4-1动物微生物--消毒与灭菌技术

1、1,清洁、消毒与灭菌技术,学习目标:掌握1、消毒、灭菌的概念2、化学消毒剂使用原则及化学消毒方法3、物理、化学消毒灭菌法的概念,2,清洁、消毒与灭菌技术,清洁,是清除物品上的一切污迹,如尘埃,油脂等,消毒,清除或杀灭物品上的病原微生物,灭菌,清除或杀灭物品上的一切微生物,以杀灭芽孢为准,3,概念的鉴别,消毒相对的，不一定达到无菌的要求灭菌绝对的，一定达到无菌的要求。,4,物品清洁法,常用的清洁方法,5,清洁方法用于,医院衣被、家具、地面、墙壁及医疗器械等物体表面的处理或物品消毒、灭菌前的处理,6,常用去污法,碘酊乙醇甲紫乙醇或草酸溶液陈旧血渍过氧化氢溶液高锰酸钾维生素c或过氧乙酸墨水稀盐酸或草

2、酸也可用氨水或过氧化氢铁锈1%热草酸溶液，也可用热醋酸,7,擦拭法,高压蒸汽灭菌法,常用消毒灭菌的方法,物理法,化学法,浸泡法,熏蒸法,喷雾法,热力消毒法,生物净化法,辐射消毒法,燃烧法,烤箱法,煮沸法,干热法,湿热法,日光曝晒法,紫外线灯照射法,电子灭菌灯法,电离辐射法,8,利用热力或光照等物理作用，使微生物的蛋白质及酶变性或凝固，以达到消毒灭菌的目的干热消毒灭菌法湿热消毒灭菌法光照消毒法,物理消毒灭菌法,9,一、干热消毒灭菌法,干热是指相对湿度在20%以下的高热，由空气导热，传热较慢，干热消毒灭菌常用的方法,10,燃烧灭菌法,11,微波消毒灭菌法,12,二、湿热消毒灭菌法,湿热由空气和水蒸

3、气导热，传热快，穿透力强，湿热消毒灭菌常用的方法：煮沸消毒法高压蒸汽灭菌法，一般高压蒸汽灭菌的压力为102.97137.30kPa，温度为1211260C经1530min可达到灭菌目的,13,湿热消毒灭菌法,14,三、光照消毒法,光照消毒法主要利用紫外线照射，使菌体蛋白发生光解变性而导致细菌死亡，常用方法有：日光曝晒消毒法日光曝晒法用于枕头、床褥、床垫、棉絮等的消毒，一般曝晒6h可达到消毒，曝晒时2h翻面一次紫外线消毒法紫外线消毒法用于空气消毒与物品表面的消毒,15,干热消毒灭菌法,16,光照消毒法,17,化学消毒灭菌法,化学消毒灭菌法是利用化学药物渗透细菌体内，使菌体蛋白凝固变性，干扰细菌酶

4、的活性，抑制细菌代谢和生长或损害细菌膜的结构，改变其渗透性，破坏其生理机能等，从而达到消毒灭菌目的,18,(一)化学消毒剂的使用原则,(1)根据物品的性能及微生物的特性，选择合适的消毒剂。(2)严格掌握消毒剂的有效浓度、消毒时间及使用方法。(3)消毒剂应定期更换，易挥发的消毒剂要加盖，并定期检测，调整其浓度。,19,(一)化学消毒剂的使用原则,(4)浸泡前将物品洗净擦干，浸没在消毒液内的物品应注意打开轴节或套盖，管腔内应注满消毒液。(5)在使用前用无菌生理盐水冲净消毒后的物品，避免消毒剂刺激人体组织,20,(二)化学消毒剂的分类,l、高效消毒剂高效消毒剂可杀灭一切微生物，包括芽孢(碘酊、福尔马

5、林等)2、中效消毒剂中效消毒剂可杀灭细菌繁殖体，不能杀灭芽孢(乙醇、碘伏等)3、低效消毒剂低效消毒剂可杀灭细菌繁殖体，不能杀灭结核杆菌、亲水性病毒或芽孢(苯扎溴铵、氯己定等),21,(三)化学消毒剂的使用方法,浸泡法侵泡法是将物品洗净、擦干后，浸没在消毒液中进行消毒灭菌的方法。擦拭法擦拭法是用消毒剂直接擦拭人体或物品表面，如皮肤、桌椅等，达到消毒灭菌的方法。喷雾法喷雾法是利用喷雾器将消毒剂变成微粒气雾弥散在空气中对空气和物品表面进行消毒灭菌的方法。熏蒸法熏蒸法是将消毒剂加热或加人氧化剂，使其产生气体来进行消毒灭菌的方法。,22,(三)化学消毒剂的使用方法,23,(四)常用的化学消毒剂,碘酊io

6、dinetincture过氧乙酸peraceticacid福尔马林formalin（3740%的甲醛溶液)戊二醛glutaraldehyde环氧乙烷ethyleneoxide含氯消毒剂乙醇alcohol碘伏iodophor,24,碘酊消毒效力：高效,浓度和用法：2%用于皮肤消毒，擦后待干，再用70%乙醇脱碘2.5%用于脐带断端消毒，擦后待干，再用70%乙醇脱碘注意事项：对皮肤有刺激性，不可用于黏膜消毒对金属有腐蚀性，不可用于金属器械的消毒对碘过敏者禁用,25,过氧乙酸peraceticacid,消毒效力：高效0.2用于手消毒，浸泡12min0.5用于餐具消毒，浸泡3060min0.20.5用于

7、物体表面消毒，或浸泡10min12用于空气消毒，8mL/m3，加热熏蒸，密闭门窗30-120min,26,过氧乙酸,注意事项：对金属有腐蚀性，不可用于金属器械的消毒易氧化分解而降低杀菌力，需现配现用浓溶液有腐蚀性，配制时要戴口罩和橡胶手套存放于阴凉避光处，防高温引起爆炸,27,福尔马林formalin(3740%的甲醛溶液),消毒效力：高效40甲醛210mLm3加水420mL加热，作室内物品及空气消毒40甲醛4060mLm3加高锰酸钾2040g，柜内熏蒸，密闭612h10甲醛可作浸泡器械消毒,28,福尔马林,注意事项：蒸汽穿透力弱，因此衣服应挂起消毒消毒效果易受温度、湿度影响，要求室温在18以

8、上，相对湿度在70以上对人体有一定毒性和刺激性，使用时注意防护,29,戊二醛glutaraldehyde,消毒效力：高效浓度和用法：2戊二醛溶液加入0.3碳酸氢钠，成为2碱性戊二醛，用于浸泡不耐高温的金属器械、医学仪器、内镜等，消毒需1030min，灭菌需710h.,30,戊二醛,注意事项：每周过滤1次，每2周应更换消毒液1次浸泡金属类物品时，加入0.5亚硝酸钠作为防锈剂消毒灭菌后的物品，使用前用无菌蒸馏水冲净,31,环氧乙烷ethyleneoxide,消毒效力：高效环氧乙烷为气体灭菌剂，用于精密仪器、器械、化纤、人造毛类制品等不耐热、不耐湿物品的灭菌。灭菌剂量为8001200mg/L，温度为

9、542，相对湿度为6010，时间为2.54h.临床上有少量物品时可放入丁基橡胶袋中灭菌；有大量物品时可放人环氧乙烷灭菌柜内灭菌,32,环氧乙烷,注意事项：易燃易爆具有一定毒性，工作人员要严格遵守操作程序存放在阴凉通风无火源处储存温度不可超过40，以防爆炸灭菌后的物品须通风处理，清除环氧乙烷残留量后方可使用每次灭菌时，应进行效果检测及评价,33,含氯消毒剂（常用的有漂白粉、漂白粉精、氯胺T、二氯异氰脲酸钠等）,消毒效力：中、高效浓度和用法：0.5漂白粉溶液、0.51氯胺溶液用于浸泡餐具、便器等，浸泡30min13漂白粉溶液、0.53氯胺溶液喷洒或擦拭地面、墙壁及物品表面排泄物消毒：干粪5份加漂白

10、粉1份搅拌，放置2h，尿液100mL加漂白粉1g，放置1h,34,含氯消毒剂,注意事项：消毒剂保存在密闭容器内，置于阴凉、干燥、通风处，减少有效氯的丧失配制的溶液性质不稳定，应现配现用有腐蚀及漂白作用，不宜用于金属制品、有色衣服及油漆家具的消毒3d更换一次消毒液,35,乙醇alcohol,消毒效力：中效浓度和用法：7075用于皮肤消毒95用于燃烧灭菌注意事项：易挥发，需加盖保存，定期测定，保持有效浓度有刺激性，不宜用于黏膜及创面消毒易燃，故应置于避火处,36,碘伏iodophor,消毒效力：中效浓度和用法：0.5l.0有效碘溶液用于外科手术及注射部位皮肤消毒涂擦2次0.05%有效碘溶液用于黏膜

11、、创面消毒注意事项：碘伏稀释后稳定性差，宜现配现用避光密闭保存，放阴凉处消毒后不用乙醇脱碘,37,苯扎漠铵(新洁尔灭)bromogeraminum,消毒效力：低效0.01005用于黏膜消毒0.10.2用于皮肤消毒0.1%0.2用于金属器械消毒，浸泡1530min(加入0.5亚硝酸钠以防锈),38,苯扎漠铵(新洁尔灭),注意事项：对肥皂、碘、高锰酸钾等阴离子表面活性剂有拮抗作用有吸附作用，会降低药效，所以溶液内不可投人纱布、棉花等对铝制品有破坏作用，故不可用铝制品盛装,39,氯己定(洗必泰)chlorhexidine,0.02用于手消毒，浸泡3min0.05用于创面消毒0.1用于物体表面消毒注意

12、事项：对肥皂、碘、高锰酸钾等阴离子表面活性剂有拮抗作用消毒效力：低效有吸附作用，会降低药效，所以溶液内不可投人纱布、棉花等,40,五、供应室护理工作,供应室的设置供应室是一个相对独立的区域，要求周围环境清洁，无污染源，室内采光、通风良好，地面、墙面光滑，便于冲洗；设有日常用水、热水、净化系统和蒸馏过滤系统；有接收、洗涤、专用晾晒物品的场所及敷料制作、消毒灭菌、无菌物品储存及发放室等。供应室分为污染区、清洁区与无菌区，消毒物品的路线采取顺向通过的方式，不可逆行。,41,物理消毒灭菌法,（physicaldisinfectionsterilization）利用物理因素作用于病原微生物，将之清除或杀

13、灭常用的有热力、光照、辐射、过滤除菌等方法。,消毒灭菌的方法,42,物理消毒灭菌法,43,热力消毒灭菌法,(heatdisinfectionsterilization)主要利用热力破坏微生物的蛋白质、核酸、细胞壁和细胞膜，从而导致其死亡效果可靠、经济方便，使用广泛,44,燃烧法,特点,适用范围,方法,简单、迅速、彻底,无保留价值的污染废弃物、病理标本、带脓性分泌物的敷料、纸张、尸体等的处理。微生物实验室接种杯的消毒灭菌；某些金属器械、搪瓷类物品，急用时也可用燃烧法。无保留价值的物品可直接在焚烧炉内焚毁,禁用,锐利刀剪禁用此法以免锋刃变钝,金属器械可在火焰上烧灼20s；搪瓷类容器可倒入少量95的

14、乙醇，慢慢转动容器，使其分布均匀，然后点火燃烧直熄灭,45,干烤法,利用特制的烤箱进行灭菌，其热力传播和穿透主要依靠空气对流和介质传导，灭菌效果可靠。适用于在高温下不变质、不损坏、不蒸发的物品，如油剂、粉剂、玻璃器皿和金属制品等；不适用于纤维织物、塑料制品等。,46,巴氏消毒法（Pasteurization）,是用热水或蒸汽加热至6580，消毒1015分钟。可有效的杀死各种细菌繁殖体和一般细菌用于碗盆及陶瓷用品的消毒。,47,压力蒸汽灭菌法（autoclavesterilization）,原理,适用,方法,是热力消毒灭菌中效果最好的一种方法利用高压及饱和蒸汽的高热所释放的潜热灭菌，潜热是指当1

15、g100的水蒸汽变成1g100的水时所释放的热能（2，255J）,临床广泛应用于耐高温、高压、潮湿物品的灭菌，如各类器械、敷料、搪瓷、橡胶、玻璃制品及溶液等是热力消毒灭菌中效果最好的一种,根据排放冷空气的方式和程度的不同，分为下排气式压力蒸汽灭菌和预真空压力蒸汽灭菌。,48,高压蒸汽灭菌法,操作前准备环境准备环境应清洁、宽敞、通风良好，有排气设施。护士准备护士应着装整洁。用物准备用物包括手提式压力蒸汽灭菌器、卧式压力蒸汽灭菌器、预真空压力蒸汽灭菌器、需灭菌的物品及计时表。,49,高压蒸汽灭菌法,操作规程手提式压力蒸汽灭菌器隔层内加一定量的水，放人需灭菌的物品，加盖旋紧，加热。当锅内压力到达40

16、kPa时，开放排气阀门，驱除冷空气，关闭排气阀门，继续加热。待压力升至103kPa时，保持原压20一30min后，关闭热源。打开排气阀，待压力降至“0”时，慢慢启盖，取出物品。玻璃物品骤然降温则易发生爆裂。,50,高压蒸汽灭菌法,卧式压力蒸汽灭菌器结构原理同手提式压力蒸汽灭菌器，不同的是由外面输入蒸汽，灭菌柜室容量较大，可供医院批量物品的灭菌。操作人员须经专业培训合格后方能上岗。,51,高压蒸汽灭菌法,预真空压力蒸汽灭菌器结构除压力蒸汽灭菌器的装置外另设有真空泵。作用原理是在灭菌前先抽出灭菌器内冷空气，形成负压，再输入蒸汽，在负压吸引下蒸汽迅速透人物品。压力为205.95kPa，温度为132，

17、经510min可达到灭菌目的。操作人员也须经专业培训合格后方能上岗。,52,高压蒸汽灭菌法,注意事项灭菌包不宜过大，不超过30cm30cm25cm，放置时各包之间留有空隙，使蒸汽易于渗透入包裹中央，排气时蒸汽能迅速逸出，保持物品干燥。将有孔的容器孔盖打开有孔的容器应将孔盖打开，使蒸汽进人。,53,高压蒸汽灭菌法,注意事项布类物品放在金属、搪瓷类物品之上布类物品应放在金属、搪瓷类物品之上，以免蒸汽遇冷凝成水珠，使包布潮湿，阻碍蒸汽进出灭菌包待干燥后取出备用被灭菌物品应待干燥后，才能取出备用定期监测灭菌效果,54,高压蒸汽灭菌法,55,高压蒸汽灭菌法,56,高压蒸汽灭菌法,57,高压蒸汽灭菌法,5

18、8,下排气式压力蒸汽灭菌法,利用重力置换的原理，使热蒸汽在灭菌器中从上而下，将冷空气由下排气孔排出，全部由饱和蒸汽取代，利用蒸汽释放的潜热使物品达到灭菌。要求：压力：103kPa137kPa（1520磅/平方英寸）温度：121126时间：1530min,59,60,61,压力蒸汽灭菌的效果监测,62,监测灭菌效果,物理监测法用150或200的留点温度计。使用前将温度计汞柱甩至50以下，放入包裹内，灭菌后检查其读数是否达到灭菌温度化学监测法主要是通过化学指示剂的化学反应，灭菌后呈现的颜色变化来辨别是否达到灭菌的要求。临床常用的化学指示卡与化学指示胶带，化学指示卡放在包的中央，化学指示胶带粘贴在包

19、的外面。,63,64,65,监测灭菌效果,生物监测法是最可靠的监测法，利用对热耐受力较强的非致病性嗜热脂肪杆菌芽孢作为指示剂，制成每片含106个嗜热脂肪杆菌芽孢的菌纸片,使用时将10片菌纸片分别放于灭菌器四角及中央，待灭菌完毕，用无菌镊取出后再放人培养基内，在56温箱中培养48h至1周，若全部菌纸片无细菌生长则表示灭菌合格。,66,电离辐射灭菌法,又称“冷灭菌”，具有广谱灭菌作用可用于金属、橡胶、塑料、高分子聚合物（如一次性注射器、输液器、输血器）、精密医疗器械、生物医学制品等,67,微波消毒灭菌法,微波是频率在30-300000MHz，波长在00011m左右的电磁波。,微波可以杀灭各种微生物

20、，包括细菌繁殖体、真菌、病毒和细菌芽孢、真菌孢子等,常用于食物及餐具的消毒、医疗药品及耐热的非金属材料器械的消毒灭菌。,68,煮沸消毒法（boilingsterilization）,要求,适用,方法,经510分钟可杀灭繁殖体，达到消毒效果。将碳酸氢钠加入水中，配成1%2%的浓度时，可提高沸点达105，增强杀菌作用，还可去污、防锈。,适用于耐湿、耐高温的物品如金属、搪瓷、玻璃和橡胶类等,将物品刷洗干净，全部浸没在水中，然后加热煮沸消毒时间从水沸后计算如中途加入物品，则在第二次水沸后重新计时,注意,煮前煮时煮后,应将物品刷洗干净有轴节的器械或带盖的容器应将轴节或盖打开再放入水中空腔导管须先在腔内灌

21、水物品不宜放置过多，大小相同的碗、盆不能重叠，要保证物品各面都与水相接触,根据物品性质决定放入水的时间及消毒时间玻璃器皿应用纱布包裹好后，从冷水或温水中放入，消毒时间为1015min橡胶制品用纱布包好，待水沸后放入，时间为510min金属及搪瓷类物品，消毒时间为1015min；,水的沸点受气压影响，海拔高的地区气压低，水的沸点也低，需适当延长消毒时间；海拔每增高300m，消毒时间延长2min；,应用无菌器械将物品及时取出置于无菌容器内,69,煮沸消毒法,一、概念煮沸消毒法是将水煮沸至100，经510min可杀灭细菌繁殖体，达到消毒效果。二、适应范围煮沸消毒法适用于耐湿、耐高温的物品，如金属、搪

22、瓷、玻璃、橡胶类等物品的消毒。三、操作前准备护士准备护士应着装整洁。用物准备用物包括煮沸锅、需消毒的物品、碳酸氢钠及计时表。,70,煮沸消毒法,操作规程将物品刷洗干净，全部浸没在水中，或在水中加入碳酸氢钠配成1一2的浓度，可将沸点提高到105还可去污防锈。加热煮沸。水沸后开始计时510min，如中途加入物品，则在第二次水沸后重新计时。关闭热源，用无菌持物钳取出消毒物品。,71,煮沸消毒法,注意事项煮沸消毒前，物品必须刷洗干净。物品各面要全部浸人水中，如空腔导管需先在腔内灌水。大小相同的碗、盆必须隔开，有轴节的器械要打开。玻璃器具应从冷水或温水放人，并用纱布包好，橡胶类物品应用纱布包裹，待水沸后

23、放入，消毒后及时取出以免橡胶变软。海拔每增高300m，需延长消毒时间2min。,72,煮沸消毒法,73,光照消毒法,又称辐射消毒，主要利用紫外线的杀菌作用，使菌体蛋白质发生光解、变性而致细菌死亡。其特点对杆菌杀菌能力强，对球菌较弱，对生长期细菌敏感，对芽孢敏感性差。,74,紫外线消毒法,概念紫外线消毒法是利用紫外线照射，使菌体蛋白发生光解、变性，菌体内的核酸、酶遭到破坏而死亡的一种消毒方法。紫外线的杀菌力与其波长密切相关，最佳杀菌波长为250270nm.适应范围紫外线消毒适用于空气消毒与物品表面的消毒。,75,日光曝晒法,原理,适用,方法,由于日光具有热、干燥和紫外线的作用有一定的杀菌力,常用

24、于床垫毛毯衣服书籍等物品的消毒,方法是将物品放在直射阳光下曝晒6h，定时翻动，使物品各面均能受到日光照射。,76,紫外线灯管消毒法,紫外线根据波长可分为A波、B波、C波和真空紫外线，杀菌作用最强的波段为250nm270nm。紫外线可杀灭多种微生物，包括杆菌、病毒、真菌、细菌繁殖体等。,77,78,杀菌机制,使菌体DNA失去转换能力而死亡；破坏菌体蛋白质中的氨基酸，使菌体蛋白光解变性；降低菌体内氧化酶的活性，使氧化能力丧失；使空气中的氧电离产生具有极强杀菌作用的臭氧。,79,方法,空气消毒物品消毒,消毒前做好室内清洁卫生，关闭门窗，停止走动每10m2安装30W紫外线灯管一支有效距离不超过2m照射时间3060分钟,消毒时应将物品全部暴露避免遮挡有效距离为2560cm照射时间为2030分钟。,80,臭氧消毒法,臭氧在常温下为强氧化剂，稳定性极差，易爆炸，主要依靠强大的氧化作用杀菌可杀灭细菌繁殖体、病毒、芽孢、真菌，并可破坏肉毒杆菌毒素。,81,床单位臭氧消毒,82,紫外线消毒法,操作前准备环境准备清洁，干燥，温度在20以上，相对湿度在4050，人员停止走动，关闭门窗。护士准备护士应着装整洁，戴防护镜。用物准备用物包括紫外线消毒灯、使用时间记录本、笔、计时表。,83,紫外线消毒法,目的(1)防止疾病传播。(2)预防和控制医院感染空气消毒法每