DNA的粗提取与鉴定课件_第1页
DNA的粗提取与鉴定课件_第2页
DNA的粗提取与鉴定课件_第3页
DNA的粗提取与鉴定课件_第4页
DNA的粗提取与鉴定课件_第5页
已阅读5页,还剩11页未读 继续免费阅读

下载本文档

版权说明:本文档由用户提供并上传,收益归属内容提供方,若内容存在侵权,请进行举报或认领

文档简介

1、粗提取和鉴定,DNA,选择实验材料,材料:鱼卵,猪肝,花椰菜,香蕉,鸡血,猕猴桃,洋葱,豌豆,菠菜,液体培养基中培养的大肠杆菌可以考虑含有DNA的生物物质,但是DNA含量比较高如果鸟类的血液核很大,DNA很多,就不需要破坏细胞壁问题:采访鸡血细胞溶液后,在实验前需要特殊处理吗?柠檬酸钠抗凝剂,1,实验原理,NaCl溶液浓度不同的DNA在0.14 mol/L的NaCl溶液中溶解度最低。利用这个原理,可以在氯化钠溶液中析出溶解的DNA。 DNA不溶于酒精溶液,但细胞内的某些物质溶于酒精溶液。利用这个原理,可以进一步提取杂质较少的DNA。DNA会把二苯胺(沸水浴)染成蓝色。因此,二苯胺可以用作确认D

2、NA的试剂。第二,目的要求早期掌握DNA的粗提取和识别方法,观察提取的DNA物质。第三,材料:鸡血细胞液(5-10毫升),体积分数为95%的酒精溶液(冷却),蒸馏水,质量浓度为0.1g/毫升的柠檬酸钠溶液,物质的量浓度分别为2mol/l和0.015毫升此时,血细胞沉入离心管底部,去除上清液,就能得到鸡血细胞液。问:从鸡血中提取DNA时,为什么要从血液中去除上等液?4,方法:1,鸡血细胞液体准备,鸡血细胞液体,a:上清液是血清,不含血细胞,DNA在鸡血细胞中,所以要去除上清液。添加0.1g/ml浓度的柠檬酸钠溶液(抗凝剂):防止鸡血细胞的凝固。提取新鲜鸡血,2,鸡血细胞的核物质,制备5-10毫升

3、好鸡血细胞液体,注入烧杯,在添加20毫升蒸馏水的同时,用玻璃棒快速搅拌,加速和过滤血细胞的细胞膜和核膜破裂。鸡血细胞液体,添加20毫升蒸馏水。目的是吸收水,释放细胞的DNA。将物质的量浓度为2mol/l的氯化钠溶液40毫升加入滤液中,搅拌均匀,DNA就会溶解在溶液中。3,在细胞核内溶解DNA,加入DNA溶解液,浓度为2mol/L的氯化钠溶液40ml,沿鼻杯内壁慢慢加入蒸馏水,轻轻搅拌,灯丝就会出现,蒸馏水越来越多,直到氯化钠浓度约为0.14mol/l为止,不会持续增加。过滤出含有,5,DNA的黏稠物,析出含有,4,DNA的黏稠物,加入蒸馏水。目的是降低NaCI的浓度,释放DNA。获取DNA的粘

4、性物质(白牛奶),将20毫升物质的量浓度为2毫升/l的氯化钠溶液注入烧杯,使粘合剂在溶液中溶解得尽可能多。6,将DNA的粘度再溶解,用纱布过滤,将DNA溶解在滤液中,7,将包含DNA的氯化钠过滤,加入20毫升含DNA/l浓度的氯化钠溶液,加入溶液中冷却的酒精溶液50米,溶液中杂质较少的长丝(其主要成分是DNA),8,进一步提取杂质少的DNA,冷却酒精溶液50毫升,含DNA的滤液,较少杂质的蚕丝,9,确认DNA,2个20毫升试管,每种加入5毫升0.015毫升氯化钠溶液的浓度,将长丝放入试管中,用玻璃棒搅拌然后将4毫升的二苯胺试剂分别添加到两个试管中。均匀搅拌后,将试管放入沸水中加热5分钟,然后在

5、2个试管中观察和比较溶液颜色的变化,直到试管冷却。,0.015氯化钠溶液5毫升,无钢丝4毫升的二苯胺试剂,蓝色,0.015氯化钠溶液5毫升,钢丝,添加4毫升的二苯胺试剂,如在“DNA的粗提取和鉴定”实验装置下,回答问题。(1)作为实验材料,使用鸡血细胞液,而不是鸡的全血,主要原因是鸡血细胞液的含量高。(2)在图a所示的实验阶段添加蒸馏水20毫升的目的是通过图b所示的步骤获得滤液,然后在该过滤器中添加2 mol/L的NaCl溶液。图c所示的实验阶段添加蒸馏水的目的是:(3)为了检查而得到的灯丝的主要成分是DNA,如图d所示,进行实验,使溶液脱落。(4)试管是对照组,试管是实验组。试管现象;b试管现象。在沸水中加热的目的是DNA抗高温。试管在实验中的作用如下。b试管中溶液颜色的变化程度主要相关。加快颜色反应速度,DNA,血细胞水分吸收和分解,释放DNA,将滤液DNA溶解在浓盐溶液中,DNA析出,二苯胺,溶液不变蓝,溶液变蓝,耐受性,对照组,添加多少细丝,步骤再溶(2 mol/L的NaCl),过滤(包含DNA的滤液),932n附加片剂(体分率为95%的冷却酒精),9321确认,准备鸡血液,情景

温馨提示

  • 1. 本站所有资源如无特殊说明,都需要本地电脑安装OFFICE2007和PDF阅读器。图纸软件为CAD,CAXA,PROE,UG,SolidWorks等.压缩文件请下载最新的WinRAR软件解压。
  • 2. 本站的文档不包含任何第三方提供的附件图纸等,如果需要附件,请联系上传者。文件的所有权益归上传用户所有。
  • 3. 本站RAR压缩包中若带图纸,网页内容里面会有图纸预览,若没有图纸预览就没有图纸。
  • 4. 未经权益所有人同意不得将文件中的内容挪作商业或盈利用途。
  • 5. 人人文库网仅提供信息存储空间,仅对用户上传内容的表现方式做保护处理,对用户上传分享的文档内容本身不做任何修改或编辑,并不能对任何下载内容负责。
  • 6. 下载文件中如有侵权或不适当内容,请与我们联系,我们立即纠正。
  • 7. 本站不保证下载资源的准确性、安全性和完整性, 同时也不承担用户因使用这些下载资源对自己和他人造成任何形式的伤害或损失。

评论

0/150

提交评论