陕西省咸阳市旬邑县2022-2023年高二下学期期中质量检测生物试题（含答案）

陕西省咸阳市旬邑县2022-2023年高二下学期期中质量检测生物试题姓名：__________班级：__________考号：__________题号一二总分评分一、单选题1．以下事实与基因工程的诞生无关的是（）①肺炎链球菌的转化实验②中心法则的确立③克隆羊“多利”的诞生④精子获能机理的揭示⑤遗传密码的破译⑥质粒、限制酶、连接酶及逆转录酶的发现⑦DNA合成仪的问世⑧体外重组DNA分子构建的成功⑨重组DNA进入受体细胞并成功表达A．①⑥ B．③⑥ C．③④ D．④⑤2．下列关于基因工程的叙述中，不正确的是（）A．一种限制酶一般只能识别一种特定的核苷酸序列B．基因工程依据的原理主要是基因突变C．基因工程是在DNA上进行的分子水平的设计施工D．基因工程能够定向地改变生物的性状3．下图是一段DNA片段的示意图，下列有关酶作用不正确的是（）A．限制性核酸内切酶可切断a处 B．DNA连接酶可连接a处C．解旋酶可使b处断裂 D．DNA聚合酶可连接b处4．下列关于酶的说法，正确的是()A．限制酶广泛存在于各种生物中，其化学本质是蛋白质B．一种限制酶只能识别一种特定的核苷酸序列C．不同的限制酶切割DNA后都会形成黏性末端D．DNA连接酶可将单个核苷酸加到某个DNA片段的末端，形成磷酸二酯键5．关于下列黏性末端的描述，正确的是（）A．限制性核酸内切酶切割DNA形成④时需要脱去2个水分子B．DNA连接酶与DNA聚合酶均能作用于上述黏性末端C．①和④的黏性末端不同，一定是由不同的限制性核酸内切酶切出D．①与③的黏性末端相同，一定是由相同的限制性核酸内切酶切出6．下图表示基因工程中获取水稻某目的基因的不同方法。下列相关叙述中正确的是（）

A．这三种方法都用到酶，都是在体外进行B．①②③碱基对的排列顺序均相同C．图示a、b、c三种方法均属人工合成法D．方法a不遵循中心法则7．某目的基因两侧的DNA序列所含的限制酶酶切位点如图所示，下列可作该目的基因最佳载体的是（）A．B．C．D．8．下图表示基因工程中目的基因的获取示意图，不正确的是（）A．③表示PCR技术，用来扩增目的基因B．从基因文库中要得到所需的目的基因可以根据目的基因的相关信息来获取C．若获取的目的基因相同，则图中基因组文库小于cDNA文库D．若基因比较小，核苷酸序列又已知，则可以直接通过人工合成的方法获取9．在基因工程中，把选出的目的基因（共1000个脱氧核苷酸对，其中腺嘌呤脱氧核苷酸460个），放入DNA扩增仪中扩增4代，那么，在扩增仪中应放入胞嘧啶脱氧核苷酸的个数是()A．540个 B．7560个 C．8100个 D．17280个10．下列有关抗虫基因表达载体的叙述，正确的是（）A．切割含抗虫基因的DNA片段和载体必须用同一种限制酶B．抗虫基因表达载体中要有启动子和终止密码子C．抗虫基因表达载体必须具备标记基因，其作用是筛选含有目的基因的受体细胞D．抗虫基因的表达启动于复制原点11．下图为基因表达载体的模式图，下列有关基因工程中载体的说法，错误的是（）A．基因表达载体的构建是在生物体外完成的B．任何基因表达载体的构建都是一样的，没有差别C．图中启动子位于基因的首端，是RNA聚合酶识别和结合的部位D．抗生素抗性基因的作用是作为标记基因，用于鉴别受体细胞中是否导入了目的基因12．基因工程中因受体细胞不同，目的基因导入的方法也不同，下列叙述不正确的是（）A．将目的基因导入棉花细胞内常用花粉管通道法B．将目的基因导入老鼠细胞内常用显微注射法C．将目的基因导入大肠杆菌内常用感受态细胞转化法D．将目的基因导入小麦细胞内常用农杆菌转化法13．下列关于目的基因导入微生物细胞的叙述中，不正确的是（）A．常用原核生物作为受体细胞，是因为原核生物繁殖快，且多为单细胞，遗传物质相对较少等B．受体细胞所处的一种能吸收周围环境中DNA分子的生理状态称为感受态C．感受态细胞吸收DNA分子需要适宜的温度和酸碱度D．常用生理盐水处理细胞，使其处于感受态14．某研究小组为了研制预防禽流感病毒的疫苗，开展了前期研究工作。其简要的操作流程如下图。下列有关叙述错误的是（）A．步骤①所代表的过程是反转录B．步骤②需使用限制性核酸内切酶和DNA连接酶C．步骤③可用CaCl2处理大肠杆菌，使其从感受态恢复到常态D．检验Q蛋白的免疫反应特性，可用Q蛋白与患禽流感康复的鸡的血清进行抗原一抗体特异性反应实验15．下列获取目的基因的方法中需要模板链的是（）①从基因文库中获取目的基因②利用PCR技术扩增目的基因③反转录法④通过DNA合成仪利用化学方法人工合成A．①②③④ B．①②③ C．①②④ D．②③16．在检测抗虫棉培育是否成功的方法中，不属于分子水平检测的是（）A．观察害虫吃棉叶后是否死亡B．检测目的基因片段与DNA探针能否形成杂交带C．检测目的基因转录形成的mRNA与DNA探针能否形成杂交带D．检测目的基因表达产物能否与特定抗体形成杂交带17．利用外源基因在受体细胞中表达，可生产人类所需要的产品。下列各项中能说明目的基因完成了在受体细胞中表达的是()A．棉花二倍体细胞中检测到细菌的抗虫基因B．大肠杆菌中检测到人胰岛素基因及其mRNAC．山羊乳腺细胞中检测到人生长激素DNA序列D．酵母菌细胞中提取到人干扰素蛋白18．下列有关基因工程的叙述，正确的是（）A．基因工程所用的工具酶是限制酶、DNA聚合酶B．所有的限制酶都只能识别同一种特定的核苷酸序列C．选用细菌作为重组质粒的受体细胞是因为细菌繁殖快D．只要目的基因进入了受体细胞就能成功地实现表达19．运用现代生物技术的育种方法，将抗菜青虫的Bt基因转移到优质油菜中，培育出转基因抗虫的油菜品种，这一品种在生长过程中能产生特异的杀虫蛋白质，对菜青虫有显著抗性，能大大减轻菜青虫对油菜的危害，提高油菜产量，减少农药使用，据以上信息，下列叙述正确的是（）A．Bt基因的化学成分是蛋白质B．Bt基因中有菜青虫的遗传物质C．转基因抗虫油菜能产生杀虫蛋白是由于具有Bt基因D．转基因抗虫油菜产生的杀虫蛋白是无机物20．下列不属于利用基因工程技术制取的药物是（）A．从大肠杆菌体内制取白细胞介素B．在酵母菌体内获得的干扰素C．在青霉菌体内提取青霉素D．在肠杆菌体内获得胰岛素21．基因治疗是人类疾病治疗的一种崭新手段，下列有关叙述中不正确的是（）A．基因治疗可使人类遗传病得到根治B．基因治疗是一种利用基因工程产品治疗人类疾病的方法C．基因治疗是指将健康基因导入有基因缺陷的细胞中D．基因治疗的靶细胞可以是体细胞和生殖细胞22．下列关于蛋白质工程的说法，正确的是（）A．蛋白质工程是在分子水平上对蛋白质分子直接进行操作B．蛋白质工程能生产出自然界中不存在的新型蛋白质分子C．对蛋白质的改造是通过直接改造相应mRNA来实现的D．蛋白质工程的流程和天然蛋白质合成的过程是相同的23．基因工程与蛋白质工程的区别是（）A．基因工程需对基因进行分子水平操作，蛋白质工程不对基因进行操作B．基因工程合成的是天然存在的蛋白质，蛋白质工程合成的可以是天然不存在的蛋白质C．基因工程是分子水平操作，蛋白质工程是细胞水平（或性状水平）操作D．基因工程完全不同于蛋白质工程24．蛋白质工程中，直接进行操作改造的是（）A．氨基酸结构 B．蛋白质的空间结构C．肽链结构 D．基因结构25．下图为将胡萝卜的离体组织在一定条件下培育形成试管苗的过程示意图。有关叙述正确的是（）A．利用此过程获得的试管苗可能为杂合子B．①②过程中都会发生细胞的增殖和分化C．多倍体植株的培育需经过如图所示过程D．此过程依据的生物学原理是细胞膜具有流动性26．下列有关细胞全能性的叙述，正确的是（）A．植物体只有体细胞才具有发育成完整个体所必需的全套基因B．高度分化的植物细胞只有处于离体状态时才有可能表现出全能性C．植物体内某些体细胞没有表现出全能性，其原因是所含基因不同D．紫色糯性玉米种子培育成植株，这反映植物种子具有全能性27．下图表示基因型为AaBb的水稻的花药通过无菌操作，接入试管后，在一定条件下形成试管苗的培育过程。下列相关叙述错误的是（）A．愈伤组织是花粉细胞通过有丝分裂后形成的不规则的细胞团B．在愈伤组织的形成过程中，必须从培养基中获得水、无机盐和小分子的有机物等营养物质C．为促进花粉细胞分裂生长，在培养基中应加入适宜浓度的生长素等激素D．试管苗可能出现的基因型有AABB或AAbb或aaBB或aabb28．下图是两种二倍体植物细胞(甲、乙)融合并培育新植株的过程，下列有关分析正确的是（）。A．过程①需要将植物组织置于含有纤维素酶和果胶酶的溶液中，且溶液中的渗透压应大于细胞液渗透压B．过程②要用聚乙二醇等方法诱导原生质体融合，主要依据细胞膜具有选择透过性原理C．过程④⑤⑥需要根据生长发育进程更换不同的培养基D．最终得到的植株相对于甲、乙而言发生了染色体数量变异，不具有可育性29．如图所示为白菜—甘蓝的培育流程，下列叙述错误的是()。

A．过程①用到的酶是纤维素酶和果胶酶B．过程②常用的化学试剂是聚乙二醇C．过程④细胞的全能性提高D．过程⑤细胞的全能性降低，最终失去全能性30．用植物组织培养技术，可以培养或生产出（）A．食品添加剂 B．无病毒植物 C．人工种子 D．前三项都是31．下列四个选项中没有采取植物组织培养技术的是A．花药离体培养得到单倍体植株B．秋水仙素处理幼苗获得多倍体植株C．人工种子的培育D．“番茄—马铃薯”杂种植株的培育过程32．马铃薯利用其块茎进行无性繁殖，种植的世代多了以后往往会因感染病毒而减产，为此农户都希望得到无病毒的幼苗进行种植。获得无病毒幼苗的最佳方法是（）A．选择优良品种进行杂交 B．进行远缘植物体细胞杂交C．利用芽尖进行组织培养 D．人工诱导基因突变33．动物细胞工程技术的基础是（）A．动物细胞融合 B．单克隆抗体C．胚胎移植 D．动物细胞培养34．用于动物细胞培养的细胞大都取自胚胎或出生不久的幼龄动物的器官或组织，其主要原因是这样的组织或细胞（）A．容易产生各种变异 B．具有更高的全能性C．取材十分方便 D．分裂增殖的能力强35．下列属于动物细胞培养与植物组织培养主要区别的是（）A．培养基成分不同B．动物细胞培养不需要在无菌条件下进行C．动物细胞可以传代培养，而植物细胞不能D．动物细胞能够大量培养，而植物细胞只能培养成植株36．动物细胞培养的特点（）①细胞贴壁②有丝分裂③细胞分化④接触抑制⑤减数分裂⑥原代培养一般传1-10代A．①②④⑥ B．②③④⑤ C．①③④⑥ D．③④⑤⑥37．在动物细胞培养的有关叙述中，正确（）A．动物细胞培养的目的就是为了获得大量的细胞分泌蛋白B．动物细胞培养前要用胰蛋白酶处理使细胞分散C．细胞遗传物质的改变发生于原代培养过程中D．培养至50代后继续传代的细胞是细胞株38．一般来说，动物细胞体外培养需要满足以下条件（）①无毒的环境②无菌的环境③合成培养基需加血清④温度与动物体温相近⑤一定需要O2，不需要CO2⑥CO2能调节培养液pHA．①②③④⑤⑥ B．①②③④C．①③④⑤⑥ D．①②③④⑥39．下列哪项不属于体细胞核移植技术的应用（）A．加速家畜遗传改良进程，促进优良畜群繁育B．保护濒危物种C．获得组织器官异体移植的供体D．大量生产紫杉醇40．科学家将雌黑鼠乳腺细胞的细胞核移入白鼠去核的卵细胞内，待发育成早期胚胎后移植入褐鼠的子宫，该褐鼠产下小鼠的体色和性别是（）A．黑、雌 B．褐、雌 C．白、雄 D．黑、雄二、综合题41．苏云金杆菌（Bt）能产生具有杀虫能力的毒素蛋白。图1是转Bt毒素蛋白基因植物的重组DNA形成过程示意图；图2是毒素蛋白基因进入植物细胞后发生的两种生物大分子合成的过程，据图回答抗虫棉花植物的相关问题。（1）将图1①的DNA用HindⅢ、BamHⅠ完全酶切后，反应管中有种DNA片段。过程②两片段通过键相连。（2）假设图1中质粒原来BamHⅠ识别位点的碱基序列变为了另一种限制酶BclⅠ的碱基序列，现用BclⅠ和HindⅢ切割质粒，则该图1中①的DNA右侧还能选择BamHⅠ进行切割，（选填“能”或“不能”）获得所需重组质粒，理由是。（3）“转基因抗虫棉”具有抗害虫的能力，这种变异属于。这个事实说明，害虫和植物共用一套。（4）假设抗虫基因含有12000个碱基对，则该基因控制合成的蛋白质共有个氨基酸（不考虑终止密码）。（5）“转基因抗虫棉”抗害虫的遗传信息传递过程可表示为（用文字和箭头形式表示）。（6）该项科技成果在环境保护上的作用是。42．下图是获得转基因抗虫棉的技术流程示意图。请回答：（1）A→B利用的技术称为，其中②过程需要热稳定的酶才能完成。（2）图中将目的基因导入棉花细胞需要经过③过程，该过程为构建，其目的是使目的基因在受体细胞中稳定存在且可以遗传给下一代，并能表达。（3）上述流程示意图中，将目的基因导入棉花细胞所采用的方法是法，该方法一般（填“适宜”或“不适宜”）用于将目的基因导入单子叶植物。（4）欲确定抗虫基因在G体内是否表达，在个体水平上需要做实验。如果抗虫基因导入成功，且与某条染色体的DNA整合起来，该转基因抗虫棉可视为杂合子，将该转基因抗虫棉自交一代，预计后代中抗虫植株占。43．据图回答下列问题：（1）过程①②是用处理细胞的细胞壁，后经③过程诱导原生质体融合，实际融合的过程中原生质体可能会形成种融合细胞(只考虑两个细胞融合的情况)。④是的过程，与此过程密切相关的细胞器是。（2）在⑤过程培养中，除了提供水分、无机盐、糖类、维生素以及氨基酸外，还需要在培养基中加入。同时，在培养过程中，除必要的温度、光照和氧气等外界条件外，成功的另一个关键是操作过程中必须保证。（3）若番茄细胞内含A条染色体，马铃薯细胞内含B条染色体，将番茄和马铃薯采用杂交育种方法培育(假设能成功)，得到的后代应含条染色体，还必须用来处理幼苗，才能得到可育的番茄-马铃薯植株，此时体细胞中含有条染色体。（4）若番茄是二倍体，马铃薯是四倍体，则(3)中可育杂种植株为倍体。44．下图是动物细胞培养的基本过程示意图。（1）容器A中放置的是动物器官或组织。它一般取自。（2）容器A中的动物器官或组织首先要用剪刀剪碎，然后用酶处理，这是为了使细胞分散开来。这样做的目的是。（3）培养首先在B瓶中进行。瓶中的培养基成分除了有葡萄糖、氨基酸、促生长因子、无机盐、微量元素等，通常还需要加入。在此瓶中培养一段时间后，有许多细胞衰老死亡，到这时的培养称为。（4）在动物细胞培养的过程中，当贴壁细胞分裂生长到细胞表面相互接触时，细胞会停止分裂增殖，这种现象称为细胞的。此时，瓶壁上形成的细胞层数是。（5）为了把B瓶中的细胞分装到C瓶中，用酶处理，然后配置成，再分装。随着细胞传代次数的增多，绝大部分细胞分裂停止，进而出现的现象；但极少数细胞可以连续增殖，其中有些细胞会因遗传物质发生改变而变成细胞，该种细胞的黏着性，细胞膜表面蛋白质（糖蛋白）的量。（6）动物细胞培养过程中还需要O2和CO2气体，O2是细胞代谢所必须的，CO2的主要作用是。45．青蒿素是最有效的抗疟疾药物，但野生黄花蒿青蒿素产量低，为缓解青蒿素供应不足的状况，科学家将tms基因和tmr基因导入黄花蒿的愈伤组织从而获得了黄花蒿的冠瘿组织，改造过程用到的部分结构如下图。（1）科学家将目的基因导入黄花蒿愈伤组织细胞的常用方法是。（2）图中Ti质粒的基本单位是，结构P、T是基因成功转录的保证，其中结构P的作用是为了鉴别受体细胞中是否含有目的基因，并将含有目的基因的细胞筛选出来，图中还缺少的结构是。（3）在获得转基因的冠瘿组织过程中，核心步骤是，在具体操作中常常使用两种能产生不同黏性末端的限制酶对目的基因和运载体的两端分别进行切割，这样做的好处是。（4）要检测目的基因是否插入到冠瘿组织细胞的染色体DNA上，可采用技术。与愈伤组织相比，冠瘿组织的生长速度更快，原因可能是46．看图回答（1）PCR技术的中文名称为。PCR过程中加热使DNA双链打开，这一步是打开氢键，在细胞中此过程是在酶的作用下进行的。（2）当温度降低时，引物与模板结合，加热至74℃，在酶的作用下，引物沿模板延伸，最终合成2个DNA分子，此过程中的原料是，遵循的原则是。（3）PCR技术的前提是。PCR技术使DNA分子大量复制，若将一个用15N标记的DNA分子放入试管中，以14N标记的脱氧核苷酸为原料，连续复制4次之后，则15N标记的DNA分子占全部DNA分子的比例为。在基因工程中，把选出的目的基因（共2000个脱氧核苷酸对，其中腺嘌呤脱氧核苷酸是860个）放入DNA扩增仪中扩增4代，那么，在扩增仪中应放入胞嘧啶脱氧核苷酸的个数是，其中在第四代利用的胞嘧啶脱氧核苷酸的个数是。

答案解析部分1．【答案】C【解析】【解答】①肺炎链球菌的转化实验证实了不同生物的DNA分子能重新组合；②中心法则说明了遗传信息的传递过程；③多利羊的诞生证实了细胞核移植技术能够得以实现，与基因工程无关；④精子获能机理的揭示为体外受精提供了依据，与基因工程无关；⑥质粒、限制酶是基因工程的工具；⑦DNA合成仪的问世可以实现人工合成目的基因；⑧体外重组DNA分子构建属于基因工程中构建基因表达载体；⑨重组DNA进入受体细胞并能成功表达，这也是基因工程的目标。综上所述，③④与基因工程诞生无关，故A、B、D不符合题意，C符合题意。故答案为：C。【分析】基因工程是指按照人们的愿望，进行严格的设计，并通过体外DNA重组和转基因等技术，赋予生物以新的遗传特性，从而创造出更符合人们需要的新的生物类型和生物产品。由于基因工程是在DNA分子水平上进行设计和施工的，因此又叫做DNA重组技术。2．【答案】B【解析】【解答】A、限制酶具有专一性，一种限制酶只能识别一种特定的核苷酸序列，并在特定的位点剪切DNA分子，A正确；B、基因工程的原理是基因重组，B错误；C、基因工程是将一种生物的基因与另一种生物的DNA分子组合在一起，这属于分子水平的设计施工，C正确；D、基因工程是按照人的意愿改造生物的性状，属于定向改变生物的性状，D正确。故答案为：B。【分析】基因工程是指按照人们的愿望，进行严格的设计，并通过体外DNA重组和转基因等技术，赋予生物以新的遗传特性，从而创造出更符合人们需要的新的生物类型和生物产品。由于基因工程是在DNA分子水平上进行设计和施工的，因此又叫做DNA重组技术。3．【答案】D【解析】【解答】A、限制性核酸内切酶作用于磷酸二酯键，可切断a处，A正确；B、DNA连接酶作用于磷酸二酯键，可连接a处，B正确；C、解旋酶作用于氢键，可使b处断裂，C正确；D、DNA聚合酶作用于磷酸二酯键，可以连接a处，D错误。故答案为：D。【分析】1、DNA聚合酶主要作用是通过形成单个脱氧核糖核苷酸之间的磷酸二酯键来形成DNA分子。

2、解旋酶主要作用是使DNA分子中碱基对的氢键断裂，使DNA两条链解开。

3、基因工程中DNA连接酶主要作用就是把两条DNA末端的缝隙“缝合”起来。

4、DNA聚合酶主要作用是通过形成单个脱氧核糖核苷酸之间的磷酸二酯键来形成DNA分子。4．【答案】B【解析】【解答】限制酶主要存在于微生物中，其化学本质是蛋白质，A项错误；一种限制酶只能识别一种特定的核苷酸序列，并且使每一条链中特定部位的两个核苷酸之间的磷酸二酯键断裂，B项正确；有的限制酶切割DNA后会形成黏性末端，有的限制酶切割DNA后会形成平末端，C项错误；DNA连接酶可将双连DNA片段“缝合”起来，恢复被限制酶切开的两个核苷酸之间的磷酸二酯键，D项错误。【分析】1.正确选择限制酶的要点：（1）载体和目的基因都有识别位点和形成相同黏性末端；（2）不能切坏标记基因与目的基因；（3）载体的识别位点应位于启动子和终止子之间。

2.只用一种限制酶切割质粒和目的基因会存在两个缺点：（1）目的基因自己环化；（2）目的基因与质粒反向连接，使基因不能正常表达。5．【答案】C【解析】【解答】A、限制性核酸内切酶切割DNA形成④时会使2个磷酸二酯键断裂，需要消耗2个水分子，A错误；B、DNA连接酶能作用于上述黏性末端，但是DNA聚合酶不能作用于上述黏性末端，B错误；

C、同一种限制酶剪切产生的黏性末端肯定是相同的，所以①和④的黏性末端不同，一定是由不同的限制性核酸内切酶切出，C正确；

D、①与③的黏性末端相同，也可能是由不同的限制性核酸内切酶切出的，D错误。

故答案为：C。

【分析】1、限制性核酸内切酶——“分子手术刀”（1）来源：主要是从原核生物中分离纯化来的；（2）特性：特异性，一种限制酶只能识别一种特定的核苷酸序列，并且能在特定的切点上切割DNA分子；（3）作用：能够识别双链DNA分子的某种特定核苷酸序列，并且使每一条链中特定部位的两个核苷酸之间的磷酸二酯键。

2、DNA连接酶——“分子缝合针” （1）来源：大肠杆菌、T4噬菌体；（2）DNA连接酶的种类：E.coliDNA连接酶和T4DNA连接酶；（3）作用及作用部位：E.coliDNA连接酶作用于黏性末端被切开的磷酸二酯键，T4DNA连接酶作用于黏性末端和平末端被切开的磷酸二酯键。6．【答案】A【解析】【分析】根据题意和图示分析可知：三种方法都用到了酶，依次为逆转录酶、限制酶、DNA聚合酶，都是在体外人工操作下进行的，故A正确；③为人工合成的目的基因，没有内含子，所以①②③碱基对的排列顺序不完全相同，B错误；图示a、c两种方法均属人工合成法，b方法是将DNA进行切割，故C错误；方法a是逆转录后合成DNA，仍然遵循中心法则，故D错误。7．【答案】A【解析】【解答】结合题图可知，剪切目的基因可以只用一种限制酶AluⅠ就可以把目的基因剪切下来，也可以用限制酶NheⅠ和SmaⅠ把目的基因剪切下来。只不过用两种不同的限制酶切割目的基因和载体，可以防止目的基因和载体的自身环化以及目的基因和载体的反向连接。并且用同种限制酶切割目的基因和载体能产生相同末端，才能保证目的基因与载体能够连接，所以用限制酶NheⅠ和SmaⅠ切割目的基因，也应该用限制酶NheⅠ和SmaⅠ切割载体。综上所述可知，A符合题意，B、C、D不符合题意。故答案为：A。【分析】1、单酶切是指用同一种限制酶对含目的基因的DNA和质粒进行切割，目的基因序列的两边必须各有一个能被该限制酶识别的序列及切点，而质粒至少有一个识别序列及切点，这样被切割的质粒与切下的目的基因两边形成相同的黏性末端，以实现连接而形成重组质粒。

2、双酶切是指用两种限制酶进行切割，含目的基因的DNA和质粒上都必须有能被这两种限制酶识别的序列及切点，结果两者都会产生具有两种不同的黏性末端的DNA片段，两个末端分别用A与B表示，然后混合起来，那么载体分子的A端与目的基因的A端连接，载体分子的B端与目的基因的B端连接，形成重组DNA分子，这样就可以避免DNA连接酶催化时被切割后的质粒自连成环的现象，并能保证质粒与目的基因的定向连接。8．【答案】C【解析】【解答】A、PCR技术是一种体外复制DNA的方法，PCR技术可以用来扩增目的基因，A正确；B、基因文库中获得所需的目的基因，必须要先了解目的基因的相关信息，B正确；C、基因组文库包括某种生物的全部基因，cDNA文库只包含某种生物的部分基于，所以基因组文库大于cDNA文库，C错误；D、若基因较小，核苷酸序列已知，可以通过化学方法进行人工合成，D正确。故答案为：C。【分析】获得目的基因的方法：1、从基因文库（基因组文库和cDNA文库）中获取；2、利用PCR技术扩增；3、人工合成（化学合成）。9．【答案】C【解析】【分析】一个DNA中C有1/2×2000－460＝540，PCR技术扩增4代，需要提供胞嘧啶脱氧核苷酸的个数是（24-1）×540＝8100。

【点评】难度中等，理解PCR过程中消耗的原料的数量。10．【答案】C【解析】【解答】A、切割抗虫基因的DNA片段和载体一般使用同种限制酶，但是不是“必须”，使用不同的限制酶也能产生相同的末端也是可以的，A错误；B、抗虫基因的表达载体中一般含有目的基因、启动子。终止子、标记基因和复制原点，并没有终止密码子，B错误；C、抗虫基因表达载体中的标记基因的作用是帮助筛选出含有目的基因的受体细胞，C正确；D、抗虫基因的表达启动于启动子，而不是复制原点，D错误。故答案为：C。

【分析】基因工程操作第二步：基因表达载体的构建（基因工程中的最关键步骤），将获取的目的基因和运载体用DNA连接酶连接成重组DNA。

1.目的：使目的基因在受体细胞中稳定存在，并且可以遗传至下一代，使目的基因能够表达和发挥作用。

2.表达载体的基本组成：目的基因＋启动子＋终止子＋标记基因：

（1）启动子：是一段有特殊结构的DNA片段，位于基因的首端，是RNA聚合酶识别和结合的部位，能驱动基因转录出mRNA，最终获得所需的蛋白质。

（2）终止子：也是一段有特殊结构的DNA片段，位于基因的尾端。

（3）标记基因的作用：是为了鉴定受体细胞中是否含有目的基因，从而将含有目的基因的细胞筛选出来(鉴定和筛选含有目的基因的受体细胞)。常用的标记基因是抗生素抗性基因。11．【答案】B【解析】【解答】A、基因工程是在生物体外将DNA进行重组形成重组DNA分子，然后导入受体细胞，赋予生物新的遗传特性，A正确；B、基因表达载体上的酶切位点和标记基因都有可能不同，所以不同基因表达载体的构建过程不一定相同，B错误；C、启动子应是在基因的首端，是RNA聚合酶识别和结合的部位，C正确；D、抗生素抗性基因的作用就是作为标记基因，可以初步检测受体细胞是否导入了目的基因，D正确。故答案为：B。

【分析】基因表达载体的构建（基因工程中的最关键步骤），将获取的目的基因和运载体用DNA连接酶连接成重组DNA。

1.目的：使目的基因在受体细胞中稳定存在，并且可以遗传至下一代，使目的基因能够表达和发挥作用。

2.表达载体的基本组成：目的基因＋启动子＋终止子＋标记基因

（1）启动子：是一段有特殊结构的DNA片段，位于基因的首端，是RNA聚合酶识别和结合的部位，能驱动基因转录出mRNA，最终获得所需的蛋白质。

（2）终止子：也是一段有特殊结构的DNA片段，位于基因的尾端。

（3）标记基因的作用：是为了鉴定受体细胞中是否含有目的基因，从而将含有目的基因的细胞筛选出来(鉴定和筛选含有目的基因的受体细胞)。常用的标记基因是抗生素基因。12．【答案】D【解析】【解答】A、利用花粉管通道法可用于将目的基因导入植物细胞，A正确；B、将目的基因导入动物细胞常用显微注射法，要将目的基因导入受精卵中，B正确；C、将目的基因导入微生物细胞中常用感受态细胞法，C正确；D、自然条件下，农杆菌感染双子叶植物和裸子植物，所以农杆菌转化法常用于将目的基因导入双子叶植物中。小麦种子属于单子叶植物，所以将目的基因导入小麦细胞不用农杆菌转化法，D错误。故答案为：D。【分析】转化的方法包括：1、将目的基因导入植物细胞的方法有农杆菌转化法、基因枪法和花粉管通道法；2、将目的基因导入动物细胞最有效的方法是显微注射法；3、将目的基因导入微生物细胞的方法是感受态细胞法。13．【答案】D【解析】【解答】A、基因工程中常用细菌等原核生物作为受体细胞是因为原核生物繁殖快、遗传物质相对较少、多为单细胞，所以选用原核生物作为受体细胞操作较简单，容易成功，A正确；

B、用Ca2+（或CaCl2）处理微生物细胞，会使其处于一种能吸收周围环境中DNA分子的生理状态，这种细胞称为感受态细胞，B正确；

C、温度和酸碱度会影响细胞内酶的活性，进而影响细胞的代谢活动，所以感受态细胞吸收DNA分子需要适宜的温度和酸碱度，C正确；

D、感受态细胞法要用Ca2+（或CaCl2）处理微生物细胞，而不是用生理盐水处理细胞，D错误。故答案为：D。【分析】细胞处于能够吸收DNA的状态称感受态，处于感受态的细胞称作感受态细胞。受体细胞经过一些特殊方法（如：CaCl2等化学试剂法）的处理后，细胞膜的通透性发生变化，成为能容许多有外源DNA的载体分子通过的感受态细胞。14．【答案】C【解析】【解答】A、步骤①是人工以RNA为模板生成DNA的过程叫逆转录，A正确；

B、步骤②是基因表达载体的构建，需使用同一种限制性核酸内切酶切割目的基因和质粒，同时需要DNA连接酶连接它们形成重组质粒，B正确；

C、步骤③可用CaCl2处理大肠杆菌，使其处于感受态，C错误；

D、患禽流感康复的鸡的血清中含有相应的抗体，可以与Q蛋白发生抗原-抗体特异性结合反应，以此可以检测Q蛋白的免疫反应特性，D正确。故答案为：C。【分析】1、基因工程技术的基本步骤：

（1）目的基因的获取：方法有从基因文库中获取、利用PCR技术扩增和人工合成。

（2）基因表达载体的构建：是基因工程的核心步骤，基因表达载体包括目的基因、启动子、终止子和标记基因等。

（3）将目的基因导入受体细胞：根据受体细胞不同，导入的方法也不一样。将目的基因导入植物细胞的方法有农杆菌转化法、基因枪法和花粉管通道法；将目的基因导入动物细胞最有效的方法是显微注射法；将目的基因导入微生物细胞的方法是感受态细胞法。

（4）目的基因的检测与鉴定：分子水平上的检测：①检测转基因生物染色体的DNA是否插入目的基因--DNA分子杂交技术；②检测目的基因是否转录出了mRNA--分子杂交技术；③检测目的基因是否翻译成蛋白质--抗原-抗体杂交技术．个体水平上的鉴定：抗虫鉴定、抗病鉴定、活性鉴定等。

2、据图分析可知，①是逆转录过程，②是基因表达载体构建过程，③是转化过程，④目的基因在受体细胞中表达过程。

15．【答案】D【解析】【解答】①基因文库是提前构建好的，所以从基因文库中获取目的基因不需要模板链；②PCR技术是利用DNA复制的原理扩增大量目的基因，DNA复制需要模板，所以利用PCR技术扩增目的基因需要模板链；③反转录是以RNA为模板合成DNA，所以反转录法需要模板链；④通过DNA合成仪利用化学方法人工合成，只需要已知目的基因的核苷酸序列，输入到DNA合成仪就可以，不需要模板链。综上所述，②③需要模板链，①④不需要模板链，A、B、C不符合题意，D符合题意。

故答案为：D。

【分析】1、基因文库的构建：（1）将某种生物体内的DNA全部提取出来，选用适当的限制酶，将DNA切成一定范围大小的DNA片段，然后，将这些DNA片段分别与载体连接起来，导入受体菌的群体中储存，每个受体菌都含有了一段不同的DNA片段。这个群体包含了这种生物的所有基因，叫做这种生物的基因组文库。该文库较大，基因中有内含子、启动子，部分基因可以进行基因交流。（2）如果用某种生物发育的某个时期的mRNA经逆转录产生的多种互补DNA（也叫cDNA）片段，与载体连接后储存在一个受体菌群中。那么，这个受体菌群体就叫做这种生物的cDNA文库。该文库较小，基因中没有内含子、启动子。全部基因可进行基因交流。

2、PCR是多聚酶链式反应的缩写。是一项在生物体外复制特定DNA片段的核酸合成技术。它是利用DNA双链复制的原理，将基因的核苷酸序列不断地加以复制，使其数量呈指数方式增加。通过这一技术，可以在短时间内大量扩增目的基因。

3、人工合成目的基因：适用于基因比较小，核苷酸序列又已知。常用的方法有逆转录法和化学合成法。16．【答案】A【解析】【解答】A、通过观察害虫吃棉叶是否死亡，属于个体水平上的鉴定，A符合题意；B、检测目的基因片段与DNA探针能否形成杂交带，采用的是DNA分子杂交技术，属于分子水平上的检测，B不符合题意；C、检测目的基因转录形成的mRNA与DNA探针能否形成杂交带，采用的是分子杂交技术，属于分子水平上的检测，C不符合题意；D、检测目的基因表达产物蛋白质能否与特定抗体形成杂交带，采用的是抗原-抗体杂交技术，属于分子水平上的检测，D不符合题意。故答案为：A。

【分析】目的基因的检测与鉴定：（1）分子水平上的检测：①检测转基因生物染色体的DNA是否插入目的基因-DNA分子杂交技术；②检测目的基因是否转录出了mRNA-分子杂交技术；③检测目的基因是否翻译成蛋白质-抗原-抗体杂交技术。（2）个体水平上的鉴定：抗虫鉴定、抗病鉴定、活性鉴定等。17．【答案】D【解析】【分析】基因完成表达说明已经经过转录和翻译阶段生成了相应的蛋白质，故本题答案选D。A和C项，只能证明目的基因已经导入，并不代表能够表达；大肠杆菌中检测到人胰岛素基因及其mRNA，只能证明目的基因完成了转录过程；

【点评】本题重在考查目的基因的检测与鉴定的相关知识，属于对识记、理解层次的考查，属于简单题。18．【答案】C【解析】【解答】A、基因工程中常用的工具酶有DNA连接酶、限制性核酸内切酶，A错误；B、一种限制酶都只能识别一种特定的核苷酸序列，即具有特异性，B错误；C、选用细菌作为重组质粒的受体细胞是因为细菌繁殖快，并且遗传物质少，C正确；D、目的基因进入受体细胞需要检测和鉴定，不一定能成功实现表达，D错误。故答案为：C。【分析】1、基因工程的基本工具：（1）限制性核酸内切酶（限制酶）：能够识别双链DNA分子的某种特定的核苷酸序列，并且使每一条链中特定部位的两个核苷酸之间的磷酸二酯键断开，因此具有专一性；（2）DNA连接酶：缝合DNA片段的磷酸二酯键；（3）载体：最常用的载体是质粒,它是一种裸露的、结构简单的、独立于细菌拟核之外，并具有自我复制能力的双链环状DNA分子。

2、目的基因导入细胞后不一定进行基因的表达，需要对目的基因进行分子水平上检测和个体水平上的鉴定。

19．【答案】C【解析】【解答】解：A、Bt基因的化学成分是DNA，A错误；B、Bt基因是抗菜青虫基因，来自于微生物，所以不含有菜青虫的遗传物质，B错误；C、转基因抗虫油菜能产生杀虫蛋白是由于具有Bt基因能控制杀虫蛋白的合成，C正确；D、转基因抗虫油菜产生的杀虫蛋白是有机物，D错误．故选：C．【分析】基因工程是指按照人们的意愿，进行严格的设计，并通过体外DNA重组和转基因等技术，从而创造出更符合人们需要的新的生物类型和生物产品．20．【答案】C【解析】【解答】白细胞介素、胰岛素不属于自然状态下大肠杆菌产生的物质，只有通过基因工程定向改造过的大肠杆菌才能生产上述物质；干扰素不属于自然状态下酵母菌产生的物质，只有通过基因工程定向改造过的酵母菌才能产生上述物质。青霉素是自然状态下青霉菌产生的物质，所以不需要通过基因工程青霉菌就可以产生。综上所述，A、B、D不符合题意，C符合题意。故答案为：C。【分析】基因工程是按照人们的愿望，进行严格的设计，并通过体外DNA重组和转基因等技术，赋予生物以新的遗传特性，从而创造出更符合人们需要的新的生物类型和生物产品。21．【答案】B【解析】【解答】A、基因治疗无法改变体内所有细胞的遗传物质，所以不能使遗传病得到根治，A正确；

BC、基因治疗是要把正常基因导入病人体内的，不是利用基因工程的产品来治疗人类疾病，B错误，C正确；

D、基因治疗可能是改造体细胞内的遗传物质，也可能是改造生殖细胞内的遗传物质，所以基因治疗的靶细胞可以是体细胞和生殖细胞，D正确。故答案为：B。【分析】基因治疗是把正常基因导入病人体内，使该基因的表达产物发挥功能，从而达到治疗疾病的目的，这是治疗遗传病的最有效的手段。包括体外基因治疗和体内基因治疗。22．【答案】B【解析】【解答】蛋白质工程指以蛋白质的结构规律及其与生物功能的关系作为基础，通过基因修饰或基因合成，对现有蛋白质进行基因改造，或制造一种新的蛋白质，以满足人类的生产和生活的需要。由概念可知：蛋白质工程是在分子水平上对现有蛋白质的基因分子进行操作，A错误；由概念可知：蛋白质工程能产生出自然界中不曾存在过的新型蛋白质分子，B正确；对蛋白质的改造是通过直接改造现有蛋白质的基因来实现的，C错误；蛋白质工程的流程和天然蛋白质合成的过程是不完全相同的，D错误。

【分析】蛋白质工程的实质是：改造基因。蛋白质工程的过程：根据中心法则逆推以确定目的基因的碱基序列：预期蛋白质功能→设计预期蛋白质结构→推测应有氨基酸序列→找到对应的脱氧核苷酸序列；进行基因修饰或基因合成；最终还是回到基因工程上来解决蛋白质的合成问题。因此，蛋白质工程生产合成的蛋白质是自然界中不存在的新型蛋白质分子。23．【答案】B【解析】【解答】A、蛋白质工程的原理是基因改造，所以蛋白质工程要对基因进行操作，A错误；

B、蛋白质工程的实质是定向改造或生产人类所需的蛋白质，所以蛋白质工程的结果是可以生产出自然界中没有的蛋白质，B正确；

C、蛋白质工程也是分子水平的操作，C错误；

D、蛋白质工程依然还要利用基因工程，D错误。故答案为：B。【分析】1、蛋白质工程是指以蛋白质分子的结构规律及其与生物功能的关系作为基础，通过基因修饰或基因合成，对现有蛋白质进行改造，或制造一种新的蛋白质，以满足人类的生产和生活的需求。

2、蛋白质工程的基本途径是：从预期的蛋白质功能出发→设计预期的蛋白质结构→推测应有的氨基酸序列→找到相对应的脱氧核苷酸序列。24．【答案】D【解析】【分析】蛋白质工程是指以蛋白质的结构规律及其与生物功能的关系作为基础，通过基因修饰或基因合成，对现有蛋白质进行基因改造，或制造一种新的蛋白质，以满足人类的生产和生活的需要。故选D

【点评】本题意在考查考生的识记能力，属于容易题。25．【答案】A【解析】【解答】A、分析题图可知，图示为植物组织培养技术，利用此过程获得的试管苗的基因型与亲本的基因型相同，可能为杂合子，也可能为纯合子，故A正确；B、图中①是脱分化过程，没有发生细胞分化，故B错误；C、多倍体植株的培育不需要采用植物组织培养技术，故C错误；D、此过程采用的是植物组织培养技术，其依据的原理是细胞的全能性，故D错误。故答案为：A。【分析】分析题图可知，图示为植物组织培养技术。图中①是脱分化过程，②为再分化并发育为试管苗的过程。26．【答案】B【解析】【解答】A、植物体的生殖细胞也具有发育成完整个体所需的全套基因，A错误；

B、在生物的生长发育过程中，体内细胞并不会表现出全能性，而是分化成各种组织和器官，只有离体的细胞才能表现出全能性，B正确；

C、植物体内某些体细胞没有表现出全能性，是因为在特定的时间和空间条件下细胞中的基因选择性表达的结果，C错误；

D、种子由受精卵发育而来，是新个体的幼体，种子发育成个体只是个体的生长发育，不能体现全能性，D错误。故答案为：B。【分析】细胞的全能性是指具有某种生物全部遗传信息的任何一个细胞，都具有发育成完整生物体的潜能。全能性最高的细胞是受精卵，生殖细胞的全能性比体细胞高，体细胞中分化程度越低全能性越高。27．【答案】D【解析】【解答】A、花药离体培养获得试管苗应用的是植物组织培养技术，花粉细胞形成愈伤组织是通过有丝分裂形成的，A正确；

B、愈伤组织细胞无法进行光合作用，必须从培养基中获得水、无机盐和小分子的有机物等营养物质，B正确；

C、生长素可以促进花粉细胞的分裂生长，C正确；

D、图中的试管苗是由花药培育来的，花药中的花粉细胞是通过减数分裂产生的，所以基因型为AaBb的水稻产生的花粉基因型有AB、Ab、aB、ab，所以试管苗可能出现的基因型有AB、Ab、aB、ab，D错误。故答案为：D。【分析】1、植物组织培养技术：在无菌和人工控制条件下，将离体的植物器官、组织、细胞，培养在人工配制的培养基上，给予适宜的培养条件，诱导其产生愈伤组织、丛芽，最终形成完整的植株。

2、植物组织培养技术过程：离体的植物器官、组织、细胞→脱分化→愈伤组织→再分化→胚状体或丛芽→发育成完整的植株。28．【答案】C【解析】【解答】A、纤维素酶和果胶酶会除去植物细胞壁，要保持原生质体正常的形态结构和生理功能，溶液的渗透压应该等于细胞液渗透压，A错误；

B、诱导原生质体融合，利用的是细胞膜具有流动性的原理，B错误；

C、植物生长发育的不同阶段，需要的营养和植物激素有差异，所以过程④⑤⑥需要根据生长发育进程更换不同的培养基，C正确；

D、利用植物体细胞杂交技术获得的新植株，体细胞中有同源染色体，所以该植株是可育的，D错误。故答案为：C。【分析】植物体细胞杂交是用两个来自于不同植物的体细胞融合成一个杂种细胞，并且把杂种细胞培育成新的植物体的方法。植物体细胞杂交的优点是克服了远缘杂交不亲合的障碍。29．【答案】D【解析】【分析】植物细胞壁的主要成分是纤维素和果胶，所以去除细胞壁应用纤维素和果胶酶，A正确；杂种细胞是已经分化的细胞，而愈伤组织是未分化的细胞，所以愈伤组织的全能性要高于杂种细胞，C正确；无论是分化还是未分化的植物细胞都具有全能性，D错误。30．【答案】D【解析】【解答】利用植物组织或细胞的大规模培养，可以生产一些天然有机化合物，如蛋白质、糖类、脂肪、药物、香料、生物碱、食品添加剂及其他生物活性物质等。由于植物生长点附近的病毒浓度很低甚至是无病毒，切取一定大小的茎尖分生组织进行培养，再生植株就可能脱除病毒，从而获得脱毒苗。人工种子是模拟天然种子的基本构造，利用人工种子包皮被植物组织培养中得到的体细胞胚。因此用植物组织培养技术可以培养或生产出食品添加剂、无病毒植物、人工种子，A、B、C不符合题意，D符合题意。故答案为：D。【分析】植物组织培养技术的应用有：1、快速繁殖、培育无菌植物；2、通过细胞培养生产药物；3、制作人工种子，解决某些作物的繁殖问题；4、转基因植物的培育，用到组织培养方法。31．【答案】B【解析】【分析】植物细胞组织培养，是将离体的植物组织，器官或细胞形成完整植物的技术。花药离体培养得到单倍体植株；正确。秋水仙素处理的是幼苗获得多倍体植株，不属于组织培养。人工种子是通过植物组织培养得到的胚状体、不定芽、顶芽和腋芽等为材料，通过人工薄膜包装得到的种子；正确。植物体细胞杂交技术形成的“番茄—马铃薯”杂种细胞经过植物组织培养形成杂种植株；正确。32．【答案】C【解析】【解答】由于植物生长点附近的病毒浓度很低甚至是无病毒，切取一定大小的茎尖或芽尖分生组织进行培养，再生植株就可能脱除病毒，从而获得脱毒苗，所以获得无毒幼苗的最佳方法是利用芽尖进行组织培养。A、B、D不符合题意，C符合题意。

故答案为：C。

【分析】利用植物组织培养技术培育无毒植株时应取植物分生区附近，如：根尖、茎尖。33．【答案】D【解析】【解答】解：动物细胞工程常用的技术手段有：动物细胞培养、动物细胞核移植、动物细胞融合、生产单克隆抗体等．其中动物细胞培养技术是其他动物工程技术的基础．故选：D．【分析】细胞工程是指应用细胞生物学和分子生物学的原理和方法，通过细胞水平或者细胞器水平上的操作，按照人们的意愿来改变细胞内的遗传物质或获取细胞产品的一门综合科学技术．动物细胞工程常用的技术手段有：动物细胞培养、动物细胞核移植、动物细胞融合、生产单克隆抗体等．其中动物细胞培养技术是其他动物工程技术的基础．34．【答案】D【解析】【解答】动物细胞培养利用的是细胞增殖的原理，最终要培养出大量的动物细胞。由于取自胚胎或出生不久的幼龄动物的器官或组织的细胞分裂增殖能力较强，利用这些细胞可以更容易培养出大量细胞。综上所述，A、B、C不符合题意，D符合题意。故答案为：D。【分析】动物细胞培养就是从动物机体中取出相关的组织，将它分散成单个细胞，然后，放在适宜的培养基中，让这些细胞生长和增殖。35．【答案】A【解析】【解答】A、动物细胞培养的培养基中需要加入动物血清、血浆，但是植物组织培养基中不需要加入血清、血浆，所以动物细胞培养和植物组织培养的主要区别是营养基成分不同，A正确；B、动物细胞培养和植物组织培养都需要在无菌条件下进行，防止细菌感染，B错误；C、动物细胞和植物细胞都能增殖，所以动物细胞和植物细胞都可以传代培养，C错误；D、植物组织培养中也可以只把植物细胞培养到愈伤组织，所以动物细胞和植物细胞都可以大量培养，D错误。故答案为：A。【分析】1、植物组织培养技术：在无菌和人工控制条件下，将离体的植物器官、组织、细胞，培养在人工配制的培养基上，给予适宜的培养条件，诱导其产生愈伤组织、丛芽，最终形成完整的植株。

2、动物细胞培养就是从动物机体中取出相关的组织，将它分散成单个细胞，然后，放在适宜的培养基中，让这些细胞生长和增殖。36．【答案】A【解析】【解答】①动物细胞培养过程中，悬液中分散的细胞很快会贴附在瓶壁上，出现细胞贴壁现象；②动物细胞培养过程中，动物细胞都是通过有丝分裂使细胞数量增加；③动物细胞培养过程中，不会产生其他种类的细胞，所以不涉及细胞分化；④动物细胞培养过程中，贴壁细胞分裂生长到表面相互接触时，细胞就会停止分裂增殖，出现接触抑制现象；⑤动物细胞培养过程中，细胞进行的是有丝分裂，不进行减数分裂；⑥动物细胞培养过程中，通常把第1代至第10代以内的培养细胞统称为原代细胞培养。综上所述，①②④⑥是动物细胞培养的特点，③⑤不是动物细胞培养的特点，故A符合题意，B、C、D不符合题意。故答案为：A。【分析】1、细胞贴壁：悬液中分散的细胞很快就贴附在瓶壁上，称为细胞贴壁。

2、细胞的接触抑制：贴壁细胞分裂生长到表面相互接触时，细胞就会停止分裂增殖的现象。

3、原代培养：将动物组织消化后的初次培养。

4、传代培养：贴满瓶壁的细胞经胰蛋白酶处理后分瓶继续培养。37．【答案】B【解析】【解答】A、动物细胞培养的目的是获得大量动物细胞，A错误；B、动物细胞培养前要用胰蛋白酶或胶原蛋白酶处理剪碎的组织，使组织细胞分散开，B正确；C、原代培养中，细胞的遗传物质一般不会发生改变，C错误；D、培养至50代后继续传代的细胞是细胞系，D错误。故答案为：B。【分析】1、动物细胞培养过程：取出组织块→剪碎、用胰蛋白酶或胶原蛋白酶处理→分散成单个细胞→用培养液稀释成细胞悬液放入培养瓶中培养→原代培养→传代培养。

2、目前使用的或冷冻保存的正常细胞通常为10代以内，以保持细胞正常的二倍体核型。一般来说细胞在传至10~50代左右时增殖会逐渐缓慢，以至于完全停止，这时部分细胞的细胞核型可能会发生变化；当继续传代培养时少部分细胞会克服细胞寿命的自然极限，获得不死性。38．【答案】D【解析】【解答】①动物细胞培养需要无毒环境，防止病毒侵染细胞；②动物细胞培养需要无菌环境，防止细菌感染；③动物细胞培养基中需要加入血清、血浆等一些天然成分；④动物细胞培养需要把温度控制在37℃左右，与动物体温相近；⑤动物细胞培养需要O2和CO2；⑥动物细胞培养中CO2是维持培养液pH的相对稳定。综上所述，①②③④⑥正确，⑤错误，故A、C、B不符合题意，D正确。

故答案为：D。

【分析】1、动物细胞体外培养所需的条件：无菌、无毒的环境；营养；温度和pH；气体环境。

2、保证被培养的细胞处于无菌、无毒的环境，采取以下措施：（1）对培养液和所有培养用具进行无菌处理；（2）添加一定量的抗生素，以防培养过程中的污染；（3）定期更换培养液，以便清除代谢产物。

3、动物细胞培养液中需加入的营养有糖、氨基酸、促生长因子、无机盐、微量元素等，还需要加入血清、血浆等一些天然成分。

4、动物细胞培养所需气体主要有O2和CO2。O2是细胞代谢所必需的；CO2的主要作用是维持培养液的pH。39．【答案】D【解析】【解答】A、加速家畜遗传改良进程，促进优良畜群繁育，应用了体细胞核移植技术，A不符合题意；B、保护濒危物种，应用了体细胞核移植技术，B不符合题意；C、获得组织器官异体移植的供体，应用了体细胞核移植技术，C不符合题意；D、大量生产紫杉醇，应用了植物组织培养技术，D符合题意。

故答案为：D。

【分析】1、体细胞核移植技术的应用：（1）加速家畜的遗传改良进程，促进优良种群繁育；（2）转基因克隆动物做生物反应器，生产珍贵的医用蛋白；（3）克隆动物的组织、器官做移植的供体；（4）研究克隆动物和克隆细胞可使人类更深入地了解胚胎发育及衰老过程。

2、植物组织培养技术的应用有：（1）快速繁殖、培育无菌植物；（2）通过细胞培养生产药物；（3）制作人工种子，解决某些作物的繁殖问题；（4）转基因植物的培育，用到组织培养方法。40．【答案】A【解析】【解答】基因控制生物的性状，基因在DNA上，DNA在染色体上，染色体在细胞核内，细胞核是细胞的代谢和遗传的控制中心，重组细胞的细胞核来自于雌性黑鼠，因此小鼠的毛色为雌、黑色。【分析】本题主要考查核移植的相关知识，意在考查考生对所学知识的理解，把握知识间的内在联系的能力。41．【答案】（1）4；磷酸二酯键（2）能；BclⅠ和BamHⅠ形成的黏性末端相同（3）基因重组；密码子（4）4000（5）（6）减少农药施用，降低环境污染【解析】【解答】（1）据图1中①的DNA上有2个BamHⅠ酶切位点，1个HindⅢ的酶切位点，所以用HindⅢ和BamHⅠ完全切割后能将DNA切成4段，所以反应管中有4种DNA片段。过程②要将切割后的目的基因与切割后质粒连接在一起，需要使用DNA连接酶催化两者的磷酸二酯键重新形成。

故答案为：4；磷酸二酯键。

（2）据图可知，BamHⅠ和BclⅠ切割产生的黏性末端是相同，都是GATC（或者说CTAG），那么BamHⅠ和BclⅠ切割产生的黏性末端可以重新连接在一起。所以现用BclⅠ和HindⅢ切割质粒，则该图1中①的DNA右侧还能选择BamHⅠ进行切割，能获得所需重组质粒。

故答案为：能；BclⅠ和BamHⅠ形成的黏性末端相同。

（3）转基因技术利用的原理时基因重组，所以“转基因抗虫棉”具有抗害虫的能力，这种变异属于基因重组。苏云金杆菌的基因能够在棉花植株中表达，说明所有生物共用同一套遗传密码子。

故答案为：基因重组；密码子。

（4）基因中12000个碱基对，如果所有序列全部转录出来mRNA中有12000个碱基。由于mRNA上3个相邻碱基组成一个密码子，如果不考虑终止密码子，每一个密码子决定一个氨基酸，所以该基因控制合成的蛋白质共有4000个氨基酸。

故答案为：4000；

（5）棉花细胞中的DNA可以进行复制并遗传给子代细胞，DNA复制时遗传信息去向DNA→DNA。同时DNA中的基因会控制蛋白质合成，需要经过转录和翻译过程，转录时遗传信息去向DNA→RNA，翻译时遗传信息去向RNA→蛋白质。

故答案为：

（5）通过基因工程获得抗虫棉花植株，使棉花植株获得抗虫性状，这样农业生产中可以减少农药施用，降低环境污染。

故答案为：减少农药施用，降低环境污染。

【分析】基因工程是按照人们的愿望，进行严格的设计，并通过体外DNA重组和转基因等技术，赋予生物以新的遗传特性，从而创造出更符合人们需要的新的生物类型和生物产品。42．【答案】（1）PCR；DNA聚合（TaqDNA聚合）（2）基因表达载体（重组DNA）（3）农杆菌转化；不适宜（4）抗虫接种；3/4【解析】【解答】（1）图中A→B使DNA数目增加，而PCR技术可以扩增目的基因，所以A→B利用的技术称为PCR。PCR技术中要使用热稳定DNA聚合（TaqDNA聚合）酶。

故答案为：PCR；DNA聚合（TaqDNA聚合）。

（2）目的基因要与运载体连接在一起，这一过程称为构建基因表达载体（重组DNA），目的是使目的基因在受体细胞中稳定存在且可以遗传给下一代，并能表达。

故答案为：基因表达载体（重组DNA）。

（3）图中显示使用了农杆菌，所以上述流程示意图中，将目的基因导入棉花细胞所采用的方法是农杆菌转化法。农杆菌转化法常用于将目的基因导入双子叶植物，所以不适宜用于将目的基因导入单子叶植物。

故答案为：农杆菌转化；不适宜。

（4）欲确定抗虫基因在G体内是否表达，在个体水平上需要做抗虫接种实验。假设抗虫基因为A，如果抗虫基因导入成功，且与某条染色体的DNA整合起来，该转基因抗虫棉可视为杂合子Aa，将该转基因抗虫棉自交一代，子代中AA：Aa：aa=1：2：1，所以后代中抗虫植株占3/4。

故答案为：抗虫接种；3/4。

【分析】1、PCR是多聚酶链式反应的缩写。是一项在生物体外复制特定DNA片段的核酸合成技术。

它是利用DNA双链复制的原理，将基因的核苷酸序列不断地加以复制，使其数量呈指数方式增加。通过这一技术，可以在短时间内大量扩增目的基因。

2、基因表达载体的构建是基因工程的核心。其目的是使目的基因在受体细胞中稳定存在，并且可以遗传给下一代，同时，使目的基因能够表达和发挥作用。基因表达载体的组成：目的基因、启动子、终止子、标记基因、复制原点。

3、将目的基因导入植物细胞，常用的方法有农杆菌转化法、基因枪法、花粉管通道法等。应用最多的是农杆菌转化法，单子叶植物常用基因枪法，我国转基因抗虫棉用的是花粉管通道法。43．【答案】（1）纤维素酶和果胶酶；3；细胞壁再生；高尔基体（2）植物激素；无菌条件（3）(A＋B)/2；秋水仙素；A＋B（4）六【解析】【解答】（1）据图可知过程①②是去除植物细胞壁获得原生质体，植物细胞壁的主要成分是纤维素和果胶，所以过程①②是用纤维素酶和果胶酶处理细胞的细胞壁。若只考虑两个细胞融合的情况，则番茄细胞原生质体与马铃薯细胞的融合情况有3种，包括番茄细胞和番茄细胞融合的细胞、马铃薯细胞和马铃薯细胞融合的细胞、番茄细胞和马铃薯细胞融合的细胞。图中④过程是细胞壁再生过程，植物细胞壁形成与细胞内高尔基体有关。

故答案为：纤维素酶和果胶酶；3；细胞壁再生；高尔基体。

（2）过程⑤是将植物细胞培育成完整植物体，需要用到植物组织培养技术，植物组织培养过程所需培养基中除了提供水分、无机盐、糖类、维生素以及氨基酸外，还需要在培养基中加入植物激素（如生长素和细胞分裂素）。植物组织培养过程中必须保证无菌条件，防止细菌感染植物细胞。

故答案为：植物激素；无菌条件。

（3）若番茄细胞内含A条染色体，马铃薯细胞内含B条染色体，将番茄和马铃薯采用杂交育种方法培育(假设能成功)，杂交育种需要让番茄产生的配子与马铃薯的配子结合产生后代。由于番茄配子中染色体数为A/2，马铃薯配子中染色体数为B/2，所以杂交育种中后代染色体数为（A+B）/2。这样的后代体细胞中没有同源染色体，高度不育，所以要得到可育的番茄-马铃薯植株必须用秋水仙素处理幼苗，幼苗细胞中染色体数目会加倍，此时体细胞中染色体数为A+B。

故答案为：（A+B）/2；秋水仙素；A+B。

（4）若番茄是二倍体，体细胞中2个染色体组；马铃薯是四倍体，体细胞中4个染色体组。番茄体细胞与马铃薯体细胞融合得到的杂种植物细胞中有6个染色体组，所以这样的杂种细胞培育的杂种植株为六倍体。

故答案为：六。

【分析】1、植物体细胞杂交技术过程：用纤维素酶和果胶酶去细胞壁获得原生质体→诱导原生质体融合→再生出新的细胞壁形成杂种细胞→诱导杂种细胞形成杂种植株。

2、植物体细胞杂交是用两个来自于不同植物的体细胞融合成一个杂种细胞，并且把杂种细胞培育成新的植物体的方法。植物体细胞杂交的优点是克服了远缘杂交不亲合的障碍。44．【答案】（1）动物胚胎或幼龄动物的器官、组织（2）胰蛋白（或胶原蛋白）；使细胞与培养液充分接触（3）动物血清；原代培养（4）接触抑制；单层（或一层）（5）细胞悬浮液；衰老甚至死亡；不死性；降低；减少（6）维持培养液的pH值【解析】【解答】（1）动物细胞培养一般选取的是动物胚胎或幼龄动物的器官、组织，这样的组织细胞分裂能力强，容易培养获得大量的组织细胞。

故答案为：动物胚胎或幼龄动物的器官、组织。

（2）用胰蛋白酶（或胶原蛋白酶）处理剪碎的组织，可以使细胞分散开来。组织或器官中的组织细胞分散后可以使细胞与培养液充分接触。

故答案为：胰蛋白（胶原蛋白）；使细胞与培养液充分接触。

（3）动物细胞培养的培养基成分除了有葡萄糖、氨基酸、促生长因子、无机盐、微量元素等，通常还需要加入动物血清。在培养瓶中最初的培养称为原代培养。

故答案为：动物血清；原代培养。

（4）在动物细胞培养的过程中，当贴壁细胞分裂生长到细胞表面相互接触时，细胞会停止分裂增殖，这种现象称为细胞的接触抑制。瓶壁上形成的细胞层数是单层（或一层）。

故答案为：接触抑制；单层（或一层）。

（5）为了把B瓶中的细胞分装到C瓶中，用酶处理，使组织细胞分散开，再培养到培养液中，可以配置成细胞悬浮液，最后再分瓶。细胞传代次数的增多，绝大部分细胞分裂停止，进而出现衰老甚至死亡的现象。但极少数细胞因遗传物质发生改变，会连续增殖，成为不死性细胞。这种不死性细胞也就是癌细胞，癌细胞表面糖蛋白减少，细胞黏着