肝炎病毒—

乙型肝炎病毒 HBV,Hepatitis Virus,主要包括,甲型肝炎病毒 HAV,丙型肝炎病毒 HCV,丁型肝炎病毒 HDV,戊型肝炎病毒 HEV,第28章 肝炎病毒,甲型肝炎病毒Hepatitis A virus,1973年Feinstone首次从病人粪便中发现HAV,一、生物学特性,1、形态结构：,2732nm 小球形颗粒，单正链RNA，无包膜,2、抗原,病毒衣壳抗原HAV Ag，仅一个型别，可诱生中和抗体,4、抵抗力：,3、动物模型与细胞培养,耐60 1小时；对乙醚、酸处理均有抵抗力,动物接种 HAV易感动物有黑猩猩、狨猴、猕猴细胞培养 常用细胞：原代肝细胞和猴胚肾细胞 生长特点：增殖慢，不引起细胞裂解 不出现明显的病变 常用免疫荧光等方法检测,二、致病性与免疫性,1、传染源：甲肝病人和隐性感染者,2、传播途径：粪-口途径传播,Source:Viral Hepatitis and Liver Disease 1984;9-22J Infect Dis 1989;160:887-890,Feces,Serum,Saliva,Urine,100,102,104,106,108,1010,Concentration of Hepatitis A Virusin Various Body Fluids,Body Fluid,Infectious Doses per ml,3、临床特征：,隐性感染多临床表现为恶心、呕吐、食欲减退、 黄疸、肝脾肿大、血清转氨酶升高等一般为自限性疾病，预后良好，不发展成 慢性肝炎和慢性携带者。,4、致病机制,病毒直接损伤主要与免疫病理反应有关,HAV的致病性,粪口途径传播,小肠淋巴结中大量增殖,入血并形成病毒血症,肝脏为最终靶器官（病毒直接损伤或免疫病理作用）,通过胆汁随粪便排出体外,5、免疫性,无论显性感染还是隐性感染 均能产生抗-HAV的 IgM和IgG抗体,抗-HAV的IgM在感染早期出现 阳性可作为甲肝的确诊依据,抗-HAV的IgG在恢复期出现 有保护作用，维持多年,甲型肝炎的临床表现与血清学反应,三、微生物学检查,一般不做病毒的分离培养检测血清抗体：感染早期可检测抗HAV IgM 流行病学调查可检测抗HAV IgG检测抗原：免疫荧光染色法检测病毒RNA：分子生物学方法,四、防治原则,控制传染源,隔离治疗急性期病人,切断传播途径 养成良好的卫生饮食习惯，加强食物、水源和粪便管理,防,保护易感者 被动免疫： 丙种球蛋白 主动免疫： 减毒活疫苗（H2株）或灭活疫苗,治： 保肝治疗，休息 预后好,乙型肝炎病毒Hepatitis B virus,HBV感染的临床类型,急性肝炎慢性肝炎无症状携带者重症肝炎与肝硬化和肝癌密切相关,一、生物学特性,1、 形态结构： 病人血液中可找到三种不同形态颗粒 大球形颗粒、小球形颗粒、管形颗粒,Dane颗粒( 大球型颗粒，有感染性的完整成熟的HBV颗粒 ）,42nm 直径的球形颗粒,核心：DNA-不完全双链环状 DNA聚合酶衣壳 ：双层衣壳 外衣壳 = 包膜(脂质双层+蛋白质) HBsAg等 内衣层 = HBcAg,病毒衣壳，直径22nm，仅含有HBsAg,小球形颗粒,管形颗粒：,直径22nm ，长100 nm-700 nm，仅含有HBsAg,2、HBV的基因结构与功能基因组为不完全双链环状DNA 长链（负链），长度固定，3200 bp 短链（正链）：长链的50%99% 负链含4个ORF： S区、C区、P区、X区,S：表面抗原基因Pre-S2：前表面抗原2基因C：核心抗原基因 PreC：前核心抗原基因X：X基因P：P基因Polymerase：多聚酶基因RNaseH：RNA酶H基因S-mRNA：转录S的mRNAC-mRNA：转录C的mRNADR1、DR2：直接重复序列1、2,乙型肝炎病毒基因结构模式图,S区：由S基因、PreS1和PreS2基因组成 编码HBsAg、PreS1、PreS2 C区：由前C和C基因 C基因编码核心蛋白HBcAg Pre-C与C基因共同编码Pre-C蛋白 Pre-C蛋白经切割加工后形成HBeAg P区：编码DNA多聚酶 X区：编码HBxAg,3、HBV的复制,表面抗原（HBsAg）,存在于三型颗粒中，病毒的外衣壳蛋白HBV感染的主要标志 具有抗原性，可刺激机体产生保护性抗体-抗HBs制备疫苗的最主要成分,4、抗原组成,有四个不同亚型：adr, adw, ayr, ayw 有共同的a抗原表位 有两组互相排斥的抗原表位（d/y, w/r）,仅存在于Dane颗粒中，病毒内衣壳蛋白血液中检查不到，可在肝细胞表面存在引起细胞免疫，清除HBV感染细胞起作用抗原性强，能刺激机体产生抗体-抗HBc 抗HBc IgM：提示病毒在复制 抗HBc IgG：血中持续时间较长，但无保护作用,核心抗原（HBcAg）,e 抗原 （HBeAg）,可溶性蛋白，游离存在于血循环中为HBV复制和有强传染性的一个指标能刺激机体产生抗体-抗HBe 对HBV的感染有一定保护作用 出现是预后良好的征象,常规细胞培养还未获得成功黑猩猩是对HBV最敏感的动物目前采用的是病毒DNA转染的细胞培养系统，将病毒DNA导入细胞，细胞表达病毒抗原,5、细胞培养及动物模型,6、抵抗力,100 10分钟或0.5%过氧乙酸能灭活,抵抗力强于HAV，一些常用方法效果不好不能被70%乙醇灭活,1、传染源 ：乙型肝炎患者（急性或慢性） 无症状HBsAg携带者,2、传播途径： 血液、血制品等传播（血制品、注射、外科等） 母 - 婴传播（胎儿期、围产期、哺乳） 性传播 生活密切接触传播,二、致病性与免疫性,3. 致病机制,HBV的致病机制尚未完全清楚 免疫病理反应以及病毒与宿主细胞间的相互作用是肝细胞损伤的主要原因,1. 细胞免疫及其介导的免疫病理反应 特异性CTL的直接杀伤作用 细胞因子的抗病毒效应,细胞免疫具双重性 细胞免疫是彻底清除病毒的主要因素。 过度的细胞免疫反应引起大面积的肝细胞损伤，导致重症肝炎。 细胞免疫功能低下，不能有效清除病毒，导致慢性感染。,2.体液免疫及其介导的免疫病理反应 HBsAg和抗-HBs的免疫复合物沉积于肝内，可使肝毛细管栓塞，导致急性肝坏死，表现为重症肝炎。免疫复合物沉积于肾小球基底膜、关节滑液囊等处，激活补体，导致型超敏反应,3.自身免疫反应引起的病理损害 HBV感染使肝特异性脂蛋白抗原（liver specific protein, LSP）暴露，LSP作为自身抗原诱导机体产生自身抗体，通过直接或间接作用，导致肝细胞损伤。,过分强烈的细胞免疫 大面积肝细胞损伤 爆发型肝炎（重症肝炎） 免疫功能正常 隐性感染或急性肝炎 免疫功能低下 慢性肝炎或慢性活动性肝炎,S基因变异：a抗原表位基因发生变异，导致HBsAg抗原性改变，出现免疫逃逸和“诊断逃逸”。PreC基因的变异：1896 nt G-A突变导致第28位TGG变为TAG，使PreC基因不能转译出完整的HBeAg。C基因的变异，导致HBcAg抗原位点的改变，出现免疫逃避。,4. 病毒变异与免疫逃逸,5、与原发性肝癌关系,流行病学方面,病毒分子结构,三、微生物学检查,1、检测病毒抗原抗体系统,HBsAg-抗- HBs,HBeAg-抗- HBe,抗- HBc等,2、检测血清HBV DNA：PCR法,3、检测血清DNA多聚酶,HBV抗原、抗体检测结果的临床分析,HBsAg HBV感染的重要指标 感染早期出现 急性肝炎恢复后14个月内消失 持续6个月以上提示为慢性肝炎或HBV携带者 抗-HBs （HBsAb） 中和抗体 见于恢复期、既往感染、疫苗接种后 阳性提示机体对乙肝有免疫力,HBcAg不易检出阳性提示病毒颗粒存在血液具有传染性抗- HBc - IgM 阳性提示HBV处于复制状态，具有强的传染性抗- HBc - IgG 低滴度提示既往感染，高滴度高提示急性感染,HBeAg阳性提示病毒在体内复制，具有传染性抗-HBe（HBeAb） 机体获得免疫力病毒复制减弱传染性降低,急性乙型肝炎感染的临床表现与血清学反应,Typical Serologic CourseProgression to Chronic HBV Infection,Weeks after Exposure,Titer,IgM anti-HBc,Total anti-HBc,HBsAg,Acute(6 months),HBeAg,Chronic(Years),anti-HBe,0,4,8,12,16,20,24,28,32,36,52,Years,四、防治原则,一般性预防 控制传染源，切断传播途径，筛选供血员人工主动免疫 疫苗（血源疫苗、基因工程疫苗)人工被动免疫 含高效价抗-HBs的人血清免疫球蛋白（HBIg）,治疗,无特效方法广谱抗病毒药物、调节机体免疫功能及护肝药物联合应用干扰素有一定效果,丙型肝炎病毒Hepatitis C virus,一、生物学特性 55-65 nm 球形，单正链RNA病毒，有包膜,1、 传播途径似HBV，主要经输血或血制品传播，性接 触传播和母婴传播也是重要的传播途径 2、临床表现：急性肝炎、慢性肝炎或无症状携带者， 感染易慢性化，与肝硬化或肝癌的发生有密切关系 3、感染后免疫力不强,二、致病性与免疫性,无特异性方法，主要切断传播途径 （筛选献血员，加强血制品管理等） 疫苗研制有困难（抗原性不强，易变异）,三、微生物学检查：,检测抗-HCV 和 HCV-RNA,四、防治原则：,丁型肝炎病毒Hepatitis D virus,意大利学者Rizzetto于1977年首先发现，又称 抗原,直径35-37nm，球形 负单链环状RNA 衣壳为HBsAg 内含HDV RNA 和丁型肝炎病毒抗原 HDAg,为缺陷病毒，辅助病毒为HBV传播途径与 HBV 相同引起丁型肝炎，两种感染方式 共同感染：急性丁型肝炎 重迭感染: 慢性丁型肝炎,诊断