抗化学性肝损伤功能食品.doc

化学性肝损伤一、肝脏的“高负荷”肝脏是人体内最大的实质性腺体，是体内新陈代谢的中心站，被喻为“人体最大的化工厂”，具有十分重要和复杂的生理功能（内）：1糖原生成、分解、异生，维持血糖浓度 2肝脏中的胆汁酸能促进脂类的消化与吸收 3肝脏除能合成本身所需蛋白质外，还能合成大部分血浆蛋白，如清蛋白、纤维蛋白原、凝血酶原等；4储存脂溶性维生素A、D、E、K及维生素B5能吞噬或胞饮血液中的细菌、衰老破坏的红细胞、病毒、抗原及变性蛋白体等，使血液净化6解除氨的毒性7在胚胎期，肝脏还能生成红细胞，具有造血功能作为人体中重要的解毒器官，是许多药物、外源性化学物质、氧化性毒物的重要靶点。二、肝损伤的危害肝损伤是多种严重肝脏疾病的发生、发展及最终走向肝功能衰竭的始动环节和共同途径。各种有害因素所致的肝损伤可表现为肝坏死、脂肪肝、胆汁郁积、肝纤维化、肝硬化及肝癌等。三、机制（参考文献 朱海波牡蛎提取物对化学性肝损伤保护作用的研究）1细胞崩解和死亡“亲肝毒物”涉及肝脏解毒功能，主要通过细胞色素P450酶系和一些基团(葡萄糖醛酸、硫酸酯、甲基、巯基、甘氨酸、谷氨酸、芳香基等)的结合作用。肝脏的解毒功能与肝脏的血供、细胞内酶系和肝脏的代谢功能有关。细胞色素 P450系有两种黄素蛋白，分别参与内源性和外源性化合物的代谢转化。但当细胞繁育机制失效时，有毒的代谢产物与蛋白质共价键结合，引起脂质过氧化，或引起蛋白质的硫代氧化，这些都可导致细胞崩解和死亡。2 肝细胞受损最基本的表现是质膜损伤 (1)D-gal（D-半乳糖）与肝细胞内尿苷二磷酸(UDP)结合，形成UDP-半乳糖胺复合物，使尿苷三磷酸(UTP)耗竭，致使RNA和蛋白质合成受阻，质膜结构蛋白合成减少，膜出现损伤(2)CCl4可通过早期溶膜作用直接破坏膜的结构导致质膜受损，细胞膜通透性增加。(3)各种化学性肝损伤中产生的自由基如 CCl3、活性氧等能与细胞膜上不饱和脂肪酸起作用，发生脂质过氧化作用从而破坏膜的完整性，自由基还能与膜蛋白质大分子进行共价结合而引起膜结构、功能完整性的破坏。而当细胞质膜受损时，膜通透性发生改变，影响细胞正常生理功能，当质膜完全失去完整性时，有小泡形成，小泡破裂后，细胞内容物溢出，最终导致细胞死亡。3 自由基引起肝细胞受损是肝细胞损伤的重要机制。自由基使构成细胞组织的各种物质，如脂质、糖类、蛋白质、脱氧核糖核酸(DNA)等所有的大分子物质，发生各种氧化反应，引起变性、交联、断裂等氧化伤害，进而导致细胞结构和功能的破坏，以及机体组织的损伤和器官的病变，从而导致伤害和病变。（1）CCl4经肝细胞微粒体内细胞色素P450酶系产生自由基(CCl3、CClO2、Cl)，使细胞膜、内质网膜等发生氯烷化和脂质过氧化，损伤膜的结构和功能。 CCl4在体内代谢生成CCl3自由基,后者可与氧发生反应生成CCl3OO，此种自由基在体内可通过两种方式损伤细胞,一种为直接途径,与膜蛋白或脂质结合,尤其是内质网系统,造成烷化反应以及酶的失活;另一种为间接途径,通过与细胞膜及不饱和脂肪酸的相互作用从而增强脂质过氧化反应，从而影响脂质代谢，同时，脂质过氧化自由基及其终产物MDA等过氧化脂质会使细胞膜的流动性和通透性发生障碍。（2）大剂量AP（扑热息痛或醋氨酚 非抗炎解热镇痛药）经肝脏P450代谢成半醌类中间产物，氧分子则活化成活性氧(O2-、H2O2等)，两者引起GSH（谷胱甘肽）耗竭，此时半醌类中间产物可与蛋白质和生物大分子进行共价结合，而活性氧还引起膜脂质过氧化。（3）氰化钾致细胞缺氧期间，能量不足，抑制了还原反应，分子氧氧化成毒性超阴离子O2-，继而引发自由基连锁反应，产生毒性自由基(如 H2O2、OH等)攻击细胞膜，诱发脂质过氧化反应毒害细胞。毒性自由基还可以与大分子物质 DNA、RNA 及蛋白质交联，破坏其结构和功能。线粒体功能失调使氧化磷酸化能力降低，ATP缺失而细胞死亡。缺氧、氧应急、低流量状态、中毒都可引起线粒体内膜受磷脂酶的降解而形成许多小孔，使其通透性增加，这些小孔的开放受线粒体内酸中毒抑制，但线粒体内碱中毒却可导致细胞死亡。4 引起肝脏中离子浓度变化D-gal、TAA（硫代乙酰胺）等引起肝细胞内Ca2+增多、Mg2+减少。Ca2+增多抑制线粒体功能，激活磷脂酶，分解膜磷脂，破坏溶酶体膜，使蛋白水解酶释放，使黄嘌呤脱氢酶转化为黄嘌呤氧化酶，加速氧自由基产生，从而使肝细胞损伤加剧。CCl3通过早期溶膜作用破坏膜的结构导致质膜受损，细胞膜通透性增大，因而K+顺浓度梯度漏出。5 引起代谢紊乱D-gal损伤可通过肝细胞的代谢紊乱而导致肝损伤。D-gal 与肝细胞内 UDP 结合形成复合物，使 UTP 耗竭、尿苷类化合物环化不能进行，致使 RNA 和蛋白质合成受阻，质膜结构蛋白合成减少，使 UDPG-焦磷酸转移酶活性和数量均下降，影响糖类(包括糖原和粘多糖)、RNA 和葡萄糖醛酸的合成，引起磷脂代谢障碍、膜损伤加重、Ca2+内流增加，严重者导致细胞中毒死亡。有研究表明TAA 也可诱导肝的代谢紊乱而致肝坏死。另外CCl4影响糖原合成。乙醇在微粒体内由乙醇脱氢酶氧化为乙醛，在乙醇脱氢酶作用下进一步氧化为乙酸。在对乙醇氧化的过程中引起氧化型的辅酶I向还原型辅酶I转化，细胞处于氧化还原状态。还原型辅酶I、高浓度的自由基和乙醛的堆积影响了肝脏对脂肪、糖类和蛋白质的代谢，结果导致脂肪酸代谢紊乱，糖原合成减少(低血糖等)，蛋白质合成受损和糖蛋白合成、分泌、排泌受阻等。脂肪酸的合成增加，L-甘油-3-磷酸和脂肪酸水平增加,导致TG合成增加,进而通过VLDL（低密度脂蛋白） 将这些脂质分泌入血肝脏合成TG超过VLDL的分泌能力,便会导致肝细胞内蓄积脂肪。四、原料与功效成分根据主要功效成分和保健作用,大致分为以下四类。（参考文献）1.由植物、中草药或其提取物研制而成。 如灵芝、大豆、枸杞、茶、黄芪、芦笋、当归、山楂、银杏、香菇等。这类植物具有活血化瘀、清肝解毒、强肝益肝的作用,从有效成分来看, 这些保健食品中含有多糖、黄酮类、甙类及萜类化合物,如大豆皂甙、银杏黄酮类、香菇多糖、黄芪多糖等, 具有提高免疫能力、抗脂质过氧化、抗肿瘤、抗衰老等生物功能。大豆 大豆中提取出的多烯磷脂酸胆碱和二烯磷脂酸胆碱在肝损伤早期能降低P450酶活，阻断线粒体氧化损伤，降低ALT和AST的活性；降低脂肪酸的积聚。（Navder K P,Dilinoleoyl phosphatidyl-choline is responsible for the beneficial effects of polyenyl phosphatidylch oline on ethanol-induced mito-chondrial injury in rate ） 也有研究证明大豆皂苷（五环三萜类化合物）有抗脂质过氧化的作用，防护ccl4对肝脏的损伤。2.目前公认的具有抗氧化、促进细胞增殖、提高免疫能力的营养物质 如牛磺酸、硒、维生素E、维生素C 等;（1）牛磺酸可以通过调节肝脏脂肪代谢，稳定细胞膜通透性，增加机体抗脂质过氧化能力，清除氧自由基，抑制细胞因子的异常升高，抑制胶原沉积，从而多方面、多环节、多层次的抑制酒精性肝损伤的发生与发展。牛磺酸通过加速或对肝细胞极低密度脂蛋白分泌的保护作用，防止高脂血清诱发的原代培养肝细胞脂肪病变。（2）维生素E和硒都是自由基清除剂,大剂量Vc能减轻细胞脂肪性病变,促进肝细胞再生及肝糖元的合成,增强肝脏的解毒功能。有研究表明对肝炎或肝性昏迷者,大剂量Vc确有治疗作用。3.由一些特殊动物如牡蛎、甲鱼、蚂蚁等研制而成。 谷丙转氨酶（ALT）和谷草转氨酶(AST)有研究（牡蛎提取物对化学性肝损伤保护作用的研究）表明：牡蛎提取物对CCl4所致的小鼠急性肝损伤有明显的保护作用，它可以抑制CCl4所致小鼠血清中 ALT、AST和LDH 的升高可以抑制H2O2所引起的细胞培养液中ALT、AST的升高。改善急性肝损伤的肝脏的显微结构，肝组织灶状坏死减少,范围减小,浊肿、气球样变及间质炎症减轻。牡蛎中含有大量的糖原，其提取物中糖原占 2040%。糖原是组织能源物质的储备形式，是体力脑力活动效率及持久力的物质保证，改善心脏及血液循环功能，并能增进肝脏的功能，具有保肝作用4.一些特殊生物因子如胎盘因子、多肽等。谷胱甘肽(GSH)能与进入体内的有毒化合物、重金属离子或致癌物质等相结合,并促其排出体外,起到中和解毒的作用。GSH 还可抑制乙醇侵害肝脏产生脂肪肝。五、国内保健品现状国家食品药品监督管理总局公布的国产保健食品中对化学性肝损伤有辅助保护作用的功能性食品共有146种（数据库中可查到）。产品名称金娜牌青清含片申请人中文名称文山县金达利三七生物科技有限责任公司申请人地址云南省文山县城开化北路保健功能清咽、对化学性肝损伤有辅助保护作用功效成分/标志性成分含量每100g含：总皂甙 2.0g、总黄酮 0.18g主要原料葛根、三七提取物、灵芝适宜人群咽部不适者、有化学性肝损伤危险者不适宜人群少年儿童食用方法及食用量每日2次，每次2片，含食产品规格0.8g/片保质期18个月贮藏方法置阴凉干燥处注意事项本品不能代替药物批准日期2005-03-07批准变更日期2006-02-13变更内容产品名称由金达利牌青清含片变更为金娜牌青清含片产品编号18942批准文号国食健字G20050150产品名称同仁堂牌警醒片受让方地址北京市海淀区上地信息路2号上地国际科技创业园C栋3层申请人中文名称北京同仁堂健康药业股份有限公司申请人地址北京市北京经济技术开发区景园北街2号58幢5层-13层保健功能对化学性肝损伤有辅助保护作用功效成分/标志性成分含量每100g含：牛磺酸 20.1g、维生素C 6.86g、L-肉碱 4.58g主要原料L-谷氨酰胺、牛磺酸、维生素C、L-肉碱酒石酸盐、葡萄糖酸锌、 碳酸镁、 维生素B1、葡萄糖、硬脂酸镁适宜人群有化学性肝损伤危险者不适宜人群无食用方法及食用量每日2次，每次2片产品规格450mg/片保质期24个月贮藏方法避光、通风、置阴凉干燥处注意事项本品不能代替药物批准日期2005-05-13备案日期2010-10-21备案内容备案日期：2008-03-25 申报单位名称变更:该申报单位已由北京同仁堂健康药业有限公司变为北京同仁堂健康药业股份有限公司 备案日期：2010-10-21 申报单位地址变更:该申报地址已由北京市海淀区上地信息路2号上地国际科技创业园C栋3层变为北京市北京经济技术开发区景园北街2号58幢5层-13层转让方中文名称北京健阳保健品制造有限公司转让方地址北京市平谷区东发工业科技园区1区8号受让方北京同仁堂健康药业有限公司批准转让日期2008-01-29产品编号19668批准文号国食健字G20050325L-肉碱又称左旋肉碱，是一种促使脂肪转化为能量的类氨基酸产品名称干元牌干元胶囊申请人中文名称日加满饮品（上海）有限公司申请人地址上海市嘉定区曹安路12号桥金园五路108号保健功能对化学性肝损伤有辅助保护作用、延缓衰老功效成分/标志性成分含量每100g含：谷胱甘肽 8390mg、牛磺酸 1600mg主要原料酵母提取物、牛磺酸、维生素E、维生素B1、维生素B2、维生素B6、食用香精适宜人群有化学性肝损伤危险者、中老年人不适宜人群少年儿童、孕妇食用方法及食用量每日1次，每次4粒，开封后请立即食用产品规格300mg/粒保质期18个月贮藏方法密封、置阴凉干燥处注意事项本品不能代替药物批准日期2005-04-25备案日期2011-06-20备案内容备案日期：2011-06-20 申报单位名称变更:该申报单位已由上海东锦饮品有限公司变为日加满饮品（上海）有限公司 申报单位地址变更:该申报地址已由上海曹安路十二号金宝工业园区变为上海市嘉定区曹安路12号桥金园五路108号产品编号3326批准文号国食健字G20050309产品名称普比欧牌金利胶囊申请人中文名称山东普比欧生物技术有限公司申请人地址济南市历下区中创开元山庄23号楼保健功能抗疲劳、对化学性肝损伤有辅助保护作用功效成分/标志性成分含量每100g含：总皂甙0.4g、总黄酮0.43g主要原料黄芪、西洋参、淫羊藿、油菜花粉、金银花、沙棘、木瓜、栀子、海狗鞭适宜人群易疲劳者、有化学性肝损伤危险者不适宜人群少年儿童食用方法及食用量每次2次，每次3粒产品规格0.25g/粒保质期24个月贮藏方法阴凉、干燥、通风处注意事项本品不能代替药物批准日期2005-04-22产品编号10210批准文号国食健字G20050287产品名称三奇堂牌京茶申请人中文名称北京三奇医药技术研究所申请人地址北京市昌平区城区镇超前路9号保健功能对化学性肝损伤有辅助保护作用、调节血脂功效成分/标志性成分含量每100g含：总皂甙 1.1g、粗多糖 620mg、总黄酮 1.46g主要原料绞股蓝、山楂、制首乌、橘皮、五味子、蒲公英、泽泻、枸杞子适宜人群有化学性肝损伤危险者、血脂偏高者不适宜人群少年儿童、孕妇食用方法及食用量每日3次，每次2袋，沸水冲泡饮用产品规格2.3g/袋保质期24个月贮藏方法置阴凉干燥处注意事项本品不能代替药物批准日期2005-03-29产品编号11379批准文号国食健字G20050215多糖具有抗病毒活性，改善血液循环；改善肝脏的血液循环就能提升其代谢能力，挽救由于炎症造成的肝脏的缺氧状况，回复肝功能。产品名称新动力牌甘保通胶囊申请人中文名称贵阳新动力绿色食品有限公司申请人地址贵州省贵阳市中华北路169号金辉大厦九楼保健功能对化学性肝损伤有辅助保护作用、改善胃肠道功能（润肠通便）功效成分/标志性成分含量每100g含：葛根素 14.4g、芦荟苷 0.07g主要原料葛根提取物、芦荟提取物适宜人群有化学性肝损伤危险者、便秘者不适宜人群少年儿童、孕产妇、哺乳期妇女及慢性腹泻者食用方法及食用量每日2次，每次2粒产品规格0.4g/粒保质期24个月贮藏方法置阴凉干燥处注意事项本品不能代替药物；食用本品后如出现明显腹泻者，请立即停止食用批准日期2005-06-24产品编号15301批准文号国食健字G20050492六、检测指标1 血清谷丙转氨酶（ALT）和谷草转氨酶(AST)细胞膜损伤后，其结构和功能完整性和稳定性破坏，通透性改变，主要存在肝细胞质中的酶就会进入血液循环系统，因此通过评估血清ALT和血清AST水平的改变可以反映四氯化碳在小鼠中引起的肝损伤程度。2 肝组织中丙二醛（MDA过氧化脂质降解产物）、还原性谷胱甘肽（GSH）和甘油三酯（TG）MDA、氧化型谷胱甘肽(GSSG) 反映了体内脂质过氧化的氧化程度及细胞受自由基攻击的程度。体内脂质过氧化反应是指活性氧(氧自由基)与多不饱和脂肪酸的反应，反应代谢产物脂质过氧化物( lipid peroxide，LPO) 的性质很不稳定，如MDA、氧化型谷胱甘肽(GSSG)等，在连锁反应中很快被分解，并衍生出多种不同的含氧功能基团。这些基团可引起细胞成分的损伤，造成细胞功能和结构损害，使组织发生继发性破坏。乙醛与半肤氨酸和谷肤甘肤(GSH)的酞基结合，使肝中GSH的浓度和活性降低，削弱谷胧甘肤清除有毒自由基的能力，从而导致细胞膜的过氧化损伤。酒精影响肝内脂类代谢，使甘油三酷增加，促进脂肪肝形成。七 机制肝损伤的化学机制主要通过细胞色素P450及其结合反应产生的中间代谢产物引起的损伤。化学性肝损伤主要与自由基损伤、抗氧化体系不足或耗竭、磷脂的崩解、钙超载有关。（1）自由基（Oxygenrfeeardieals，OFR）自由基是人体进行生命活动时所产生的一种活性分子。正常生理情况下，自由基在机体内能够持续不断的产生，并具有调节细胞间的信号传递、细胞生长、抑制病毒和细菌等生物学作用。然而，当人体处于病理状态，或在吸烟，过度饮酒和不健康饮食等因素影响下，或在放射线照射、环境污染等因素作用下，均会引起自由基过量产生。当自由基产生过多超过了机体的抗氧化防御能力或机体的抗氧化防御系统削弱时，自由基不能被及时清除，就会攻击细胞组织，造成蛋白质、核酸等生物大分子变性，导致细胞和组织器官发生氧化损伤，诱发各种疾病，并加速机体衰老。自由基介导的脂质过氧化作用在肝损伤启动和各种环节发挥着关键作用。肝脏因其独特的血管和代谢功能，是药物和外来物质代谢的主要器官。在肝脏正常代谢过程中就存在有自由基反应，当机体摄入大量外源性药物或毒物，或肝脏处于病理状态如病毒感染、局部微循环障碍及炎症反应等均会产生大量自由基，若自由基产生超过了机体抗氧化系统的清除能力或抗氧化系统活性不足时，肝组织内自由基会急剧增多。OFR引起肝损伤的机制如下：首先，由于肝细胞膜存在多不饱和脂肪酸，OFR直接攻击肝细胞膜，引发脂质过氧化反应，生成过氧化脂质（Lipid peroxide，LPO），LPO可直接损伤肝细胞，还可进一步攻击细胞器生物膜，引发二次脂质过氧化反应，导致细胞器功能失调如线粒体呼吸功能受损，加重肝细胞损伤；OFR抑制细胞膜Na+/K+ATP酶活性，导致细胞能量代谢障碍；其次，OFR可破坏细胞膜的完整性和稳定性，增加细胞膜通透性，导致钙离子、亚铁离子等离子内流增加，肝细胞亚铁离子增加会加速非酶促反应，生成自由基，加重肝损伤导致损伤肝细胞坏死；另外，OFR还可抑制多种酶的活性或改变其活性，干扰细胞内正常的酶促反应，细胞正常功能被破坏，如导致体内抗氧化酶活性下降，抗氧化防御能力降低，自由基不能及时清除，引发氧化应激；此外，OFR可与DNA分子反应，破坏分子构型和完整性造成DNA分子损伤，OFR主要通过破坏其氢键或改变其特殊密码、改变DNA多聚酶结合位点使DNA多聚酶发生错误旋转折叠、改变合成DNA模板结构等途径损伤DNA分子。由此可见，体内自由基的过度激活是肝细胞损伤重要机制之一。（2）抗氧化体系不足或耗竭正常情况下，自由基在机体内不断地产生和消除，不会对机体造成损伤，因为机体内存在两类抗氧化损伤的防护系统，一类是酶抗氧化系统包括过氧化氢酶、超氧化物歧化酶（super oxide dismutase，SOD）、谷胱甘肽过氧化物酶等；另一类是非酶抗氧化系统，包括存在于细胞脂质部分的维生素A（-胡萝卜素）、维生素E（-生育酚）、存在于细胞内外的抗坏血酸（维生素C）、还原型谷胱甘肽、褪黑素、-硫辛酸、微量元素铜、锌、硒（Se）等。它们可清除自由基、抑制自由基反应，保护细胞和组织不受自由基的损伤。当细胞，组织或机体产生过多氧化物，在机体抗氧化防御系统与自由基产生失衡时导致氧化应激（oxifative stress），最终造成DNA、蛋白质，脂类等生物大分子氧化损伤，引起细胞损伤。（3）磷脂的崩解（phospholipid breakdown）磷脂是甘油三酯中的一个或两个脂肪酸被含磷酸的其他基团所取代的一类脂类物质，是细胞膜的构成成分，具有亲水性和亲脂性重属性，对细胞的物质转运、吸收和代谢有重要作用。细胞膜磷脂被自由基攻击而崩解，磷脂酶A2、磷脂酶C等酶被激活催化细胞膜上的磷脂释放花生四烯酸、前列腺素、TXA2及PAF等介质，加重肝细胞损伤。（4）肝细胞钙超载钙对维持体内细胞正常生理状态，调节神经肌肉兴奋等有重要作用。钙稳态对维持细胞正常功能极为重要。四氯化碳（Carbon etrachloride，CCl4）、疏水性胆盐等细胞毒性物质，经肝脏细胞色素P450代谢产生自由基可直接攻肝细胞膜，发生脂质过氧化反应，破坏细胞膜完整性和稳定性，增加其通透性；破坏钙稳态，使钙离子跨膜内流增加。大量钙离子涌入细胞并主要聚集在线粒体内，会激活钙依赖蛋白酶，诱发黄嘌呤氧化反应生成更多的OFR，从而加重肝细胞损伤甚至导致肝细胞坏死。八CCl4肝损伤机制CCl4是氯化烷烃类化合物，造成的肝损伤是典型的自由基损伤，进入体内后，在肝细胞内质网中经亚铁细胞色素 P450依赖性混合功能氧化酶的代谢，生成活泼的三氯甲基自由基和铝自由基，并且可启动毒性更强的超氧阴离子(O2 )和羟自由基( OH)，这些自由基对肝细胞存在多种攻击方式：(1) 直接与细胞膜上的蛋白质及脂质结合，产生烷基化作用而使酶失活；(2) 抑制细胞膜和微粒体膜上钙泵的活性，使钙离子内流增加，引起细胞中毒坏死；(3)与细胞膜上的多不饱和脂肪酸起作用启动脂质过氧化作用，破坏细胞膜完整性致肝细