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文档简介

1、1,研究背景,1,2,考试内容,3,4,研究目的和重要性,全文结论,报告内容,2,畜禽粪便的微生物污染及其处理,畜禽粪便中含有大量病原体和寄生虫卵,如大肠杆菌、昆沙门胧、黄葡萄球菌、蛔虫卵、球虫卵等。如果不及时处理,就会成为危险的感染源,导致疾病。另外,如果处理大量家畜粪便不当,蚊子和苍蝇就会繁殖,使环境中的病原体和寄生虫扩散,细菌种类增加,细菌的杨怡增加,人和家畜的传染病也会扩散。粪便处理方法:饲料化处理、能源化处理、肥料化处理。研究背景,3,寄生在人类和动物皮肤粘膜鼻腔胃肠等,鞭毛不形成孢子和荚果的革兰氏阳性葡萄球菌,金葡菌对各种化脓性疾病,败血症或败血症,乳腺炎等所有家畜产生多种危害,呼

2、吸机黑灰色油性粒子或粉末,略微溶于水,呈碱性,容易落入潮水中。无残留污染消毒杀菌是提高氮肥利用率,改善土壤,抑制农作物病虫害危害的多用途肥料。5,研究目的和重要性,研究奶牛粪便致病性金黄色葡萄球菌的分离鉴定和药草敏感性,并在堆肥中添加石灰氮对金葡菌杀灭效果及堆肥发酵的影响。为消除畜产污染,防止畜产污染,防止病原金葡菌的发生,扩散,防疫,粪便的有效处理和利用提供了科学依据。石灰氮对堆肥发酵的影响,试验内容,石灰氮对金黄色葡萄球菌的杀灭效果,金黄色葡萄球菌的分离,鉴定及抗菌活性,7,奶牛粪便中致病性金黄色葡萄球菌的分离鉴定和体外抗菌活性,方法,病原细菌鉴定:显微检验,生化检验,动物实验,病原体纯培

3、养,PCR鉴定,体外抗菌活性:养鱼草和乳香,8,图1金黄色葡萄球菌从甘露醇氯化钠培养基中生长,分离细菌培养特性和形态特征,图2从206个牛粪中分离34个金黄色葡萄球菌,染色结果为金黄色葡萄球菌。9,表2 34分离菌株生化检验结果,注:“”表明分离细菌生化反应阳性;“-”表示分离菌的生化反应是阴性。生化检测结果10,动物病原检测结果34株中7株在2448h小时内死亡,阴性对照组的老鼠都处于健康状态。14d后解剖检查结果无病变。死老鼠死前都可以看到昏迷、食欲不振、毛发蓬松、精神不振、四肢僵硬等状态。验尸结果显示肠粘膜充血,恶臭的真黄绿色渗出物,肾脏脾脏肥大。脾脏和腹腔积液接种于高盐甘露醇同期时,均

4、生长在金黄色中等大小的圆形菌落。革兰染色呈革兰阳性,呈中等大小葡萄球菌。11,PCR测试结果,图3 staphylococcus aureus PCR标识,m为DNA marker;14是分离菌株PCR产物。5无菌水控制;6是标准菌株。扩增引物是Coa基因致病性金黄色葡萄球菌固有基因,目标片段为800bp。12,体外抗菌结果,表3 8种致病性金黄色葡萄球菌7株的平均抗菌结果单位:毫米,注:“”号麻木,抑菌圈直径7毫米10毫米;“”号表示敏感,抑菌圈直径10mm15mm之间。“”表示高灵敏度,抑菌圈直径大于15mm。13,摘要,分离菌的形态、染色培养特性、可疑金黄色葡萄球菌34株在206奶牛新鲜

5、粪便中检测。生物化学试验、动物病原试验、PCR分析结果表明,34株疑似金黄色葡萄球菌7株分离出致病性金黄色葡萄球菌,病原菌检出率为20.59。丹参、大黄、枸杞等三种草药对金黄色葡萄球菌非常敏感,对茜草和青蒿敏感,其他草药对金黄色葡萄球菌敏感,14,2牛粪堆肥中添加石灰氮对金黄色葡萄球菌的除灭效果,培养温度的测定,试验设计培养温度分别为20C,30C,37C,50C,添加石灰氮0%和2%,即处理组添加2%石灰氮,该比例是将石灰氮与300g牛粪均匀混合,分别在4个不同的温度点停止10d的培养。从0d、1d、3d、5d、7d和10d的培养中分别提取了1g的样品,测定了金黄色葡萄球菌的数量。15,添加

6、石灰氮的测定,试验设计根据培养温度的测试结果,选择最佳培养温度(即30),将石灰氮的添加量设置为0%,2%,2.5%,3%。该比例将石灰氮混合在300克牛粪中,30培养5d。培养0d,1d,3d,5d,采集1g样品,用平板系数测定金黄色葡萄球菌的数量。16,结果图4牛粪堆肥中添加0%石灰氮时葡萄球菌的数值变化,图5牛粪堆肥中添加2%石灰氮时葡萄球菌的数值变化,培养温度的确定,同一堆肥期间30金葡菌20和37以下葡萄球菌20和37以下因此30是最佳培养温度。17,添加石灰氮的决定图6在牛粪堆肥中添加石灰氮时,金黄色葡萄球菌的数值变化,30培养时添加2.5%的石灰氮,可以杀死金黄色葡萄球菌。18,

7、摘要石灰氮主要由元素分解过程中产生的中间产物氰和二氰氨杀死病原微生物,其丰口惠成分氰和二氰氨的分解速度受温度和水分的影响。37和50点石灰氮的丰口惠成分分解速度快,丰口惠效果不持续,37也适合金黄色葡萄球菌的繁殖。50的高温堆肥条件实际上很难控制,同一堆肥期间30金葡菌的数量明显小于20,37金葡菌的数量。因此30是最佳培养温度,有助于发挥石灰氮的抗菌效果。要达到在30温度下完全杀死金黄色葡萄球菌的目的,必须在牛粪堆肥中添加至少2.5%的石灰氮。19,试验3牛粪堆肥中添加石灰氮对堆肥发酵的影响,材料堆肥原料:牛粪,石灰氮试验场:内蒙古农业大学牛生产实验室。实验设计对照组0%,处理组石灰氮添加量

8、分别为2%,3%,4%,即测试组0%,2%,3%,4%。20,20,堆肥样品收集分别为0d,3d,7d,14d,21d,28d,35d,42d,49d,5点取样,每样300g,混合均匀。测量地表温度:将水银温度计放在反应堆中心,每天上午和下午读取2次读数的平均值。含水量:105 24小时烘焙后计量。PH:使用样品10g,50ml去离子水的30分钟冲击,正点30分钟,用PH测量仪测量。总有机碳:采用KCI萃取-蒸馏法。21,21,有机物测定:总有机碳1.724。总氮:使用kjeldahl方法。C/N:有机碳总量与总氮的比率。种子发芽金志洙:将一张大小合适的滤纸均匀地放在灭菌的培养皿中,放入15颗

9、白菜种子,将6ml的萃取物放在培养皿中,将蒸馏水作为对照,重复3次,在25的恒温培养基中培养5d,测定种子发芽率和根长。平均发芽率处理平均根长发芽金志洙GI(%)=100%对比平均发芽率与平均根长大肠杆菌数:使用稀释板法。金黄色葡萄球菌数:采用稀释板法。22、堆温度的变化,图7堆肥温度的变化,结果对照组0%的加热速度比处理组快2%,3%,4%,对照组0%堆肥后,3%堆肥上升到最高高温39.8,处理组2%,3%,4实验组经过高温后进入了长期的冷却成熟期。,23,水分含量变化,图8水分含量变化,水分含量基本呈下降趋势,处理组2%,3%,4%的下降幅度大于对照组0%。堆肥初期水分保持在71v%,水分

10、含量比较高。堆肥结束前,各实验组的水分基本稳定在60%左右。23,24,随着PH值的变化,图9 PH值的变化,堆肥时间的延长,各实验组的PH值逐渐减少。堆肥结束后,各处理组的pH值基本稳定在7.008.00左右,符合堆肥腐烂pH值必须在7.008.00之间的标准。25,总有机碳的变化,图10堆肥总有机碳的变化,25,各试验组总有机碳量在堆肥开始后3天内减少最快,说明有机碳是微生物优先使用的碳源。最后,其含量保持在较低水平。按实验组,碳总量呈下降趋势,但堆肥过程也有氮损失大,牛粪中含有很多难以分解的纤维素等有机物,整体碳总量几乎没有变化。26,有机物变化,图11堆肥有机物变化,26,堆肥全过程中

11、,试藻堆的有机物含量随着时间的推移逐渐减少。堆肥初期有机物分解速度快,冷却期间有机物变化不大。堆肥结束前,4个试组原子有机物含量分别下降到39.24%,34.26%,33.41%,35.46%。27,全氮的变化,图12堆肥T-N的变化,堆肥初期处理组的全氮小幅减少,是因为在此过程中有机氮被强分解,产生了巨大的NH3挥发。随着堆肥的进行,在最后腐败阶段,有机物分解速度下降,趋于稳定,相对氮含量逐渐提高,最终总氮含量高。27,28,28,C/N的变化,图13 C/N的变化,堆肥过程中各实验组碳氮比例呈下降趋势。随着堆肥发酵的进行,总碳和总氮含量继续下降,但通过添加不同浓度的石灰氮,氮开始和最终相对

12、含量提高,堆中的C/N逐渐减少。29,发芽指数的变化,图14 GI的变化,图15白菜种子发芽,试验组0%,2%,3%,4%的初始发芽率分别为20.87%,2.56%,0.49%,0%。数据表明,种子发芽指数超过80%,堆肥被认为已经成熟。29,30,30,大肠杆菌数的变化,图16堆肥大肠杆菌的数值变化,31,摘要,堆肥是杀死粪便病原微生物的非常有效的手段,但不适当的处理仍可能有环境和公共安全的危险。这种试验用石灰氮的加入,发挥了迅速杀死大肠杆菌的效果。对照组0%的堆温度急剧上升,而2%,3%,4%的处理组出现高温烟雾现象,但大肠杆菌迅速到达检测边界以下。随着石灰氮添加量增加2%、3%、4%,各

13、处理组的总有机碳减少幅度不大,总氮的增加量逐渐减少,种子发芽指数增加。各组堆肥已达到成熟。32,致病性金黄色葡萄球菌的检出率为20.59%。丹参、大黄、枸杞等三种药草对金黄色葡萄球菌的抗菌效果比较强。其中丹参对金黄色葡萄球菌的抗菌作用最强。30是杀死金黄色葡萄球菌的理想温度。在此温度下,为了达到完全杀死金黄色葡萄球菌的目的,在牛粪堆肥中加入至少2.5%的石灰氮。石灰氮的添加对大肠杆菌迅速杀灭效果。对照组0%的堆温度急剧上升,而2%,3%,4%的处理组推迟了高温,但大肠杆菌很快到达了检测边界以下。2%,3%,4%各处理组总有机碳没有明显减少,全氮增加逐渐成为全文结论,33,减少,种子发芽金志洙增加。各组堆肥已达到成熟。34 .感谢我的恩师奥格音乐教授,对3年的学习经历给予了细致的指导和关怀,借此机会,向恩师表示衷心的感谢。坐下来,感谢季晨所有的老师和同学!谢谢,35,直接删除以下内容行材料可编辑修改使用材料可编辑,36,主要业务:在线软件设计、平面设计制作、出版广告等公司提

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