（分析化学专业论文）非水介质毛细管电泳法鉴别圆珠笔油墨.pdf

首都师范人学硕十。拳何论文 摘要 在各类刑事、经济案件及民事纠纷中，常常会遇见伪造和篡改的文件，所以 在司法鉴定和实际的案件侦破工作中，文件签字的真伪与相对书写时间的鉴定是 很重要的内容之一。而圆珠笔油墨中染料的检测和油墨的分类又足书写时| n j 鉴定 的前提基础。目前，油墨检测的方法很多，其中以色谱法应用最广。非水介质毛 细管电泳法是毛细管电泳方法中的一个重要分支，近几年在药物分析、手性化合 物分离、环境检测等方面应用越来越广，已引起国内外科学工作者的高度重视。 本论文尝试使用非水介质毛细管电泳法分析检测圆珠笔油墨中的染料，并根据油 墨中所含的染料种类不同将其进行分类。 第一章介绍了非水介质毛细管电泳法的研究进展，简述了非水介质毛细管电 泳法的发展历程、基本理论和常见用途。 第二章介绍了非水介质毛细管电泳法鉴别蓝色圆珠笔油墨笔迹，根据笔墨中 染料的种类，对收集的近一百种蓝色圆珠笔进行了分类。 第三章介绍了非水介质毛细管电泳法鉴别黑色圆珠笔油墨笔迹，尝试使用两 种缓冲体系，并分别研究了缓冲溶液的浓度、电压、温度、提取方法和取样量对 实验结果的影响。 第四章介绍了非水介质毛细管电泳法和高效液相色谱法在油墨鉴定方面的 异同点。 第五章总结了非水毛细管电泳在油墨分析中的研究状况。 关键词：非水介质毛细管电泳；高效液相色谱法：黑色圆珠笔；蓝色圆珠笔； 首部师范人学硕十学何论文 a b s t r a c t t h ea p p r e c i a t i o no fs i g n a t u r eo rt h er e a lw r i t i n gt i m eo ft h ed o c u m e n t sw a so n e o ft h em o s ti m p o r t a n tc o n t e n ti nj u d i c a t u r ea p p r e c i a t i o nb yr e a s o no ft h ea p p e a r a n c e o fd o c u m e n t sf a b r i c a t e do rs o p h i s t i c a t e di nc i v i ld i s s e n s i o n ，c r i m i n a l ，e c o n o m i c a l c a s e s t h ed e t e c t i o no fd y e si ni n k sa n dt h ec l a s s i f i c a t i o no fi n k sw a st h eb a s i so ft h e a p p r e c i a t i o no fw r i t i n gt i m e n o w a d a y s ，t h em e t h o do fi n kd e t e c t i o nw a sv e r ym u c h a n dt h ea p p l i c a t i o no fc h r o m a t o g r a mw a sm o r ep o p u l a rt h a no t h e r s n o n - a q u e o u s c a p i l l a r ye l e c t r o p h o r e s i s ( n a c e ) w a so n eo f t h em o s ti m p o r t a n tb r a n c h e so fc a p i l l a r y e l e c t r o p h o r e s i s ，w h i c hw a sm o r ea n dm o r ep o p u l a ri nm e d i c a t i o na n a l y s i s ，t h e s e p a r a t i o no fc h i r a lc o m p o u n d s ，e n v i r o n m e n td e t e c t i o n m a n yc h e m i s t sa th o m ea n d a b r o a da t t a c h e dm u c hi m p o r t a n c eo fn a c e i tw a st r i e dt od e t e c td y e si ni n k sa n d c l a s s i f yt h eb a l l p o i n tp e n so nt h eb a s i so fd y e si ni n k s i nc h a p t e ro n e ，t h er e c e n ta d v a n c eo ft h er e s e a r c ho fn a c ew a si n t r o d u c e da n dt h e h i s t o r y ，t h eb a s i st h e o r ya n dt h ep u r p o s eo f n a c e w e r es u m m e r i z e d n a c ed i s c r i m i n a t i o no fb l u eb a l l p o i n tp e ni n k sw a si n t r o d u c e di nc h a p t e rt w oa n d t h ec l a s s i f i c a t i o no fl e s st h a n10 0b l u eb a l l p o i n tp e n sw a sa c h i e v e da c c o r d i n gt od y e s i ni n k s c h a p t e rt h r e ed i s c r i b e dn a c e d i s c r i m i n a t i o no fb l a c kb a l l p o i n tp e ni n k s ，a n dt w o b u f f e rs y s t e m sw a st r i e d ，t h ec o n c e n t r a t i o no fb u f f e rs o l u t i o n ，v o l t a g e ，t e m p e r a t u r e ， t h ee f f e c to ft h ee x t r a c t i o nm e t h o da n dt h es a m p l ea m o u n tw e r es t u d i e d i nc h a p t e rf o u r , t h ed i f f e r e n c eo ft h ed i s c r i m i n a t i o no fb a l l p o i n ti n k sb yn a c ea n d h p l c w e r es u l n m e r e d i nl a s tc h a p t e r ，t h ea p p l i a n c eo f n a c ei nt h ea n a l y s i so fi n kw a ss u m m e r e d k e y w o r d s ：n o n a q u e o u sc a p i l l a r ye l e c t r o p h o r e s i s , h i g hp o w e r f u ll i q u i d c h r o m a t o g r a p h y ；b l a c kb a l l p o i n tp e n ；b l u eb a l l p o i n tp e n ； 首都师范人学硕十学何沦丈 首都师范大学学位论文原创性声明 本人郑重卢明：所呈交的学位论文，是本人在导师的指导下。独立进行研 究工作所取得的成果。除文中已经注明引用的内容外，本论文不含有任何其他个 人或集体已经发表或撰写过的作品成果。对本文的研究做出重要贡献的个人和集 体，均已在文中以明确方式标明。本人完全意识到本论文声明的法律结果由本人 承担。 学位论文作者签名：多之勇 7 同期：2 0 0 8 年5 月l 同 首都师范大学学位论文授权使用声明 本人完全了解首都师范大学有关保留、使用学位论文的舰定，学校有 权保留学位论文并向国家主管部门或其指定机构送交论文的电子版和纸质 版。有权将学位论文用于非赢利目的的少量复制并允许论文进入学校图书馆 被查阅。有权将学位论文的内容编入有关数据库进行检索。有权将学位论文 的标题和摘要汇编出版。保密的学位论文在解密后适用本规定。 靴做储擗：多够嗍2 啷。日 首邡师范人学顾十学何沦文 1 1 前言 第一章非水毛细管电泳法研究进展 毛细管电泳( c a p i l l a r ye l e c t r o p h o r e s i s ，c e ) 足8 0 年代初发展起来的，以高压电场 为驱动力、毛细管为分离通道，根据样品中各组分之间淌度和分配行为上的差异 而实现分离的一种新型分离分析技术【i 】。与传统平板电泳和高效液相色谱技术相 比，毛细管电泳具有多分离模式、分离效率高、分析速度快、试剂和样品用量少、 成本低、易于调控等优点，是目前发展最为迅速的分离分析技术之一。其应用领 域已从一般的小离子到大分子甚至单细胞，在生物、化学、医药、环保、食品等 领域都有了广泛的应用【2 1 。 毛细管电泳分离通常是在水溶液中完成的，因此要求分析物在分离介质中具 有一定的溶解性，这限制了分析物的使用范围。为拓宽毛细管电泳的分析范围， 可在分离介质中加入表面活性剂和有机溶剂等来加以调节，但仍要求被分析物在 水中有足够的溶解度。对在水溶液中溶解度很小的被分析物，通常在分离毛细管 管壁上的吸附也非常明显，且用来调整分离条件的实验参数有一定的局限性。为 了解决强疏水性样品在毛细管电泳中的分离分析问题，1 9 8 4 年w a l b r o h e l 和 j o r g e n s o n t 3 】首次以乙腈为分离介质，以盐酸、高氯酸化四甲基铵为电解质对几 何异构体喹琳和异喹琳进行分离，与经典毛细管电泳技术相比有其突出的优势， 开创了非水介质在毛细管电泳中应用的先河。实际上非水电泳并不是一个全新概 念，在经典电泳中早有人做过非水介质的探索。h a y e k 4 l 早在1 9 5 1 年便对悬浮在 煤油中碳黑颗粒的迁移行为作过探讨，揭示电泳能在非水介质中进行。直到1 9 9 4 年，s a h o t a 和k h a l e d i 5 j 报道了用甲酰胺和n 一甲基甲酞胺作分离介质，对比研 究了非水与水毛细管电泳在效率、分离时间和选择性的不同。与此同时，n g 及 t o m l i n s o n 研究组报道了非水毛细管电泳的实际应用，他们使用纯甲醇和混合甲 醇成功分离了疏水性药品及其代谢物睁引。自此以后，非水介质毛细管电泳 ( n o n a q u e o u sc a p i l l a r ye l e c t r o p h o r e s i s ，n a c e ) 才逐渐渐引起了人们的注意并得到 广泛应用，已成功地应用于药物与其代谢物、蛋白质、手性化合物、脂肪酸、表 面活性剂以及有机离子和无机离子等的分离。每年有关n a c e 的文章逐年增加， 有关此方面的综述和评论日益增多【9 。3 1 。但与总的已发表的c e 文章相比，其数量 首都师范人学硕十学何论文 还是相对较少。与常规的以水为分离介质的c e 方法相比，n a c e 依然是一种相对 较新的分离模式。 利用有机溶剂物理化学性质上的不同特性，用其作为n a c e 分离介质具有多 方面的优势：( 1 ) 对在水溶液中难溶而不f i 皂f i c e 分离的对象，在有机介质中有较高 的溶解度而实现c e 分离，拓宽了分析范围。如不溶于水的多环芳烃也能用c e 进 行分析；( 2 ) n a c e 能改善分离度，增加选择性。在非水条件下，溶质的溶剂化、 离子对效应和复合物的形成与水相中有很大的不同，在水介质中迁移速度相近的 溶质在非水介质中的迁移时f h j 能发生改变，甚至完全改变分离顺序，丛i 而使在水 介质中难分离的物质分离度增加，可更好地选择性测定【i ；( 3 ) n a c e 增多了可优 化参数的个数，如非水介质的极性、介电常数、粘度等，故仅通过简单地调节背 景电解质的构成，许多分离参数，比如分辨率、分离时间、选择性就能得到轻微 甚至显著的改变；( 4 ) 与水体系相比，非水体系分离电流小，故可承受更高的操作 电压，产生高电场，因而町缩短分离时间，提高分离效率；( 5 ) 对某些水和非水 都可溶的分析物，能提高灵敏度【1 5 , 1 6 1 。在不增大焦耳热条件下可提高缓冲液的离 子强度，因而如果采用电动进样方式时，能产生更好的样品堆积效应，从而增大 进样量，提高检测灵敏度，同时也可使用较大内径的毛细管柱，在进行u v 检测 时，可提高灵敏度。同时，由于大口径毛细管的应用，加大了进样量，加上溶剂 易挥发的特点，也非常适用于半制备；( 6 ) 非水介质可使某些添加剂的溶解度得 以增加，降低疏水物质与带负电荷毛细管壁的相互作用，提高了分离效率；( 7 ) 对 于许多在水介质中不太稳定的化合物，非水介质能提供稳定的分离环境；( 8 ) 非 水体系可直接用于c e m s 中，选用比水具有更低沸点的有机介质作为分离体系， 可改善质谱进样口去溶效果，并能降低背景信号，提高灵敏度。选用比水表面张 力小的有机溶剂，可用更低的电喷雾电压，增加电喷雾的稳定性，提高离子化效 率。 1 2 非水体系毛细管电泳的基本理论 1 2 1 有机溶剂的选择 一般情况，有机溶剂必须考虑以下问题： 2 前都师范人学硕十学似论文 ( 1 ) 稳定的电流。分离过程需要稳定的电流。有机溶剂如果不导电，可加入 可溶于该溶剂的电解质来实现。不添加电解质，也可直接使用纯n 甲基甲酰胺 ( n m f ) 、甲酰胺( f a ) 作分离介质f 1 7 】，但是，加入电解质能得到更好的重现性。 ( 2 ) 迁移时间。使用有机溶剂的另- f i l l 提条件是能够获得可接受的分离时问。 电渗流l a e o 和分析物的电迁移淌度p 印主要受溶剂粘度和介电常数的影响。 ( 3 ) 溶剂的纯度。虽然一些有机溶剂有较大的紫外吸收，但在高于2 5 4m t l 波 长进行检测几乎不受影响，也可使用间接紫外检测、间接荧光、电化学及激光诱 导荧光的方法。溶剂最好是h p l c 级，溶剂在环境中吸附少量的水对重复性的影 响较微【1 8 1 ( 4 ) 沸点。大多数有机溶剂的沸点低于水。如果有少量增加的j o u l e 热能导致 介质在毛细管中沸腾，生成气泡，易引起分离电流中断。因此，应避免在分离过 程中有较大的电流出现。另外，有机溶剂的挥发性较强，溶剂易蒸发，缓冲液浓 度易发生变化，离子强度逐渐增加，导致重复性变差，应经常更新。 ( 5 ) 环境方面的考虑。因毛细管电泳缓冲液用量少的固有特点，可不作考虑。 另外要考虑的其他因素是：价廉易得、可性、对溶质是否呈惰性等。 1 2 2 有机溶剂的性质 有机溶剂有宽范围的物理化学特性，这有利于利用这些特性进行优化。非水 毛细管电泳利用有机溶剂显著不同的物理化学特性( 溶剂介电常数、粘度、溶剂 自电离常数、沸点、溶质的p k a 值) ，来控制电渗流( e o f ) 。有机溶剂接受毛细 管壁上硅羟基质子的能力对e o f 的影响起着关键的作用，直接决定毛细管壁的 硅羟基离解、管壁对溶质的吸附和管壁双电层电位的大小，从而影响管壁z e t a 电 势。同时影响分析物的迁移行为、分辨率和检测限。 1 2 3 常用有机溶剂及混合溶剂 在毛细管电泳中，溶剂的性质对电渗流有着非常大的影响。由于非水溶剂的 理化性质与水差别很大，必然会引起非水介质和水相介质在分离选择性上的差 别。上面讨论说明，溶剂能显著地改变分析物的迁移和分离选择性。对n a c e 中 有机溶剂的选择，需要考虑挥发性、介电常数、粘度、质子离解和偶极矩等多种 贝。芗的综合影响。常用作电泳介质的非水溶剂有甲醇、乙腈、甲酰胺、n 甲基甲 3 首都师范人。学硕十学何论文 酰胺、n ，n 二甲基甲酰胺等。甲酰胺及其衍生物是少有的几种介电常数较高、粘 度较小的有机溶剂。甲醇和乙睛是最常用的有机溶剂，它们具有较低的紫外吸收， 用u v 检测时，波长可以懒0 2 0 0n m ，能获得较低的检测限。二甲基亚砜、n ，n 二甲基乙酰胺、二氧六坏、碳酸丙烯( p c ) 1 1 9 】、丙三醇、四氢呋哺( t h f ) 、正- j 1 醇、 异丁醇和j 下戊醇【2 0 】等也有人使用。 改变混合溶剂的比例是n a c e 优化分离的有效手段。在实际应用中，混合溶 剂较为常见如甲醇和乙腈，能够改善溶解性，分析更广范围的憎水物质。如果不 考虑有机溶剂特性对相互作用的影响，由于介质具有不同的介电常数和粘度，它 能引起溶质的迁移变化。 迄今为止，甲醇乙腈混合溶剂仍是使用最多的混合溶剂体系。这主要是因 为甲醇是质子溶剂，而乙睛是质子惰性溶剂，这样，混合溶剂的给体能力能通过 简单的控制两者的比例来实现。 在n a c e 中，报道使用四氢呋喃( t h f ) 作分离介质的文献甚少，这足因为它 能对仪器造成损害。使用三元混合溶剂较为少见。 1 2 4 电解质的选择 在有机溶剂中加入电解质使其具有一定的导电性能是实现n a c e 的重要条 件。在n a c e 中，大多数电解质在有机溶剂中的溶解度很低，这限制了电解质的 选择范围。酸及其铵盐是最普遍使用的电解质，其中乙酸铵是最常用的电解质， 因为它能很好地溶于大多数有机溶剂中。同时，在使用时还需加入乙酸钠或乙酸 与它一起调节电泳介质的酸碱缓冲性斛2 。乙酸在乙腈中的溶解度较差，可加入 乙酸增加其溶解性能。 p o r r a s 等人【2 2 1 在甲醇乙睛( 5 0 ：5 0 ；v v ) 中分别以以碱会属乙酸盐、乙酸铵、氯 化铵为电解质，分离了正电荷药物和负电荷利尿剂。k i m 等人【2 3 】用三羟甲基氨基 甲烷( t r i s ) 和乙酸作电解质在甲醇中分离了纺织品中的五氯酚及3 个2 ，3 ，5 ，6 四氯 酚异构体有别于普通的缓冲盐，r a z e e 等【2 4 】在甲醇或甲醇。乙睛中用十六烷基三 甲基氯化铵( c t a b ) ，在甲醇乙醇中用十二烷基硫酸钠( s d s ) 分离了二硝基苯甲 酸位置异构体和食品染料食品添加剂同质异构体。 应用于n a c e 中的电解质还有氛化钱【2 5 】尽管氯化铵等无机电解质紫外可见光 背景很小，系统效率较高，但电流不稳定，可能是电解所致。季胺盐在n a c e 中 4 首郜师范人学硕十学位论文 也有成功使用的例子【2 6 1 ；另外如【q 癸胺盐、烷基胺盐( 如二正戊胺) 、乙基乙酸铵 ( t e a r ) 、乙酸镁、柠檬酸、甲酸、甲磺酸、碳酸氢钠，磷酸二氢钾、丙二酸和三 氟乙酸等电解质都有应用。 1 3 检测方法 基于吸收的光检测技术( 如紫外、荧光、激光光热、化学发光、折光指数等) 、 电化学检测方法( 包括电导、电位和电流测定法伏安法) 和质谱已成功应用于常规 毛细管电泳检测，这些检测方法一般也可用- 于n a c e 的检测2 7 1 。 1 3 1 紫外检测 同以水为分离介质的毛细管电泳一样，紫外检测也广泛应用在n a c e 中，这 主要是紫外检测器为通用型检测器且普及较广所致。紫外检测主要缺点是其相对 差的检测限( l o d ) ，一般在l o m o l l ，这是由于细内径的毛细管柱造成的。由于 使用非水介质的优点，即较低的电导率，使分离电流较低，故可在背景介质温度 不过分增加的情况下而增加毛细管的直径，即有利于宽口径毛细管的使用，从而 增加了吸收光程使检测灵敏度的增加【2 引。很多有机溶剂有较强的紫外吸收，只有 甲醇和乙腈及两者的混合物能在低于2 0 0n i n 的波长下进行检测而一般的有机 溶剂要求检测波长大于2 5 4n n l 。间接紫外检测的优化方法跟水相c e 相似。g r o b 和s t e i n e r 2 9 】用2 萘磺酸做为载色团，在乙腈甲醇( 8 0 ：2 0 ，v v ) 介质中，使用2 8 0n n l 波长，加入电渗流调节剂p o l y b r e n e 使e o f 反转，成功分离了一些阴离子表面 活性剂( 烷基磺酸盐，甲醚磺酸盐，烷基苯基磺酸赫) 。 1 3 2 荧光和其他光检测方法 荧光特别是激光诱导荧光( l i f ) 能提供高的灵敏度和选择性，非水介质粘度 高、极性低、化合物稳定性强以及由于分子氧的存在可有效降低淬灭效应使其产 生较强的荧光，检测下限可降低至水缓冲液的1 1 2 1 6 3 0 1 。j a n s s o n 和r o e r a a d e 【3 在1 9 9 5 年使用n 甲酰胺作分离介质时就遇到了非水介质的紫外吸收问题，并建议 可以用激光诱导荧光( l i f ) 检测来克服。t j e m e l u n d 和h a i l s e i l 【3 2 】在几种分离介质 中证明了l i f 是一种强有力的检测手段。分析物在几种有机溶剂的荧光强度都高 于水，d m f 甚至是水的3 4 4 倍。在纯溶剂中，荧光强度为n m f d m s o f a 甲 s 首都师范人学硕十学位论文 醇 乙腈 水。大多数情况下，l i f 检测要求对没有荧光基团的分析物，需进行繁 琐的衍尘处理过程。因此，间接荧光检测成为可选择的技术应用予n a c e 中。l l j 接荧光检测法常用于待测物本身不发生荧光而又缺乏合适的衍生化试剂，该方法 是基于将荧光离子作为电泳缓冲液的主要组分，待测离子与荧光离子之问由于电 荷的替代或生成离子对以达到检测的目的。 1 3 3 质谱检测 1 9 8 7 年首次报道了毛细管电泳与质谱的联用技术( c e m s ) 【3 3 1 。随之该项技术 就迅速获得了认可和发展。受到质谱技术的限制，c e 流出物不得含有高j ；= 和表 面活性剂成分，最好是易挥发性缓冲液，所以c e m s 的最早报道均是采用毛细管 区带电泳法，使用的缓冲液主要有甲酸、乙酸的铵盐等挥发性物质，l u 等人【3 4 】 指出，在以电喷雾为接口的c e m s 中，甲醇、乙腈等溶剂比水的表面张力小，可 用更低的电喷雾电压，增加电喷雾的稳定性，提高离子化效率。而且选用比水具 有更低沸点的有机介质作为分离体系和改善质谱的进样n 去溶效果，并能降低背 景信号，有利于分析信号的检出。另外，在n a c e 中，电泳分离的电流很小，使 毛细管与电喷雾( e s i ) 接口较为简单。因为n a c e 的固有特点，采用非水缓冲液 分析水不溶性有机物是c e m s 的发展方向。t o m l i n s o n 等人【3 5 】最先将使用 n a c e m s 技术法对第二代h 2 受体拮抗剂咪芬替丁的体内、外代谢进行研究。有 关n a c e m s 的综述己有多篇。 1 3 4 电化学检测 与其它检测方法相比，电化学检测( e d ) 有其独特的优点，其质量检测限低， 线性范围宽，选择性好，而且设备简单，价格低廉，便于推广使用。在n a c e 中， 近年来，有关非水毛细管电泳电导法及安培法的报道大量增多，在溶剂体系、电 解质的选择及优化方法等方面已进行了广泛的研究。安培法是使用最多的检测方 法。电导检测法也日益受到重视，这是由于非水介质有相对低的电导率，使用非 抑制电导检测法时基线噪音低，信噪比较为适当。如t o m l i n s o n 等使用电导检测 在9 5 甲醇中测定了共扼胆酸。非接触电导检测法由于仪器简单和高稳定性，近 年来也引起人们的兴趣。检测的信号基于分析物和背景介质中共存离子的迁移率 比。m u z i k d r 等人【3 6 】在n a c e 中应用非接触电导检测法，发现对于某一具有同一 6 首都! j f | j 范人。学硕十学何论文 电导的介质均呈现相同样的信号和噪音，而与溶剂的种类无关。m a t y s i k t 3 7 】设计 了一种新型电化学检测池，可提高n a c e e d 的实用性，此装置用于分析烟草 中的尼占丁，获得令人满意的结果。 总之，非水毛细管电泳技术拓展了检测手段的应用，从而使毛细管电泳检测 技术适用于更多的化合物。 1 4 非水毛细管电泳的应用 1 4 1 非水毛细管电泳在药物及环境等方面的应用 n a c e 和c z e 相比的优势在于它能分离带电和不带电的分析物。在 n a c e 中中性化合物可以以去质子或复共扼对配合物的形式加以分离。由于使用 非水介质能够在高电场下应用，使分离时间缩短并提高高分离效率。n a c e 的应 用主要集中在药物及环境污染物上，在其他方面的应用也同趋广泛。 表1 1 非水毛细管电泳住约物及环境等方面的应用 t a b 1 - lt h ea p p l i a n c eo f n a c eo nd r u g g e r ya n de n v i r o m e n t a n a l y s i so b j e c t s o l v e n t e l e c t r o l y t e l i t e r a t u r e g l y c o a l k a l o i d a c e t o n i t r i l e e t h a n o l1 2 ma c e t i ca c i d + r o x i t h r o m y c i n f o n n a m i d e - i e n l a n 0 1 r e s v e r a t r o l a m m o n i u m a c e t a t e s t e r o i d a l a l k a l o i d s b e r b e r i n e m o r p h i n e a l k a l o i d a c e t o n i l r i l e - m e t h a n o l a c e t o n i t r i l e - m e t h a n o l m e t h a n 0 1 a c e t o n i t r i l e m e t h a n o l m e t h a n o l i e - a c e t o n i t r i l e m e t h a n o i 5 0 m m o l l a m m o l l o n i u ma c e t a t e 1 0 m m o 儿a m m o l l o n i u m a c e t a t e + 2 m m o l l a c e t i ea c i d 5 0m n l o l ls o d i u mc h o l a t e + 2 0m m o l l a m m o 儿o n i u ma c e t a t e 5m n l o l l n a o h 3 8 3 9 4 0 4 1 z ，m m o i la m m o i l o n i u ma c e t a t e + 1m4 2 a c e t i ca c i d 7 5m m o l ls o d i u ma c e t a t e + lma c e t i c 4 3 a c i d 2 5m m o l i a m m o l l o n i u ma c e a t e 4 4 + l m a c e d ca c i d 4 5 7 首都师范人学硕十学位论文 1 4 2 毛细管电泳在手性化合物分离上的应用 1 9 9 4 年y e 和k h a l e d i 等首次报道了纯溶剂中对映体的分离之后，有关采用一作水 介质分离对映体的文献逐渐增多。这是因为很多有机溶剂能促进离子对形成或手 性选择剂与分析物的i 旬离子一偶极相互作用。有关n a c e 应用于对映体分离的研 究相对于水相c e 还很不深入，但随着人们就有机溶剂对酸碱化学、离子溶剂化 和淌度的影响及其在手性识别过程中作用的不断认识，n a c e 的潜在优势和实用 价值将引起关注。 表1 31 r 水介质毛细管电泳法在手性化合物分析方面的应用 t a b1 3t h ea p p l i a n c eo fn a c eo nt h es e p a r a t i o no fc h i r a lc o m p o u n d a n a l y s i so b j e c t s o l v e n t e l e c t r o y t e l i t e r a t u r e e n a n t i o m e r sd r u g s a m i n oa c i d s a m i n e s 9c h i r a lm i d i c i n e a m i n oa c i d s f o r m a m i d e e t h a n 0 1 m e t h a n o l m e t h a n o l a m i n ef o r m a t e m e t h a n 0 1 e t h a n o l a m i n oa c i d sm e o h d a n s y la m i n oa c i d s n m f c i t r i ca c i d - t r i s 4 8 10 0 m m o l lo c t a n o i ca c i d+12 5 j 4 9 a m m u n i u m 4 0m m o i ln a o h5 0 7 5m m o l lc i t f i ca c i d + 7 5m m o l lt r i s 5l 1 2 5 m m o l la m m u n i u m + 0 m m o l j l 5 2 5 3 5 4 8 首都师范人学硕卜学何论文 1 4 3 非水毛毛细管电泳在法庭科学中的应用 非水介质毛细管电泳方法在法庭科学方面已经有所应用，p r h a d d a d 5 5 1 以 甲醇为有机溶剂，醋酸铵为电解质分离检测了圆珠笔中几种染料，并运用计量学 方法来处理实验数据，结果准确可靠。 1 5 结论 非水毛细管电泳主要用于分析不易溶于水而易溶于有溶剂的物质，分离在水 溶剂中淌度相似的物质，研究在水中难以发生的反应等，展现了广泛的应用阿景。 但仍存在很多限制性因素，如目l j 很多非水溶液的物理化学性质还不是很清楚， 给试剂的选择带来一定的困难。( 1 ) 一些有机介质( 如甲酰胺类) 由于自身的吸收， 使得在低于2 4 0i u n 的波长背景下吸收太大反而使检测限变差，甚至在电场下还会 被电解，从而影响分离；( 2 ) n a c e 的介质与生物体液性质有很大的差异，这就极 大地限制了n a c e 模式在生物大分子及单细胞检测等分离分析前沿领域的广 泛应用；( 3 ) n a c e 作为对c e 的一种有用的补充形式体现了其自身的特点和优 点，它能够解决分析中的一些难题，目前的理论研究和实际应用还不够深入。 本论文就是在前人工作的基础上，对n a c e 的理论和方法学上作进一步研 究和探讨。论文主要有以下几方面的研究工作：( 1 ) 用n a c e 分离和测定了蓝色圆 珠笔墨水中的染料成分；( 2 ) 用n a c e 分离和测定了黑色圆珠笔墨水中的染料成 分：( 3 ) 将n a c e 和h p l c 在墨水分析应用方面做了对比。 9 首都师范人学硕十学位论文 参考文献： 【】j o r g e n s o nj w ，l u k a c sk d a n a l c h e m ，l9 8l ，5 3 ，l2 9 8 - i3 0 2 【2 】胡之德，高效毛细管电泳，兰州人学山版社，1 9 9 7 【3 】w a l r o h e ly ，j o r g e n s o nj w j c h r o m a t o g r a ，1 9 8 4 ，3 1 5 ：1 3 5 1 4 3 【4 】h a y e km j p h y s c o l l o i dc h e m ，1 9 5 l ，5 5 ：1 5 2 7 - 1 5 3 3 【5 】s a h o t ar s ，k h a l e d im g a n a l c h e m ，1 9 9 4 ，6 6 ：1 1 4 1 - 11 4 6 【6 1n gc l ，l e eh k ，l is f y c h r o m a t o g r , l9 9 4 ，17 ：3 8 4 7 - 3 8 5 7 f 7 】t o m l i n s o na j ，b e n s o nl m ，g o r r o dj w ，e ta l l c g c ，l9 9 4 ，l2 ：l2 2 - 13 0 【8 】t o m l i n s o na j ，b e n s o nl m ，g o r r o dj w ，e ta 1 j c h r o m a t o g r b ，1 9 9 4 ，6 5 7 ：3 7 3 - 3 8l f 9 】r i e k k o l am l e l e c t r o p h o r e s i s ，2 0 0 2 ，2 3 ：3 8 6 5 - 3 8 8 3 【l0 】s t e i n e rf ，h a s s e im e l e c t r o p h o r e s i s ，2 0 0 0 ，21 ：3 9 9 4 4 016 【l 】h u i ec w e l e e t r o p h o r e s i s ，2 0 0 3 ，2 4 ：l5 0 8 - l5 2 9 【2 1s m i t hn w ，c a r t e r - f i n c ha s j c h r o m a t o g r a ，2 0 0 0 ，8 9 2 ：2 1 9 - - 2 5 5 【3 】m i l l e rj l ，k h a l e d im g ，s h e ad a n a l c h e m ，l9 9 7 ，6 9 ：1 2 2 3 - 1 2 2 9 【4 】s a l i m i m o o s a v ih ，c a s s i d yrm a n a l c h e m ，1 9 9 5 ，6 7 ：1 0 6 7 1 0 7 3 【5 】b a l c h u n u sa t ，s e p a n i a km j a n a lc h e m ，19 8 8 ，6 0 ：6l7 - 6 2l 【6 】j o h a n s s o n m ，h e n i o nj d ，z w e i e n b n u m uj jc h r o m a t o g r a ，19 91 ，5 5 4 ：3 2 9 - 3 3 8 【7 】w r i g h tp b ，l i s t e ra s ，d o r s e yj g a n a l c h e m ，19 9 7 ，6 9 ：3 2 5l 3 2 5 9 【8 】b i o m s d o t t i ri ，h a n s e ns h ，j p h a r m a c e u tb i o m e d 1 9 9 5 ，1 3 ：1 4 7 3 - 1 4 8 l 【1 9 】t j o m e l u n d j ，h a n s e n s h j b i o c h e r n b i o p h y s m e t h o d s1 9 9 9 ，3 8 ：1 3 9 1 5 3 【2 0 】p o r r a ss p ，j u s s i l am ，s i n e r v ok e ta l ，e l e c t r o p h o r e s i sl9 9 9 ，2 0 ：2 5l 队25l8 【2 l 】b i o m s d o t i ri ，h a m e n s h j c h r o m a t o g ra1 9 9 5 ，7 1l ：3 1 3 - 3 2 2 f 2 2 】p o r r a ss p ，v a l k o le ，j y s k ep ，e ta l j b i o c h e m b i o p h y s m e t h o d s 1 9 9 9 ，3 8 ：8 9 - 1 0 2 【2 3 】k i mb ，c h u nm s ，s h i i ls ，e ta 1 c h e m s o c 19 9 9 ，2 0 ：1 4 8 3 - 1 4 8 6 【2 4 】r a z e e ，t a m u r aa ，m a s u j i m at j a o a ci n t1 9 9 9 ，8 2 ：1 5 7 7 - 1 5 8 6 【2 5 】v a l k oi e ，s i r e nh ，r i e k k o l am l lc g cl9 9 7 ，l5 ：5 6 m 6 6 7 f 2 6 】t j o m e l u n dj ，h a n s e ns h j c h r o m a t o g r a ，19 9 7 ，7 9 2 ：4 7 5 - - 4 8 2 2 7 m a t y s i kf m e l e c t r o p h o r e s i s ，2 0 0 2 ，2 3 ：4 0 0 , - 4 0 7 【2 8 】j u s s i l am p a l o n e ns ，p o r r a ss p ，r i e k k o l am l e l e c 仃o p h o r e s i s2 0 0 0 ，2 1 ：5 8 6 - - 5 9 2 【2 9 】g r o bm ，s t e i n e rf e l e c t r o p h o r e s i s2 0 0 2 ，2 3 ：1 9 2 1 - 1 9 2 7 3 0 】w a r dv l ，k h a l e d im g jc h r o m a t o g rb1 9 9 8 ，7 1 8 ：1 5 - 2 2 f 3 1 】c h r o m a t o g r a p h i a1 9 9 5 ，4 0 ：1 6 3 - 1 6 9 3 2 】t j o n e l u n d ，j ，ha m e n s h j c h r o m a t o g r al9 9 7 ，7 7 9 ：2 3 5 - 2 4 3 【3 3 】o l i v a r e sj a ，ng u y e n n t ，y o n k e rc r a n a l c h e m ，19 8 7 ，5 9 ，12 3 啦! 2 3 2 【3 4 】l uw ，p o o ng kc a r m i c h a e lp l ，e ta 1 a n a l c h e m ，19 9 6 ，6 8 ，6 6 8 - 6 7 4 【3 5 】t o m l i n s o naj ，b e n s o nl m ，g o r r o dj w j c h r o m a t o g r b ，19 9 4 ，6 5 7 ，3 7 3 - 3 8l 3 6 】m u z i k d rj ，v a n d eg o o rt ，g a sb ，k e n n d l e re j c h r o m a t o g r a ，2 0 0 l ，9 2 4 ：1 4 7 - 1 54 3 7 】m a t y s i kf m j c h r o m a t o g r a ，1 9 9 9 ，8 5 3 ：2 7 - 3 4 【3 8 】b i a n c og ，s c h m i t t k o p pl i n p ，c r e s c e n z i a ，e ta 1 a n a lb i o a n a lc h e m ，2 0 0 3 ，3 7 5 ( 6 ) ：7 9 9 8 0 4 【3 9 李娜，谢天尧，郑妍鹏，等分析测试学报，2 0 0 2 ，2 1 ( 5 ) ：2 0 - - 2 6 【4 0 】c h e ny h ，c h u n gy l ，l i nc h jc h r o m a t o g ra ，2 0 0 2 ，9 4 3 ( 2 ) ：2 8 7 - 2 9 4 【41 】b a c k o f e nu ，m a t y s i kf m ，l u n t ec e jc h r o m a t o g r a ，2 0 0 2 ，9 4 2 ( 1 2 ) ：2 5 9 - 2 6 9 【4 2 】c h e r k a o u is ，b e k k o u c h ekc h r i s t e np ，e ta 1 jc h r o m a t o g ra ，2 0 0 1 ，9 2 2 ( 1 - 2 ) ：3 2 1 3 2 8 1 0 首都师范人。硕十学f 妒论文 【4 3 】jis g ，c h a iy f ，z h a n gg q ，e ta 1 b i o m e dc h r o m a t o g r ，19 9 9 ，13 ( 7 ) ：4 3 9 - - 4 4l 【4 4 】b j o r n s d o t t i ri ，h a n s e ns jp h a r mb i o m e da n a l ，19 9 7 ，15 ( 8 ) ：10 8 3 - 10 8 9