钼蓝比色法.doc

1: C# h; a$ e+ N概述x1 8 P- u$ X6 D7 h; I, t磷脂是由一分子甘油与两分子脂肪酸，一分子磷酸和一个氨基醇残基所组成的复杂的含磷类脂化合物。它能在含水很少的油脂中溶解。磷脂不稳定比油脂更易氧化，其氧化产物会加速油脂氧化速度和程度。高温下磷脂会产生黑色絮状沉淀，同时磷脂是一种乳化剂，使油脂易产生包络空气而产生泡沫，在加工过程中产生溢锅现象，磷脂的主要成分脑磷脂、卵磷脂，既具有油溶性又具有亲水性。因此，检测毛油和成品油中的磷脂含量，对于掌握生产操作和保证油脂质量是不可缺少的。0 m3 c# H9 V2 V( L N2) a; q& ! H6 g检测方法$ p& m! n g# t/ % . M6 L$ w280加热试验法（见第十二节）0 l* C! N8 r3 9 m6 S浊度仪测磷脂：# _3 Y. w& z5 , F（1）通电自检。/ r. H4 o0 k/ h2 g% . m（2）精炼厂各工序出来的油品，先摇匀，然后按如下表称量油样于干净比色皿中。 y2 F( 6 2 表33工段名称转换公式（PPM）样品重量指标控制（PPM）脱臭P=（1.72NTU）-0.5285.01g5脱色P=（1.27NTU）-0.2255.01g10中和油P=（8.26NTU）-4.491.002g10四级豆油P=（5.89NTU）+316.40.198g$ R# % S/ E% Y7 g/ A2007 R, c p. v& x2 |9 , S3 O. n4 eh! D. X% , 7 0 wa、加丙酮至刻度线，上盖。% F4 _0 X1 I/ 9 a( g7 w8 K9 Hgb、摇匀，滴一滴硅硐油于比色皿外表面，用擦镜纸擦匀。7 c! C2 a! f5 c9 c、装入浊度仪，按ENTER键，稳定5min后，读取结果。4 s% E7 f& oY i w& ed、计算出油品实际浊度，NTU=NTU1-NTU0，脱色，脱臭浊度按公式计算，D001查表（NTU0为丙酮的空白浊度）。4 SO) c/ ?5 # k J* C# ve、用丙酮清洗比色皿。/ K( m8 d$ ! D钼蓝比色法: U c/ w9 W- V; Y(1)实验原理：将含磷脂的试样加氧化锌一起灼烧，使有机磷转变为无机磷，以磷酸盐的形式留在灰分中，在将灰分加酸溶解，使磷酸根离子与钼酸钠作用生成磷钼酸钠，遇硫酸联氨被还原成蓝色的络合物钼蓝。 X$ 3 E9 H7 Z含磷脂的试样ZnOZn3(PO4)2+CO2+NO2+H2O% D: # U2 6 x& GZn3(PO4)2HClZnClH3PO47 z g% + D% ) x/ AH3PO4+Na2MoO4+H2SO4 (Na3PO4*12MoO3)+ Na2SO4+H2SO4+H2O& k3 b9 C6 N2 W1 ?4 Q1 Z2 J7 WNa3PO4*12MoO3(MoO2*4MoO3)*H3PO4*4H2O2 H4 i+ f ?/ l: # _: C（2）仪器和用具： e$ H p2 y- a, i9 d瓷坩锅或石英坩锅、紫外分光光度计、移液管（5 ml、10ml）、电炉高温炉、漏斗、容量瓶：100,500,1000ml、表面皿、烧杯、量筒、恒温水浴锅、坩锅、试剂瓶等4 f4 _- j9 A2 L+ o, J( EU$ G（3）试剂：( ?* V! Q! x- L% a、 50%氢氧化钾溶液/盐酸、硫酸、氧化锌、滤纸、0.015%硫酸联氨溶液； 8 * / z I Z5 z& b、 2.5%钼酸钠稀硫酸溶液：量取140ml硫酸注入300ml水中,摇匀,冷却至室温，加入12.5g钼酸钠,溶解后加水至500ml,摇匀,静置24小时备用。+ k# o& K$ d) f& Q9 k) X9 X5 Q! Kc、 磷标准溶液：称取无水的磷酸二氢钾0.4391g溶于1000ml水中作为1号液，含磷0.1mg/ml，吸取1号液10ml，加水稀释至100ml含磷0.01mg/ml作为2号液，比色用。 nnx4 j. ! ; i! E! Q（4）操作方法：& K& ? y2 e8 l. c6 z Z- a、绘制标准曲线8 5 N1 _* H4 S( Q取5只50ml比色管，编成1、2、4、6、8 五个号码, 按号码顺序分别加入磷标准2号液1、2、4、6、8ml,8 3 o 4 Y/ f# e j; o, U5 f再按顺序分别加水9、8、6、4、2ml。接着向5只管内各加0.015% 硫酸联氨溶液8.0ml钼酸钠稀硫酸溶液2.0ml，加塞摇匀，去塞，将5只管置于正在沸腾的水浴中加热10分钟，取出冷却至室温，用水稀释至50ml充分摇匀，经10分钟后，用分光光度计计在波长650nm下，用1cm液槽，用水调整零点，分别测定消光值。以消光值为纵坐标，以磷（0.01、0.02、0.04、0.06、0.08mg）为横坐标绘制标准曲线。7 I7 r+ io: b、制备被测液: G4 a/ fQ% q& n; n; Q5 t用坩锅称取试样约10g(准确至0.001g)，加氧化锌0.5g，先在电炉上加热炭化，然后送入550600的高温炉中灼烧至灰化(白色)，灼烧时间约2小时,取出坩锅在干燥器中冷却至室温，用热盐酸(1:1)10ml溶解灰分，并加热微沸5分钟，将溶解液过滤，注入 100ml容量瓶中，用热水冲洗坩锅和滤纸，待滤液冷却至室温后，用50%氢氧化钾溶液中和至出现浑浊，缓慢滴加盐酸使氢氧化锌沉淀全部溶解后，再滴2滴，最后用水稀释至刻度，摇匀。 D! N0 m2 c2 ; Vc、比色：8 M T: E S9 J用移液管吸取被测液10ml注入50ml比色管中,加入0.015%硫酸联氨8.0ml，加2.0ml钼酸钠稀硫酸溶液，加塞, 摇匀, 将比色管置于正在沸腾的水浴中加热10分钟,取出冷却至室温，用水稀释至50ml充分摇匀，经10分钟后，用分光光度计在650nm下，用1cm液槽，用水调整零点,测定消光值。* % * Q6 g h8 y; l9 d、结果计算： 5 Y4 v2 $ s: 0 N1 Q0 根据被测液的消光值，从标准曲线查得磷量(p)，按公式计算磷脂含量：- P3 B4 2 J5 H E. E3 |6 - T, r 9 B- ( J. X$ U, o1 h. x2 U+ L7 i5 t& ( B6 t磷脂(%)=& ?) ? G$ m- F8 . N/ U104 0 I3 3 w* a5 H5 h U3 W9 I3 m1 Z! _- K3 z# f8 v$ M1 * J; C! ?3 U3 d5 D: g3 I) E; J式中：6 k/ M4 C7 S B8 M/ O. W( 0 p- sP - 标准曲线查得的磷量，mg；: R5 I; m |: TS sV2 - 样品灰化后稀释的体积，ml；( l! UR/ J6 i$ 7 ) uV1 - 比色时所取的被测液体积，ml；3 n! c# g4 b. |/ * U9 Wf, 26.31 - 每毫克磷相当于磷脂的毫克数； M; G3 y2 W: j e8 % DW - 试样重量，g。 P% M- r; E, r3 q注：于常数已输入紫外分光光度计，结果即为（KABS）值。