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文档简介

1、提取 1. 酶对糖及其苷类提取的影响 通常含糖及其苷类化合物的天然药材组织中往往同时含有酶，共存酶能促使苷键裂解，故药材粉碎后，受潮、冷水浸泡都能促使它们的相互接触致使苷键裂解，生成次生苷乃至苷元，影响原有成分及其作用，因此： 欲提取原始苷时，需杀酶，60%以上乙醇、甲醇或80以上水处理； 欲提取次生苷或苷元，需利用酶，如发酵等。,糖和苷的提取分离,2. 提取糖及苷类溶剂的选择 一般来说，糖苷类具多羟基，极性较大，难溶于低极性有机溶剂，大多在甲醇、乙醇、丙酮、正丁醇、乙酸乙酯中溶解度较大，提取效率较好，又能抑制酶，故为优选溶剂； 水也为常用溶剂，尤其是糖的提取，可选用热水提取，但杂质较多，同时

2、应注意共存有机酸的影响，必要时可用缓冲液。,分离 1活性炭柱色谱 2纤维素色谱 3离子交换柱色谱 4凝胶柱色谱 5季铵氢氧化物沉淀法 6分级沉淀或分级溶解法 7蛋白质除去法,1活性炭柱色谱 概述 用途分离水溶性物质较好 如：氨基酸、糖类及某些苷类。 特点： 上样量大，分离效果较好，不受糖溶液浓度改变和无机盐存在的影响，适合大量制备； 来源容易，价格廉； 缺点：无测定其吸附力级别的理想方法。,活性炭对物质的吸附规律 对分子量大的化合物吸附力大于分子量小的化合物，即：多糖 单糖 活性炭在水溶液中的吸附力最强，在有机溶剂中吸附力较弱。洗脱顺序： H2O、10%、20%、30%、50%、70%乙醇液

3、无机盐，单糖等 二糖 三糖 多糖,2纤维素色谱 原理与PC相同，属分配层析。 溶剂系统：水、丙酮、水饱和的正丁醇等。 用水溶性的溶剂如HAc：H2O进行展开时，其原理属吸附层析。,3离子交换柱色谱 除水提液中的酸、碱性成分和无机离子； 制成硼酸络合物阴离子交换树脂（不同浓度硼酸盐液洗脱）,4凝胶柱色谱 常用商品名称及型号： 葡聚糖凝胶 琼脂糖凝胶,5季铵氢氧化物沉淀法 季铵氢氧化物是一类乳化剂。,6分级沉淀或分级溶解法 是利用多数糖可溶于水，三糖以下尚可溶于乙醇，随着聚合度的增大，在乙醇中溶解度逐步降低的性质，在糖的水溶液中分次加入乙醇，使醇浓度渐增，从而达到对糖进行粗略分离目的的方法。 为使多糖稳定，通常在pH=7时进行 酸性多糖在pH=24时进行 处理酸性多糖时，为防酸水解苷键，操作宜迅速。,7蛋白质除去法 用分级沉淀法得到的多糖，常夹杂有较多的蛋白质，为除之，通常选择能使蛋白质沉淀而使多糖不沉淀的试剂来处理，如：酚、三氯乙酸、鞣酸等。 注意：处理时间要短，温度要低

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