ascocap乳腺癌her2检测指南的学习体会和困惑-聂秀_ppt课件

Union hospital 武汉协和医院 ASCO/CAP乳腺癌HER2检测指南 的学习体会和困惑 武汉协和医院病理科 聂秀 Union hospital 武汉协和医院 主要内容 1、IHC判读标准的学习和困惑 2、实践中需要重视的几个问题 3、接受亮视野ISH检测 4、对组织处理的要求 Union hospital 武汉协和医院 IHC检测流程和判读标准 2007版 Arch Pathol Lab Med. 2007;131(1):18-43 Union hospital 武汉协和医院 Union hospital 武汉协和医院 Union hospital 武汉协和医院 IHC检测流程和判读标准 2013版 2007版：30% Arch Pathol Lab Med. 2013 Oct 7. Epub ahead of print Union hospital 武汉协和医院 Union hospital 武汉协和医院 Union hospital 武汉协和医院 Union hospital 武汉协和医院 主要内容 1、IHC判读标准的学习和困惑 2、实践中需要重视的几个问题 3、接受亮视野ISH检测 4、对组织处理的要求 Union hospital 武汉协和医院 对肿瘤医生的推荐要点 必须要求对乳腺癌患者的每个浸润性原发 灶和转移灶（若为期肿瘤，且可获得标 本）进行HER2检测，以指导HER2靶向治疗 的决策。 Union hospital 武汉协和医院 同组织病理学特征的不一致性 如果发现下述组织病理学特征， 初始HER2 检测结果为阳性，则应当要求新的HER2检 测。 组织学1级的下列类型腺癌： 浸润性导管或小叶癌，ER和PgR阳性 小管癌（至少90%为纯小管癌） 粘液癌（至少90%为纯粘液癌） 筛状癌（至少90%为纯筛状癌） 腺样囊性癌（至少90%为纯腺样囊性癌） Arch Pathol Lab Med. 2013 Oct 7. Epub ahead of print Union hospital 武汉协和医院 对浸润性微乳头状癌判读3+不再强调完整 的闭环膜染色 至少判2+ Union hospital 武汉协和医院 即使存在异质性，只要扩增细胞连续、 均质，且占浸润癌10%以上，就应明确报 道为ISH阳性。 Union hospital 武汉协和医院 推荐：切片超过6周不再用于HER2检测 Union hospital 武汉协和医院 IHC检测流程和判读标准 2013版 如因技术问题导致无法将单一或双重检测（IHC和ISH）报告为阳 性、阴性或不确定时，必须报告HER2检测结果为无法确定（ indeterminate）。 情况可能包括： 样本处理不当 人为原因（人为挤压或边缘效应）导致判读困难 检测失败 应要求对另一样本进行检测以确定HER2状态 应在报告的备注中注明检测结果无法确定的原因。 Arch Pathol Lab Med. 2013 Oct 7. Epub ahead of print Union hospital 武汉协和医院 主要内容 1、IHC判读标准的学习和困惑 2、实践中需要重视的几个问题 3、接受亮视野ISH检测 4、对组织处理的要求 Union hospital 武汉协和医院 亮视野ISH检测 2013版指南： “可接受的（IHC和ISH）检测应优先使用FDA批 准的IHC，亮视野ISH，或FISH检测” “在进行亮视野ISH检测时，首先必须与FDA批准的 FISH检验进行对比验证” “对于亮视野ISH，计数时应对正常乳腺细胞和肿瘤 细胞中的着色模式进行比较，因为可能会观察到难以 判读的人为原因造成的着色。如果肿瘤细胞的着色模 式既非正常也非明显的扩增，应寻求专家意见。” Union hospital 武汉协和医院 图图2 单单探CISH400（原放大倍数） A：信号点4 ， HER2无扩增；B：信号点6而10， HER2低拷贝 扩增； C：信号点融合成大簇 ， HER2高拷贝扩 增。 单探CISH Union hospital 武汉协和医院 双探CISH Union hospital 武汉协和医院 图图8 A: 双探CISH400, B: 双探CISH400（原放大倍数） A: 箭头标记处为 原位癌，箭末标记处为 正常小导管，中间为 淋巴 细胞；B: 箭头标记处为 浸润癌，箭末标记处为 原位癌。 Union hospital 武汉协和医院 IHC+单探CISH IHC+双探CISH Union hospital 武汉协和医院 乳腺SISH 无扩增 扩增 Union hospital 武汉协和医院 胃SISH 无扩增 扩增 Union hospital 武汉协和医院 主要内容 1、IHC判读标准的学习和困惑 2、实践中需要重视的几个问题 3、接受亮视野ISH检测 4、对组织处理的要求 Union hospital 武汉协和医院 对组织处理的要求 2007版： 组织获取至固定的时间应尽可能短；用于HER2 检测的标本应在10%中性缓冲福尔马林中固定6- 48小时；细胞学标本必须固定在福尔马林中。 2013版： “应确保所有用于HER2检测的标本（细胞学标 本、穿刺活检或切除标本）都尽快开始固定流 程（离体后在1小时内开始固定），并于10%中 性缓冲福尔马林中固定6至72小时” Union hospital 武汉协和医院 冷缺血时间：外科医师切除肿块到肿块进入固定 液的时间。理想的时间应该少于30分钟。 冷缺血时间直接影响蛋白、RNA、DNA等成分的降 解速度，从而影响对这些成分的准确检测。 防止组织自溶 Union hospital 武汉协和医院 甲醛浸透组织的速度大约1mm/h,不是简单的化学 固定反应，需要甲醛对蛋白和核酸进行交联。 固定时间至少6-8h，最好24h。 小组织需要与大组织同样的充分的固定时间。 Union hospital 武汉协和医院 固定不及时，组织自溶,形态无法观察 Union hospital 武汉协和医院 HE检测固定较差示例：乳腺癌 30 原发灶：固定较差会导致组织收缩、 形态学发生改变，影响组织学的分级 淋巴结转移灶 Union hospital 武汉协和医院 IHC检测固定较差示例：乳腺癌 图片由 W Hanna提供 Union hospital 武汉协和医院 IHC检测固定较差示例 ki67 固定不佳，抗 原丢失，假阴 性 Union hospital 武汉协和医院 ISH检测固定较差示例：乳腺癌 图片由 Abbott/Vysis.提供 固定不完全会导致片状染色；探针信号可能较弱或缺失 Union hospital 武汉协和医院 胃肠道MDT病理科调查问卷反馈 1. 您在实际工作中使用的固定液类型为 A酒精 B.10%福尔马林 C.10%中性缓冲福尔马林 D.不清楚 E,其 它_ (正确率：本院38%，进修学生25%） 2. 免疫组化或者分子标记物检测中推荐使用的固定液类型为_ A酒精 B.10%福尔马林 C.10%中性缓冲福尔马林 D.不清楚 (正确率：本院38%，进修学生50%） 3. 您在实际工作中，胃镜活检标本从离体到放入固定液的时间是_A_； 手术标本从离体到放入固定液的时间是_B_ A. 10分钟之内 B. 30分钟之内 C.1个小时之内 D. 1个小时以上 (正确率：本院49%、33%，进修学生58% 、33% 。） 4. 胃切除标本在放入固定液之前，您是否常规沿大弯剪开_ A. 是 B. 否 (正确率：本院49%，进修学生75%） 34 Union hospital 武汉协和医院 5 实际工作中，固定液和手术样本体积之比合适的为_ A. = =20:1 E. 不清楚 (正确率：本院25%，进修学生50%） 6. 您认为标本固定不符合要求，可能对检测产生哪些影响（不定项 选择）_ A. 影响很小或者无影响 B. 会导致HE染色失败 C. 因为标本固定不及时，会导致组织自溶，丢失蛋白或者DNA分子标 记物 D. 严重时会导致免疫组化或者分子诊断失败 E标本离体到固定时间，标本固定时间，固定液类型，固定液与标 本体积大小的比例，都会影响标本固定效果 (正确率：本院29%，进修学生25%） 35 Union hospital 武汉协和医院 7. 您认为内镜活检标本的固定时间在那个时间段内最合适：_ A. 1小时之内 B.6个小时之内 C. 6-48小时 D.48个小时以上 E.不清楚 (正确率：本院13%，进修学生8%） 8. 您认为胃大部切除标本的固定时间在哪个时间段内最合适：_ A. 6小时之内 B.12个小时之内 C.12-48小时 D.48个小时以 上 E.不清楚 (正确率：本院21%，进修学生25%） 9. 内镜下粘膜切除（EMR）或内镜下粘膜下层切除（ESD）固定前最佳 处理步骤是: A.直接放入固定容器中 B. 标本离体后，立即将标本展平，使粘膜 的基底层面贴附在泡沫板上,并用大头针固定,必要时用生物色标标记 基底及周边切缘 C.不清楚 (正确率：本院67%，进修学生83%） 36 Union hospital 武汉协和医院 武汉协和医院胃癌Her2检测结果 分析 Union hospital 武汉协和医院 分析数据说明： 来源：协和医院病理科报告系统内2013年6月7日-2014年3月7日 的胃癌Her2检测数据 选用原则：外院送检的IHC组化和FISH检测病例都未纳入计算， 只计算本院病人数据，IHC和FISH、手术标本和活检标本、不同 科室来源的手术标本分别进行了统计 目的：分析不同来源的样本对于Her2结果检测的影响 Union hospital 武汉协和医院 送检科室检测总数 IHC 3+比 率 IHC3+和2+比 率 13511.4%28.6% 21789.7%21.7% 3156.7%20.0% 4215.0%15.0% 5762.6%23.7% 6240.0%8.3% 合计3516.9%21.6% 不同外科来源的手术标本检测结果对比分析 Union hospital 武汉协和医院 不同来源的手术标本IHC阳性率最高为11.43%，最低为 0，不同科室区别较大 原因分析： 除综合外科以外，IHC3+