真菌试验PPT课件.pptx

1 侵袭性真菌病的实验室检测 2 近20余年来深部真菌感染呈持续增多趋势 原因 高危人群增加深部真菌感染的基础疾患为HIV感染 47 4 恶性肿瘤 14 7 糖尿病 9 9 慢性肺部疾患 9 3 腹部和心脏手术 7 6 淋巴瘤 4 0 白血病 3 1 透析 3 1 和器官移植 1 3 等 3 侵袭性真菌病病死率高 侵袭性念珠菌病的病死率为10 49 侵袭性曲霉病可高达62 85 粒细胞缺乏患者曲霉感染病死率超过90 镰刀菌属感染病死率79 87 播散性接合菌病病死率96 赛多孢菌属感染病死率为58 4 侵袭性真菌病的实验室检测 侵袭性真菌病的诊断 1 病原真菌直接镜检 培养和组织病理学检查灵敏度差 耗时久 难以满足临床需要2 非侵袭性检测技术快速 敏感 特异性高 5 致病性真菌 组织胞浆菌 副 球孢子菌 皮炎芽生菌 足癣菌 孢子丝菌条件致病性真菌 念珠菌属 曲霉属 隐球菌属 毛霉属 青霉属 根霉属 犁头霉属 镰刀霉 肺孢子菌 6 最有价值的两个临床检测方法 半乳甘露聚糖 galactomannan GM 的检测 亦称GM试验 1 3 D 葡聚糖 glucan 的检测 亦称G试验或BG试验 7 G试验 1 3 D葡聚糖为真菌细胞壁成分 可在念珠菌属 曲霉属 毛孢子属 镰刀属 枝顶孢属和酵母属等所致侵袭性真菌病患者血清中存在 作为真菌抗原具有较高的特异性 原核生物 病毒和人体细胞都不存在这种多聚糖 8 原理 鲎凝血酶原 亚基G因子识别BG BG水平精确到1pg ml 激活凝血酶原 亚基凝固酶量化 光密度 凝固蛋白原凝固蛋白 9 检测标本 血液 支气管肺泡灌洗液 脑脊液灵敏度67 100 特异度90 连续2次阳性时特异度增至96 阴性预测值100 正常人群中浓度一般20pg ml 10 BG检测的常用试剂及阳性判断标准 日本SeikagakuKogyo公司研制的FungitecGglucan试剂 其判断标准为20pg ml美国CapeCode协会研制的Glucatell试剂 判断标准为60pg ml 11 临床应用 1 阳性 念珠菌 曲霉 镰刀霉 酵母和丝孢酵母2 定植的念珠菌显示阴性3 早期诊断 不受机体免疫状态影响 BG值升高平均早于发热5d 早于呼吸道症状平均10 7d 早于HRCT检查平均9 3d4 BG可用于动态随访疾病的变化 12 5 不同的BG值反映不同真菌感染 13 BG与肺孢子菌肺炎的关系 BG可能从肺孢菌的囊壁释放出来 进入肺泡腔内 并通过肺泡毛细血管进入到血液中 故BG值呈现阳性 14 可能的假阳性 1 输注白蛋白 球蛋白 溶血 血液透析 输注抗肿瘤的糖类药物 外科手术早期 标本接触纱布2 某些抗菌药物 多粘菌素E 厄他培南 头孢噻肟 头孢吡肟 氨苄西林 舒巴坦 磺胺类药物 15 GM试验 曲霉菌细胞壁成分半乳甘露聚糖抗原 galactomannan GM 仅存在于曲霉菌细胞壁表面通过酶联免疫吸附试验检测GMGM较临床症状及影像学异常早出现约1周 16 应用 GM诊断侵袭性曲霉感染invasiveaspergillosisIA的敏感度为73 高于G试验 特异度为91 两者联合能更有效的诊断IA 敏感度和特异度 分别达到了86 和98 阳性和阴性预测值分别为86 和98