（参考课件）病毒性肝炎标志物检测.ppt

病毒性肝炎标志物检测,1,A,病毒性肝炎HepatitisVirus,肠道传播,肠道外传播,F,TTV?其它,E,NANB,B,D,C,病毒性肝炎-背景,2,传染源,粪便,血液/,血源性物质/,体液,血液/,血源性物质/,体液,血液/,血源性物质/,体液,粪便,传播途径,粪-口,经皮肤/经粘膜,经皮肤/经粘膜,经皮肤/经粘膜,粪-口,慢性感染,否,是,是,是,否,病毒性肝炎类型,A,B,C,D,E,基因组类型ssRNAdsDNAssRNAssRNAssRNA,3,HepatitisBVirus,乙型肝炎的病原体在全世界广泛流行，估计全球半数以上人口已被HBV感染过，5%的人口为HBV慢性感染中国：乙肝高发区，人群HBsAg的检出率达9.8%,4,HepatitisBVirus,5,抗原组成(一)-HBsAg,位于病毒表面，是一种糖蛋白4种亚型(adr,adw,ayr,ayw)欧美国家:adw我国汉族:adr我国少数民族:ayw判断HBV感染的指标之一刺激机体产生保护性抗体即抗-HBs,6,抗原组成(二)-HBcAg,位于Dane颗粒核心部分和肝细胞核内，在血清中不易检出游离的HBcAg主要成分是蛋白质刺激机体产生抗-HBc(非保护性抗体)在乙肝急性期、恢复期和HBsAg携带者中常可检出抗-HBc抗-HBcIgM常提示病毒处于复制状态,7,抗原组成(三)-HBeAg,位于HBV的核心,是一种可溶性蛋白抗原HBeAg和Dane颗粒出现相平行，且与DNA多聚酶在血中的消长动态相符合血中HBeAg的出现可作为HBV复制及血清有感染性的指标刺激机体产生抗-HBe抗-HBe能与受染肝细胞表面的e抗原结合,通过补体介导破坏受染的肝细胞,抗-HBe的出现是预后良好的征象,8,抗原组成(四)-Pre-S抗原,位于HBV的外衣壳上，有两种刺激机体产生抗Pre-S1和抗Pre-S2，能阻断HBV与肝细胞受体结合，从而起到抵抗病毒的作用抗Pre-S1和抗Pre-S2的出现，表示病情好转，趋向痊愈,9,传染源,患者潜伏期急性期慢性期无症状HBsAg携带者,10,高,中等,低/不能检出,血液,精液,尿,血清,阴道分泌物,粪便,伤口渗出物,唾液,汗液,泪液,乳汁,各种体液中HBV的浓度,11,血源性传播输血、注射、外科和牙科手术、针刺等剃刀、牙刷和蚊虫叮咬等母婴垂直传播宫内传播分娩时微小皮损处传播产后母婴密切接触性传播,HBV传播途径,12,病原学诊断(一)-抗原抗体检测,项目：HBsAg、抗-HBs、HBeAg、抗-HBe、抗-HBc以及抗-HBcIgM方法ELISA(enzyme-linkedimmunosorbentassay，最常用，定性)发光免疫分析(定量)反相间接血凝试验(少用),13,ELISA的基本原理,利用抗原和抗体特异性结合主要的试剂固相抗原或抗体酶标记的抗原或抗体酶的底物,14,病原学诊断(二)核酸检测,核酸杂交探针PCR引物,15,HBsAg感染的标志Anti-HBs既往感染/接种疫苗Anti-HBcIgM急性感染标志Anti-HBcIgG既往或慢性感染HBeAg急性病毒复制，有传染性Anti-HBe病毒不再复制HBV-DNA急性病毒复制，比HBeAg更准确；主要用于监测治疗反应,16,血清学检测的临床意义,HBsAg抗-HBsHBeAg抗-HBe抗-HBc临床意义,急性或慢性感染(大三阳),+,-,+,-,+,+,+,+,乙肝后期或慢性感染(小三阳),-,-,+,+,-,-,-,潜伏期或急性乙肝早期,-,-,+,+,+,痊愈或恢复期,有免疫力,-,-,-,-,-,+,+,+,-,-,痊愈,有免疫力,疫苗接种或曾经感染过,有免疫力,17,蛋白质代谢功能的检查,肝合成白蛋白、脂蛋白、凝血因子、纤溶因子、各种转运蛋白等，肝脏受损时，这些蛋白下降球蛋白（非肝脏合成）在肝实质细胞受损、间质细胞增生时，球蛋白生成增加,18,肝功能,1.代谢功能：1)蛋白质、脂肪的同化、储存、异化等2)核酸代谢、维生素的活化和储藏3)胆红素、胆酸的生成分泌、排泄功能如对胆红素的排泄2.分泌、排泄功能：如对胆红素的排泄3.生物转化功能：氧化、还原、水解、结合,19,实验室检查的目的,了解：肝脏有无损伤及损伤的程度监测肝功能状态协助病毒性肝炎和肝癌的诊断评价肝脏的储备功能其他,20,一）血清总蛋白、白蛋白、球蛋白A/G比值测定,1）血清总蛋白（TP，serumtotalprotein）是血清所含各种蛋白的总称,包括血清A和G，各占60%和40%2）白蛋白（A，albulin)为血液中主要蛋白质。由肝脏合成，其半衰期为15-19天,21,3）球蛋白(G，globulin)：为血清总蛋白中除去白蛋白以外的蛋白质,是多种蛋白质的混合物，包括：免疫球蛋白和补体、各种糖蛋白、脂蛋白、金属结合蛋白和酶球蛋白主要是由单核-吞噬细胞系统合成,与机体免疫有关4）A/G比值：1，如342umol/L,41,临床意义,2）根据黄疸程度判断黄疸原因（总胆红素水平）完全阻塞性黄疸342umol/L不完全阻塞性黄疸171-342umol/L肝性黄疸17.1-171umol/L溶血性黄疸500U,随病情好转逐渐下降至正常B、病情恶化，转氨酶反下降，是肝细胞广泛坏死的表现C、在急性肝炎的恢复期，如转氨酶在100U左右波动或再上升,提示急性转为慢性,49,临床意义,（2）慢性肝炎和脂肪肝:轻度上升（100-200U）或正常（3）肝硬化、肝癌:轻度上升（100-200U）或正常,50,2、-谷氨酰转移酶（-GT）,1）-G活性肾胰肝2）在肝-GT广泛分布于肝细胞毛细胆管侧和整个胆管系统，在胆汁淤滞时,肝内-GT合成亢进，肝癌可合成-GT3）参考值男11-50U/L女7-30U/L,51,意义,1）肝癌肝癌合成A、肝内阻塞胆汁淤滞-GT肝癌细胞产生B、阳性率95%2）阻塞性黄疸:-GT（上升幅度与黄疸程度平行）,52,意义,3)急性肝炎:中度升高，1000U,53,肝癌标志物的检查,在肝细胞癌时,由于肝细胞功能异常，产生出一些与肝细胞癌密切相关的蛋白质,称为肝癌的肿瘤标志物，对肝癌的诊断有重要意义,54,1.AFP测定,1）AFP是胎儿性蛋白，为胎儿所特有，出生后不久转为阴性,或仅含微量在原发性肝癌时升高因而，测定AFP在血中的浓度，对此类疾病的诊断有重要意义,55,2）来源:胎肝和卵黄囊与肝再生时，分裂细胞数量呈正相关,3）参考值:成人25ug/L3周6个月的小儿500ug/L持续1个月以上,能排除妊娠、活动性肝炎、幼儿性睾丸或卵巢、畸胎瘤等可确诊肝癌（2）肝炎病毒性肝炎肝细胞重新具有了产生AFP的能力.急性、慢性肝炎均可升高，但300ug/L，随着肝细胞的修复，AFP下降，为一过性的升高,57,4)意义,（3）妊娠3-4月以后AFP升高7-8月高峰,但400ug/L分娩后约3周降至正常（4）其他肝硬化（活动期）、先天性胆管闭锁等AFP升高,58,2、癌胚抗原（CEA）测定,1）癌胚抗原是一种存在于成人癌组织中的胎儿性蛋白，可根据免疫学原理检测2）参考值0-5ug/L,59,2、癌胚抗原（CEA）测定,（1）消化道肿瘤A、无助癌的早期诊断B、观察术后过程,判断预后,预测再发的指标（2）原发性肝癌与转移性肝癌的鉴别价值：较大转移性肝癌CEA阳性率高达90%（3）溃疡、肝硬化、阻塞性黄疸及吸烟者和老人CEA可轻度升高,60,肝病检查项目的选择,61,选择原则,1、肝功检查无特异性强的检查方法，而且检查项目繁多，选择项目应考虑的选择原则：1）病情需要2）敏感性、特异性高3）实验室条件允许,62,2、选择项目,1）健康查体:ALT、肝炎病毒标志物2）肝炎诊断：急性：ALT、肝炎病毒标志物慢性:ALT、肝炎病毒标志物加上AST、ALP、TP、A/G、-GT、血清蛋白电泳,63,2、选择项目,3）黄疸：一般总胆红素、ALT加上AFP4）原发性肝癌：除一般肝功,加测AFP、-GT、CEA等,64,血气分析,65,1、酸碱度(pH)，参考值7.357.45。7.35为酸血症，7.45属碱血症。但pH正常并不能完全排除无酸碱失衡。2、二氧化碳分压(PCO2)参考值4.655.98kPa(3545mmHg)乘0.03即为H2CO3含量。超出或低于参考值称高、低碳酸血症。55mmHg有抑制呼吸中枢危险。是判断各型酸碱中毒主要指标。3、二氧化碳总量(TCO2)，参考值2432mmHg，代表血中CO2和HCO3之和，在体内受呼吸和代谢二方面影响。代谢性酸中毒时明显下降，碱中毒时明显上升。,66,4、氧分压（PO2）参考值10.6413.3kpa（80100mmHg）。低于55mmHg即有呼吸衰竭，30mmHg可有生命危险。5、氧饱和度(SatO2)，参考值3.5kPa(26.6mmHg)。6、实际碳酸氢根（AB），参考值21.427.3mmHg，标准碳酸氢根（SB）参考值21.324.8mmol/L。AB是体内代谢性酸碱失衡重要指标，在特定条件下计算出SB也反映代谢因素。二者正常为酸碱内稳正常。二者皆低为代谢性酸中毒（未代偿），二者皆高为代谢性碱中毒（未代偿），ABSB为呼吸性酸中毒。,67,7、剩余碱（BE）参考值3+3mmol/L，正值指示增加，负值为降低。8、阴离子隙（AG），参考值816mmol/L，是早期发现混合性酸碱中毒重要指标。判断酸碱失衡应先了解临床情况，一般根据pH，PaCO2,BE（或AB）判断酸碱失衡，根据PaO2及PaCO2判断缺氧及通气情况。pH超出正常范围提示存在失衡。但pH正常仍可能有酸碱失衡。PaCO2超出正常提示呼吸性酸碱失衡，BE超出正常提示有代谢酸失衡。但血气和酸碱分析有时还要结合其他检查，结合临床动态观察，才能得到正确判断。血气及酸碱分析,68,血液酸碱度(pH)【参考值】735745(血气酸碱分析仪)【临床意义】人血处于恒定的弱碱性状态，pH值735表示酸血症，pH值745表示碱血症，可由代谢性和呼吸性疾病引起。pH正常并不能排除酸碱失衡。无呼吸影响的酸碱度(pHNR)【参考值】735745(血气酸碱分析仪)【临床意义】pH大于或小于pHNR，说明有呼吸因素影响pH。,69,动脉血氧分压(Pa02)【参考值】初生儿80120kPa(6090mmHg)成人106133kPa(80100mmHg)(血气酸碱分析仪)换算系数：kPa75mmHg，mmHg0133kPa【临床意义