洛索洛芬钠渗透泵型控释片的研究 硕士论文

单位代码10369学号200701102010届硕士研究生学位论文洛索洛芬钠渗透泵型控释片的研究STUDYONLOXOPROFENSODIUMOSMOTICPUMPCONTROLLEDRELAESETABLETS学科专业药剂学研究方向药物新技术与新剂型导师王成永教授硕士生杨甜2010年4月合肥目录中文摘要1英文摘要3英文缩略词5前言6第一章处方前研究及体外分析方法的建立1仪器与试药132方法与结果1321处方前研究13211洛索洛芬钠的溶解度13212洛索洛芬钠在不同释放介质中的稳定性14213表观油水分配系数的测定1422含量测定方法的建立15221检测波长的确定15222色谱条件与系统适应性16223洛索洛芬钠对照品溶液的制备17224标准曲线的制备17225精密度试验18226稳定性试验19227重复性试验19228回收率试验20229洛索洛芬钠渗透泵片的含量测定2023释放度测定方法的建立21231检测波长的确定21232标准曲线的制备22233精密度试验22234释放介质中的稳定性23235回收率试验23236释放度测定方法243讨论244小结25第二章洛索洛芬钠渗透泵型控释片制备工艺的研究1仪器与试药262方法与结果2621洛索洛芬钠渗透泵型控释片的制备工艺及工艺流程图26211制备工艺26212工艺流程图2722洛索洛芬钠渗透泵型控释片的单因素考察27221片芯处方的单因素考察27222包衣液处方的单因素考察32223体外释放条件对药物释放的影响3623正交试验优化处方3824处方的确定4025处方与工艺重复性考察4126释药曲线的拟合4127释药机理的初步研究423讨论424小结44第三章洛索洛芬钠渗透泵型控释片的质量控制及稳定性研究1仪器与试药452方法与结果4521外观性状4522释放度检查46221方法学考察46222释放曲线的绘制46223释放度限度的确定4623样品的含量测定及其限度4624有关物质分析方法的建立47241色谱条件47242最低检测限和定量限的确定47243降解产物对主药测定的影响47244洛索洛芬钠渗透泵型控释片有关物质检查4825洛索洛芬钠渗透泵型控释片初步稳定性研究48251考察项目与检测方法48252影响因素试验49253加速试验503讨论514小结52第四章洛索洛芬钠渗透泵型控释片在大鼠体内初步药动学研究1仪器与试药532方法与结果5321受试制剂与参比制剂5322实验动物5323给药方案及血样采集5324血浆样品的处理和测定5425体内分析方法的建立54251色谱条件54252方法的专属性54253标准曲线的制备55254精密度试验56255样品回收率试验56256血浆样品稳定性考察5726血药浓度测定结果5827相对生物利用度613讨论614小结62全篇小结63参考文献64综述68个人简历80致谢81中文摘要洛索洛芬钠（LOXOPROFENSODIUM）为苯丙酸类非甾体抗炎药，具有起效迅速，抗炎强效且均衡，胃肠道刺激小的特点，临床上广泛用于治疗慢性风湿性关节炎、类风湿性关节炎、骨性关节炎、变形性关节炎、腰疼等。目前，洛索洛芬钠已上市的品种有普通片、分散片、口腔速崩片、颗粒剂、胶囊剂、贴剂。国内尚未见自主研制的缓控释制剂上市。将洛索洛芬钠制成渗透泵型控释片能够在一定时间范围内以恒定的释药速度释放出一定量的治疗药物，可以减少给药次数和保持平稳的血药浓度，为病人提供一种相比较而言较为安全、方便的服药方式。本文建立了紫外分光光度法用于渗透泵片释放度的测定，建立了高效液相色谱法用于渗透泵片含量测定和体内血药浓度的检测。以上分析方法准确可靠、方便快捷，满足分析要求。本文在充分考察药物及各种辅料性质的基础上，以氯化钠、羟丙甲基纤维素K4M（HPMCK4M）、乳糖为片芯组成，以醋酸纤维素（CA）丙酮溶液、邻苯二甲酸二丁酯（DBP）和聚乙二醇400（PEG400）为包衣材料，制备了洛索洛芬钠渗透泵型控释片（LOXOPROFENSODIUMOSMOTICPUMPCONTROLLEDRELEASETABLETS）。从片芯处方、包衣液处方、体外释放条件等因素对洛索洛芬钠渗透泵型控释片的释药行为进行了单因素考察。在单因素考察及因素筛选的基础上，采用综合评分法，通过正交试验，优化处方。结果显示，优化的处方在12小时内呈零级释药特征，释药较完全，批间重现性良好。为控制渗透泵型控释片的质量，根据洛索洛芬钠的理化性质和渗透型控释片的制剂特点，建立了本品的释放度、有关物质、含量的测定方法。结果显示方法准确、可行，能有效控制产品的质量，为制定该制剂的质量标准提供了一定的依据。参照药物稳定性试验指导原则的要求，以外观、释放度、含量、有关物质等项目作为考察指标，对洛索洛芬钠渗透泵型控释片进行影响因素试验（4500LX光照、60高温及RH925高湿）和加速试验。试验结果显示，各项考察指标在上述试验过程中均未发生明显变化，证明该制剂稳定性良好，本品的制备工艺研究和质量标准研究合理、方法可行。本文以市售普通片作为对照，对洛索洛芬钠渗透泵型控释片进行了药动学研究。利用高效液相色谱法对体内血药浓度进行测定，两种制剂的峰浓度（CMAX）分别为837、2345G/ML，达峰时间（TPEAK）分别为6031、0753H，药时曲线下面积（AUC）分别为62197、54936G/MLH，其相对生物利用度为11322。结果表明，自制渗透泵片具有出峰时间晚、峰值低、血药浓度平稳的特征。关键词洛索洛芬钠；渗透泵型控释片；质量标准；药代动力学ABSTRACTLOXOPROFENSODIUMISASTYRENEACRYLICACIDNONSTEROIDALANTIINFLAMMATORYDRUGSWITHRAPIDONSET,POTENTANTIINFLAMMATORYANDBALANCED,GENTLESTIMULATIONOFTHEGASTROINTESTINALTRACT,WHICHISWIDELYUSEDINCLINICALTREATMENTOFCHRONICRHEUMATISMARTHRITIS,RHEUMATOIDARTHRITIS,OSTEOARTHRITIS,DEFORMATIONARTHRITIS,BACKPAINANDSOONCURRENTLY,LOXOPROFENSODIUMVARIETIESHAVEBEENLISTEDORDINARYTABLETS,DISPERSIBLETABLETS,ORALFASTDISINTEGRATINGTABLETS,GRANULES,CAPSULES,PASTETABLECHINAHASNOTYETINDEPENDENTLYDEVELOPEDCONTROLLEDRELEASEFORMULATIONSONTHEMARKETMADEOFTHEOSMOTICPUMPLOXOPROFENSODIUMCONTROLLEDRELEASETABLET,ITCANRELEASEACONSTANTDRUGRELEASERATEOFACERTAINAMOUNTOFTHERAPEUTICDRUGSWITHINACERTAINTIME,WHICHCANREDUCEINJECTINGTIMESANDMAINTAINASTABLEBLOODCONCENTRATION,TOPROVIDEACOMPARISONOFPATIENTSISMORESAFEANDCONVENIENTWAYOFTAKINGMEDICINEITWASESTABLISHEDBYUVSPECTROPHOTOMETRYFORTHEOSMOTICPUMPTABLETSRELEASETEST,HIGHPERFORMANCELIQUIDCHROMATOGRAPHYHPLCFORTHEDETERMINATIONOFOSMOTICPUMPTABLETANDTHEBLOODCONCENTRATIONOFTHETESTTHEABOVEANALYSISMETHODISACCURATE,CONVENIENT,MEETTHEANALYSISREQUIREMENTSONTHEBASISOFINVESTIGATINGTHECHARACTERSOFLOXOPROFENSODIUMANDVARIOUSINGREDIENTS,USEINGSODIUMCHLORIDE,HPMCK4M,LACTOSECHIPCORE,WITHCELLULOSEACETATECAACETONE,DIBUTYLPHTHALATEDBPANDPOLYETHYLENEGLYCOL400PEG400FORTHECOATINGMATERIAL,PREPAREDLOXOPROFENSODIUMOSMOTICPUMPCONTROLLEDRELEASETABLETSFORCOREWITHASLICEPRESCRIPTION,CLOTHINGMEMBRANEPRESCRIPTION,INVITRORELEASECONDITIONSASFACTORS,LOXOPROFENSODIUMONOSMOTICPUMPTABLETSWITHDRUGRELEASEBYTHESINGLEFACTORSSTUDIEDTOSINGLEFACTORANDFACTORBASEDSCREENING,WITHINTEGRATEDRATEMETHOD,THEORTHOGONALEXPERIMENTALDESIGN,OPTIMIZATIONPRESCRIPTIONTHERESULTSSHOWTHATOPTIMIZATIONOFPRESCRIPTIONDRUGRELEASECHARACTERISTICSWEREZEROORDERIN12H,AMORECOMPLETEDRUGRELEASE,AGOODBATCHREPEATABILITYACCORDINGTOTHEPHYSICOCHEMICALPROPERTYOFLOXOPROFENSODIUMANDCHARACTERISTICOFOSMOTICPUMPTABLETSPREPARATION,THEDRUGRELEASERATE,RELATEDSUBSTANCESANDCONTENT,WHICHWERETHEQUALITYCONTROLSOFLOXOPROFENSODIUMOSMOTICPUMPTABLETSTHERESULTSHOWEDTHATTHEMETHODWASACCURATEANDFEASIBLE,WHICHPROVIDESOMEREFERENCEFORQUALITYCONTROLOFLOXOPROFENSODIUMOSMOTICPUMPTABLETSREFERENCINGGUIDANCEPRINCIPLESOFINVESTIGATIONONDRUGSTABILITY,THESTABILITYTESTOFLOXOPROFENSODIUMOSMOTICPUMPTABLETSWERECARRIED4500LXSTRONGLIGHTTEST,60HIGHTEMPERATURETEST,RH925HIGHHUMIDITYTESTBYINSPECTIONOFTHECHARACTER,DRUGRELEASE,RELATEDSUBSTANCE,CONTENTEXAMINATIONANDSOONANDTHENTHEACCELERATIONTESTWASCARRIEDONTHERESULTSINDICATEDTHATLOXOPROFENSODIUMOSMOTICPUMPTABLETSWERESTABLE,NEARLYWITHOUTANYQUALITYCHANGESDURINGTHESTABILITYSTUDYTHEPREPARATIONPROCEDUREANDTHEQUALITYCONTROLSTANDARDWEREREASONABLEANDFEASIBLEWITHTHECOMMERCIALLOXOPROFENSODIUMTABLETSASTHEREFERENCE,THEPHARMACOKINETICSWASSTUDIEDBYSELFPREPARELOXOPROFENSODIUMOSMOTICPUMPTABLETSHPLCWASEMPLOYEDTODETECTTHELOXOPROFENSODIUMCONCENTRATIONINBLOODPLASMATWOPREPARATIONSOFPEAKCONCENTRATIONCMAXWERE837G/MLAND2345G/ML,PEAKTIMETPEAKWERE6031HAND0753H,AREAUNDERTHECONCENTRATIONTIMECURVEAUCWERE62197G/MLHAND54936G/MLHTHERELATIVEBIOAVAILABILITYOFTHETWOPREPARATIONSWAS11322THERESULTSSHOWTHATOSMOTICPUMPTABLETSHAVEPROPERTYEVENINGPEAKTIME,PEAKLOW,STABLEPLASMACONCENTRATIONKEYWORDSLOXOPEOFENSODIUMOSMOTICPUMPCONTROLLEDTABLETSQUALITYSTANDARDPHARMACOKINETICS英文缩略词（ABBREVIATION）缩略词英文全名中文释义AUCAREAUNDERCONCENTRATIONTIMECURVE药时曲线下面积CACELLULOSEACETATE醋酸纤维素DDAY天HHOUR小时HPLCHIGHPERFORMANCELIQUIDCHROMATOGRAPHY高效液相色谱法HPMCHYPROMELLOSE羟丙甲基纤维素LXLUX勒克斯（光照度单位）MINMINUTE分钟MRTMEANRESIDENCETIME平均滞留时间NSAIDSNONSTEROIDALANTIINFLAMMATORYDRUGS非甾体类抗炎药PAPPAPPARENTNOCTYLALCOHOL/WATERPARTITION表观正辛醇/水分配系数PBSPHOSPHATEBUFFEREDSALINE磷酸盐缓冲液PEGPOLYETHYLENEGLYCOL聚乙二醇PHPOWEROFHYDROGEN酸碱度RHRELATIVEHUMIDITY相对湿度RSDRELATIVESTANDARDDEVIATION相对标准偏差前言1立题依据与研究背景11研究背景解热镇痛药是一类具有解热、镇痛作用，且大多数还具有显著的抗炎、抗风湿作用的药物，故称为解热镇痛抗炎药（ANTIPYRETICANALGESICANDANTIINFLAMMATORYDRUGS）。鉴于此本类药物的抗炎作用与具有甾体结构的糖皮质激素不同，1974年在意大利米兰召开的国际会议中，将本类药物归入非甾体抗炎药（NONSTEROIDALANTIINFLAMMATORYDRUGS,NSAIDS）1。自1899年德国拜尔公司研制出乙酰水杨酸（阿司匹林）ACETYLSALICYLICACID,ASPIRIN,ASA2问世以来的百年间，发现了许多不同类别的非甾体抗炎药，极大的丰富了临床治疗学，并广泛应用于临床。目前，非甾体抗炎药是全球处方药和非处方药用量最大的药物之一，在内、外、妇、儿科均广泛使用，在风湿病临床中也占有很重要的地位。阿司匹林是非甾体抗炎药的原形药物，至今仍在使用，并且开发其新的用途。20世纪50年代出现的吡唑酮类药物，如保泰松，以及20世纪60年代上市的吲哚乙酸类药物，如吲哚美辛（消炎痛），以其强大的抗炎、镇痛作用而广泛应用于临床。20世纪70年代至今，可谓非甾体抗炎药发展最快的年代，相继上市的丙酸类药物，如布洛芬和酮基布洛芬等；苯乙酸类药物，如双氯芬酸；萘乙酸类药物，如萘普生等。这些新型药物由于在化学结构上的变更，与阿司匹林或保泰松或吲哚美辛相比，疗效相当或更好，而不良反应的发生率和严重程度均明显下降。此外，为了提高疗效，同时减少其不良反应，出现了不同剂型的非甾体抗炎药，如戴芬（德国生产）是双氯灭酚的双释胶囊，布洛芬缓释剂型芬必得等3。近年来，国内外已证实非甾体抗炎药主要的作用机制是抑制花生四烯酸ARACHIDONICACID,AA代谢中的环氧化酶CYCLOOXYGENASE,COX和脂氧化酶LIPOXYGENASE,LOX，阻碍前列腺素PROSTAGLANDIN,PG、前列环素PROSTACYCLIN,PGI和白三烯LEUKOTRIENE,LT的致炎增敏作用4。前列腺素和前列环素能使血管舒张并增强血管通透性，间接成为引起炎症的媒介，并且延长炎症时间，此外，前列腺素还可以使痛觉神经末梢增敏，产生疼痛。白三烯是过敏性慢反应物质SRSA的主要成分，能增强血管通透性并促进血浆渗出。通过AA代谢所产生的大部分炎症介质均可为NSAIDS所阻断5。除此之外，非甾体抗炎药的作用机制还包括解除氧化磷酸化偶联；抑制溶酶体酶释放；从血浆蛋白里置换出内源性抗炎多肽；抑制补体活化；拮抗激酶活性及其产生；抑制氧自由基产生；抑制白细胞聚集和黏附6。非甾体抗炎药的种类繁多，其“家族成员”还在不断增多，分类方法有很多种。根据对COX抑制特性将NSAIDS分为四类第一类COX1倾向性抑制剂，如小剂量肠溶性阿司匹林；第二类为非选择性COX抑制剂，如吲哚美辛、双氯芬酸等；第三类为选择性COX2抑制剂，如美洛昔康等；第四类为COX2特异性抑制剂，如罗非昔布、塞来昔布等7。还可以根据其对花生四烯酸的不同代谢途径来分类以及根据其化学结构来分类。洛索洛芬钠（LOXOPROFENSODIUM）又称环氧洛芬钠、罗索普洛芬钠、氯索洛芬钠，由日本三共株式会社（SANKYO）研发，1986年7月在日本以商品名为“乐松”（LOXONIN）上市。本品是第一个苯丙酸类前体型非甾体抗炎药，具有良好的镇痛、抗炎及解热作用，尤其是镇痛作用最强。其镇痛作用强度比吲哚美辛（消炎痛）强10倍，其抗炎和解热作用则与之相当。由于本品为前体药物，经胃肠道吸收后转变为活性代谢产物而发挥作用，故对胃肠道副作用少，使用更加安全。临床上广泛用于治疗慢性风湿性关节炎、类风湿性关节炎、骨性关节炎、变形性关节炎、腰疼等1。12立题依据近年来，为增加药物的市场价值和竞争力，开发药物的新剂型成为重要的途径。在各种投放于市场的新型给药系统中，口服控释给药系统能够减小血药浓度的波动和给药次数，具有明显的给药方便性和较好的患者顺应性的优点。在各种口服控释给药系统中，渗透泵片独特的优点已成为研究开发的热点811。一般的口服给药系统其释药速率会受到释药环境的PH值、胃肠道蠕动的快慢等其它生理因素的影响，而渗透泵型控释片利用了渗透压原理释放药物，其释药行为对上述因素的变化不敏感，释药速度达到均匀恒定，体内外试验相关性良好12，可同时控释多种药物13。因此，被公认是目前最理想的口服控释给药方法之一。国内外研究报道表明，洛索洛芬钠显著的治疗效果和较小的副作用受到临床医生和患者的普遍认可，是我国“九五”及2010年医药科技发展规划推荐品种之一。在日本专利1997年到期后，福建汇天生物药业有限公司1998年开始对该品种进行研制开发，并于2002年7月获得国家新药证书和生产批件。目前，洛索洛芬钠已上市的剂型有普通片、分散片、口腔速崩片、颗粒剂、胶囊剂、贴剂。因此，积极开发推广本品的新剂型具有非常重要的现实意义。国内尚未见自主研制的缓控释制剂上市。将洛索洛芬钠制成渗透泵型控释片，能够在一定的时间范围内以恒定的释药速度释放出一定量的治疗药物，可以改善血药浓度的峰谷现象，保持平稳的血药浓度，同时减少给药次数，为病人提供一种相比较而言较为安全、方便的服药方式。所以本文选择洛索洛芬钠作为模型药物，制备渗透泵型控释片这一课题进行研究与开发，力求通过对控释制剂技术的研究，研制出设计合理，性质稳定，适合于生产，同时具有广大社会效益和经济效益的制剂新产品。2国内研究现状21洛索洛芬钠的基本理化性质CHEMICALSTRUCTURESOFLOXOPROFENSODIUM化学名MONOSODIUM242OXOCYCLOPENTYLMETHYLPHENYLPROPANOATE分子式C15H17O3NA分子量26828本品为白色或浅黄色结晶或结晶性粉末，无气味，味微甜咸。在水、甲醇中易溶，在乙醇中溶解，在丙酮、氯仿、乙醚中不溶。22洛索洛芬钠的作用机制及药动学研究洛索洛芬钠为苯丙酸类非甾体抗炎药，为非活性的前体药。吸收后在体内转化成活性代谢产物抑制环氧化酶，减少前列腺素生成，抑制中性粒细胞向炎症部位的趋向性及抑制趋向因子形成而发挥作用14。本品口服后经胃肠道迅速吸收，转变为顺式和反式羟基代谢物，其药理活性是由反式羟基代谢物产生15,16。健康成人单次口服洛索洛芬钠60MG，迅速吸收，在肝脏、肾脏、皮肤、其他细胞外间隙及四肢的炎性组织中浓度较高，在关节中浓度持续时间较长，而在脑组织和骨骼肌中浓度较低。服药后，原形药物的血药浓度达峰时间大约为30分钟，反式羟基代谢物的血药浓度达峰时间大约为50分钟，给药1小时后的洛索洛芬钠原形及反式羟基代谢物的血浆蛋白结合率分别为970和928。本品大部分以原形药物的葡萄糖醛酸的结合物或羟基化的葡萄糖醛酸结合物从尿液中排出。健康成人口服本品每次60MG，每日3次，连续5天，其吸收和排泄均与单次给药无明显差异，未见蓄积17,18。缪海均等19选取18例健康志愿者单剂量口服60MG洛索洛芬钠片，采用高效液相层析法测定血浆中洛索洛钠药物浓度，结果证明本品口服吸收快，消除半衰期短。23洛索洛芬钠的临床适应症洛索洛芬钠具有起效迅速，抗炎强效且均衡，胃肠道刺激小的特点。临床上可广泛应用于各种急性或慢性关节炎，如风湿性关节炎、类风湿性关节炎、强直性脊柱炎、骨性关节炎和痛风性关节炎等；软组织风湿病，如腰疼、颈臂肩综合征、肩周炎、网球肘等；手术后、外伤后及拔牙后疼痛以及急性上呼吸道炎症的解热和镇痛14。黄烽等20选择52例活动性强直性脊柱炎患者，口服洛索洛芬钠，经过4周的治疗，总有效率为9242，其中对各主要疗效指标均有明显改善P因素A因素B。对于因素A，最佳水平为2；对于因素B，最佳水平为2；对于因素C，最佳水平为2，因此最佳处方为A2B2C2，即氯化钠用量为30MG，PEG400用量为5MG/ML，包衣增重为3。24处方的确定片芯处方组成用量洛索洛芬钠90G氯化钠30G羟丙甲基纤维素K4M10G乳糖130G硬脂酸镁2G以3PVP无水乙醇溶液制粒1000片包衣液处方组成用量醋酸纤维素30G聚乙二醇4005ML邻苯二甲酸二丁酯2ML丙酮1000ML25处方与工艺重复性考察按照24项下确定的最优处方制连续制备三批洛索洛芬钠渗透泵片，按照释放度测定方法测定三批的体外释放度，考察处方与工艺的重复性，结果见TAB215和FIG212。试验结果表明，洛索洛芬钠渗透泵片的处方与工艺重复性良好。表215批间工艺重复性考察TAB215RELEASEPROFILESOFLOXOPROFENSODIUMATDIFFERENTBATCHSACCUMULATIVERELEASED（）TIMEH24681012BATCH1204365553719841957BATCH2193367565724846962BATCH3206359551713825948MEAN201364556719837956RSD348114136077131074图212批间工艺重复性考察FIG212RELEASEPROFILESOFLOXOPROFENSODIUMATDIFFERENTBATCHS26释药曲线的拟合分别用零级、一级和HIGUCHI方程对按照24项下确定的最优处方制备的洛索洛芬钠渗透泵片体外释药曲线进行拟合，用相关系数R判断其拟合度，结果见TAB216。由拟合结果可以看出，以零级方程拟合的相关系数最大，可见本制剂体外释放呈零级释放特征。表216释药曲线拟合结果TAB216THERESULTOFDIFFERENTEQUATIONSFITTEDFOROPTIMALFORMULATIONMODELEQUATIONRZEROORDERMT/M00804T00037509959FIRSTORDERIN1MT/M02432T0346409440HIGUCHIMT/M02546T1/2001990983627释药机理的初步研究33对药物体外释药机理的研究，有利于探索制剂处方与释药行为的关系，对了解其在体内的释药行为具有重要的参考意义。对于以包衣膜内外的渗透压差作为主要释药动力的单室渗透泵型控释片，其零级释放部分的释药速率满足以下公式DM/DTA/HLPPCEQN21其中，DM/DT代表药物释放的速率；A为膜的表面积；H为膜的厚度；LP为机械穿透系数；和P分别代表膜内外的渗透压和静压差；为发射系数；C为片内溶解的药物浓度。当流体静压差与渗透压差相比，P时，包衣膜内渗透压又远大于膜外渗透压时，上式可简化为DM/DTA/HLPCEQN22当处方确定后，EQN22中KLP为常数，且在片芯内的全部药物完全溶解之前，式中C和可以分别用药物的饱和溶解度CS和片芯组成物质饱和溶液的渗透压S取代，即DM/DTA/HKSCSEQN23由上述公式EQN23可知，A、H、K、S、CS均为常数，为此，只要片芯中全部药物溶解之前，药物可维持零级释药速率。3讨论31关于剂型的选择根据有关文献报道42，洛索洛芬钠在大鼠的整个肠道都有吸收，无特定的吸收部位，适宜制备成缓释、控释制剂。以渗透压作为释药动力，以零级释药动力学为特征的渗透泵型控释制剂，是被公认的最理想的口服控释给药系统之一，已经成为国内外研究的热点。本文将洛索洛芬钠制成渗透泵型控释片，既能保留洛索洛芬钠原有的起效迅速，抗炎强效且均衡，胃肠道刺激小的特点，又充分利用了渗透泵型控释片的能够使血药浓度较长时间地维持在有效范围内，释药速率不受胃肠道可变因素影响的优点，可以减少用药次数与全身副作用，提高了药物的安全性和有效性。32关于处方的设计药物的溶解度是设计渗透泵片处方的一个重要考虑因素，最适宜制成渗透泵片的药物其溶解度在530G/100ML范围以内。片芯吸水后，迅速形成具有一定浓度的药物饱和溶液，从而保证一定的释药速率37。对于难溶性药物，其饱和溶液的浓度极低，难以达到有效的治疗浓度，需要提高其溶解性，促进药物的释放；对于极易溶解的药物，容易造成释药速率特别大，出现突释现象，难以达到控释要求，则需要加入一些阻滞剂，降低其释药速度。洛索洛芬钠属于极易溶解的药物，其在渗透泵片芯的微环境中容易形成适宜浓度的均匀溶液，从而在半透膜内形成一定的渗透压来维持恒速释放，所以不需要在片芯中加入大量的渗透压促进剂。本课题在制备渗透泵片时考虑加入羟丙甲基纤维素作为阻滞剂，用以调节释药速率。33关于制备工艺在预试验的过程中，分别采用湿法制粒压片和全粉末直接压片，结果发现采用全粉末直接压片时，制得的片剂光滑，成型性好，但需要较大的压力，对冲模的磨损较大，另外，由于粉末的流动性不佳，使得片重差异较大，且在压片的过程中产生粉尘较多。而湿法制粒压片的压片颗粒流动性和压缩成型性好，压力无需很大，且片芯中各组分混合均匀，并且减少了粉尘的污染，有利于进行工业化大生产。因此，本文选用湿法制粒压片工艺制备渗透泵型控释片。在制备的过程中，采用双面机械打孔制备渗透泵型控释片，双面打孔既可以使药物的释放更加稳定，又可以避免药物从一个释药孔释放时，由于局部药物浓度过高而产生胃肠道刺激等副作用。4小结本文通过对片芯处方、包衣液处方以及体外释放条件进行了单因素考察，结果表明NACL用量、包衣膜中PEG400用量、包衣增重的因素对药物的释放有显著的影响。在单因素考察的基础上，采用正交试验，通过综合评分法优化处方，得到洛索洛芬钠渗透泵型控释片的最佳处方。按照最佳处方制备三批样品进行释放度考察，结果表明工艺重复性良好。进行释药曲线的拟合，洛索洛芬钠渗透泵型控释片体外释药曲线符合零级释放特征。第三章洛索洛芬钠渗透泵型控释片的质量控制及稳定性研究药品质量的优劣直接影响到药品的安全性和有效性，关系到用药者的健康与生命安危。药品的质量标准是药品的纯度、成分含量、组分、生物有效性、疗效、毒副作用、热原度、无菌度、物理化学性质以及杂质的综合表现。本章根据药物质量研究指导原则的要求，对洛索洛芬钠渗透泵型控释片的质量标准进行研究。制剂稳定性对保证制剂安全有效是非常重要的，为了提高制剂质量，保证药品疗效与安全，必须重视和研究制剂的稳定性。经过制剂基本项目考察合格的样品，还必须进行稳定性试验，以考察制剂在温度、湿度、光线的影响下随时间变化的规律，为样品的生产、包装、贮存、运输条件提供科学依据。主要考察项目包括外观、含量、有关物质、释放度，本文参照中国药典2005版二部附录XIXC药物制剂稳定性试验指导原则有关内容，对自制洛索洛芬钠渗透泵型控释片进行相关考察。1仪器与试药日本岛津高效液相色谱仪（VPODS日本岛津色谱柱、LC10AT输液泵、SPD10A紫外检测器、CSLIGHT色谱工作站）；AS10200A超声波清洗机（天津奥特赛恩斯仪器公司）；TU1901双束紫外可见分光光度计（北京普析通用仪器有限公司）；AG285型电子天平（上海梅特勒托利多公司）；RCZSB药物溶出仪（天津大学无线电厂）。洛索洛芬钠渗透泵型控释片（自制）；洛索洛芬钠对照品（中国药品生物制品检定所，批号100638200401）；甲醇（色谱纯，天津市四有精细化学品有限公司）；盐酸（分析纯，湖南化学试剂厂）；氢氧化钠（分析纯，湖南师范大学试剂厂）；其它试剂均为分析纯。2方法与结果21外观性状取洛索洛芬钠渗透泵型控释片三批样品，对片剂外观进行检查，结果表明本品为白色圆形包衣片，片剂光滑圆整，无斑点、阴影或麻点。22释放度检查221方法学考察同第一章“23”项下。222释放曲线的绘制按第一章“23”释放度测定方法项下，取本品三批样品批号090705、090710、090713，进行释放度测定，结果见FIG31。图31三批洛索洛芬钠渗透泵累计释放曲线FIG31THEACCUMULATIVERELEASECURVEOFLOXOPROFENSODIUMOSMOTICPUMPTABLETS223释放度限度的确定根据洛索洛芬钠渗透泵型控释片三批样品的累积释放度曲线实验结果，并参照中国药典2005版二部附录XD项下对口服固体制剂释放度限度的规定，制定本品的释放度限度为本品每片在2小时累积释放量为20，6小时累积释放量为55，12小时累积释放量为90以上。23样品的含量测定及其限度按第一章“22”含量测定方法项下，对三批样品（批号090811、090817、090822）的洛索洛芬钠含量进行测定，计算标示含量及RSD，结果见TAB31。根据三批样品的含量测定结果，制定本品的含量限度为含洛索洛芬钠应为标示量的95105。表31含量测定结果TAB31THECONTENTDETERMINATIONOFTHEOSMOTICPUMPTABLETSBATCHTHERELATIVECONTENTOFLOXOPROFENSODIUMMEANRSD09081199749908995699460340908179975100231006710022046090822991399759941994303124有关物质分析方法的建立241色谱条件色谱柱日本岛津VPODS（150MM46MM,5M）；流动相甲醇水冰醋酸三乙胺（60040011）；检测波长222NM；流速100ML/MIN；进样量20L；柱温25。242最低检测限和定量限的确定精密量取对照品溶液适量，用流动相逐级稀释成一系列浓度的稀溶液，分别精密量取各稀溶液20L进样测定。采用信噪比法43，取峰高为噪音23倍的进样量作为最低检测限，峰高为噪音10倍的进样量作为最低定量限。实验结果进样浓度为007G/ML时，主峰的S/N3，即最低检测限为007G/ML20L14NG；进样浓度为026G/ML时，主峰的S/N10，即最低定量限为026G/ML20L52NG。243降解产物对主药测定的影响4446（专属性考察）酸破坏样品的制备取洛索洛芬钠渗透泵片粉末适量（约相当于洛索洛芬钠125MG），置100ML烧瓶中。加入01MOL/L的盐酸溶液10ML，振摇使溶解，在80水浴中加热1H，放冷，取出，用01MOL/L氢氧化钠溶液调PH至中性，加流动相定容至刻度，滤过，作为酸破坏样品。碱破坏样品的制备取洛索洛芬钠渗透泵片粉末适量（约相当于洛索洛芬钠125MG），置100ML烧瓶中。加入01MOL/L氢氧化钠溶液10ML，振摇使溶解，在80水浴中加热1H，放冷，取出，用01MOL/L的盐酸溶液调PH至中性，加流动相定容至刻度，振摇使溶解，滤过，作为碱破坏样品。中性溶液加热破坏样品的制备取洛索洛芬钠渗透泵片粉末适量（约相当于洛索洛芬钠125MG），置100ML烧瓶中。加入蒸馏水10ML，振摇使溶解，在120加热1H，放冷，取出，加流动相定容至刻度，滤过，作为中性溶液加热破坏样品。以上样品经适当处理后，进样20L，进行HPLC分析，记录色谱图。结果表明洛索洛芬钠渗透泵片在中性溶液120加热破坏中未见明显的降解产物，在01MOL/L的盐酸和01MOL/L氢氧化钠溶液中有不同程度的降解，降解产物不干扰主药的测定。244洛索洛芬钠渗透泵型控释片有关物质检查供试药品洛索洛芬钠渗透泵片，批号090703、090715、090721；实验方法有关物质检查法即主成分自身稀释对照法；实验结果有关物质检查结果见TAB33、TAB34、TAB35、TAB36。2441有关物质的测定高效液相色谱法（主成分自身稀释对照法）精密称取洛索洛芬钠渗透泵片适量（约相当于洛索洛芬钠25MG），置25ML容量瓶中加蒸馏水溶解并定容至刻度，精密量取5ML于50ML容量瓶中，用流动相定容至刻度，摇匀，滤过，续滤液作为供试品溶液；精密量取续滤液1ML于100ML容量瓶中，用流动相定容至刻度，摇匀作为对照溶液。精密量取对照溶液20L注入色谱柱，调节检测灵敏度，使主成分谱峰高约为满量程的20，精密量取供试品溶液和对照溶液各20L分别注入液相色谱仪，记录色谱图至主成分保留时间的2倍。供试品色谱图中如有杂质峰（辅料、溶剂峰除外），量取各杂质峰面积之和不得大于对照溶液主峰面积（1）。2442有关物质检查限度的确定试验结果表明，三批样品的总杂质量均小于1。参照化学药物杂质研究指导原则，并结合样品的自身理化性质和实测情况，将本品的有关物质限度定为总杂质量不得超过1。25洛索洛芬钠渗透泵型控释片初步稳定性研究251考察项目与检测方法参照药物稳定性实验指导原则对药物制剂稳定性实验的要求，以性状、释放度、有关物质、标示含量为重点考察项目，对洛索洛芬钠渗透泵型控释片进行稳定性实验，考察实验前后各考察指标是否有明显变化。各考察项目的检测方法均参照上述质量标准研究项下的相关方法。1性状观察实验前后洛索洛芬钠渗透泵片的外观性状是否有明显变化；2释放度检查按质量标准中释放度检测方法进行，测定2H、6H、12H的累积释放度；3含量测定按质量标准中含量测定方法进行；4有关物质按质量标准“244”项下进行测定；252影响因素试验将已经过全检合格的090703批洛索洛芬钠渗透泵片置表面皿中，作为供试样品，分别进行下列光照、高温、高湿实验。2521光照试验取样品置于表面皿中，室温条件下，将放有样品的表面皿置于光照强度为4500500LX的光照箱中进行光照试验。分别于0、5、10D取样，按考察项目下的方法检测。结果见TAB32。表32洛索洛芬钠渗透泵片光照稳定性试验N3TAB32THEDETERMINATIONRESULTSOFLOXOPROFENSODIUMOSMOTICTABLETSINSTRONGLIGHTTESTN3ACCUMULATIVERELEASED（）TIMEDAYAPPEARANCE2H6H12HCONTENT（）RELSUB（）0HARDANDSMOOTH213565954100320555HARDANDSMOOTH205553946997507210HARDANDSMOOTH2015529329958081结果表明，本品在强光照射下放置10D后，各项考察指标与0D数据比较，均未见明显变化。2522高温试验取样品，置表面皿中，于60烘箱中放置，分别于0、5、10D取样，按考察项目下的方法检测。结果见TAB33。结果表明，本品在60高温条件下放置10D，各项考察指标与0D数据比较，均未见明显变化。表33洛索洛芬钠渗透泵片高温稳定性试验N3TAB33THEDETERMINATIONRESULTSOFLOXOPROFENSODIUMOSMOTICTABLETSINHIGHTEMPERATURETESTN3ACCUMULATIVERELEASED（）TIMEDAYAPPEARANCE2H6H12HCONTENTRELSUB0HARDANDSMOOTH192557953100560645HARDANDSMOOTH184553941997207310HARDANDSMOOTH17954694899850762523高湿试验取样品，置表面皿中，分别放置于相对湿度为75，925（25）密闭容器中，分别于0、5、10D取样，按考察项目下的方法检测。结果见TAB34。表34洛索洛芬钠渗透泵片高湿稳定性试验N3TAB34THEDETERMINATIONRESULTSOFLOXOPROFENSODIUMOSMOTICTABLETSINHIGHHUMIDITYTESTN3ACCUMULATIVERELEASEDRHTIMEDAYAPPEARANCE2H6H12HCONTENTRELSUB0HARDANDSMOOTH20454895710013043755HARDANDSMOOTH192542946996705510HARDANDSMOOTH18753693596590539255HARDANDSMOOTH191543943982106410HARDANDSMOOTH1795349389728072结果表明，本品在高湿度下放置10D，除片面吸潮，片重有增加外，其他各项考察指标与0D数据比较，均无明显变化。253加速试验供试品三批，按市售包装，在稳定402、相对湿度755的条件下放置3个月，所用设备应能控制稳定2、相对湿度5，并能对真实温度与湿度进行监测，在试验期间第1、2、3个月末分别取样一次，按稳定性重点考察项目检测。结果见TAB35。表35洛索洛芬钠渗透泵片加速试验TAB35THEDETERMINATIONRESULTSOFLOXOPROFENSODIUMOSMOTICTABLETSINACCELERATEDTESTACCUMULATIVERELEASEDBATCHTIMEMONTHAPPEARANCE2H6H12HCONTENTRELSUB0907030HARDANDSMOOTH19557894599760541HARDANDSMOOTH207563932100340642HARDANDSMOOTH19156493999530663HARDANDSMOOTH19657193499410730907150HARDANDSMOOTH212545951100640431HARDANDSMOOTH205536954100970572HARDANDSMOOTH20754894399350623HARDANDSMOOTH19954294699620680907210HARDANDSMOOTH20856394699750521HARDANDSMOOTH201568951100780562HARDANDSMOOTH21255793999820633HARDANDSMOOTH2065729549969071结果本品三批在模拟市售包装后经加速试验3个月，各项考察指标与0月检测结果比较均未见明显变化。3讨论31关于质量标准的研究根据含量测定方法的选择原则，制剂的含量测定应首选色谱法43。高效液相色谱法测含量，具有专属性强、灵敏度高等特点。本品3批样品释放度试验结果12H平均累积释放量为标示量的90以上，符合释放度限量的常规要求，说明本方法用于测定洛索洛芬钠渗透泵型控释片的释放度切实可行。试验结果表明，洛索洛芬钠渗透泵型控释片，符合零级释放特征，且制备工艺简单稳定，适合工业化大生产，具有良好的开发应用前景。本课题依照中国药典2005版二部附录中关于控释片检测项下要求，通过对洛索洛芬钠渗透泵片的性状、释放度、含量测定及有关物质的考察，结果均符合控释片的质量要求。研究结果表明该制剂制备工艺科学、合理、可行，质量标准可控。32关于稳定性研究药品的稳定性是指原料药及制剂保持其物理、化学、生物学和微生物学性质的能力。稳定性研究是药品质量控制研究的主要内容之一，与药品质量研究和质量标准的建立紧密相关。稳定性试验包括影响因素试验光照、高温、高湿、加速试验与长期试验。影响因素试验结果可知，本品在4500LX光照、60高温及RH925高湿条件下放置10D，除在高湿条件下片面有吸潮，其他试验条件下各项考察指标与0D数据比较，均无明显变化，表明本品在光照、高温及高湿环境中放置，内在质量均较稳定。由于时间原因，加速试验仅考察了3个月。通过加速试验结果可见，本品模拟市售包装后，在温度402，RH75条件下放置3个月，各项考察指标与0月检测结果基本一致，表明本品经加速试验3个月，质量稳定。对于长期试验由于留样时间较短，不能系统的将结果阐述，有待于后续工作的补充。4小结建立高效液相色谱法对洛索洛芬钠渗透泵型控释片的含量和有关物质进行测定，同时建立了洛索洛芬钠渗透泵型控释片的质量标准。对稳定性初步考察，进行影响因素试验和加速试验，考察释放度、有关物质、含量等均未超出规定范围，为药品的生产、包装、储存提供了科学依据。第四章洛索洛芬钠渗透泵型控释片在大鼠体内初步药动学研究随着科学技术的发展及研究的深入，人们逐渐认识到药物制剂所产生的药理效应是受到各种复杂因素的影响，药效不仅与药物的化学结构有关，而且还受到各种制剂因素和生物因素的影响。因此，研究药物在体内的吸收、分布、代谢和排泄过程的各种机理和理论，研究各种剂型因素和生物因素对药效的影响，对控制药物制剂的内在质量，确保药物的最终安全和有效，具有十分重要的理论和现实意义。本章对市售片及自制洛索洛芬钠渗透泵片的药代动力学和生物利用度进行考察比较，用药动学参数CMAX、AUC等来证实洛索洛芬钠渗透泵片的控释效果。1仪器与试药日本岛津高效液相色谱仪（VPODS日本岛津色谱柱、LC10AT输液泵、SPD10A紫外检测器、CSLIGHT色谱工作站）；YKH型涡旋混合器（江西医疗器械厂）；DL802B型离心沉淀机（上海安亭科学仪器厂）。受试制剂洛索洛芬钠渗透泵型控释片（自制）；参比制剂洛索洛芬钠片（上海三共制药有限公司）；对照品洛索洛芬钠对照品（中国药品生物制品检定所，批号100638200401）；肝素钠（1012500U，天津生物化学制药厂）；甲醇（色谱纯，天津市四有精细化学品有限公司）；其它试剂均为分析纯。2方法与结