鱼骨粉制备阿胶复合氨基酸螯合钙工艺研究.doc

鱼骨粉制备阿胶复合氨基酸螯合钙工艺研究 本实验主要探究钙与复合氨基酸质量比、pH值、温度、时间四种因素对螯合率的影响，为阿胶复合氨基酸螯合钙的进一步应用提供技术支持与理论基础。 1材料与方法 1.1仪器、试剂及材料 1.1.1材料鱼骨粉购自青岛佰仁生物科技有限公司；阿胶复合氨基酸粉（实验室自制）。 1.1.2仪器TG16G离心机（湖南凯达科学仪器有限公司）； HH-8数显恒温水浴锅（金坛市科析仪器有限公司）； AL204-IC电子天平（梅特勒-托利多仪器有限公司），原子吸收分光光度计。 1.1.3试剂乙二胺四乙酸二钠；CaCO3；钙指示剂；盐酸；硝酸；高氯酸；无水乙醇以上均为分析纯。 1.2方法 1.2.1鱼骨粉中钙的水解取鱼骨粉1.00克，在盐酸用量4毫升，盐酸浓度3mol/L，反应温度108，反应时间1小时，此条件下鱼骨粉中可溶性钙溶出率最高3。 1.2.2鱼骨粉中可溶性钙含量的测定采用熊竹EDTA滴定法，配置EDTA标准溶液与钙标准溶液，用钙标准液标定EDTA溶液，用配置好的EDTA标准液滴定样品溶液至溶液呈蓝色。测得可溶性钙含量为28.2%，具有很高的利用价值。可溶性钙含量计算公式4： 可溶性钙含量%=可溶性钙总量/骨粉总量100% 1.2.3螯合反应将氨基酸液与钙源按一定比例混匀，放入恒温水浴锅中按一定温度搅拌一定时间，反映结束后将样品置于离心机中，离心分离弃去沉淀物，蒸馏后加入无水乙醇纯化，抽滤弃去滤液，将样品置于冰箱中冷冻干燥。 螯合钙测定运用原子吸收分光光度计测定螯合态钙元素的方法，将样品湿法消化后溶于纯水中，将试液置于离心机中10000转/分钟，稀释上清液后可直接用原子吸收分光光度计测定。 螯合率计算，按公式计算5： A=M1/M2100% 式中：A螯合率（%）；M1螯合态钙元素含量（g）；M2反应体系中钙元素总量（g）。 1.2.4单因素试验钙与复合氨基酸质量比、pH值、温度、时间四种因素进行单因素试验。 质量比的影响。固定pH值为7，反应温度70，反应时间50分钟，分别量取钙与复合氨基酸质量比21、1.51、11、11.5、12制成样品进行螯合反应。 pH值的影响。固定钙与复合氨基酸质量比11，反应温度70，反应时间50分钟，分别调pH值为5、6、7、8、9进行螯合反应。 温度的影响。固定钙与复合氨基酸质量比11，pH值为7，反应时间50分钟，反应温度分别为30、50、70、90进行螯合反应。 反应时间的影响。固定钙与复合氨基酸质量比11，pH为7，反应温度70，反应时间分别为30分钟、40分钟、50分钟、60分钟、70分钟进行螯合反应。 1.2.5正交试验试验采用钙与复合氨基酸质量比、pH值、温度、时间四个因素设计正交表L9（34），根据正交分析确定最优螯合路线，见表1。 2结果与讨论 2.1单因素试验 2.1.1钙与复合氨基酸质量比对螯合率的影响 由图1可知当钙与复合氨基酸质量比为11时螯合率出现峰值，钙含量较多或较少对螯合率都有影响，其原因可能是氨基酸与钙螯合的比例是一定的，钙离子增加和减少都会对螯合反应造成影响6。 2.1.2pH值对螯合率的影响由图2可知，当pH值为7时螯合率最高，pH值过酸过碱都影响钙离子螯合，可能是当溶液中H+增加时，H+与钙离子争夺供电基团，影响螯合反应的正常进行，当溶液中OH-增加时OH-与钙离子率先形成氢氧化钙沉淀，不利于螯合反应进行7。所以pH值为7时，H+与OH-对氨基酸影响较小，螯合率最高。 2.1.3温度对螯合率的影响 由图3可知，当温度逐渐升高时螯合也不断升高，温度达到70时螯合效果最佳，温度过高螯合率反而下降，其原因可能是过高的温度使螯合物分解或发生其他化学反应，从而使螯合率降低8。 2.1.4时间对螯合率的影响 由图4可知，当反应时间为50分钟时螯合效果最佳，时间过长反而使螯合率降低，原因可能是螯合物不稳定，时间过长会造成螯合物分解或转化9，从而降低了螯合率。2.2正交试验（见表2） 3结论 本研究结果显示：对螯合率的影响，钙与氨基酸比例反应时间pH值反应温度。当钙与复合氨基酸质量比11、pH值取7、反应温度90、反应时间60分钟的条件下螯合率最高，螯合率达76.5%。与同类文献螯合率结果相差不大，说明鱼骨中钙含量较丰富,利用鱼骨制备复合氨基酸螯合钙有利于废物利用，减少环境污染。 参考文献 1王俊,程薇,文莉,熊光权,曾汉庭,陈金国,乔宇.复合氨基酸螯合钙对大鼠生物利用率的研究J.湖北农业科学,xx,(12):1492-1494. 2马海霞,杨贤庆,胡振珠,张桢,陈胜军,杨燕.复合氨基酸螯合钙的合成工艺优化J.食品与机械,xx,(01):214-218.3熊竹.虾