山南市2025届高三1月检测试题生物试题含解析

山南市2025届高三1月检测试题生物试题注意事项:1．答题前，考生先将自己的姓名、准考证号码填写清楚，将条形码准确粘贴在条形码区域内。2．答题时请按要求用笔。3．请按照题号顺序在答题卡各题目的答题区域内作答，超出答题区域书写的答案无效；在草稿纸、试卷上答题无效。4．作图可先使用铅笔画出，确定后必须用黑色字迹的签字笔描黑。5．保持卡面清洁，不要折暴、不要弄破、弄皱，不准使用涂改液、修正带、刮纸刀。一、选择题：（共6小题，每小题6分，共36分。每小题只有一个选项符合题目要求）1．大脑细胞中的永久性的不溶性蛋白缠结物能够杀死细胞，导致令人虚弱的渐进性神经退行性疾病。下列说法正确的是（）A．多种永久性的不溶性蛋白之间的差异只与其基本单位氨基酸有关B．脑细胞中所有的永久性的不溶性蛋白都会对脑细胞造成杀伤C．永久性的不溶性蛋白可以与双缩脲试剂反应生成砖红色沉淀D．破坏永久性的不溶性蛋白的空间结构可使其失去生物活性2．线粒体自噬时，内质网膜包裹损伤的线粒体形成自噬体，此时LC3-I蛋白被修饰形成LC3-II蛋白，LC3-II蛋白促使自噬体与溶酶体融合，完成损伤的线粒体降解。研究人员选取周龄一致的大鼠随机分为对照组、中等强度运动组和大强度运动组。训练一段时间后，测量大鼠腓肠肌细胞LC3-I蛋白和LC3-II蛋白的相对含量，结果如下图。下列叙述不正确的是（）A．自噬体与溶酶体融合依赖膜的流动性B．LC3-II/LC3-I的比值随运动强度增大而增大C．运动可以抑制大鼠细胞的线粒体自噬D．溶酶体内的水解酶能分解衰老、损伤的线粒体3．某二倍体动物的一个精原细胞形成精细胞过程中，处于不同分裂时期的细胞示意图如下（部分染色体，无突变发生）。下列分析正确的是（）A．甲为前期I，不会使同源染色体上的非等位基因重组B．乙为中期I，细胞中非同源染色体的组合方式已确定C．丙为后期I，细胞中有2个染色体组和2套遗传信息D．丁为末期I，细胞两极距离变大，核膜凹陷形成环沟4．为了研究线粒体RNA聚合酶的合成，科学家采用溴化乙啶（能专一性抑制线粒体DNA的转录）完成了下表实验。下列相关说法错误的是组别实验处理实验结果实验组用含溴化乙啶的培养基培养链孢霉链孢霉线粒体RNA聚合酶含量过高对照组用不含溴化乙啶的培养基培养链孢霉链孢霉线粒体RNA聚合酶含量正常A．线粒体DNA控制的性状遗传不遵循孟德尔的遗传规律B．RNA聚合酶可与DNA上的特定序列结合，驱动转录过程C．由实验可知，线粒体RNA聚合酶由线粒体DNA控制合成D．由实验可知，线粒体DNA转录的产物对核基因的表达有反馈作用5．某校生物研究性学习小组模拟赫尔希和蔡斯的噬菌体侵染细菌的实验，过程如图所示。下列有关分析错误的是（）A．由于噬菌体不能独立生活，所以标记噬菌体时应先标记噬菌体的宿主细胞——大肠杆菌B．实验1的结果是只有上清液a有放射性，沉淀物b中无放射性C．如果实验2的混合培养时间太长或太短，则沉淀物d的放射性会降低D．该实验能证明DNA是遗传物质，但不能证明DNA是主要的遗传物质6．医学上常从某些动物组织中提取出胶原蛋白作为手术缝合线，手术后这种缝合线可以被人体组织细胞消化、吸收，从而避免拆线的痛苦。下列相关叙述错误的是（）A．可用盐析的方法使胶原蛋白从溶液中沉淀出来B．动物组织细胞中的胶原蛋白是在核糖体上合成的C．手术缝合线经吸收后可在细胞内检测到这种胶原蛋白D．使用的手术缝合线需要避免人体组织产生免疫排斥反应二、综合题：本大题共4小题7．（9分）菌根是真菌与植物根系的联合体。真菌从土壤中吸取养分和水分供给植物，植物为真菌提供糖类等有机物。下表为不同温度下菌根对玉米幼苗光合特性影响的实验结果。组别光合作用速率（μmolCO2·m22·s-1）气孔导度·（mmol·m-2·s-1）叶绿素相对含量25℃有菌根8.86239无菌根6.5623315℃有菌根6.45831无菌根3.842285℃有菌根4.04426无菌根1.41723气孔导度是描述气孔开放程度的量请回答下列问题：（1）本实验的自变量是_______________________________。（2）在光合作用中，CO2还原为糖的一系列反应称为__________循环，CO2进入该循环时首先与____________(写中文名称）结合，CO2进入该循环后形成的第一个糖是____________。（3）15℃条件下，与无菌根玉米相比，有菌根玉米光合作用速率高，据表分析，其原因有①__________________________，促进了光反应；②_________________________，促进了碳反应。（4）实验结果表明：菌根能提高玉米的光合作用速率，在_______________条件下提高比例最大。8．（10分）果蝇的灰身和黑身是一对相对性状，由常染色体上的A/a控制。现让多只灰身果蝇随机交配，F1中灰身：黑身=55：9，无致死现象且雌雄情况相同。回答下列问题：（1）这对性状中___________是显性性状，原因是_______________________。（2）在F1中灰身：黑身不满足分离比3：1，原因是______________________，亲本中a的基因频率为______________________。（3）已知果蝇的另一对相对性状正常腿与短腿由X染色体上的B/b基因控制，已知受精卵中缺少该对等位基因中的某一种基因时会致死。现有正常腿雌果蝇与短腿雄果蝇交配，得到大量的F1代且雌：雄=2：1。根据实验结果，能得出的结论有___________（答出两点即可）。9．（10分）玉米是雌雄同株植物，目前已发现多个单基因雄性不育突变植株，均表现为花药干瘪，不含花粉粒。引起雄性不育的隐性突变基因有a基因（位于1号染色体）、b基因（位于4号染色体）、d基因（基因与染色体的位置关系未知）等，具有一对或一对以上上述隐性基因的植株均表现为雄性不育。请回答：（1）玉米的单基因雄性不育突变植株是指受一___________（填“个”或“对”）隐性突变基因控制的植株。（2）若只考虑A/a和B/b两对基因，则雄性不育植株的基因型有__________种。（3）同学甲为研究A/a与D/d基因的位置关系，利用基因型为aadd的植株作_____（填“父本”或“母本”）与基因型为AADd的正常植株进行交配获得F1，F1正常植株与雄性不育突变植株比例为1∶1，该比例无法确定这两对基因的位置关系，从亲本正常植株（AADd）产生的配子角度分析，原因是_____。（4）同学乙利用同学甲实验的F1植株进一步探究这两对基因的位置关系，思路是_______，观察后代表现型及比例，若后代正常植株∶雄性不育突变植株=______，则说明这两对基因位于2对同源染色体上。10．（10分）干扰素是动物体内的一种蛋白质，可用于治疗病毒的感染和癌症。长期以来，人们利用相关病毒诱导白细胞产生干扰素再从血液中提取，但每升血只能提取0.05μg。1982年，我国科学家通过基因工程等技术开发研制出我国首个基因工程药物——重组人干扰素。回答下列相关问题。（1）相对于从基因组文库中获取干扰素基因，从已病毒免疫的白细胞中提取mRNA，再反转录并构建的cDNA文库中获取的干扰素基因，更易在大肠杆菌中合成正常干扰素。从基因表达的角度分析，其原因是_____。（2）天然的干扰素很难在体外保存，但通过蛋白质工程可得到“可保存的干扰素”。蛋白质工程以_____和_____的关系为基础，通过基因修饰或基因合成，对现有蛋白质进行改造，或制造一种新的蛋白质。（3）在构建该基因表达载体时，需同时用限制酶HindⅢ和BstⅠ处理目的基因和质粒，主要目的是_____。（4）质粒中LacZ基因编码的半乳糖苷酶，能催化生成蓝色物质从而将细菌染成蓝色。在含有四环素的培养基中，未被转化的大肠杆菌的生长现象是_____，含有质粒载体的大肠杆菌的生长现象是_____，含有重组质粒的大肠杆菌的生长现象是_____，从而获得所需重组细胞。（注：若能正常生长需要写出菌落特征）（5）转基因细菌产生的干扰素可能会成为某些人的过敏原，存在潜在风险。有科学家将干扰素基因转入小鼠基因组，获得膀胱生物反应器，最终在尿液中获得干扰素。在该操作中，应使干扰素基因在_____细胞中特异性表达。11．（15分）玉米（2n=20）是我国栽培面积最大的作物，可作为研究遗传规律的实验材料。近年来常用的一种单倍体育种技术使玉米新品种选育更加高效。请回答问题。研究者发现一种玉米突变体（S），用S的花粉给普通玉米授粉，会结出一定比例的单倍体籽粒（胚是单倍体；胚乳与二倍体籽粒胚乳相同，是含有一整套精子染色体的三倍体。图1）（1）根据亲本中某基因的差异，通过PCR扩增以确定单倍体胚的来源，结果见图2。从图2结果可以推测单倍体的胚是由____________发育而来。（2）玉米籽粒颜色由A、a与R、r两对独立遗传的基因控制，A、R同时存在时籽粒为紫色，缺少A或R时籽粒为白色。紫粒玉米与白粒玉米杂交，结出的籽粒中紫：白=3：5，出现性状分离的原因是_________。推测白粒亲本的基因型是____________和____________。（3）将玉米籽粒颜色作为标记性状，用于筛选S与普通玉米杂交后代中的单倍体，过程如下图：请根据F1籽粒颜色区分单倍体和二倍体籽粒，并写出与表型相应的基因型。单倍体籽粒胚的表现型为____________色，基因型为________；二倍体籽粒胚的表现型为_______色，基因型为____________；二者籽粒胚乳的表现型为____________色，基因型为____________。

参考答案一、选择题：（共6小题，每小题6分，共36分。每小题只有一个选项符合题目要求）1、D【解析】

蛋白质结构具有多样性的原因：由于组成蛋白质的氨基酸的种类、数目和排列顺序的不同以及空间结构的差异导致蛋白质结构的多样性。在高温、过酸或者过碱的条件下易导致蛋白质空间结构的改变而使其失活变性。蛋白质遇到双缩脲试剂发生络合反应，生成紫色络合物。【详解】A、多种永久性的不溶性蛋白之间的差异与其基本单位氨基酸的种类、数量、排列顺序不同以及肽链的空间结构不同有关，A错误；B、蛋白质的功能具有多样性，据题干分析，只有大脑细胞中的永久性的不溶性蛋白缠结物能够杀死细胞，不是所有的永久性的不溶性蛋白都会对脑细胞造成杀伤，B错误；C、永久性的不溶性蛋白与双缩脲试剂反应呈紫色，C错误；D、破坏蛋白质的空间结构都会使其失去生物活性，也就是变性，D正确。故选D。2、C【解析】

分析题图可知：LC3-II蛋白促使自噬体与溶酶体融合，完成损伤的线粒体降解，实验数据显示随运动强度增大，LC3-II的含量增加，据此分析作答。【详解】A、自噬体可以与溶酶体融合，这依赖于膜的流动性，A正确；BC、据图可知，随运动强度加大，LC3-II/LC3-I的比值变大，因“LC3-II蛋白促使自噬体与溶酶体融合，完成损伤的线粒体降解”，故运动可以促进细胞的线粒体自噬，B正确、C错误，D、溶酶体内含有水解酶，可以分解衰老、损伤的线粒体，也可消灭侵入机体的病菌，D正确。故选C。解答本题的关键是明确题目中两种蛋白的功能，并能结合实验结果分析作答。3、B【解析】

减数分裂过程。减数第一次分裂间期：染色体复制染色体复制减数第一次分裂：前期。联会，同源染色体的非姐妹染色单体交叉互换；中期，同源染色体成对的排列在赤道板上；后期，同源染色体分离非同源染色体自由组合；末期，细胞质分裂。核膜，核仁重建纺锤体和染色体消失。减数第二次分裂：前期，核膜，核仁消失，出现纺锤体和染色体；中期，染色体形态固定，数目清晰；后期，着丝点分裂，姐妹染色单体分开成为染色体病均匀的移向两级；末期，核膜核仁重建，纺锤体和染色体消失。【详解】A、甲为前期I，会因为同源染色体的非姐妹染色单体之间进行交叉互换而发生同源染色体上的非等位基因重组，A错误；B、乙为中期I，各对同源染色体排列在细胞中央的赤道面上，每两个未分开的同源染色体的着丝粒分别与从细胞相对的两极发出的纺锤丝相连，此时细胞中非同源染色体的组合方式已确定，B正确；C、丙为后期I，细胞中有2个染色体组和4套遗传信息，C错误；D、丁为末期I，细胞两极距离变大，细胞膜凹陷形成环沟，D错误。故选B。4、C【解析】

分析表格：实验组和对照组的单一变量为是否加入溴化乙啶（专一性阻断线粒体DNA的转录过程），结果加入溴化乙啶的实验组中，链孢霉线粒体内的RNA聚合酶含量过高，而没有加入溴化乙啶的对照组中，链孢霉线粒体内的RNA聚合酶含量正常，说明线粒体内RNA聚合酶是由核基因控制合成的，且线粒体基因表达的产物可能对细胞核基因的表达有反馈抑制作用。据此答题。【详解】A、线粒体基因控制的性状遗传不遵循孟德尔遗传规律，孟德尔遗传定律只适用于进行有性生殖的真核生物的细胞核基因的遗传，A正确；B、RNA聚合酶可与DNA上的特定序列结合，即基因上游的启动子结合，驱动转录过程，B正确；C、实验组培养基中加入了溴化乙啶，线粒体DNA的转录被阻断，而链孢霉线粒体内的RNA聚合酶含量过高，说明线粒体内RNA聚合酶由核基因控制合成，C错误；D、用不含溴化乙啶的培养基培养链孢霉，链孢霉线粒体内的RNA聚合酶含量正常，说明线粒体基因表达的产物可能对细胞核基因的表达有反馈抑制作用，D正确。故选C。5、B【解析】

根据题意和图示分析可知：图示为噬菌体侵染大肠杆菌的部分实验：用35S标记噬菌体→噬菌体与大肠杆菌混合培养→噬菌体侵染未被标记的细菌→在搅拌器中搅拌（目的是将蛋白质外壳和细菌分开），然后离心，检测上清液和沉淀物中的放射性物质，上清液a中放射性较强，沉淀物b中含有少量的放射性。用32P标记噬菌体→噬菌体与大肠杆菌混合培养→噬菌体侵染未被标记的细菌→在搅拌器中搅拌（目的是将蛋白质外壳和细菌分开），然后离心，检测上清液和沉淀物中的放射性物质，上清液c中放射性较低，沉淀物d中放射性较高。该实验证明了噬菌体的遗传物质是DNA。【详解】A、噬菌体属于细菌病毒，不能独立生活，所以标记噬菌体时需要先标记噬菌体的宿主细胞，即大肠杆菌，A正确；B、由于35S标记的是噬菌体的蛋白质外壳，故实验1的结果是放射性主要存在于上清液中，沉淀物中也会有少量放射性，B错误；C、实验2中的噬菌体被标记的是DNA，如果混合培养时间太短，则一些被标记的DNA没有侵入细菌，如果保温时间太长，则一些子代含放射性的噬菌体因大肠杆菌裂解而释放出来，都会导致沉淀物d的放射性降低，C正确；D、本实验证明了DNA是遗传物质，但不能证明DNA是主要的遗传物质，D正确。故选B。本题结合噬菌体侵染大肠杆菌的部分实验过程图，考查噬菌体侵染细菌的实验，要求考生识记噬菌体侵染细菌的过程，明确噬菌体侵染细菌时只有DNA注入细菌中。6、C【解析】

胶原蛋白作手术缝合线，利用了蛋白质可以被人体组织水解的特点，蛋白质被蛋白酶水解后得到氨基酸，氨基酸被细胞吸收，使这种手术缝合线具有免拆线的优点。【详解】A、蛋白质溶液中加入盐溶液后能使蛋白质的溶解度降低，从而使蛋白质从溶液中析出，即盐析法使胶原蛋白从溶液中沉淀出来，A正确；B、胶原蛋白为蛋白质，合成场所为核糖体，B正确；C、手术缝合线经水解被人体吸收后，以氨基酸的形式进入人体细胞，故在细胞内检测不到胶原蛋白，C错误；D、使用的手术缝合线为胶原蛋白，可能作为抗原引发人体的免疫反应，故需要使用与人体胶原蛋白空间结构相同或相似的胶原蛋白手术缝合线以避免产生免疫排斥反应，D正确；故选C。二、综合题：本大题共4小题7、有无菌根和温度卡尔文核酮糖二磷酸三碳糖叶绿素相对含量高气孔导度大，有利于CO2的吸收5℃（或低温）【解析】

1.影响光合作用的环境因素有：光照强度、温度、二氧化碳浓度等，其中光照强度主要影响光反应，二氧化碳浓度主要影响暗反应；影响光合作用的内在因素有：色素的含量、酶的数量、五碳化合物的含量等。2.分析表格可知，在不同温度条件下，有菌根玉米的光合速率均高于无菌根玉米，并且温度越低，提高比例越大；在相同温度条件下，有菌根玉米的气孔导度、叶绿素含量均高于无菌根玉米，而细胞间CO2浓度低。【详解】（1）根据题意和分析表格可知，该实验探究了不同温度下菌根对玉米幼苗光合特性的影响，因此实验的自变量为温度的不同和有无菌根处理。（2）CO2还原为糖的一系列反应称为卡尔文循环。CO2进入该循环首先与RuBP（核酮糖二磷酸）形成三碳糖，故CO2进入该循环时首先形成的糖是三碳糖。（3）表格中看出，15℃条件下，与无菌根玉米相比，有菌根玉米的气孔导度和叶绿素含量均高；叶绿素有利于光反应中吸收光能；气孔导度大，二氧化碳供给充分，暗反应充分，因此有菌根玉米的光合作用速率高。（4）表格中看出，菌根能提高玉米的光合作用速率，在5℃（或低温）条件下提高比例最大。本题考查光合作用的过程和影响因素的知识点，要求学生掌握光合作用的过程，特别是掌握暗反应的过程及其物质变化，理解影响光合作用的因素。能够正确分析表格中的数据，通过实验结果判断温度和菌根对植物光合速率的影响情况，这是突破该题的关键。8、灰身亲本全是灰身，F1性状分离出现了黑身亲本灰身果蝇中存在纯合体（AA）3/8（或1．5%）①果蝇的正常腿为显性性状，短腿为隐性性状；②亲本雌果蝇为显性性状，雄果蝇为隐性性状；③该果蝇种群的正常腿只出现在雌果蝇中，雄果蝇没有正常腿；④缺乏b基因使受精卵致死；⑤F1果蝇中正常腿：短腿=1：2（F1果蝇中正常腿雌果蝇：短腿雌果蝇：短腿雄果蝇=1：1：1）；⑥正常腿果蝇之间无法进行基因交流；⑦正常腿果蝇只有杂合体，没有纯合体【解析】

要区分一对相对性状的显、隐性关系，可以让生物杂交，有两种情况可以作出判断，若是两个相同性状的生物个体杂交后代中有另一个新的相对性状出现，则亲本的性状为显性性状；若是不同性状的生物个体杂交，后代中只出现一种性状，则此性状为显性性状。根据后代隐性个体（aa）的比例可以判断亲本配子中a的比例，进一步计算亲本a的基因频率。【详解】（1）让多只灰身果蝇随机交配，F1中灰身：黑身＝55：9，出现了不同于亲本的性状黑身，证明灰身为显性性状；（2）在F1中灰身：黑身不满足分离比3：1，无致死现象且雌雄情况相同，则考虑亲本是否基因型相同，根据“多只灰身果蝇随机交配”可推测分离比异常的原因是亲本灰身果蝇中存在纯合体，假设导致黑身的基因为a，根据F1中黑身（aa）的比例为，可推测亲本产生的配子比例为A：a＝5：3，即亲本中a的基因频率为1.5%；（3）根据F1代雌：雄=2：1，根据其比例可知雄性个体部分死亡，则推测果蝇的正常腿为显性性状，短腿为隐性性状，亲本为正常腿雌果蝇（XBXb）与短腿雄果蝇（XbY），后代个体为正常腿雌果蝇（XBXb）、短腿雌果蝇（XbXb）、短腿雄果蝇（XbY）、正常腿雄果蝇（XBY、因缺乏Xb致死），所以才会出现F1代且雌：雄=2：1，由于缺乏Xb致死，故果蝇的正常腿只有XBXb这一基因型。本题考查基因分离定律的相关应用，考生应熟练掌握不同基因型个体的比例计算。对于后代中出现致死现象导致的比例异常现象的分析，可以用假设法判断性状显隐性，再结合异常比例分析做题。9、对5母本管Aa和Dd基因在不在一对同源染色体上，当其和aadd杂交子代AaDd（正常植株）和Aadd（雄性不育突变）的比例都是1∶1选择F1野生型植株（AaDd）自交，观察子代表现型及比例9∶7【解析】

根据题干中“引起雄性不育的隐性突变基因有a基因（位于1号染色体）、b基因（位于4号染色体）、d基因（基因与染色体的位置关系未知）等，具有一对或一对以上上述隐性基因的植株均表现为雄性不育”，只有A_B_D_才表现为雄性可育，且其中Aa、Bb遵循基因自由组合定律。【详解】（1）根据题干中“有一对或一对以上上述隐性基因的植株均表现为雄性不育”，所以玉米的单基因雄性不育突变植株是指受一对隐性突变基因控制的植株。（2）根据题干中“有一对或一对以上上述隐性基因的植株均表现为雄性不育”，所以A/a和B/b组成的基因型中A_bb、aaB_和aabb表现为雄性不育，基因型有5种。（3）aadd的个体雄性不育，所以只能作母本；当其与AADd杂交，aadd只能产生ad的配子，不管Aa和Dd基因在不在一对同源染色体上，只能产生AD和Ad的配子，配子之间随机结合生成AaDd（正常植株）和Aadd（雄性不育突变）的比例都是1∶1，所以无法确定这两对基因的位置关系。（4）为了确定Aa和Dd两对等位基因的关系，可以选择F1野生型植株（AaDd）自交，观察子代表现型及比例，如果子代A_D_∶aaD_∶A_dd∶aadd=9∶3∶3∶1，即正常植株∶雄性不育突变植株=9∶7，说明这两对基因位于2对同源染色体上。本题的关键是判断两对基因是否在一对同源染色体上，考生需要根据自由组合定律的实质设计合理的实验进行分析，10、从基因组文库中获得的干扰素基因有内含子，在大肠杆菌中干扰素基因的转录产物中与内含子对应的RNA序列不能被切除，无法表达出干扰素蛋白质分子的结构规律生物功能防止目的基因和载体任意连接（或自身环化或反向连接）无法生长正常生长，菌落呈蓝色正常生长，菌落呈白色（或无色）膀胱上皮【解析】

基因工程技术的基本步骤：（1）目的基因的获取：方法有从基因文库中获取、利用PCR技术扩增和人工合成。（2）基因表达载体的构建：是基因工程的核心步骤，基因表达载体包括目的基因、启动子、终止子和标记基因等。（3）将目的基因导入受体细胞：根据受体细胞不同，导入的方法也不一样。将目的基因导入植物细胞的方法有农杆菌转化法、基因枪法和花粉管通道法；将目的基因导入动物细胞最有效的方法是显微注射法；将目的基因导入微生物细胞的方法是感受态细胞法。（4）目的基因的检测与鉴定：分子水平上的检测：①检测转基因生物染色体的DNA是否插入目的基因——DNA分子杂交技术；②检测目的基因是否转录出了mRNA——分子杂交技术；③检测目的基因是否翻译成蛋白质﹣﹣抗原﹣抗体杂交技术。个体水平上的鉴定：抗虫鉴定、抗病鉴定、活性鉴定等。【详解】（1）从基因组文库中获得的干扰素基因有内含子，在大肠杆菌中干扰素基因的转录产物中与内含子对应的RNA序列不能被切除，无法表达出干扰素。因此相对于从基因组文库中获取干扰素基因，从已病毒免疫的白细胞中提取mRNA，再反转录并构建的cDNA文库中获取的干扰素基因，更易在大肠杆菌中合成正常干扰素。（2）蛋白质工程以蛋白质分子的结构规律和生物功能的关系为基础，通过基因修饰或基因合成，对现有蛋白质进行改造，或制造一种新的蛋白质。（3）在构建该基因表达载体时，需同时用限制酶HindⅢ和BstⅠ处理目的基因和质粒，主要目的是防止目的基因和载体任意连接（或自身环化或反向连接）。（4）用限制酶H