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实验八 血型鉴定及交叉配血实验,(一)ABO血型鉴定,1实验原理 红细胞膜上具有血型糖蛋白,作为抗原,也称为凝集原;ABO血型就是根据红细胞表面抗原来确定的,根据红细胞上有或无A抗原或/和B抗原,将血型分为A型、B型、AB型及O型四种。 血清中含有相应的特异性抗体称为凝集素。 凝集原和相应的凝集素特异性结合,使红细胞凝集成团,进而引起红细胞破裂,产生溶血。 ABO血型鉴定的原理是利用红细胞凝集试验,将待测血液分别与已知含A抗体和B抗体的标准血清混合,观察是否发生凝集现象,判断待测血液红细胞上有何种抗原,由此确定待测血液的血型。,ABO血型分类,ABO血型正反定型结果,(一)ABO血型鉴定,2血型鉴定方法 标记凹载玻片:左上角写A,右上角写B。 分别吸取标准A血清和标准B血清各1滴滴于双凹载玻片左端和右端。 采血针刺破左手无名指尖,待血液出来后,用2支毛细滴管吸取血液,分别加入到玻片左、右两侧的血清内,并用牙签搅拌,使标准血清与血液混匀。(切勿混用毛细滴管和牙签!) 手持玻片转动数次,转动时玻片应保持在一个水平面上,然后置室温下5min后观察结果。 肉眼观察:如果外观略呈花边状或锯齿状,看上去有沉淀,则多为凝集;如果血滴呈均匀状态,边缘整齐,则多为不凝集。 进一步在低倍镜下观察:在低倍镜下,如果观察到红细胞凝集成团,或尚有少数游离细胞,则为凝集现象;如果红细胞均为游离状态,则为不凝集。根据镜下所见有无凝集现象判定血型。,取干净载玻片,滴加定型剂,消毒,取血,消毒,取血,消毒,观察,记录结果,实验步骤,抗A,抗B,用7075的酒精消毒取血部位,消毒取血部位,用针扎一下消毒部位,使血冒出,立即滴一滴血液在抗A或B上。,抗A,抗B,再用7075的酒精擦洗消毒刚用针扎的部位,然后再取一滴血液于抗B或A上。,抗A,抗B,观察有无凝集,并按下表判定结果。,呈现均匀的淡红色时,表明不凝集,用“一”号表示。 在试剂里凝结成絮团状,形成鲜明的对比,表明凝集,用“十”号表示。,主侧配血 用患者血清与供 者红细胞进行试验 次测配血 供血者血清与患 者红细胞进行试验,(二)交叉配血试验,交叉配血的要求,主侧配血要求: 绝对不可以有凝集或溶血现象。 次测配血要求: 供血者血清加受血者红细胞在允许范围内,可以有凝集现象,但不可以有溶血。,交叉配血的目的,交叉配血试验是输血前必要的步骤,主要是检查受血者血清中有无能破坏供血者红细胞的抗体。主要目的是为了防止输血后产生溶血性反应。 尽可能确保对人和一个病人来说,输了供血者的血不会引起有害反应,并且使红细胞在输注后能保持最长的存活时间。,交叉配血试验方法,盐水介质配血 酶介质配血 菠萝酶,无花果酶,木瓜酶 抗球蛋白介质配血 经典方法,加LISS(低离子介质溶液)的方法 聚凝胺介质配血 凝胶方法配血,盐水介质配血方法,离心 看结果,抗球蛋白配血方法,患者,献血者,主侧,次侧,37 水浴30分钟,三洗,抗球蛋白方法配血方法,加抗球蛋白,离心 看结果,阳性,阴性,酶介质配血方法,主次侧 均加酶,酶介质配血方法,离心 看结果,37 ,37 水浴30分钟,二、Rh定型 1、使用盐水介质试剂 用LIM配制的红细胞悬液,可以代替 由生理盐水配制的红细胞悬液在盐水介质 试剂中进行Rh定型,两者定型方法和效果 均相同。,聚凝胺(Polybrene)配血方法,室温放置 1 分钟,主次侧均 加聚凝胺,聚凝胺(Polybrene)配血方法,离心,聚凝胺引起红细胞非特异性凝集,主次侧均 加重悬液 看结果,后面内容直接删除就行 资料可以编辑修改使用 资料可以编辑修改使用 资料仅供参考,实际情况实际分析,主要经营:课件设计,文档制作,网络软件设计、图文设计制作、发布广告等 秉着以优质的服务对待每一位客户,做到让客户满意! 致力于数据挖掘,合同简历、论文写作、PPT设计、计划书、策划案、学习课件、各类模板等方方面面,打造全网一站式需求,感谢您的观看和下载,The user can demonstrate on a projector or
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