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文档简介

1、第2课时基因工程的基本操作程序【基础过关】知识点一目的基因的获取1 .下列关于基因文库的说法,错误的是()A. 可分为基因组文库和部分基因文库B. cDNA文库属于部分基因文库C. 基因组文库的基因在不同物种之间均可进行基因交流D. 同种生物的cDNA文库基因数量较基因组文库基因数量少答案 C解析 基因组文库只有部分基因能够在不同物种之间进行基因交流。2.下列获取目的基因的方法中需要模板链的是() 从基因文库中获取目的基因利用PCR术扩增目的基因反转录法 通过DNA合成仪利用化学方法人工合成目的基因A. B .C .D .答案 D解析 PCR利用的是DNA双链复制原理。即将双链DNA之间的氢键

2、打开,变成单链DNA作为 聚合反应的模板链。反转录法则是以目的基因转录成的信使RNA为模板,在反转录酶的作用下,先反转录形成互补的单链DNA再合成双链的 DNA则均不需要模板。知识点二基因表达载体的构建3 .水母发光蛋白由236个氨基酸构成,其中 Asp、Gly、Ser构成发光环,现已将这种蛋白质的基因作为生物转基因的标记,在转基因技术中,这种蛋白质的作用是()A. 促使目的基因导入宿主细胞中B. 促使目的基因在宿主细胞中复制C. 使目的基因容易被检测出来D. 使目的基因容易成功表达答案 C4. 下列哪项不是表达载体所必需的组成成分()A. 目的基因B .启动子C.终止子D .抗青霉素基因答案

3、 D解析 A、B、C三项均为表达载体的必要的组成成分;具有标记基因也是表达载体所必需的组成成分,但抗青霉素基因只是标记基因中的一种,不是所有的表达载体都含有。知识点三 将目的基因导入受体细胞5. 人们将苏云金芽孢杆菌中的抗虫基因导入棉花细胞中培育成为抗虫棉,这个过程中所利用的主要原理是()A.基因突变B .基因重组C.基因工程 D 染色体变异答案 B解析 将苏云金芽孢杆菌的抗虫基因导入棉花细胞中,通过DNA复制、转录、翻译合成特定的蛋白质,表现出特定的性状。此题易错选C。基因工程是一种技术手段,而不是生物学原理,抗虫棉的培育利用的是基因工程这一技术手段使基因发生重组。6 .基因工程常用的受体细

4、胞有 ()大肠杆菌 枯草杆菌支原体动植物细胞A.B .C .D .答案 D解析 基因工程常用的受体细胞有大肠杆菌、枯草杆菌、土壤农杆菌、酵母菌和动植物细胞等。知识点四 目的基因的检测与鉴定7 .检测转基因生物是否转录出mRNA应通过何种分子杂交方法实现 ()A. DNA- DNA杂交 B . DNA- RNA杂交C. RNA-蛋白质杂交 D .蛋白质一蛋白质杂交答案 B解析 A、B、D三项分别是在复制、 转录和翻译水平上检测基因工程是否成功,C项所述分子杂交方法是不存在的。8.利用外源基因在受体细胞中表达,可生产人类所需要的产品。 下列选项中能说明目的基因完成了在受体细胞中的表达的是 ()A.

5、 棉花二倍体细胞中检测到细菌的抗虫基因B. 大肠杆菌中检测到人胰岛素基因及其mRNAC. 山羊乳腺细胞中检测到人生长激素DNA序列D. 酵母菌细胞中提取到人干扰素蛋白答案 D解析 基因表达的产物是蛋白质,因此,只有在受体细胞中检测或提取到了相应蛋白质才能证明目的基因在受体细胞中完成了表达。A、C项只能说明完成了目的基因的导入,B项只能说明完成了目的基因的导入和目的基因的转录过程。【能力提升】9 .基因工程的正确操作步骤是 ()构建基因表达载体将目的基因导入受体细胞检测目的基因的表达是否符合特定性状要求提取目的基因A.B .C.D .答案 C解析 基因工程的基本操作步骤为:目的基因的获取t基因表

6、达载体的构建t将目的基因导 入受体细胞t目的基因的检测与鉴定。10.下列有关PCF技术的叙述,正确的是 ()A. 作为模板的DNA序列必须不断地加进每一次的扩增当中B. 作为引物的脱氧核苷酸序列必须不断地加进每一次的扩增当中C. 反应需要的DNA聚合酶必须不断地加进反应当中D. 反应需要的DNA连接酶必须不断地加进反应当中答案 B11.用某人的胰岛素基因制成的DNA探针,能与之形成杂交分子的是 ()该人胰岛A细胞中的DNA该人胰岛B细胞中的mRNA该人胰岛A细胞中的mRNA 该人肝细胞中的 DNAA.B .C.D .A细胞和肝细胞中均含有胰答案 C解析 人的胰岛素基因存在于人的所有体细胞中,因

7、此该人胰岛岛素基因, 可与用胰岛素基因制成的DNA探针形成杂交分子。该人胰岛B细胞中的 mRNA有一8DNA探针形成杂交分子。部分是由胰岛素基因转录形成的,也能与用胰岛素基因制成的12在基因表达载体的构建中,下列说法不正确的是()一个基因表达载体的组成包括目的基因、启动子、终止子 有了启动子才能驱动基因转录出mRNA 终止子的作用是使转录在所需要的地方停止 所有基因表达载体的构建是完全相同的A.B . C . D .答案 B解析 一个基因表达载体的组成,除了目的基因外,还必须有启动子、终止子以及标记基因等。由于目的基因的不同,所以构建的基因表达载体也是不同的。其中,启动子是与RNA聚合酶结合的

8、位点,控制着转录的开始;而终止子控制着转录的结束。抗青曙玳基囲曰抗四环累苹因13质粒是基因工程中最常用的载体,它存在于许多细菌体内,某细菌质粒上的标记基因如图所示,通过标记基因可以推知外源基因(目的基因)是否转移成功。外源基因插入的位置不同,细菌在培养基上生长情况也不同,如图所示外源基因在质粒中可插入的位置有a、b、c三点。某同学根据实验现象对其插入的位点进行分析,其中分析正确的是()实验现象实验推论在含青霉素培养基上生长情况在含四环素培养基上生长情况目的基因插入的位置A能生长能生长aB不能生长能生长bC能生长不能生长cD不能生长不能生长c答案 B解析 若质粒上插入的位置在 c点,那么抗四环素

9、基因和抗青霉素基因都没有被破坏,导入 该重组质粒的细菌在含青霉素的培养基和在含四环素的培养基上均能生长。14.棉铃虫是一种危害棉花的害虫。我国科学工作者发现一种生活在棉铃虫消化道内的苏云 金芽孢杆菌能分泌一种毒蛋白使棉铃虫致死,而这种毒蛋白对人畜无害。 通过基因工程方法,科学家采用花粉管通道法将毒蛋白基因转入棉花植株并成功表达,棉铃虫吃了这种转基因棉 花的植株后就会死亡。花粉管通道法是指:利用植物花粉萌发时形成的花粉管通道将毒蛋白基因送入胚囊,进而导入不具备细胞壁的合子或早期胚体细胞,借助天然的种胚系统,形成 含有目的基因的种胚。F列所示的黏性末端是由 AATTCI 种限制酶作用产生的。AAI

10、TXjCTTAACn AAGC(2) 利用花粉管通道法将毒蛋白基因导入棉花细胞,此过程是基因操作的基本步骤中的第三步,即。为减少获得目的基因的盲目性,在获得真核生物的目的基因时,应尽量采用 的方法。 该目的基因在导入受体细胞前需要与载体结合,目前经常使用的载体有和 (4)检测该目的基因是否表达的方法是答案 (1)4(2)将目的基因导入受体细胞人工合成目的基因(3)质粒 入噬菌体的洐生物动植物病毒(4)让害虫吃棉花,观察害虫的生存状态解析 用同一种限制酶切出的黏性末端是相同的,图中四个黏性末端各不相同,故为四种限制酶切割而成;获得目的基因的方法有从原有的物种中分离(基因文库中提取)和人工合成目的

11、基因,后者目的性强;载体最常用的是质粒,另外也可以用 入噬菌体的洐生物和动植物病毒等,目的基因是否表达可以在分子水平或个体水平上检测。15.酵母菌的维生素、 蛋白质含量高,可生产食品和药品等。 科学家将大麦细胞的 LTP1基因导入啤酒酵母菌中, 获得的啤酒酵母菌可产生LTP1蛋白,并酿出泡沫丰富的啤酒。基本操作过程如图所示,请据图回答下列问题:尢肠杆茵啤酒辭母 皿捷四环蠶卒因标记基因扯卄揺蠹基国尢麦细胞检测,转基国 篩选啤酒酵母CZU,TF1 环(1)该技术定向改变了酵母菌的性状,这种可遗传变异属于 从大麦细胞中可直接分离获得 LTP1基因,还可采用 方法获得目的基因。本操作中为了将LTP1基

12、因导入酵母菌细胞内,所用的载体是 。(3)要使载体与LTP1基因连接,首先应使用 进行切割。假如载体被切割后,得到的分子末端序列为 AATTCG则能与该载体连接的 LTP1基因分子末端是 。A. GCTTAA B. TAATTCCC. CTTTAG D. AAATCT(4)切割完成后,采用 酶将载体与LTP1基因连接,连接后得到的DNA分子称为此操作中可以分别用含有青霉素、四环素的两种选择培养基进行筛选,则有C进入的酵母菌在选择培养基上的生长情况是 除了看啤酒泡沫丰富与否外,还可用什么方法检测LTP1基因在啤酒酵母菌中是否表达?答案 基因重组 (2)人工合成 质粒 (3)限制酶 A DNA连接

13、 重组DNA重组质 粒)(5)能在含有青霉素的培养基上存活, 但不能在含有四环素的培养基上存活(6)检验转基因啤酒酵母菌能否产生 LTP1蛋白解析 基因工程从变异角度分析应属于基因重组,获取目的基因可采用直接从物种中分离或 人工合成等方法,常用的载体是质粒。【个性拓展】16我国曾经发生过因“非典型性肺炎”而死亡的病例,经研究发现,该病是由SARS病毒(一种RNA病毒)感染所引起的疾病。SARS病毒表面的S蛋白是主要的病毒抗原, 在SARS病人康 复后的血清中有抗 S蛋白的特异性抗体。某研究小组为了研制预防 SARS病毒的疫苗,开展了 前期研究工作,其简要的操作流程如图:(1) 实验步骤所代表的反应过程是 。(2) 步骤构建重组表达载体 A和重组表达载体 B必须使用限制性核酸内切酶和 酶,后者的作用是将用限制性核酸内切酶切割的 和连接起来。(3) 如果省略步骤而将大量扩增的S蛋白基因直接导入大肠杆菌,一般情况下,不能得到表达的S蛋白,其原因是S蛋白基因在大肠杆菌中不能,也不能(4) 为了检验步骤所表达的S蛋白是否与病毒S蛋白有相同的免疫反应特性,可用与进行抗原一抗体特异性反应实验,从而得出结论。(5) 步骤和的结果相比,原核细胞表达的S蛋白与真核细胞表达的 S蛋白的氨基酸序列(填“相同”或“不同”),根本原因是 。答案(1)反转录 (2)DNA连接

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