（生物化学与分子生物学专业论文）中国小鲵属的核型研究.pdf

中国小鲵属的核型研究 生物化学与分子生物学专业 研究生卿立燕指导教师王一丁曾晓茂 摘要本文对中国大陆小鲵属近年新描述物种进行了核型报道并与小鲵属己知 核型进行了比较分析，对核型演化进行了初步总结。传统上小鲵属可划分为3 个核型类群，即2 n = 5 6 、2 n = 5 8 、2 n = 4 0 ，中国大陆小鲵属物种隶2 n = 5 6 类群， 台湾物种属2 n = 5 8 类群；按生态型划分，前者一般属低山区池塘型，后者为中、 高山区流溪型。本研究旨在为探讨小鲵属动物的系统发育、分类及演化提供细 细胞遗传学证据。现简述如下： 1 猫儿山小鲵核型及带型 猫儿山小鲵二倍体染色体数为2 n = 5 6 ，全部染色体按大小和形状可以分为4 组。5 6 条染色体均呈现着丝粒型c 一带；n o 4 染色体具插入型c 一带；n o 9 染色 体的短臂有着丝粒周围型c 一带；n o 1 3 染色体整个短臂呈c 一带深染；a g n o r s 位于n o 8 染色体短臂端部( 8 p 研) 。 猫儿山小鲵与小鲵属己失i ：1 2 n = 5 6 的物种的核型组成大致相似，差异主要体现 在染色体的具体分组及相应染色体的类型上，如猫儿山小鲵的n o 1 3 为亚端着 丝点染色体，其它2 n = 5 6 的小鲵为中着丝点染色体；猫儿山小鲵较其它小鲵插入 型c 一带少，小型端着丝粒染色体上未见复合型c 一带，n o 1 3 整个短臂呈c 一带深 染，这在小鲵属的已知c 一带中非常特别，结合其亚端着丝粒的染色体类型，可 以将此看作是猫儿山小鲵在核型上区别与其它小鲵属物种的标志；猫儿山小鲵 是2 n = 5 6 的小鲵中唯一a g n o r s 位于大型双臂染色体上( 8 p 垤) 的小鲵。 由此，猫儿山小鲵在核型、c 一带? 手i a g n o r s 上有小鲵属的共同特征，同其它 小鲵有较大的差异，有其独特的核型及带型。 2 豫南小鲵核型 豫南小鲵的二倍体染色体数为2 n = 6 4 ，3 2 对常染色体按大小和形状可分为3 组：大型双臂染色体组( n o s 1 - 5 ) ，大型端丝点染色体组( n o s 6 - 1 1 ) ，小 型端着丝点染色体组( n o s 1 2 3 2 ) 。 豫南小鲵同小鲵属已知核型的染色体数目( 2 n = 5 6 ，2 n = 5 8 ，2 n = 4 0 ) 明显 不同，而同小鲵科中的商城肥鲵的染色体数目相同，核型相似。核型结果与同 期进行的形态、生态，骨骼及分子研究结果一致。综合分析，x i o n g 等( 2 0 0 7 ) 认为豫南小鲵应为商城肥鲵的同物异名。 3 中国小鲵模式标本核型 中国小鲵模式标本的二倍体染色体数为5 6 ，2 8 对染色体按大小和形状可以 分大型染色体组，中型双臂染色体组，小型中着丝点染色体组和小型端着丝点 染色体组。 中国小鲵模式标本核型同义乌小鲵核型有较大差异，结果与同期分子数据 结果( 待发表) 一致，均支持义乌小鲵为有效物种。与“中国小鲵”福建武夷 山标本核型比较，差异较大，而福建武夷山核型与义乌小鲵核型间也存在明显 的差异。核型结果与费梁等对中国小鲵武夷山标本卵袋形态同浙江另两种小鲵 的卵袋比较分析的结果较为一致。 由此，中国小鲵的核型同中国已知小鲵核型有较大差异：结合分子生物数 据支持义乌小鲵为有效物种；同福建“中国小鲵”核型差异较大，与卵袋形态 比较结果较为一致，福建“中国小鲵 的分类地位有待进一步的确认。 4 挂榜山小鲵核型 挂榜山小鲵二倍体染色体数均为5 6 ，2 8 对常染色体按大小和形状可分为大 型双臂染色体组，中型双臂染色体组，小型中着丝点染色体组，小型端着丝点 染色体组。 挂榜山小鲵同2 n = 5 6 的小鲵核型相似，同时也存在差异，主要表现在相应染 i i 色体类型上。 由此，挂榜山小鲵的核型具小鲵属核型的典型特征，同时也有其独特的核 型特征。 5 中国大陆小鲵分组 根据染色体数目，猫儿山小鲵，中国小鲵模式标本及挂榜山小鲵同中国大 陆其它小鲵一样，均属于2 n = 5 6 组；根据生态学特征，均属于池塘型( p o n d t y p e ) ；根据m a t s u i 等( 1 9 8 5 ) 的第一个标准，本文三种小鲵同中国大陆已知 核型小鲵一样，均属中型染色体中无单臂染色体的一类；在此基础上，根据第 二个标准，安吉小鲵，义乌小鲵，猫儿山小鲵，挂榜上小鲵，湖北宜昌的中国 小鲵等5 种有1 0 对端着丝点染色体，为一亚组；辽宁产东北小鲵和福建产中国 小鲵有较少( 9 对) 的端着丝点染色体，为另一亚组。 关键词：小鲵属；核型；c 一带；银染核仁组织区( a g - n o r s ) 分组 i i i t h ek a r y o t y p e so f h y n o b i u se n d e m i ct om a i n l a n dc h i n a b i o c h e m i s t r ya n dm o l e c u l a rb i o l o g y s t u d e n t ：q m gl i y a nt u t o r ：w a n gy i d i n g ，z e n gx i a o m a o a b s t r a c ti nt h i sp a p e r ，l 妊a r y o t y p e so fs o m en e wh y n o b i u ss p e c i e se n d e m i ct o m a i n l a n dc h i n aw e r ef n s f l yd e s c r i b e da n dc o m p a r e dt oo t h e rh y n o b i u sk a r y o t y p e s a c c o r d i n gt oc h r o m o s o m en u m b e r ，h y n o b i u ss p e c i e sc a nb e d i v i d e di n t o3 k a r y o t y p eg r o u p s ：2 n = 5 6 、2 n = 5 8 、2 n = 4 0a n ds p e c i e sf r o mm a i n l a n dc h i n ah a v e 2 n = 5 6 ，c o m b i n e dw i t hi t sb r e e d i n gh a b i t s ，t h e yc a nb ev i e w e da st h et y p i c a l p o n d t y p e ”h y n o b i u s o t h e r w i s e ，h y n o b i u sf r o mt a i w a nw i t h2 n = 5 8i n h a b i t si nt h e m o u n t a i nr e g i o na n ds p a w n sp r i m a r i l yi nc o o ls t r e a m s t h ep u r p o s e sa r et op r o v i d e k a r t o t y p ee v i d e n c e sf o rt h ep h y l o g e n y , e v o l u t i o na n dt a x o n o m yf o rt h e s eh y n o b i u s s p e c i e s t h er e s u l t sa n dc o n c l u s i o na r ea sf o l l o w s ： 1 t h ek a r y o t y p e sa n db a n d i n g so f h y n o b i u sm a o e r s h a n e n s i s t h ed i p l o i d c o m p l e m e n to fh y n o b i u s m a o e r s h a n e n s i sc o n s i s t e do f 5 6 c h r o m o s o m e st h a tc o u l db ed i v i d e di n t of o u rg r o u p sb ys i z ea n ds h a p e ；c - b a n d s w e r ed e t e c t e di nt h ec e n t r o m e r i cr e g i o ni na l lc h r o m o s o m ep a i r s t w oi n t e r s t i t i a l c - b a n d sw e r ef o u n di nt h el o n ga h n so fc h r o m o s o m e4a n dt h e r ew a sam a j o r c - p o s i t i v eb l o c ka tt h ec e n t r o m e r i cr e g i o no ft h es h o r ta r m so fc h r o m o s o m e9 i n a d d i t i o n ，t h ew h o l es h o r ta r mo fc h r o m o s o m e13d i s p l a y e dap r o m i n e n t ! d a r kc b a n d ； a g n o r sw e r eo b s e r v e di nt h et e l o m e r i cr e g i o no ft h es h o r ta r m so fc h r o m o s o m e p a i r8 ( 8 p t h ek a r y o t y p eo fh y n o b i u sm a o e r s h a n e n s i si ss i m i l a r 、析mo t h e rh y n o b i u sw i t h 2 n = 5 6 o t h e r w i s e ，d i f f e r e n c e sc a nb ef o u n di nt h ec e n t r o m e r i cp o s i t i o na sw e l la s s u b t e l o c e n t r i cc h r o m o s o m en o 13w h i c hi sm e t a c e n t r i ci no t h e rs p e c i e sw i t h2 n = 5 6 ； t h ed a r kc b a n do nn o 13w a su n i q u ei nhm a o e r s h a n e n s i s c o m b i n e dw i t hi t s s p e c i a ls u b t e l o c e n t r i cc e n t r o m e r e ，i tc a nb ec o n s i d e r e da sa m a r k e rt od i s t i n g u i s ht h i s s p e c i e sf r o mt h eo t h e rs p e c i e s k a r y o t y p e s w en e i t h e rd e t e c t e da n ym u l t i p l e c - b a n d i n gp a t t e r n so nt h es h o r ta r n lo fc h r o m o s o m en o 10w h i c hi sc o m m o ni nt h e p o n d - t y p es p e c i e sn o ro nt h es m a l lt e l o c e n t r i cc h r o m o s o m e s ；i tw a su n i q u et h a tt h e a g - n o r so f h m a o e r s h a n e n s i sl o c a t e do nt h el a r g eb i a r m e dc h r o m o s o m ep a i r a sm e n t i o n e da b o v e 且m a o e r s h a n e n s i sw a sd i f f e r e n tw i t ho t h e rh y n o b i u s s p e c i e sf o ri t su n i q u ek a r y o t y p e ，c b a n d sa n da g - n o r s 2 k a r y o t y p eo f h y n o b i u sy u n a n i c u s t h ed i p l o i dc h r o m o s o m en u m b e ro f h y n o b i u sy u n a n i c u sw a s2 n = 6 4 t h e3 2 h o m o l o g o u sp a i r sc o u l d b ed i v i d e di n t ot h r e eg r o u p sa c c o r d i n gt os i z ea n ds h a p e t h ef i r s tg r o u pw a sl a r g e s i z e db i a r m e dp a i r s ( n o s 1 - 5 ) ；t h es e c o n dg r o u pw a s m e d i u m s i z e du n i a r m e dp a i r s ( n o s 6 11 ) ；t h er e m a i n i n gg r o u pw a st h es m a l l s i z e d p a i r s ( n o s 12 - 3 2 ) ，a l lu n i a r m e da n da c r o c e n t r i c t h ec h r o m o s o m en u m b e ri sv e r yd i f f e r e n tw i t ht h eh y n o b i u ss p e c i e sw h o s e d i p l o i dc h r o m o s o m en u m b e r sa r e5 6 ，5 8o r4 0 o nt h eo t h e rh a n d ，hy u n a n i c u s s h a r et h es a m ec h r o m o s o m en u m b e r sa n ds i m i l a rk a r y o t y p i cs t r u c t u r ew i t h p a c h y h y n o b i u ss h a n g c h e n g e n s i s t h ek a r y o t y p er e s u l ti sc o n s i s t e n tw i mt h er e s u l t s o f m o r p h o l o g y , e c o l o g y , s k e l e t o na n dm o l e c u l a rd a t a x i o n ge ta l ( 2 0 0 7 ) c o n c l u d e d t h a t 且y u n a n i c u sw a sas y n o n y mo f p s h a n g c h e n g e n s i s 3 t h ek a r y o t y p eo f h y n o b i u sc h i n e n s i sf r o mt y p el o c a l i t y t h ed i p l o i dc o m p l e m e n to fh y n o b i u sc h i n e n s i sf r o mt y p el o c a l i t yc o n s i s t e do f 5 6c h r o m o s o m e st h a tc o u l db ed i v i d e di n t of o u rg r o u p sb ys i z ea n ds h a p e ：t h ef i r s t g r o u pc o n t a i n e d9l a r g eb i a r m e dc h r o m o s o m e s ；n o s 1 0 13c o m p o s e dt h es e c o n d , m e d i u m s i z e dg r o u p ；t h et h i r dg r o u pw a sc o m p o s e do fm e t a c e n t r i cc h r o m o s o m e s ( s o s 14 18 ) ；t h ef o u r t h g r o u p i n c l u d e d10 ( n o s 19 2 8 ) u n i a r m e d m i c r o c h r o m o s o m e s t h ek a r y o t y p er e s u l to fh y n o b i u sc h i n e n s i sf r o mt y p el o c a l i t yc o n s i s t sw i t h v t h er e s u l to ft h em o l e c u l a rd a t a ( u n p u b l i s h e d ) a n db o t hs u p p o r t e dh y i w u e n s i sa sa v a l i dh y n o b i u ss p e c i e s ；t h ek a r y o t y p eo f hc h i n e n s i s ”f r o mw u y im o u n t a i nn e i t h e r t h es a m ea sh c h i n e n s i sf r o mt y p el o c a l i t yn o ra sh y i w u e n s i s a n ds i m i l a r s i t u a t i o nw e r ef o u n di nt h ec o m p a r i s o no ft h ee g gs a cb e t w e e n 丑c h i n e n s i s ”a n d o t h e rt w os p e c i e sf r o mz h e j i a n gp r o v i n c e s ot h et a x o n o m yo f hc h i n e n s i s ”f r o m w u y im o u n t a in e e d sm o r ee v i d e n c e 4 t h ek a r y o t y p eo f h y n o b i u sg u a b a n g s h a n e n s i s t h eh y n o b i u sg u a b a n g s h a n e n s i sp o s s e s s i o no f2 n = 5 6c h r o m o s o m e s ，w i t hn i n e l a r g ep a i r s ( n o s 1 9 ) ，f o u rb i a r m e dm e d i u mp a i r s ( n o s 1 0 13 ) ，f i v eb i a r m e d m i c r o c h r o m o s o m ep a i r s ( n o s 14 - 18 ) ，a n d10u n i a r m e dm i c r o c h r o m o s o m ep a i r s ( n o s 19 2 8 ) i t sk a r y o t y p ew a ss i m i l a rw i t ho t h e rh y n o b i u ss p e c i e sw h i c hh a v e2 n = 5 6 c h r o m o s o m e sb u td i f f e r e n c e sa r ea l s of o u n di nt h ec e n t r o m e r ep o s i t i o n t h a ti st o s a yh g u a b a n g s h a n e n s i sp o s s e s st h et y p i c a lh y n o b i u sk a r y o t y p ec h a r a c t e r sa sw e l l a si t su n i q u ek a r y o 帅e 5 t h eg r o u p i n go f h y n o b i u sf r o mm a i n l a n dc h i n a w i t ht h ep r e s e n tk a r y o t y p ed a t ao ft h r e eh y n o b i u ss p e c i e s ，t h ek a 巧，o t y p e so f s i x s p e c i e si n c l u d i n g s e v e np o p u l a t i o n si nm a i n l a n dc h i n ap r o c e s s e d2 n 寻5 6 c h r o m o s o m e s f r o mt h eb r e e d i n gh a b i t s ，t h e s es i xs p e c i e sc a nb ev i e w e da st h e t y p i c a l p o n dt y p e ”h y n o b i u s i na d d i t i o n ，a l l t h e s ec h i n e s es p e c i e sa r e c h a r a c t e r i z e db yt h ea b s e n c eo fam e d i u m s i z e du n i a r m e dc h r o m o s o m e a n db e l o n g t ot h e “g r o u pi f o fm a t s u ie ta l ( 19 8 5 ) f o rt h es e c o n dc r i t e r i o n ，t h ec h i n e s e p o p u l a t i o n sc a nb ed i v i d e di n t ot w oc l e a rs u b g r o u p s ：h a m j i e n s i s ，h 。y i w u e n s i s ，h m a o e r s h a n e n s i s ，h g u a b a n g s h a n e n s i sa n dh c h i n e n s i sf r o mt y p el o c a l i t yh a v et e n t e l o c e n t r i cm i c r o c h r o m o s o m ep a i r s w h i l eh 1 e e c h i ia n daf u j i a np o p u l a t i o no fh c h i n e n s i sh a v eo n l yn i n ep a i r s k e yw o r d s ：h y n o b i u s ；k u y o 帅e ；c - b a n d i n g ；a g - n o r s ；g r o u p i n g 四川师范大学学位论文独创性及 使用授权声明 本人声明：所呈交学位论文，是本人在导师垂二工! 萱瞳茂指导下， 独立进行研究工作所取得的成果。除文中已经注明引用的内容外，本论文不含 任何其他个人或集体已经发表或撰写过的作品或成果。对本文的研究做出重要 贡献的个人和集体，均已在文中以明确方式标明。本声明的法律结果由本人承 担。 本人承诺：已提交的学位论文电子版与论文纸本的内容一致。如因不符而 引起的学术声誉上的损失由本人自负。 本人同意所撰写学位论文的使用授权遵照学校的管理规定： 学校作为申请学位的条件之一，学位论文著作权拥有者须授权所在大学拥 有学位论文的部分使用权，即：1 ) 己获学位的研究生必须按学校规定提交印刷 版和电子版学位论文，可以将学位论文的全部或部分内容编入有关数据库供检 索；2 ) 为教学、科研和学术交流目的，学校可以将公开的学位论文或解密后的 学位论文作为资料在图书馆、资料室等场所或在有关网络上供阅读、浏览。 本人授权中国科学技术信息研究所将本学位论文收录到中国学位论文全 文数据库，并通过网络向社会公众提供信息服务。 ( 保密的学位论文在解密后适用本授权书) 导师签名：2 一了 签字日期：0 7 年j 月穹7 日照垆 亟7 习月 识台 一节 腓飙湖磐 第一章综述 1 染色体核型及带型 染色体作为遗传物质一d n a 的载体，对生物的遗传、变异、进化和个体发 生，以及细胞的增殖和生理过程的平衡控制等都具有十分重要的意义。每一个 物种的细胞一般都有一定数目、形状和大小的染色体。染色体组型又称核型 ( k a r y o t y p e ) ，是指每种生物的染色体的数目、大小、形态等特征的总和。如果 将体细胞核中全部染色体按照其形状、大小依顺序排列起来，叫核型图。染色 体组型代表了一个个体、一个种、甚至一个属或更大的类群特征。染色体组型 能阐明染色体组的构成以及识别一个染色体组中的特定染色体。通过染色体组 型分析研究可以鉴定染色体组，以此作为实验分析的对照指标，再进一步研究 其变化，对于研究生物的遗传变异、生物的系统演化、物种之间的亲缘关系、 某些生物起源、远源杂交及染色体工程、辐射遗传效应，人类遗传性疾病等都 有重要的意义。 染色体核型分析中，目前一般采用如下的方法：( 1 ) 常规的形状分析。如测 量染色体的长度，确定着丝点的位置，副缢痕的位置和存在与否以及随体的有 无、形状和大小。( 2 ) 带型分析。在染色体组型分析中，现多应用分带技术，根 据不同带型，可更精细而可靠地识别染色体的个体性。( 3 ) 着色区段分析。在同 源染色体之间着色区基本相同，而在非同源染色体之间则有差别。( 4 ) 定量细胞 化学方法。即根据细胞核、染色体组或每一个染色体的d n a 含量以及其他化学特 性去鉴定染色体。其中常规的形状分析和带型分析是细胞分类学中较为基本 的研究水平，能够为系统分类和演化提供更多的细胞学证据。从形态上鉴别染 色体组型，较简便易行，仍是基本的实验方法。通过形态学分析能够得出不同 种、属的基本染色体特征，并且染色体易位引起的形态变化可作为鉴别染色体 的根据。而利用染色体分带技术，可更加精确识别各条染色体。 在动物演化研究中，染色体显带技术应用广泛，在揭示科内细胞遗传学机制 多样性、不同分类阶元间的亲缘关系上发挥了重要作用。以斑腿蝗科为例u 1 ， 种间区别多表现在端带有无、个别染色体上着丝粒带的大小强弱以及异染色质 总含量值差异等方面：属内往往显示有特定的c 一带带纹( 构成该属的标志性染色 体) ，及其它方面的共同属征，属内各种问的同源程度可用银染核仁组成区定位 指标来验证，并可揭示其间的亲缘关系。染色体带纹的多样性、杂合性等反映了 染色体本身结构的复杂性，以及种下变异、物种分化和形成的遗传机制。通过对 显带机理的深入研究，可以对染色体的成分、结构、功能和行为等进行更深入的 了解，从而找出生物染色体带型变化的规律，这对于从细胞和分子水平真正揭示 生物进化的遗传机理具有重要意义。另外，生物染色体带型存在的杂合性和多态 性现象说明染色体分化与物种间生殖隔离机制的形成有着密切关系。 2 小鲵属的核型及带型研究 小鲵属h y n o b i u s 隶属两栖纲a m p h i b i a 有尾目c a u d a t a 小鲵科 h y n o b i i d a e ，由t s u c h u d i ( 1 9 8 3 ) 依据产自日本的云斑小鲵h y n o b i u sn e b u l o s u s 订立。此后，b o n a p a r t e ( 1 8 5 0 ) 以小鲵属为模式属订立了小鲵科。小鲵属作为小 鲵科中的优势属，有3 2 种，是有尾两栖类中最原始的类群之一，仅见于亚洲东 部，分布于中国、韩国和日本u 。中国现已知1 2 种，为安吉小鲵丘a m j i e n s i s 、 中国小鲵丘c h i n e n s i s 、东：l l d , 鲵尼l e e c h j j 、义乌小鲵丘y i w u e n s i s 、挂 榜山小鲵i t g u a b a n g s h a n e n s j s 、猫儿山小鲵1 t m a o e r s h a n e n s i s 、豫南小鲵 丘y u n a n i c u s 、阿里山小鲵丘a r i s a n e n s e s 、楚南小鲵丘s o n a n i 、台湾小鲵丘 f o r l l l 0 s a l 7 u s ，尼f u c a ，丘g l a c i a l i s u 一。对小鲵属核型的研究及演化规律探 讨能够为小鲵属动物的系统发育与演化提供细胞遗传学方面的证据。目前，有 关小鲵属细胞遗传学研究主要运用了核型，c 带，r 带，a g - n o r 等方法，并 涉及多数种。 2 1 小鲵属核型及分组 。 中期分裂相直接经碱性染料染色后按某种特定的规则排列成套，这样的中 期染色体组合称之为染色体组型或核型( k a r y o t y p e ) ，也叫常规核型 ( c o n v e n t i o n a lk a r y o t y p e ) ，包括染色体的数目、长短、大小、着丝粒位置、 随体或次缢痕的数目和位置等。在小鲵属的3 2 个种中，有2 5 种已进行了核 型的研究妒儿。，结果表明，大多数小鲵的染色体数目为2 n = 5 6 或2 n = 5 8 ，后 2 者除较前者多了一对额外的小染色体副外具有相似的核型。只有h y n o b i u s r e t a r d a t u s 为2 n = 4 0 ，并且其核型由于染色体形态的不同而与前两种小鲵的 核型有较大的差异( 表1 ) 。 国外学者根据染色体数目将小鲵属分为三个核型组( 表1 ) ，分别具有5 6 、 5 8 和4 0 条染色体1 。根据生态学特征，国外学者还将日本，韩国和台湾的小 鲵分为两个生态型：池塘型( p o n dt y p e ) 和高山溪流型( m o u n t a i n - b r o o kt y p e ) ， 前者生活在低山区并且在池塘等静水域中产卵，大多数种类具5 6 条染色体( 除 了h y n o b i u sr e t a r d a t 嬲具2 n = 4 0 ) ；后者生活在中、高山区，主要在较冷的 溪流中产卵，一般具2 n = 5 8 ( 除了丘o k y e n s i s 和屈t s u e n s i s 具2 n = 5 6 ) ， 分布于台湾的3 种小鲵( 丘a r i s a n e n s i s 、丘s o n a n i 、丘f o r m o s a n u s ) 和日本 的5 种( 尼b o u l e n g e r i ，丘n a e v i u s ，丘k i m u r a e ，丘s t e j n e g e r y ，丘k at o i ) 2 n = 5 8 的小鲵均属高山溪流性，1 1 ，1 3 - 1 8 。另外，m a t s u i 等( 1 9 8 5 ) n 9 1 认为根 据中型染色体中是否有单臂的染色体可以将核型相似的小鲵属物种进一步分为 两组，有中型单臂染色体的为组i ，无中型单臂染色体为组，在此基础上还 可根据单臂的微小染色体数目进一步的进行分组。根据第一个标准，中国大陆 的已知核型的几种小鲵口8 3 及日本的部分小鲵阳1 7 2 钔应属于组i i 。同时根据 第二个标准，中国大陆的4 种小鲵可以分为两个亚组，丘a m j i e n s i s t z y y w u e n s i s 等2 种有有较少( 9 对) 的端着丝点染色体，为另一亚组( 表1 ) 。1 0 对端着丝点染色体，为一亚组；辽宁产丘l e e c h i i 和福建产i - zc h i n e n s i s 有 较少( 9 对) 的端着丝点染色体，为另一亚组( 表1 ) 。 2 2 小鲵属的带型 2 2 1c 一带 在h y n o b i u s 中，r 一带是采用改进于d u t r i l l a u x 等( 1 9 7 3 ) 的方法，实际上是 复制带r b g ( d n ar e p l i c a t i o n b a n d s ) ，其结果恰好c 一带的反转，这在两栖动物 中是独一无二的，可以用来进行染色体同源片段的分析。”卜引。k o h n o 等 ( 1 9 8 3 ) 汹3 和k u r o o 等( 1 9 8 6 b ) 盥5 3 发现在小鲵属物种中，通过c 一带和改进的 r 带能够在染色体上得到复合型带型( m u l t i p l eb a n d s ) 。到目前为止，2 8 种中 的2 0 种d , 鲵已经进行了带型分析，所研究的每一个种的染色体臂上都可以看到 清晰的复合型c 带和r 带 8 。1 0 1 2 1 5 1 8 2 l2 5 - 3 2 。其q b 2 0 种小鲵的1 2 种中，2 8 对 或2 9 对染色体中的1 8 对都能够显示出复合型带型。这些复合型带型包括端带 ( t e l o c e n t r i cb a n d s ) ，近着丝粒带( p e r i c e n t r i cb a n d s ) 及插入带 ( i n t e r s t i t i a lb a n d s ) ，主要分布在9 对大型染色体( n o s 卜9 ) ，4 对中型 染色体( n o s 1 0 - 1 3 ) 以及1 5 对小型染色体中的5 对上( n o s 1 4 、1 5 和较大的端 着丝点对上( n o s 1 9 - 2 1 或2 0 - 2 2 ) 。剩下的1 0 对或1 1 对小型的染色体没有明确 的带型。在丘r e t a d a t u s 中，2 0 对染色体中的1 6 对可以检测到复合型的c 一带( 大 型组：n o s 卜1 0 ；中型组：n o s 1 1 1 3 ；小型组：n o s 1 4 1 6 ) ，而剩下的四 对没有明显的复合型带型。在小鲵属中，c 一带和r 一带主要是用于研究属间的系 统学关系( p h y l o g e n e t i cr e l a t i o n s h i p ) 。1 3 种小鲵有1 1 对染色体显示出了相 同的带型：n o s 1 、3 、6 、7 、8 、9 、1 1 、1 3 、1 4 ( 丘k i m u r a e 除外) 、1 5 和2 1 ( 或2 0 ) ，与丘r e t a d a t u s 的n o s 1 、4 、5 、7 、9 、1 0 、1 2 、1 3 、1 5 、1 6 和1 4 分别具同源性，其中1 2 种小鲵的n o 1 0 和丘r e t a d a t u s 的n 0 1 1 染色体的整个 短臂都呈现c 一带正染或r 一带负染并且呈现出不同的长度。i k e b e 等( 1 9 9 0 ) u w 将这种差异同系统学相系联系进行了讨论。同时在n o 2 染色体的长臂端部上的 c 一带正染和r 一带负染出现了长度的不同。国外学者还对这1 3 种小鲵的带型进行 了比较并对其同源性进行了计算。其中1 2 种小鲵( 丘7 e e e h i li t t s u e n s i s , 丘 d u r l r l f , h n e b u o s u s , h 。o k f e n s i s , h a b e lh t a k e d a lh t o k y o e n s i s , 丘7 i c h e n at u s , 丘n f g r e s c e n s , 丘b o u e n g e r i , 屈k i m u r a e ) 有9 0 的同源 性，而同g r e t a r d a t 嬲有6 5 的同源性，这种差异不是由于染色质的差异，因 为1 3 种小鲵的染色体总长几乎是相同的。i k e b e 等( 1 9 9 0 ) u w 对丘r e t a r d a t u s 特殊核型的形成是由于日本岛在形成过程中，丘r e t a r d a t u s 被隔离在 h o k k a i d o 岛上而从2 n = 5 6 的祖先种中分化出来，其中就可能涉及到染色体的断 裂，融合和倒位，所以可以推测丘r e t a r d a t u s 也是从另# b 1 2 中小鲵的某种核 型中演化来的。 2 2 2a g n o r s a g - n o r s 是显示n o r 简便可靠的方法，h s u 等用原位分子杂交证明a g n o r s 是 基因组中1 8 s + 2 8 s 核糖体基因( r d n a ) 的分布区。更多学者认为，h g n o r s 不是 4 表1 根据s a t o ( 19 4 3 ) 和m a t s ui 等的标准对小鲵的分组 t a b l e1t h eg r o u p i n go f h y n o b i u ss a l a m a n d e r sb 邪c do nm ec r i t e r i o nb ys a t 0 ( 1 9 4 3 ) a n dm a t s u ie ta l ( 1 9 8 5 ) 种名采集地 生态型2 n 鬻篙 参考文献 由 东北小鲵 国 中国小鲵 大 陆 安吉小鲵 小 义乌小鲵 竺 挂榜山小鲵 属 挂榜山小鲵 物 中国小鲵 桓仁县 武夷山 安吉县 镇海 挂榜山自然保护区 宜昌市 曾晓茂等，1 9 9 7 曾晓茂等，1 9 9 7 i k e b e 毗a l 一1 9 9 8 ； 曾晓茂等，1 9 9 7 i k e b ee ta 1 。1 9 9 8 本文 本文 种 猫儿山小鲵猫儿山自然保护区p 5 60 1 0 本文 日本p 日本，韩国p 日本m 日本，台湾 5 6 * l 56*0 5 8 l 8 ，9 ，1 0 8 ，9 ，1 0 8 i k e b e 。e ta 1 ， 1 9 7 9 a ，1 9 8 7 ，2 0 0 0 ； s e t 0e ta l 。 1 9 8 3 ，1 9 8 4 a ，b ，1 9 8 8 i k e b e ，c ta 1 ， 1 9 7 9 a b ，1 9 9 8 ； s e t oe ta l 。 1 9 8 3 ，1 9 8 6 ，1 9 9 3 ； 曾晓茂等。1 9 9 7 i i z u k aa n dk a k e g a w a 1 9 8 9 ； i i z u k ae ta l 一1 9 8 9 ； f i z u k aa n dk a k e g a w a 1 9 8 9 ； m5 8 o7 1 2 i 娥，e ta 1 ， 1 9 8 6 ，1 9 9 1 ； s e t 0e ta 1 1 9 8 7 ； _ - _ _ _ - _ - - _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ i h _ _ - - - - _ _ - - - 一_ - - _ h _ _ _ _ _ - _ _ _ 一 p ：池塘型( p o n dt y p e ) ；m ：高山溪流型( m o u n t a i n b r o o kt y p e ) 高山溪流型的小鲵中，只有ho m e n s 妇，1 1 i s u e n s 缸具2 n = 5 6 ( s e t o ，e ta 1 ，1 9 8 6 ，1 9 8 7 ) 具中型的端着丝点染色体的小鲵( 日本的且a b e i ，hn e b u l o s u s ，ht o k y o e n s 括的南部居群以及hm m u r a e 的h a k u b a ，n a g a n op r e 踞群) 5 9 9 m m m m o o o o o o 弱 铂 弱 鲐 铂 p p p p p p 日本韩国台湾小鲵属物种 核糖体基因的本身，而是与r d n a 转录有关的一种酸性蛋白质，因此，a g - n o r s 是具有转录活性的n o r 。有尾类已知有2 0 种进行了a g - n o r s 的观察分析，有尾目 的次缢痕或n o r 一般不易观察，其形态与无尾类有所不同，多数种类的a g n o r s 仅有一对，少数的有2 3 对，大多数的n o r 显