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,制作人:黄俊波 专业:中西医结合基础,骨髓间充质干细胞,主讲内容:,2017/11/10,一,五,四,BMSCs分化,BMSCs运用,干细胞的分类:,2017/11/10,2017/11/10,骨髓的分类:,2017/11/10,骨髓,黄骨髓,红骨髓,血窦,造血组织,造血干细胞,骨基质细胞(间充质干细胞),一、BMSCS概念:,骨髓间充质干细胞(bone mesenchymal stem cells,BMSCs) 是在骨髓中发现的一种起源于胚胎中胚层,具有自我复制和多向分化潜能的非造血干细胞。,一、BMSCs概念:,BMSCs对骨髓造血干细胞起支持、诱导作用。,2017/11/10,一、BMSCS概念:,骨髓间充质干细胞的基本概念是上世纪70年代,Friedenstein等在做全骨髓培养时报道了骨髓中有骨髓多能基质干细胞。由于呈成纤维细胞样外观也被称为集落形成单位成纤维细胞(clony forming units fibroblasts,CFU-F)或骨髓基质细胞(bone mesenchymal stem cells BMSCs)。,2017/11/10,二、BMSCS微观结构:,BMSCs有粗细不均的胞质突起,透射电镜下胞质中有丰富的细胞器,如核糖体、粗面内质网、分泌小泡、线粒体等,细胞表面可见微绒毛突起,表明该细胞具有较强的蛋白质合成能力,是其能够分泌许多生长因子,维持自身生长分化,支持造血干细胞造血的结构基础。,2017/11/10,二、BMSCS微观结构:,相邻细胞间还可见到一些细胞膜局部电子密度增高、细胞膜内颗粒相互融合的缝隙连接。缝隙连接可加强相邻细胞的连接,但更重要的是细胞的一种通讯结构,有利于细胞间信息传递,与细胞分泌、增殖、分化相关。,2017/11/10,三、BMSCs的分离、培养、鉴定:,目前用于分离BMSCs的方法主要有密度梯度离心法、贴壁筛选法、流式细胞仪分离法和磁珠分选法。流式细胞仪和磁珠分选法虽然可获得较纯的细胞,但是费用昂贵、操作复杂、不适合临床应用。,2017/11/10,三、BMSCs的分离、培养、鉴定:,BMSCs的培养方法有二维培养(极低密度传代培养,低氧张力下培养) 、三维培养、静止性细胞培养、 动力性细胞培养等。,2017/11/10,三、BMSCs的分离、培养、鉴定:,BMSCs没有特异性的抗原表型,对其鉴定还没有直接的方法。,2017/11/10,四、BMSCs的高分化能力和多分化潜能:,对BMSCs进行传代培养时可传25代,扩增50倍以上。 对细胞周期研究发现,绝大部分细胞处于GOG1期。这提示其有高分化能力。骨髓中所含的少量多能MSCs是多种细胞的前体细胞。其在不同的诱导条件下, 能向成骨细胞、成软骨细胞、成纤维细胞、脂肪细胞等中胚层组织细胞分化。,2017/11/10,2017/11/10,五、BMSCs的运用:,随着细胞学和组织工程学的发展,利用BMSCs的多向分化性及其可在体外表达多种外源目的基因的特性,将其作为种子细胞用于细胞治疗和基因治疗的研
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