第7章+蛋白质的分离、纯化和表征.ppt_第1页
第7章+蛋白质的分离、纯化和表征.ppt_第2页
第7章+蛋白质的分离、纯化和表征.ppt_第3页
第7章+蛋白质的分离、纯化和表征.ppt_第4页
第7章+蛋白质的分离、纯化和表征.ppt_第5页
已阅读5页，还剩30页未读， 继续免费阅读

下载本文档

版权说明：本文档由用户提供并上传，收益归属内容提供方，若内容存在侵权，请进行举报或认领

文档简介

1、在第7章，蛋白质，蛋白质的分离、纯化和表征中，蛋白质含有酸/碱氨基酸残基，并且两性碱/酸越大，pI通常约为6.0。第一，蛋白质的两性电离和等电点，蛋白质的分子量一般在10，000至100万道尔顿之间，1道尔顿1C12绝对质量/12 1.6610-27千克。第二，蛋白质分子的大小，(1)根据化学组成确定最小分子量；1)测定蛋白质中微量元素的含量；2)假设蛋白质仅含有一个铁原子，最小相对分子量=100* 55.8/铁百分比；(2)通过电泳测定相对分子量，蛋白质颗粒在电泳中的移动性取决于带电荷分子量的形状、变性、迁移率与电荷和形状无关，只取决于相对分子质量，巯基乙醇破坏二硫键。(3)凝胶过滤法用于测

2、量相对分子质量、凝胶法仅适用于测量球形蛋白质分子。(3)蛋白质的胶体性质和蛋白质沉淀。(1)胶体体系，胶体溶液的特性：分子直径为1-100纳米，易溶于水，不易聚集和沉淀。大多数球形蛋白质可以形成稳定的亲水胶体溶液。蛋白质胶体溶液的稳定性因素如下：1 .相同的蛋白质具有相同的电荷并相互排斥；2.水膜弹性蛋白溶液具有廷德尔效应、布朗运动和不能通过半透膜的特性。(2)蛋白质沉淀镨从胶体溶液中沉淀可逆沉淀：在温和条件下，溶液的酸碱度改变或镨的结构和性质不变。在适当的条件下，非变性沉淀可以再溶解。pI沉淀法、盐析法和有机溶剂沉淀法等。不可逆沉淀，强沉淀条件破坏了Pr胶体溶液的稳定性，也破坏了Pr的结构和

3、性质。沉淀不再能溶解变性沉淀，如加热沉淀、强酸/strong碱沉淀、重金属盐和生物碱沉淀等。1。盐析法加入中性盐去除蛋白质的水合层，盐析一般不会引起变性。在等电点沉淀的蛋白质溶液中加入氯化钠后，沉淀溶解。盐析，盐析，盐析，在蛋白质溶液中加入大量硫酸铵，为什么蛋白质会沉淀出来？有机溶剂沉淀去除水合层并降低介电常数以增加带电粒子之间的相互作用3等电点沉淀4重金属盐沉淀与带负电荷的蛋白质形成不溶性盐5生物碱试剂和一些酸沉淀与带正电荷的蛋白质形成不溶性盐6加热变性沉淀分解天然结构，疏水基团暴露，破坏水合层和带电状态。4.蛋白质分离和纯化的一般原则，总目标：提高产品纯度或比活性1。预处理：不同于动物/植物/细菌2。粗分级：盐析/等电点沉淀/有机溶剂分级3。亚组分：凝胶过滤、离子交换层析、吸附层析和亲和层析。结晶，5。蛋白质分离纯化方法，(1)根据不同分子大小的纯化方法：1 .透析和超滤。蛋白质分子通过半透膜与小分子物质分离。半透膜是玻璃纸或纤维素材料。血液透析，小分子取出，透析机，透析液，加压，血液，2。密度梯度(区域)离心，600008000转/分，重力608000次。(2)利用溶解度差异的纯化方法，1。等电点沉淀调节溶液的酸碱度，不同的蛋白质在它们的等电点依次沉淀。盐溶解和盐析。有机溶剂分馏降低介电常数，争夺水合膜。电泳按不同的电荷分离方法进行。原理：蛋白质在非等电点的总电荷

人人文库> 全部分类> 应用文书 > 技术指导

温馨提示

  • 1. 本站所有资源如无特殊说明，都需要本地电脑安装OFFICE2007和PDF阅读器。图纸软件为CAD,CAXA,PROE,UG,SolidWorks等.压缩文件请下载最新的WinRAR软件解压。
  • 2. 本站的文档不包含任何第三方提供的附件图纸等，如果需要附件，请联系上传者。文件的所有权益归上传用户所有。
  • 3. 本站RAR压缩包中若带图纸，网页内容里面会有图纸预览，若没有图纸预览就没有图纸。
  • 4. 未经权益所有人同意不得将文件中的内容挪作商业或盈利用途。
  • 5. 人人文库网仅提供信息存储空间，仅对用户上传内容的表现方式做保护处理，对用户上传分享的文档内容本身不做任何修改或编辑，并不能对任何下载内容负责。
  • 6. 下载文件中如有侵权或不适当内容，请与我们联系，我们立即纠正。
  • 7. 本站不保证下载资源的准确性、安全性和完整性, 同时也不承担用户因使用这些下载资源对自己和他人造成任何形式的伤害或损失。

最新文档

评论

0/150

提交评论