细菌的生长繁殖与培养.ppt

1、模块二 细菌基础子模块二 细菌的生长繁殖与培养,主讲人： 孟 艳 枣庄职业学院 医学院,复 习 细菌的测量单位：（） 细菌形态包括：（）（）（） 细菌的基本结构包括：（）（）（）（） 细菌的特殊结构包括：（）（）（）（） 革兰阳性菌、革兰阴性菌细胞壁共有成分：（） 革兰阳性菌细胞壁的特有成分：（） 革兰阴性菌细胞壁的特有成分：（） 芽胞的意义：（）（）一般杀灭芽孢最可靠的方法：（） 革兰染色法的步骤：（）（）（）（） 结果：（G+）：显（）色； （G-）：显（）色 革兰染色意义：（）（）（）,学习目标能力目标：知道细菌生长繁殖与代谢 并会结合实例分析知识目标：知道细菌生长繁殖的条件 熟悉细菌的

2、代谢产物素质目标：培养良好的职业素养 增强学生分析问题的能力,子模块二 细菌的生长繁殖与培养,重 点：细菌生长繁殖的条件 细菌在培养基中的生长情况 （液体 固体 半固体） 细菌的合成代谢产物 难 点：培养基种类、细菌在培养基 上的生长情况,子模块二 细菌的生长繁殖与培养,细 菌 与 人 类,子模块二 细菌的生长繁殖与培养,任务一、细菌生长繁殖的条件 ,充足的营养物质 水 碳源 氮源 无机盐 生长因子 合适的酸碱度 大多数病原菌最适pH7.2-7.6 适宜的温度 大多数病原菌最适温度为：37 必要的气体环境 氧气、二氧化碳 渗透压 多数适合等渗或低渗,任务一 细菌生长繁殖的条件,按细菌代谢时对氧

3、的需要分类（了解）,专性需氧菌 结核分枝杆菌、霍乱弧菌 微 需 氧 菌 空肠弯曲菌、幽门螺杆菌 兼性厌氧菌 大多数病原菌 专性厌氧菌 破伤风梭菌、脆弱类杆菌,任务一 细菌生长繁殖的条件,细菌的繁殖方式无性二分裂方式,任务二 细菌生长繁殖的规律,任务二 细菌生长繁殖的规律,无性生殖：母体直接产生新个体。例：分裂生殖、出芽生殖、孢子生殖、营养生殖 有性生殖：两性生殖细胞结合成合子，合子发育成新个体 根本区别：是否有两性生殖细胞的结合,草履虫 分裂生殖,任务二 细菌生长繁殖的规律,菌体伸长、核质分裂 形成横隔壁 子细胞分离,细菌的繁殖方式无性二分裂方式,视频,任务二 细菌生长繁殖的规律,2、细菌繁殖

4、速度：,大肠杆菌每18-20分钟繁殖一代。 一个大肠杆菌经过一天，会分裂成多少个呢？ 约为20亿亿亿，即21025,任务二 细菌生长繁殖的规律,对数期,迟缓期,细菌的生长曲线,0,5,15,20,25,30,10,衰亡期,总菌数,活菌数,细菌数的对数,小时,稳定期,不分裂，数量不变,体积,代谢活跃，分裂迟缓。消毒灭菌,生长数死亡数，生长繁殖快，代谢旺盛，生物性状典型,对环境敏感。研究细菌生物学性状最佳时期,由于营养消耗，生长数死亡数，活菌数稳定，有害代谢产物堆积，芽孢、外毒素、抗生素等次级代谢产物开始产生并累积。收集和观察代谢产物,生长数死亡数，活菌数，形态显著改变，甚至自溶，代谢停滞,任务二

5、 细菌生长繁殖的规律,将一定数量的细菌接种于适宜的液体培养基中，定时取样检查活菌数，可以发现其生长过程的规律性。,细菌的群体生长繁殖,细菌在自然界或体内进行繁殖时，受多种环境因素和机体免疫因素等多方面影响，不可能出现在培养基中的那种典型生长曲线。在实验研究和生产实践中，人为地改变营养条件，调整细菌的生长繁殖阶段，可以更加有效地利用对 人类有益的细菌。,任务二 细菌生长繁殖的规律,大家能看出这是些什么菌吗,任务三 细菌的人工培养,革兰氏阳性,革兰氏阴性,链球菌,球状-球菌,成堆状，,葡萄球菌,革兰氏阳性,球状-球菌,成链状，,杆状-杆菌,无序状,G-杆菌 大肠杆菌,革兰氏阴性,弧状-弧菌,一个弯

6、曲,G-弧菌 霍乱弧菌,任务三 细菌的人工培养,任务三 细菌的人工培养,任务三 细菌的人工培养,概念：根据细菌生长繁殖的条件及规律，用人工的方法，提供细菌生长繁殖必需的营养和适宜的生长条件来培养细菌的方法,恒温培养箱,使底物或代谢产物更好的转移分散。 为好氧菌溶解空气中的氧气到发酵液中,摇 床,任务三 细菌的人工培养,培养基：用人工方法配制的，适合细菌生长繁殖的营养基质。,任务三 细菌的人工培养,任务三 细菌的人工培养,任务三 细菌的人工培养,细菌培养基营养肉汤： 牛肉膏 3-5g，蛋白胨 10g，NaCl 5g， 水 1000ml， pH 7.2-7.4 放线菌培养基高氏1号： 可溶性淀粉

7、20g，KNO3 1g，K2HPO4 0.5g MgSO4 0.5g，NaCl 0.5g，FeSO4 0.01g 水 1000ml，pH 7.2-7.6 霉菌培养基沙保培养基： 蛋白胨 10g，葡萄糖（或麦芽糖）40g， 水 1000ml，自然 pH,任务三 细菌的人工培养,培养基 配方,仪器 清洗,称量 药品,加水 做记号,加热 溶解,做记号 灭菌,培养基的制备一般步骤（了解）:,补水 调pH,分装 包扎,任务三 细菌的人工培养,任务三 细菌的人工培养 （一）培养基,按用途分类（了解）,厌氧培养基,任务三 细菌的人工培养 （一）培养基, 按物理状态分类,任务三 细菌的人工培养 （一）培养基,

8、沉淀生长,混浊生长,表面生长,大多数细菌 少数细菌 专性需氧菌（仅在有氧环境下生长） 葡萄球菌 链球菌 枯草芽孢杆菌、 结核分枝杆菌,任务三 细菌的人工培养 （二）细菌在培养基中的生长情况,细菌在培养基中的生长情况 ,液体培养基,分离培养：视频 将标本或培养物划线接种在固体培养基的表面，因划线的分散作用，使许多原混杂的细菌在固体培养基表面上散开 菌 落： 单个细菌分裂繁殖成一堆肉眼可见的细菌集团。 菌 苔： 许多菌落融合在一起,任务三 细菌的人工培养 （二）细菌在培养基中的生长情况,固体培养基,菌落形态特征,光滑型（S） 表面光滑、湿润、边缘整齐 见于多数致病菌,粘液型(M) 粘稠、有光泽、水

9、珠样见于有厚荚膜或丰富明粘液层的细菌 如肺炎克雷伯菌,粗糙型(R) 表面粗糙、干燥、皱纹或颗粒状 炭疽芽孢杆菌、结核分枝杆菌,固体培养基,任务三 细菌的人工培养 （二）细菌在培养基中的生长情况,铜绿假单孢,粘质沙雷氏菌,沙门氏菌,费氏志贺氏菌,各种细菌的菌落大小、形状、颜色、气味、透明度、表面光滑度、在血琼脂平板上的溶血情况有很大差别，这有助于识别和鉴定细菌。,任务三 细菌的人工培养 （二）细菌在培养基中的生长情况,固体培养基,固体培养基,半固体培养基,无动力，仅沿穿刺线生长，呈线明显线状生长,动力试验,任务三 细菌的人工培养 （二）细菌在培养基中的生长情况,有动力，不仅沿穿刺线生长，还向四周

10、扩散呈羽毛状或云雾状生长,半固体培养基,任务三 细菌的人工培养 （二）细菌在培养基中的生长情况,细菌在培养基的生长情况 小结,病原学诊断、临床指导用药 细菌的鉴定研究 生物制品的制备 细菌的毒力分析及卫生学指标的检测 工农业生产 基因工程中的应用,（三）人工培养细菌的用途（了解）,任务三 细菌的人工培养 （三）人工培养细菌的用途,细菌的分解代谢产物（了解） 1、糖发酵试验 2、VP试验 3、甲基红试验 4、枸橼酸盐利用试验 5、靛基质（吲哚）试验 6、硫化氢试验 7、尿素酶试验,任务四、细菌的代谢产物及意义,任务四 细菌的代谢产物及意义,1、糖发酵试验 葡萄糖 HCOOH 脱氢酶 CO2+H2

11、,任务四 细菌的代谢产物及意义,2、VP（Voges-Proskauer）试验 葡萄糖丙酮酸乙酰甲基甲醇 二乙酰红色化合物,- +,任务四 细菌的代谢产物及意义,- +,3、M - 甲基红（methyl red）实验 甲基红指示剂 pH4.2（红色） pH6.3（黄色） 大肠杆菌为阳性反应 产气杆菌为阴性反应,任务四 细菌的代谢产物及意义,4、枸橼酸盐利用试验,利用枸橼酸盐生长 + 不能利用 -,- +,任务四 细菌的代谢产物及意义,5、靛基质（吲哚）试验 色氨酸吲哚玫瑰吲哚 二甲基氨基苯甲醛,- +,任务四 细菌的代谢产物及意义,6、硫化氢试验,任务四 细菌的代谢产物及意义,7、尿素酶试验

12、分解尿素产生氨的能力,任务四 细菌的代谢产物及意义,I M Vi C试验 大肠埃希菌 + + - - 产气杆菌 - - + +,任务四 细菌的代谢产物及意义,细菌的合成代谢产物及其医学意义： 与致病有关的：热原质、毒素和侵袭性酶 热原质 细菌代谢过程中产生的一种多糖，注入人和动物体内能引起发热反应。除去热原质，蒸馏法效果最好。 毒 素 毒素是病原菌合成的对机体有毒害作用的物质，有内毒素和外毒素两种。 侵袭性酶 某些细菌产生的增强侵袭力的胞外酶。,任务四 细菌的代谢产物及意义,与治疗有关的：抗生素、维生素 抗生素 由某些微生物产生的，并能抑制或杀灭其他微生物的物质称为抗生素。 广泛用于感染性疾病的治疗。 维生素 某些细菌合成的维生素除供自身需要外，还可分泌到细菌体外。如人体肠道的大肠埃希菌能合成B族维生素和维生素K，供人体吸收利用。,任务四 细菌的代谢产物及意义,与鉴别有关的：色素、细菌素 色 素 是细菌产生的有色物质。如