病理学在妇科肿瘤研究中的应用及方向

卵巢交界性肿瘤病理学 北京大学人民医院病理科 沈丹华 2008,6,15 北京大学人民医院病理科北京大学人民医院病理科 沈丹华沈丹华 2009,5,102009,5,10 病理学在妇科肿瘤研究中的 应用及方向 病理学检查被誉为诊断学中的金标准 妇科肿瘤的诊断离不开病理学检查。 通过标本的组织学改变，可以反映疾 病过程中的形态、功能、代谢的改变 临床病例的回顾性研究 总结诊治疾病的经验。 探讨某种妇科肿瘤的临床病程、治疗疗 效以及预后情况 。 提高肿瘤诊断的准确性、制订恰当的治 疗方案、准确的评估疾病的预后。 病理学在妇科肿瘤研 究中的 应用及方向 临床病例的回顾性研究中的病理学相关因素 。 免疫组织化学染色技术在妇科肿瘤研究中的 应用。 从病理学角度探讨肿瘤发生发展的过程。 病理学研究的新技术及未来研究方向 临床病例的回顾性研究 这类研究离不开病理学检查， 可以为临床医生提供肿瘤的组织学类型， 肿瘤的分化程度，临床病理学分期等重要 的信息。 临床病例的回顾性研究 子宫颈微小浸润癌的研究为例： 细胞学检查、宫颈活检、宫颈锥切、全子 宫切除、根治性子宫切除标本 总结子宫颈微小浸润癌中多项病理因素与 病程进展、治疗方案以及预后的关系 与微小浸润癌预后相关的病理 因素 浸润深度：最为客观，较易测量 如果肿瘤的浸润深度小于1mm，基本上没有转移 的潜能。 浸润深度不超过3mm，其转移的发生率也极低， 一般为1-2%。 浸润深度在3-5mm，其淋巴结转移率就明显上升 了，平均在4-8%，最高可达到13% 。 与微小浸润癌预后相关的病理 因素 微小浸润癌的水平范围与深度同等重 要 在同样浸润深度不超过5mm的病例中， 出现淋巴结转移的病例其浸润宽度都超过 了7mm。 一例发生淋巴结转移的早期浸润癌，其肿 瘤的浸润深度不足3mm，但宽度却达到 了17mm。 与微小浸润癌预后相关的病理因 素 淋巴管是否受累 相同的浸润深度，伴有淋巴管受累比无 淋巴管受累的患者，复发和淋巴结转移 的几率都明显增加。 在肿瘤浸润深度25% 的绒毛间质及细胞滋养细胞p57阳性。 免疫组织化学染色 技术在 妇科肿瘤研究中的 应用 为下一步的治疗提供依据 激素受体：子宫内膜等器官作为雌、孕激 素的靶器官，其作用是通过激素受体介导 完成的。检测子宫内膜病变中雌激素及孕 激素受体的表达情况，可以帮助判断这些 病变的预后情况并指导下一步的治疗 免疫组织化学染色技 术在 妇科肿瘤研究中的应 用 新发现基因的验证: 通过免疫组织化学染色验证 新基因的蛋白产物在组织细胞中的表达情况： 人附睾分泌蛋白（HE4），有可能成为一种新型 的卵巢癌标记物，卵巢癌患者血清中HE4增高， 需要组织病理学验证。 已知基因或蛋白在妇科肿瘤组织中的表达情况 ：如HER2在卵巢癌中的表达情况。 从病理学角度探讨 肿瘤发生发展的过 程 子宫内膜癌发病机制的探讨 ： 子宫内膜癌分为两型。 I型：子宫内膜样腺癌，雌激素依赖性，常 伴有PTEN突变。多见于围绝经期妇女。 II型：非子宫内膜样型（包括浆液性癌和 透明细胞癌）。与激素无关，常伴有p53 的突变，常见于绝经后老年妇女。 子宫内膜癌发病机制的 探讨 I型子宫内膜样腺癌：雌激素依赖性，多见 于围绝经期妇女。 常伴发子宫内膜增生，特别是非典型增生 或子宫内膜上皮内瘤变（EIN）。 常伴有PTEN突变：正常子宫内膜中PTEN 的突变率为0%, 而EIN为55%，子宫内膜样 腺癌可以到达83%。 应用免疫组织化学染 色可以检测PTEN蛋白的情况。 I型子宫内膜样癌 及癌前期病变 EIN中的PTEN表达的丢失 子宫内膜癌发病机制的 探讨 型子宫内膜癌：与雌激素的关系较少，多见 于绝经后妇女，具有代表性的组织学类型是浆 液性癌。 子宫内膜浆液性癌是由p53基因突变所致，因此 在免疫组织化学染色时p53常呈阳性表达。 子宫内膜浆液性癌的浅表病变（EIC）及前期病 变（EmGD）中，具有与子宫内膜浆液性癌相似 的分子遗传学改变，也常常发生p53 突变。 子宫浆液 性癌 p53 ER EIC组织学 表现 EIC组织学与免疫组化染色 （p53） EmGD组织学表现及免疫组织化学 染色（p53) 从病理学角度探讨 肿瘤发生发展的过程 卵巢癌发病机制的探讨 以Kurman为首的研究小组在过去10年的时 间里，对大量非浸润性和浸润性上皮性卵 巢肿瘤作了系统的病理和临床分析. 提出了卵巢肿瘤发生的二元模式。上皮性 卵巢肿瘤的发生有两条主要的通路，将上 皮性卵巢肿瘤相应地分为两大类：型肿 瘤和型肿瘤. 卵巢癌发病机制的探讨 型肿瘤包括低级别浆液性癌、黏液性癌、子宫内膜样癌、恶 性Brenner肿瘤和透明细胞癌。 浆液性和黏液性肿瘤起源于卵巢表面上皮或包涵囊肿。 低级别浆液性癌，它的发生包括一个形态学和生物学的谱系： 即从良性增生性肿瘤浆液性交界性肿瘤微乳头型浆液性交 界性肿瘤低级别浸润性浆液性癌（也称浸润性微乳头型浆液 性癌） 子宫内膜样和透明细胞肿瘤起源于子宫内膜异位或子宫腺肌瘤 ：囊腺瘤和腺纤维瘤交界性肿瘤恶性浸润性肿瘤。 分子遗传学改变KRAS和BRAF的突变 卵巢癌发病机制的探讨 型肿瘤包括高级别浆液性癌、恶性中胚叶混 合瘤（癌肉瘤）和未分化癌。 型肿瘤进展更为迅速，早期即出现转移，具 有高度侵袭性，初始时采用铂类化疗药物有效 ，患者死于肿瘤的复发和转移。 主要的分子遗传学特征是p53突变。在50-80%的 卵巢进展期高级别浆液性癌中，可以发现p53的 突变 卵巢癌发病机制的探讨 最新提出有关卵巢癌发生新模式：高级别卵巢浆液性 癌起源于输卵管粘膜的恶性转变。 在对于具有BRCA基因突变的妇女进行预防性输卵管卵 巢切除术中，常常可以发现高比率的输卵管癌。 如果对输卵管进行仔细检查，在伴有BRCA突变病例发 生恶性肿瘤者，100%可以发现输卵管原发的病变 。 不考虑是否具有BRCA突变时，大约有63%的腹膜原发 癌和49%的卵巢原发浆液性癌，伴有早期输卵管癌。 卵巢癌发病机制的探 讨 从分子遗传学角度分析表明TIC、卵巢癌以及腹膜浆液 性癌在p53突变方面是相同的 。 BRCA基因突变的妇女进行预防性输卵管卵巢切除术 后发现大约80%正常输卵管伞端粘膜可以表达p53。 即使不考虑BRCA突变的情况，一些合并有输卵管伞端 粘膜恶性转化的卵巢或腹膜浆液性癌的病例也同样发 生p53突变，其比例可达到93%. 目前尚未发现卵巢和腹膜癌的癌前病变，将p53标记 阳性及其TIC视为输卵管、卵巢、腹膜浆液性癌的癌前 病变 。 卵巢癌发病机制的探讨 卵巢癌发病机制的探讨 病理学研究的新技 术 及未来研究方向 组织芯片技术 多数以病理组织为基础的分子研究速度慢、费时 费力，难以满足现代分子生物学的研究需要：一 块常规的组织标本，至多只能切取300张5m的 切片。 1998年Kononen等发明了组织芯片技术，它可从 成百上千个石蜡包埋块中提取圆柱形核心标本置 于一个包埋块上，切片后可以一批进行多样本的 原位杂交及免疫组织化学染色，检测相关的基因 及蛋白表达情况。 组织芯片制作 组织芯片HE染色及免疫组织化学染 色片 组织芯片HE染色片 组织芯片 免疫组织化学染色片 病理学研究的新技术 及未来研究方向 原位杂交技术 应用DNA探针检测肿瘤细胞中的基因拷贝 数 目前常用的有两种方法：荧光原位杂交（ FISH）和显色原位杂交（CISH） 原位杂交技术 FISH：目前可用于新鲜冰冻及石蜡标本， 并且可采用单色或双色荧光标记， 以乳腺癌为例，可同时检测HER-2和17号 染色体，区别出真正的HER-2基因放大。 原位杂交技术 CISH：2000年由Tanner等推出，用于检测 基因放大的状况。 这种方法采用地高辛标记 DNA探针，然后 用IHC样的过氧化物酶的反应系统，DAB显 色后，使用普通光镜观察。 Average HER2/Chr17 ratio Reported Result HER2/chr172. 2 Equivocal for HER2 gene amplificati on HER2/Chr172.2 Positive for HER2 gene amplifika