生化气相色谱法,正己烷提取五氯酚,与重氮甲烷反应,色谱分离测定,注意：重氮甲烷是致癌物，操作时要戴好口罩和手套，在通风橱里进行,标准曲线法定量,07.02.2021,17,衍生化,样品衍生化的作用主要是把难分析的物质转化为与其化学结构相似但易分析的物质，便于量化和分离。 例：待测成分无紫外吸收，可将其加上生色团，生成可被检测的物质。 例：待测成分难气化，可利用化学衍

5、生反应得到易气化的衍生物，气相色谱测定,07.02.2021,18,PCP蒸汽压低，难气化，故将其衍生后GC分析,07.02.2021,19,高效液相色谱法,尿样在盐酸中加热水解,二氯甲烷提取干扰物,乙醚提取五氯酚,浓缩后测定,07.02.2021,20,PCP的高效液相色谱图,07.02.2021,21,为什么首先要加盐酸加热？ 使结合型的五氯酚游离出来 为什么要先调碱性后又调酸性？ 消除干扰。 课本131页色谱条件等,思 考,07.02.2021,22,分析柱 保护柱,07.02.2021,23,尿中五氯酚的各种测定方法特点？哪种方法最好？ 分光光度法灵敏度低，干扰多。气相色谱法需衍生，操

6、作复杂且危险性高。高效液相色谱法，步骤相对简单，灵敏度高，操作安全，故首选,ATTENTION,07.02.2021,24,SECTION METHANOL,甲醇、木醇、木精 易挥发 易燃易爆 经呼吸道、胃肠道和皮肤吸收,07.02.2021,25,甲醇摄入途径,勾兑假酒,车间空气中含有甲醇,致死量120-240g,07.02.2021,26,甲醇工业、医药及化妆品行业的原材料,07.02.2021,27,甲醇的代谢、毒性和诊断指标,甲醇主要经肝脏代谢，甲酸为中间产物，可导致酸中毒，损害视神经。代谢速度比乙醇慢，蓄积作用导致毒性大于乙醇。 产物从呼出气和尿排出。常以尿做试样。尿甲醇和甲酸含量均

7、可作为中毒诊断的参考指标,07.02.2021,28,样品采集与测定,用塑料瓶采集班末尿或晨尿，尽快分析。4冰箱可保存3天。 测定方法： 品红亚硫酸分光光度法、气相色谱法,07.02.2021,29,品红亚硫酸分光光度法,在酸性条件下 KMnO4氧化甲醇为甲醛，甲醛用品红亚硫酸显色，与标准比色定量分析,在加入品红亚硫酸之前为什么要加入草酸,注意：尿样分析前为什么要先蒸馏,07.02.2021,30,尿样置于顶空瓶中,顶空气相色谱法,抽取顶部蒸汽,顶部蒸汽达到平衡,气相色谱分析,07.02.2021,31,顶空分析注意,为了减少挥发性物质在注射器中的冷凝，应该将注射器加热到合适的温度。 每一顶空

8、瓶抽取样品最多2次，最好1次。 加热条件下顶空气体压力太大时，会在注射器拔出顶空瓶的瞬间造成挥发性成分的损失，因此在定量分析上存在一定不足,07.02.2021,32,专用分析易挥发的微量组分。如甲醇、苯系物等有机溶剂类。 香水、中草药类、调味品类和具有特殊气味的蔬菜水果类。 操作简单、快速、成本低，应用较广,07.02.2021,33,指溶液中加入无机盐使待测有机物溶解度降低而析出。 在该实验中为什么要加硫酸钠？ 降低甲醇在尿中的溶解度，增大甲醇的逸出效率。也可用氯化钠,盐析作用,07.02.2021,34,SECTION ACETONE,丙酮（acetone）别名二甲基甲酮。 无色透明液体

9、，有特殊芳香气味，易挥发，高度易燃。易溶于水和其他有机溶剂。 微毒，有麻醉作用,丙酮,07.02.2021,35,油漆,塑料,化妆品,橡胶,07.02.2021,36,丙酮与人体摄入,内源性物质。 接触后呼吸道、胃肠道和皮肤吸收。经肺和胃肠道吸收较快且完全。 水溶性高，易溶解被血液吸收并迅速分布全身组织,07.02.2021,37,丙酮在体内的代谢,人吸入丙酮后，约20%以原形经肺排出，75%以上代谢后经尿排出,生物监测试样,呼出气和尿,07.02.2021,38,肺泡气。与混合呼出气不同，肺泡气中的成分较恒定。 仪器,End-Expiratory Gas,三通管,塑料袋,07.02.2021

10、,39,135页。回答下列问题： 塑料采气袋的作用是? 收集初始呼出气。 “充分置换管中气体”，为什么？ 保证管中是终末呼出气。 “氮气将管中气体吹入活性炭管”的目的是？ 便于保存,07.02.2021,40,呼出气在采集管中室温保存6h，在活性炭管中保存72h。 活性炭装管后，两端玻璃棉固定，用氮气300350吹10min，套塑料帽短期使用或熔封后长期保存,ATTENTION,07.02.2021,41,尿样采集,立即盖紧密封，分析。4冰箱保存一周,班末尿,聚乙烯塑料瓶,气相色谱法测定呼出气中丙酮,PRINCIPLE,收集在玻璃采集管中,收集在活性炭管中,加热解吸,进样分析,直接进样分析,0

11、7.02.2021,43,FFAP毛细管柱,freefattyacidphase：游离脂肪酸相。 强极性色谱柱，使用温度40-250。 适用于分离样品中有机酸、醇、醛、酮等有机物,07.02.2021,44,07.02.2021,45,尿中丙酮的测定,化学法,酶法,顶空气相色谱法,简单、分析速度快、选择性好、应用广泛,07.02.2021,46,尿样置顶空瓶中（内置硫酸钠）密封,顶空气相色谱法,20min后抽取顶部气体,水浴80挥发,气相色谱分析,平衡时间,07.02.2021,47,顶空瓶的结构,07.02.2021,48,顶空体积问题,样品体积的上限是充满顶空瓶容积的80%，以便于有足够的

12、顶空体积用来抽取气态样品。 尿样/顶空最佳体积比需经实验确定。本实验为10/120,07.02.2021,49,平衡时间问题,平衡时间本质上取决于挥发速度。 实验确定。用510个顶空瓶装同一样品，在不同的平衡时间后GC测定。以峰面积对平衡时间作图，当峰面积基本恒定时，认为达到平衡,07.02.2021,50,SECTION HEXANE,微有异臭、无色透明液体，易挥发。 不溶于水，易溶于有机溶剂,高危险性毒物,07.02.2021,51,正己烷如何进入人体,职业性接触：胶黏剂、工业溶剂、清洁剂 的生产和使用等途径。 蒸气形式经呼吸道进入机体，也可经消化道或皮肤吸收,07.02.2021,52,

13、苹果公司员工正己烷中毒事件,擦手机屏幕原来用酒精。但正己烷挥发比酒精快5秒，公司为提高效率不顾工人安全,07.02.2021,53,正己烷中毒,关节畸形,四肢瘫软,07.02.2021,54,异己烷比正己烷毒性低，从劳动环境观点来看近年受到关注。 在欧美，胶粘剂和食用油抽提领域已经用异己烷代替正己烷,瞭望台,07.02.2021,55,选用什么做监测试样,正己烷接触者呼出气中正己烷含量显著增高，尿液中2,5-己二酮（代谢产物）含量也明显增高,呼出气中正己烷,尿中2, 5-己二酮,样品采集方法同丙酮,07.02.2021,56,呼出气中正己烷的测定（气相色谱法,活性炭管采样,苯解吸,色谱柱分离,

14、FID检测,07.02.2021,57,尿中2,5-己二酮的测定,原理是什么？ 吸取尿样，加入无水硫酸钠，密封后置于80恒温水浴60min,抽取顶空 瓶顶部气体1.0ml,气相色谱分析。 2,5-己二酮是正己烷中毒的何种生物标志物,07.02.2021,58,实验发现，尿/顶空比增大时，峰面积也明显增加，尿/顶空比增至2：3以上时尿样中杂质响应值也明显增加并干扰测定。 1：4的尿/顶空比可避免杂质峰干扰又可满足方法灵敏度要求,本实验尿/顶空体积比,07.02.2021,59,Thank you,07.02.2021,60,变色酸比色法,原理： 在酸性溶液中 甲醇+高锰酸钾 甲醛 甲醛+变色酸 紫红色化合物，在570nm波长处比色定量。 （过量的高锰酸钾及在反应中产生的二氧化锰用亚硫酸钠还原褪色,07.02.2021,61,丙酮的毒性,急性中毒主要是对中枢神经系统的麻醉和刺激作用。表现为流泪、运动失调、昏迷、呼吸衰竭，直至死亡。 丙酮急性中毒可见血和尿丙酮、血糖、肌醇及乳酸