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文档简介

生理学实验设计(第二组)肾上腺素和去甲肾上腺素对心脏和血管作用的比较第二小组成员: 梁怀彬(20115610113)苏百晗(20115610120)刘鹤飞(20115610114) 李 丽(20115610109) 雷 冰(20115610107) 李春玲(20115610108) 第一实验室周六上午刘少云(20115610115) 指导老师:周伟民李曼曼(20115610110) 完成时间:2012年5月5日 肾上腺素和去甲肾上腺素对心脏和血管作用的比较1、 实验目的: 本实验的目的是以心搏能力和动脉血压为指标来对照观察肾上腺素和去甲肾上腺素分别对于心脏和血管的作用以及对二者影响的异同。进一步深刻体会体液调节对于心血管的作用机理。二、实验的基本原理: 肾上腺素对与受体都有激动作用,其与心肌细胞膜上相应受体结合后,使心率加快,心肌收缩力增强,心输出量增多,临床上常作为强心急救药;它对血管的影响要看所作用的血管壁上哪一类受体占优势,一般来说,在整体情况下,小剂量(或正常生理浓度下)肾上腺素是主要引起体内血液重新分配,对总外周阻力影响不大;而大剂量时使得外周阻力明显升高。 肾上腺素对血管的具体作用机理是:小剂量时主要结合受体,大剂量时主要结合受体。小剂量时,肾上腺素与血管平滑肌细胞膜上相应受体结合后,使得以受体占优势的皮肤、肾、胃肠等的血管收缩,但对于以受体占优势的骨骼肌和肝血管却起着舒张作用即表现为血液的重新分配,对总外周阻力影响较小;大剂量时,结合骨骼肌和肝血管平滑肌细胞膜上的受体,使其收缩。故大剂量时使得外周阻力明显升高。 去甲肾上腺素主要激活受体,所以其主要作用是使除冠状动脉以外的小动脉强烈收缩,以引起外周血管广泛收缩,外周阻力明显增大而最终使得血压升高,故临床常将其作为升压药;但对心脏的直接作用较小,而且在外源性给予时,常因明显升压作用而通过窦弓反射引起反射性心率变慢,从而掩盖了去甲肾上腺素对心的直接作用。三、实验材料与试剂实验(1)家兔, 20%氨基甲酸乙酯溶液(5ml/kg),0.5%肝素,生理盐水,5:100000肾上腺素溶液,1:10000去甲肾上腺素溶液实验(2)蟾蜍 任氏液 5:100000肾上腺素溶液,1;10000去甲肾上腺素溶液四、实验仪器与设备实验(1)哺乳动物手术器械一套。生物信号采集处理系统,兔手术台,动脉夹,动脉导管,张力换能器,铁支架,丝线,注射器。实验(2) 蛙类手术器械一套。生物信号采集处理系统,张力换能器,铁支架,双凹夹,试管夹,蛙心插管,蛙心夹,滴管,丝线。五、实验方法:实验(1)1试剂的配置:20%氨基甲酸乙酯 0.5%肝素 生理盐水 5:100000肾上腺素溶液 1:10000去甲肾上腺素溶液 2动物的分组与处理:取6只身体状况(体重、大小、健康状况等)基本相同的家兔,随机等分为两组,一组为在体实验组,另一组为在体对照组。3指标的观察:以动脉血压为指标,分析肾上腺素和去甲肾上腺素对血管活动的调节。实验(2)1试剂的配置:任氏液 5:100000肾上腺素溶液,1:10000去甲肾上腺素溶液2动物的分组与处理:取6只身体状况(体重、大小、健康状况等)基本相同的蟾蜍,随机等分为两组,一组为离体实验组,另一组为离体对照组。3指标的观察:以心率、心肌收缩力为指标,分析肾上腺素和去甲肾上腺素对心脏活动的调节。六、技术路线:实验(1)1、仪器装置 将动脉导管与压力换能器相连,通过三通开关用生理盐水充灌压力换能器和动脉导管,排尽压力换能器和动脉导管中的气泡,然后关闭三通开关备用。2、手术1)麻醉固定 家兔称重后从耳缘静脉缓慢注射20%氨基甲酸乙酯溶液(5ml/kg)。待兔麻醉后,仰卧固定在兔手术台上。2)手术操作 减去颈前部兔毛,沿正中线切开皮肤5-7cm,用止血钳纵向分离皮下组织于正中线分开颈部肌肉,暴露气管。在气管下方穿一根线备用,在甲状软骨下约1cm处剪一倒“T”型切口,插入气管插管,用备用线结扎并固定。在气管两侧找到并辨认迷走神经,交感神经,减压神经(即家兔的主动脉神经)以及颈总动脉。用玻璃分针先仔细分离右侧减压神经,然后分离右侧迷走神经、交感神经和颈总动脉。分别在各神经、血管下穿一根不同颜色的丝线备用。3)动脉插管 分离左侧颈总动脉2-3cm(尽可能向头端游离),远心端穿线并结扎,近心端用动脉夹夹闭,在血管下穿线备用。在耳缘静脉注射0.5%肝素生理盐水2ml,并在动脉导管尖端注入0.5%肝素生理盐水0.1ml。用眼科剪在结扎线的近端动脉上剪一斜切口,向心脏方向插入已准备好的动脉导管(注意管内不应有气泡),结扎固定。压力换能器与动物心脏应保持在同一水平。3、仪器连接与调试 1)仪器连接将压力换能器与生物信号采集处理系统相连。 2)调零、压力定标和制压 实验前,一般已调整好测量系统,实验过程中,勿轻易改动。4、观察项目1)记录正常血压放开动脉夹,记录静息状态下家兔动脉血压曲线,观察正常血压波动曲线。【动脉血压随心室的收缩和舒张而变化。心室收缩时血压上升,心室舒张时血压下降,这种血压随心动周期的波动成为“一级波”(心搏波),其频率与心率一致。动脉血压亦随呼吸变化,吸气时血压先是下降,继而上升,呼气时血压先是上升,继而下降。这种波动叫“二级波”(呼吸波),频率与呼吸频率一致。】2)静脉注射小剂量肾上腺素 耳缘静脉注射肾上腺素溶液0.2-0.3ml,观察血压的变化。3)静脉注射大剂量肾上腺素待动脉血压曲线恢复正常后,耳缘静脉注射肾上腺素溶液0.5-0.8ml,观察血压的变化。4)静脉注射去甲肾上腺素耳缘静脉注射1:10000去甲肾上腺素溶液0.2-0.3ml,观察血压的变化。实验流程:仪器装置麻醉固定手术操作动脉插管仪器连接与调试观察项目实验(2)1、取蟾蜍一只,用探针捣毁脑和脊髓,将其仰卧固定在蛙板上。用镊子夹起皮肤,然后将胸部软骨下方的皮肤剪出一个“V”字形切口,暴露出剑突。用镊子夹住剑突下端,在肌肉层上剪出“V”字形切口。再用粗剪刀沿正中线剪开胸骨,并把左右两侧胸骨完全剪掉,眼科剪仔细剪开心包膜,暴露心脏。2 结扎血管:在左右主动脉下穿一根线,用玻璃分针将心尖向上翻至背面,结扎静脉窦远心端(注意勿结扎住静脉窦),将心脏回复至原位。3 蛙心插管: 在左主动脉下穿两根线。用一根线结扎住左主动脉远心端,另一线备用。提起左主动脉远端缚线,用眼科剪在左主动脉上靠近动脉圆锥处剪一“V”形切口,将盛有少量任氏液的蛙心插管由此口插入主动脉,插至动脉圆锥时,略向后退,在心室收缩时,沿心室后壁向下插,经主动脉瓣插入心室腔内(不可插入过深,以免心室壁堵住插管下口)。若插管成功进入心室,管内液体会随着心室搏动而上下移动。用左主动脉近心端的备用线结扎插管,并将结扎线固定于插管侧面的小突起上。4游离心脏:提起插管,在结扎线远端分别剪断主动脉左右分支;剪断左右肺动脉和前后腔静脉,将心脏离体。用滴管吸进插管内的余血,加入新鲜任氏液反复冲洗数次,直至液体完全澄清。保持灌流液面高度恒定(1-2cm),即可进行实验。5 仪器连接:用试管夹将制备好的离体蛙心固定于支架上,在心脏舒张期用蛙心夹夹住心尖部,并连接到张力换能器上(勿让心脏受到过度牵拉)。将张力换能器的输出线与生物信号采集处理系统相连。6 观察项目 1)描记正常蛙心收缩曲线 幅度:代表心脏搏动的强弱 疏密:代表心率 规律性:代表心脏搏动的节律性 顶点水平:代表心室收缩的程度 基线:代表心室舒张的程度 2)肾上腺素的影响 在任氏液中滴加1-2滴5:100000肾上腺素溶液,观察曲线的变化。出现效应后,用新鲜任氏液换洗,直至心跳曲线恢复正常。 3)去甲肾上腺素的影响 在任氏液中滴加1-2滴1:10000去甲肾上腺素溶液,

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