第32章 肝炎病毒ppt

第第 32章章 肝炎病毒肝炎病毒 l 肝炎病毒是引起病毒性肝炎的病原体。病毒性肝炎是危害人类健康最严重的疾病之一。迄今为止发现的肝炎病毒有甲、乙、丙、丁、戊、己、庚型 肝炎病毒。l l 第一节 甲型肝炎病毒l 甲型肝炎病毒（ hepatitis A virus，HAV） 是引起甲型肝炎的病原体。 一、一、 生物学特性生物学特性l HAV属小 RNA病毒科 ，病毒体呈球形，直径 27 32nm， 20面体立体对称，无包膜。基因组为单股正链 RNA， 含 7 478个核苷酸。HAV只有一个血清型 。l 黑猩猩和狨猴对 HAV易感 。经口或静脉注射可使动物发生肝炎，并能在肝细胞浆中检l 出 HAV。 HAV可在培养细胞内增殖，但不引起细胞裂解。 l HAV对乙醚、酸均有抵抗力。 60 1h不被灭活，如有 MgCl存在则可耐受 80 。 20可存活多年， 100 5min灭活 。过氧乙酸（ 2， 4h）、 甲醛 (0.35 37 ， 72h)等均可消除其传染性。二、二、 致病性与免疫性致病性与免疫性l （一） 传染源与传播途径l 甲型肝炎的 主要传染源是患者 ，尤其是无黄疽型肝炎患者。潜伏期为 15 45d, 平均 30d 。主要经 粪一口途径传播 ，传染性极强，病毒若污染食物及水源可引起甲型肝炎暴发流行。l （二） 致病机制与免疫l HAV 口 人体 口咽部或唾液腺增殖 消 化道 肝细胞 甲型肝炎。l HAV感染后约 3周，患者血清开始出现 HAV IgM类抗体，可持续 2个月左右， HAVIgG类抗体出现稍迟，但可在体内维持多年，对病毒的再感染有免疫力。三、三、 微生物学检查微生物学检查病人血清病人血清 HAV IgM检测可用于甲型肝炎的检测可用于甲型肝炎的 早期诊断。常用酶联免疫吸附试验（早期诊断。常用酶联免疫吸附试验（ ELISA） 和和 放射免疫测定（放射免疫测定（ RIA）。）。 也可用也可用 PCR法或核酸杂法或核酸杂交检测病毒。交检测病毒。四、四、 防治原则防治原则与患者有接触史的儿童或在流行期间与患者有接触史的儿童或在流行期间 注射丙种注射丙种蛋白或胎盘球蛋白可作为紧急预防蛋白或胎盘球蛋白可作为紧急预防 ？ 在在 特异性预特异性预防方面我国试用减毒甲肝活疫苗防方面我国试用减毒甲肝活疫苗 H2株，对人体有株，对人体有保护作用。目前甲肝基因工程疫苗正在研制中保护作用。目前甲肝基因工程疫苗正在研制中 。第二节第二节 乙型肝炎病毒乙型肝炎病毒 l 乙型肝炎病毒（ hepatitis B virus， HBV） 是乙型肝炎的病原体。 HBV传染性强，估计全世界有乙肝患者及病毒携带者 2亿多人，其中 1亿在我国。 HBV感染机体易发展成慢性肝炎，部分可引起肝硬化及肝细胞癌。l (二 )基因结构与复制方式l HBV的基因是未闭合的环状双股 DNA结构 。一股为长股（负股 L ）， 另一股为短股（正股S ）。 负股 DNA核苷酸序列含有 4个开放读码框架（ ORF） ， 分别 称为 S、 C、 P和 X区 。 S区中有 S基因、前 S1和前 S2基因，分别编码病毒的外衣壳蛋白（ HBs-Ag、 PreS1抗原、 PreS2抗原）。 C区中有 C基因及前 C基因，编码 HBcAg和 HBeAg 。 P区最长，编码 DNA多聚酶 等。 X区编码的蛋白称 HBxAg， 可反激活一些细胞的癌基因及病毒基因等，与肝癌的发生有关。l HBV DNA的复制方式 与其他 DNA病毒有所不同，它以 L DNA为模板先转录合成互补RNA，（ cRNA）， 再以 cRNA为模板，在反转录酶的作用下合成子代 L DNA， 再以 LDNA为模板复制出互补的子代 S RNA。l乙肝病毒基因结构图（三）（三） 抗原组成抗原组成 l 1. 外衣壳 l （ 1） 乙肝表面抗原 （ HBsAg ） Dene颗粒、小球形颗粒及管型颗粒表面均含有该蛋白。HBsAg具有共同抗原决定簇 a， 还有两种互相排斥的抗原决定族 d/y和 w r。 按不同形式组合成不同的亚型，有 adr、 adw、 ayr、 ayw四个亚型，我国汉族以 adr为主，少数民族以 ayw为主。l （ 2） 前 S2抗原 （ PreS2-Ag ） 是附加在 HBsAg N末端前的抗原决定簇。其免疫原性较 HBsAg强 ,它具有聚合人血清白蛋白受体（ PHSA-R） , 也是吸附肝细胞受体的决定簇。l （ 3） 前 S1抗原 PreS1-Ag 可增强 HBsAg的免疫原性，也有助于 HBV吸附到肝细胞表面。l 2. 内衣壳l （ 1） 核心抗原 （ HBcAg）： 存在于内衣壳上，一般在血清中很难检出 HBcAg。 但用免疫组化法在组织切片上可检测到。 HBcAg能刺激机体产生抗 HBc， 可在血清中持续多年。抗HBc增高可提示 HBV在体内复制。l （ 2） e抗原 （ HBeAg）： 由 PreC及 C基因编码，整体转录及翻译后成为 HBeAg。 HBeAg存在于病毒体核心结构的表面，当 HBV内衣壳裂解时释放入血。因 HBeAg的消长与病毒体及 DNA多聚酶的消长基本一致，故 HBeAg可作为体内有 HBV复制及血清具有强感染性的一个指标。由 e抗原刺激机体产生的抗 HBe对 HBV感染有一定保护作用 ? （四）（四） 组织培养及动物模型组织培养及动物模型l 黑猩猩是 HBV最敏感的动物， HBV至今仍未能在细胞培养中分离成功。目前采用的细胞培养系统是 病毒 DNA转染系统 。将病毒 DNA导人肝癌等细胞后，病毒核酸可被整合到细胞的核酸上，并在细胞中复制表达 HBsAg、 HBcAg并分泌 HBeAg。 有些细胞株还可持续产生 Dane颗粒。若用 S基因转染一些细胞系（如中国地鼠卵巢细胞），可分泌 HBsAg而不含其他病毒蛋白，已用于制备疫苗。（五）（五） 抵抗力抵抗力 l HBV对外界环境抵抗力很强。 对低温、干燥、紫外线及一般消毒剂均有耐受性。 70乙醇不能灭活病毒。高压灭菌121 20min 、 100 10min、 0.5过氧乙酸、 3含氯石灰溶液等可灭活病毒。二、二、 致病性与免疫性致病性与免疫性l （一） 传染源l 乙型肝炎患者和无症状 HBsAg携带者是 HBV主要的传染源 。潜伏期较长（ 45 160d）， 不论在潜伏期、急性期或慢性活动早期，患者血清都有传染性。 无症状的 HBV 携带者 ，血液中长期含有 HBV， 是更危险的传染源。l (二 )传播途径l 1.血液及血制品传播 人对 HBV极为易感 ，故极微量污染血进入体内即可造成感染。输血、手术、注射、针刺、拔牙等均可传播。使用公用牙刷、剃刀、皮肤粘膜的微小损伤均可导致感染。吸血昆虫通过叮咬，也可传播 HBV。l l 2.母婴间传播 主要是围产期感染，即分娩时婴儿经产道通过微小伤口受到母体病毒感染。有些胎儿在宫内已被感染，出生后 HBsAg即为阳性。哺乳也被人们认为是传播 HBV的途径。人群中 HBV携带者 50来自母婴传播，他们是乙型肝炎的稳定传染源。l 3.性行为（三）（三） 致病性与免疫性致病性与免疫性l 乙型肝炎发病机制主要是与 HBV的基因变异及病毒引起的机体免疫病理损伤有关。l 1.自身免疫应答引起的病理损害 HBV感染肝细胞后，引起肝细胞膜自身抗原发生改变，暴露出 肝特异性脂蛋白抗原（ LSP） ， 可诱导机体产生对肝细胞成分的免疫应答，通过 CTL的杀伤作用及淋巴因子的作用损害肝细胞，也可由相应抗体与细胞膜上抗原结合，通过 ADCC效应引起肝细胞损伤。l 2.免疫复合物引起的病理损伤 HBsAg与抗HBs形成免疫复合物 , 可沉积于肾小球基底膜、关节滑膜等，导致 型变态反应，出现肝外器官损害。若免疫复合物沉积于肝内，可使肝毛细血管栓塞，肿瘤坏死因子增多，导致急性肝坏死。3、 HBV基因与肝细胞基因整合 目前虽无 HBV致肝癌的直接证据，但人群流行病学调查表明 , HBsAg 携带者较无 HBV感染者，发生肝癌的危险性高 217倍。 肝癌组织中检测，可发现 HBV DNA的整合 ，l 50左右含有负股 DNA 5末端片段，即含有 X基因片段。因 X蛋白（ HBx Ag）可反式激活癌基因 , 导致肝癌的发生。 4. 细胞介导的免疫损伤 感染 HBV的肝细胞表面可表达 HBsAg 、 HBeAg、或HBcAg, 激活 T细胞（ CTL） 攻击带有病毒抗原的肝细胞。l 5.病毒基因变异 HBV的 PreC基因变异可使病毒不能转译出 HBeAg， 逃逸机体已形成的抗 HBe及细胞免疫的清除作用。此外， HBV PreC及 C区变异株可引起重型肝炎。l 6.病毒致机体免疫应答低下 研究发现HBV感染后， IL 2产生减少，肝细胞诱生干扰素降低，且 HLA I类抗原表达低下，可使免疫应答减弱，这与病毒在体内长期存在有关。三、微生物学检查三、微生物学检查 l （一） HBV抗原抗体检测l 目前常用较为敏感的放射免疫法和酶联免疫吸附法检测 HBsAg、 抗 HBs、 HBeAg、 抗 HBe及抗 HBc， 俗称 “两对半 ”（表 33 1）。该系统检测可用于 乙肝的诊断 判断传染性 判断预后及检查接种效果 筛选献血员 流行病学调查等。l （二） HBV DNA检测l 应用核酸杂交法或 PCR法检测血清中 HBV DNAl （ 三） 电镜观测血液中 HBV颗粒l四 、 防治原则l 1注射 HBV疫苗 (HBsAg)是预防乙肝 的有效措施。l 2 高效价抗 HBs的人免疫球蛋白（HBIG） 制剂可用于乙肝的紧急预防。第三节第三节 丙型肝炎病毒丙型肝炎病毒l 丙型肝炎病毒 （ hepatitis C， HCV） 是丙型肝炎的病原体， 1991年被归属于黄病毒科。丙型肝炎的特点是：呈世界性分布， 极易慢性化，且与肝硬化和原发性肝癌关系密切 。丙型肝炎在输血性肝炎中占 78 94。我国自 1993年 7月 1日起对献血者必须检查乙肝和丙肝。l （一） 生物学特性l HCV为 RNA病毒，基因型可分为 、 、 、 、 、 型， 我国以 型为主 。 在血液中含量很少。 HCV的病毒体呈球形，大小为 30 60nm。 对氯仿、乙醚等有机溶剂敏感。l （二） 致病性与免疫性l 大多数丙肝患者不出现症状，发病时已呈慢性过程。 约 20的人可发展为肝硬化或肝癌 。l （三） 微生物学检查l 1.检查病毒核酸l 目前常用 PCR 荧光法检测 HCV RNA， 此法不但可以定性，亦可定量。l 2.检查血清抗体l 用酶联免疫法检测抗体，可作为丙肝的快速诊断和筛选献血员的重要依据。l （四） 防治原则 切断传播途径第四节第四节 丁型肝炎病毒丁型肝炎病毒 l 丁型肝炎病毒 （ hepatitis D virus ，HDV） 是 1977年在慢性乙型肝炎患者的肝细胞核内发现的一种新的肝炎病毒。当时称为 因子，后证实 这是一种缺陷病毒，该病毒必须在 HBV或其他嗜肝 DNA病毒辅助下才能复制，现已正式命名为丁型肝炎病毒。l l HDV呈球形，直径 35 37nm， 基因组为一单负链环状 RNA， 长仅为 1.7kb， 是已知动物病毒中最小的基因组 ， HDV基因可编码一种HDV抗原（ HD Ag）， 该抗原能刺激机体产生抗 HDV抗体，故可自感染者血清中检测抗 HDV。l HDV与 HBV传播途径相似， 主要通过输血或血液制品传播，也可通过密切接触或通过l 母婴垂直传播 ，高危人群为多次受血者和注射药瘾者。 HDV的致病机制及免疫性还不清楚。l 丁型肝炎病毒和乙型肝炎病毒重叠感染常导致原有感染症状加重或病情恶化。故 临床在重症l 肝炎时应注意是否有 HDV重叠感染 。第五节第五节 戊型肝炎病毒戊型肝炎病毒 l (一 )生物学特性l 戊型肝炎病毒 （ hepatitis E virus，HEV） 为单股正链 RNA病毒，基因组约为 7.5kb， 5末端编码非结构蛋白，而 3末端编码结构蛋白。从患者及感染动物粪便中可查到 27 34nm直径的病毒体，无包膜，迄今未培养成功。l （二） 致病性l HEV的传染源是患者，传播途径为粪口途径，可引起爆发流行 。潜伏期平均为 40d， 多数患者起病急，病情较重，但很少转为慢性。少数患者可表现为