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低温诱导染色体加倍,1、学习低温诱导植物染色体数目加倍的方法2、理解低温诱导植物细胞染色体数目加倍的作用机制,一.实验目的,低温和秋水仙素相似,处理植物分生组织细胞,能够抑制纺锤体的形成,导致分裂后期染色体不能移向两极,细胞加大而不分裂,着丝点分裂后的染色体仍在一个细胞中,使细胞中的染色体数目加倍。,二.实验原理,选怎样的材料进行该实验?对材料要进行怎样的处理?,思考?,实验材料,三.实验材料用具,培养皿、滤纸、纱布、烧杯、镊子、剪刀、显微镜,载玻片、盖玻片、冰箱,无水酒精,冰醋酸,体积分数为15的盐酸溶液,体积分数为95的酒精溶液,改良苯酚品红染液,注意:盐酸有刺激性和腐蚀性,应小心使用,避免与皮肤和眼睛接触。,实验用具,一)根尖的培养,把洋葱放在盛满水的广口瓶上,让它的底部接触瓶内的水面,室温培养3-5d。,四.实验过程,二)低温诱导,当根长到lcm时,把数个装置连同材料分成3份:第一份放入冰箱内0低温下培养第二份放入冰箱内4低温下培养最后一份仍留在25下培养各处理36h,三)取材、固定根尖,剪取以上3种处理的根尖,每个根尖为0.51cm,分别放入卡诺氏固定液中浸泡1520min,然后用体积分数95酒精冲洗2次,贴好标签,卡诺氏固定液作用是什么?杀死细胞,固定根尖形态,维持染色体结构的完整性,使细胞分裂固定在某一个时期。,四)制作装片,取固定好的根尖,依次进行:1.解离:滴加3-4滴解离液进行3-5min的解离2.漂洗:用清水在载玻片上漂洗5次,约10min3.染色:滴加3-4滴改良苯酚品红染液进行3-5min4.制片:加一滴清水在根尖上,盖上盖玻片,注:染色时间要严格控制,不足时染色体看不清,染色过度,染色体一团糟,无法分辨,五)观察装片,先用低倍镜寻找染色体形态较好的分裂相,再换上高倍镜并调节细准焦螺旋和反光镜,使物像清晰,仔细观察,辨认哪些细胞发生染色体数目变化,设计实验表格:,五.实验结果,1.体积分数为15%的盐酸溶液在本实验中起什么作用?体积分数为95%的酒精又起什么
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