河南省郑州市十校联考2022-2023学年高二下学期期中生物试题（含答案）

河南省郑州市十校联考2022-2023学年高二下学期期中生物试题姓名：__________班级：__________考号：__________题号一二三四总分评分一、单选题1．绍兴是黄酒之乡，“麦曲酶长，酵米复芳；白梅酒娘，伴淋寒香；压滤琼浆，煎煮陈藏”是对绍兴黄酒精致复杂酿造工艺的描述。在黄酒的主要发酵过程中，“开耙”（搅拌）是极为关键的一步。下列相关叙述错误的是（）A．接种麦曲有利于淀粉水解为小分子糖，有利于“酒娘”菌种发酵B．煎煮的目的是除去发酵产品中的酵母菌等微生物，利于储藏C．发酵过程中“开耙”可适当提供O2，活化酵母D．黄酒酿制过程中需定期检测亚硝酸盐含量是否超标2．《齐民要术》记载了一种称为“动酒酢（“酢”同“醋”）法”的酿醋工艺：“大率酒一斗，用水三斗，合瓮盛，置日中曝之。七日后当臭，衣（指菌膜）生，勿得怪也，但停置，勿移动，挠搅之。数十日，醋成”。下列有关叙述错误的是（）A．制作醋的过程中发酵液的pH会降低，制作酒的过程中发酵液的pH也会降低B．加水的目的是对酒进行稀释，避免酒精浓度过高杀死醋酸菌C．“衣”位于变酸的酒表面，是由原酒中的酵母菌大量繁殖形成的D．挠搅有利于酒精与醋酸菌充分接触，还可以增加溶液中的溶解氧3．下列关于腐乳制作的叙述，错误的是（）A．毛霉可利用其体内的酶将豆腐中的蛋白质分解成小分子的肽和氨基酸B．吃腐乳时，腐乳外部的“皮”是细菌繁殖形成的C．用盐腌制腐乳的过程中，要控制盐的用量，盐的浓度过高会影响口味，过低则不足以抑制杂菌的生长，导致豆腐腐败D．其制作过程可以表示为让豆腐上长出毛霉→加盐腌制→加卤汤装瓶→密封腌制4．家庭制作泡菜的方法：新鲜的蔬菜经过整理、清洁后，放入彻底清洗并用白酒擦拭过的泡菜坛中，然后向坛中加入盐水、香辛料及一些“陈泡菜水”，密封后置于温度适宜的地方。下列与此过程相关的叙述不正确的是（）A．用白酒擦拭泡菜坛的目的是消毒B．腌制泡菜时，为了缩短发酵的时间可以加入一些原来的陈泡菜水C．制作泡菜时腌制时间过长会引起细菌大量繁殖D．若制作的泡菜咸而不酸，可能的原因是加入食盐过多，抑制了乳酸菌的发酵5．灭菌、消毒、无菌操作是生物学实验中常见的操作。下列叙述正确的是（）A．为了防止杂菌污染，应将配制好的选择培养基分装到培养皿中再进行高压蒸汽灭菌B．配制培养基、倒平板、接种均需要在酒精灯火焰旁进行C．为防止蛋白质变性，不能用高压蒸汽灭菌法对牛肉膏蛋白胨培养基进行灭菌D．可用高压蒸汽灭菌法对实验中所使用的微量离心管、细胞培养瓶等进行灭菌6．如下图所示，科研人员利用诱变方式选育可高产β-胡萝卜素的三孢布拉霉负菌，未突变菌不能在含有β-紫罗酮的培养基上生长。随β-胡萝卜素含量增加，菌体颜色从黄色加深至橙红色。图甲表示选育菌种及获得β-胡萝卜素的流程，以下相关说法错误的是（）A．经过①紫外线照射后，可能有少数三孢布拉霉负菌能在含β-紫罗酮的培养基上生长B．进行③操作时，应选择橙红色区域较小的菌落中的菌株继续接种培养C．要得到图乙所示的菌落，可用稀释涂布平板法进行②操作接种后再培养D．含β-紫罗酮的培养基属于选择培养基7．下列与“土壤中分解尿素的细菌的分离与计数”探究实践相关的叙述，正确的是（）A．若要判断选择培养基是否起到选择作用，需要设置未接种的牛肉膏蛋白胨培养基作为对照B．将土样进行10倍稀释后，取1mL上清液加入盛有9mL蒸馏水的试管中依次等比稀释C．将涂布器在火焰上灼烧，待其上的酒精燃尽后，必须先冷却再进行涂布平板操作D．待长成的菌落稳定后，要在无菌条件下进行尿素分解菌菌落的观察和计数8．刚果红能与纤维素形成红色复合物，但对纤维素水解后形成的纤维二糖和葡萄糖无作用，纤维素被纤维素分解菌分解后，培养基中会出现以这些菌为中心的透明圈。某同学利用刚果红配制选择培养基，分离土壤中能水解纤维素的微生物并观察菌落数。下列叙述正确的是（）A．划线接种后统计平板上的菌落数，统计值比活菌实际数高B．选择培养基中应以刚果红作为唯一碳源，并加入琼脂糖作凝固剂C．应选择菌落直径与周围透明圈直径比值大的菌落进行纯化D．可以把滤纸埋在土壤中，经过一段时间后，再从已腐烂的滤纸上筛选目的菌9．与传统发酵技术相比，发酵工程的产品种类更加丰富，产量和质量明显提高。下列说法错误的是（）A．分离、提纯获得微生物细胞本身或其代谢产物是发酵工程的中心环节B．发酵工程可用诱变育种、基因工程等方法选育出性状优良的工程菌并进行扩大培养C．在发酵工程的发酵环节中，发酵条件变化不仅会影响微生物的生长繁殖，也会影响微生物的代谢途径D．通过发酵工程获得的单细胞蛋白可作为食品添加剂，也可制成微生物饲料10．传统啤酒酿造过程中，发酵在敞开式发酵池中进行，麦芽汁中接入酿酒酵母后通入大量无菌空气，之后会产生大量气体翻腾逸出，在麦芽汁表面形成25～30cm厚的泡盖（气泡层），然后停止通气，进入静止发酵阶段。一段时间后可得啤酒。下列说法正确的是（）A．静止发酵阶段酵母菌可直接将淀粉转化为酒精和CO2B．用脱落酸溶液浸泡大麦种子可以增加麦芽汁中可发酵糖的含量C．泡盖的形成是由于酵母菌有氧呼吸产生大量CO2，能将麦芽汁与空气隔绝D．可以用平板划线法调查发酵液中酵母菌的数量11．通过植物细胞工程技术，可利用甲（高产不耐盐）、乙（低产耐盐）两种二倍体植物培育高产耐盐的杂种植株。实验流程如下图所示。下列叙述正确的是（）A．目的植株相对于甲、乙而言发生了染色体数目变异导致植株不可育B．由④到目的植株需进一步筛选的原因是④中含有高产不耐盐品种C．①过程应用了酶的专一性和细胞膜具有流动性原理D．为提高纤维素酶和果胶酶的处理效果①过程可将植物细胞置于适当浓度的高渗溶液中12．青蒿素是从植物黄花蒿的叶片中所提取的一种代谢产物，而茎及其他部位中的青蒿素含量极其微小，下列关于利用植物组织培养生产青蒿素的叙述中错误的是（）A．在黄花蒿组织培养过程中的一定阶段必须给予光照B．培养基中添加的生长素和细胞分裂素是影响细胞分裂、分化的重要激素C．愈伤组织是一团有特定结构和功能的薄壁细胞D．可大规模栽培组织培养苗以获取药用成分13．科学家发现，蜗牛消化道提取液可用来处理植物细胞的细胞壁，从而得到原生质体便于进行植物体细胞杂交等操作。下列有关说法错误的是（）A．蜗牛消化道提取液含有纤维素酶和果胶酶，可以去除植物的细胞壁B．处理后获得的原生质体可用秋水仙素进行诱导融合C．诱导原生质体融合后，只考虑两两融合，会产生三种融合细胞D．原生质体融合体现了细胞膜的流动性14．模型构建是生物学教学、研究和学习的一种重要方法。对下图所示生物学概念模型的理解或分析错误的是（）A．若该模型表示核移植技术，则C→D过程一定与胚胎分割和胚胎移植技术有关B．若此图表示植物体细胞杂交过程，则从A、B到C的过程可以用电融合法诱导C．若此图为试管牛生产的流程图，则A、B其中之一表示获能的精子D．若A、B表示培养液和胚胎干细胞，则C→D的传代培养过程中有可能出现分化现象15．植物细胞工程在农业、医药工业方面有着广泛的应用，下列有关叙述错误的是（）A．采用茎尖组织培养技术得到脱毒苗的过程中需要多次更换培养基B．细胞产物的工厂化生产提高了单个细胞中次生代谢物的含量C．可以利用植物组织培养过程中产生的突变体培育新品种D．利用微型繁殖技术可以保持优良品种的遗传特性16．下列在细胞工程的应用中，不需要进行检测与筛选的是（）A．对植物的愈伤组织进行诱变处理，培育作物新品种B．将鼠的骨髓瘤细胞与B淋巴细胞融合，制备单克隆抗体C．利用植物体细胞杂交技术培育“萝卜-甘蓝”杂种植物D．利用植物的快速繁殖技术获得大量试管苗17．2018年《Cell》杂志报道，我国科学家以一只雌性猕猴胎儿成纤维细胞为核供体成功克隆出两只猕猴，成为全球首例体细胞克隆灵长类动物。其中几个关键的技术创新与突破有：①在将供体细胞注入去核的卵母细胞前用灭活的病毒短暂处理；②通过反复试验，可以在10秒之内对卵母细胞进行去核操作，在15秒之内将供体细胞注入到去核的卵母细胞里；③将组蛋白去甲基化酶的mRNA和组蛋白脱乙酰酶抑制剂注入重构胚。以下相关叙述错误的是（）A．用灭活的病毒处理供体细胞的目的是促进两细胞融合B．克隆猴与人类遗传背景更接近，以其为模型研发药物可有效缩短药物研发进程C．用蛋白酶合成抑制剂激活重构胚可使其发育成完整个体D．胚胎移植时进行同期发情处理，目的是降低代孕母猴对克隆猴的免疫排斥反应18．非洲猪瘟病毒（ASFV）是一种具有包膜的双链DNA病毒，病毒蛋白p30位于病毒的包膜上，在病毒DNA合成开始之前就已经产生并持续表达至病毒生命周期的结束，在病毒进入宿主细胞时期具有重要作用。我国利用已免疫的小鼠B淋巴细胞和骨髓瘤细胞杂交，成功研制出针对p30的单克隆抗体。下列叙述正确的是（）A．针对p30的单克隆抗体可用于ASFV早期诊断试剂盒的研发B．经p30反复免疫的B淋巴细胞与骨髓瘤细胞只能用化学方法促融，如PEG促融法C．小鼠B淋巴细胞和骨髓瘤细胞用PEG诱导融合后即为杂交瘤细胞D．克隆化培养易体现出细胞的全能性，故杂交瘤细胞不能进行克隆化培养19．小鼠的某种上皮细胞与某种淋巴细胞体外培养时，上皮细胞呈现扁平不规则多角形，且粘附在培养瓶内壁上，而淋巴细胞则常常悬浮在培养液中。下列叙述错误的是（）A．培养消化道上皮细胞更易观察判断细胞是否具有接触抑制现象B．恒温培养箱中的CO2浓度维持在5%左右，以维持培养液的pH值C．培养基内加入适量的抗生素可以形成无菌、无毒的培养环境D．出现接触抑制时，用胰蛋白酶处理，再用离心法收集细胞分瓶培养20．北大邓宏魁团队利用化学小分子成功地将已高度分化的小鼠体细胞诱导成为了可以重新分化发育为各种组织器官类型的“多潜能性”细胞，并将其命名为“化学诱导的多潜能干细胞（CiPS细胞）”，开辟了一条全新的体细胞“重编程”途径。下列相关叙述错误的是（）A．小鼠体细胞诱导成CiPS细胞是形态、结构和遗传物质发生稳定性差异的过程B．与小鼠体细胞相比，诱导形成的CiPS细胞全能性较高C．体细胞经诱导转化为CiPS细胞的过程类似于植物细胞的脱分化过程D．体细胞转化成CiPS细胞时，细胞内部分不表达的基因可能会重新表达21．如下图所示，a表示现代生物工程技术，b表示其结果，下面说法正确的是（）A．如果a是核移植技术，b的产生说明了动物细胞具有全能性B．如果a是体外受精技术，则形成的b属于克隆动物C．如果a是胚胎分割技术，b中个体的基因型和表型一定相同D．如果a是基因工程，b是乳腺生物反应器，则需对移植的胚胎进行性别选择22．下列有关哺乳动物受精和早期胚胎发育的叙述正确的是（）A．在自然条件下，受精在子宫中完成B．精子需要获能才能与卵子结合，而卵子一经排出就具备受精能力C．在桑椹胚阶段，胚胎的内部开始出现含液体的腔D．囊胚期的内细胞团将来发育成胎儿的各种组织23．下列关于胚胎工程的叙述，正确的是（）A．经胚胎移植产生的后代，其遗传特性与受体保持一致B．采用胚胎分割技术获得同卵双胎或多胎，可以看做动物的无性繁殖C．胚胎移植时，供体和受体母畜都必须具备优秀的遗传性能D．试管牛与试管苗一样都可以保持优良品种的遗传特性24．将患有线粒体遗传病的妇女的卵母细胞的细胞核移植到健康妇女捐献的去核卵母细胞中，再利用胚胎工程技术，可最终产下了健康的“三亲婴儿”。下列相关叙述错误的是（）A．该过程需要用到体外受精和胚胎移植等胚胎工程技术B．在核移植过程中，用物理或化学方法激活重构胚，使其发育为早期胚胎C．卵母细胞捐献者携带的红绿色盲基因可以遗传给“三亲婴儿”D．“三亲婴儿”同时拥有自己父亲、母亲及卵母细胞捐献者的部分基因25．下列有关动物细胞工程的叙述，正确的是（）A．干细胞是从胚胎中分离提取的细胞，都具有发育成完整个体的能力B．进行胚胎移植前，要对供体和受体进行免疫检查，以防止发生免疫排斥反应C．将纯化的病毒抗原蛋白反复注射到小鼠体内即可从其血清中分离得到单克隆抗体D．若要对胚胎进行性别鉴定，通常选择囊胚中的滋养层细胞进行DNA分析26．下列关于“DNA的粗提取和鉴定”实验的原理的叙述，错误的是（）A．利用DNA不溶于酒精溶液，而蛋白质能溶于酒精溶液，可将DNA与蛋白质分离B．利用高温能使蛋白质变性，却对DNA没有影响的特性，可将DNA与蛋白质分离C．在用预冷的酒精沉淀DNA时，要用玻璃棒沿一个方向搅拌，防止DNA断裂D．利用DNA能溶于2mol/L的NaCl溶液，可将提取的丝状物或沉淀物溶解于NaCl溶液中27．下图为不同限制性核酸内切膀识别的序列及切割位置（箭头所指），下列叙述错误的是（）A．图示4种限制性核酸内切酶均不能够识别和切割RNA分子内的核苷酸序列B．若DNA上的碱基随机排列，NotI限制性核酸内切酶切割位点出现频率较其他三种限制性核酸内切酶高C．酶切时使用两种限制酶同时处理是为了防止质粒和含目的基因的外源DNA片段自身环化D．用酶BglII切出的目的基因与酶BamHI切割的质粒重组后，则不能再被这两种酶切开28．某质粒上有SalⅠ、HindⅢ、BamHⅠ三种限制酶切割位点，同时还含有抗四环素基因和抗氨苄青霉素基因，获得此质粒的农杆菌表现出对两种抗生素的抗性。利用此质粒获得转基因抗盐烟草的过程，如下图所示。请据XIA图分析下列表述错误的是（）A．在构建重组质粒时，选用HindⅢ和SalⅠ两种酶切割目的基因的两端及质粒可防止目的基因和质粒的自我环化B．若转基因抗盐烟草幼苗中检测出现了抗盐基因的DNA，不能说明烟草幼苗有抗盐特性C．用分别含有氨苄青霉素和四环素的培养基筛选农杆菌时，发现含有目的基因的农杆菌不能在含青霉素的培养基上生长，能在含四环素的培养基上生长D．利用植物组织培养技术培育转基因抗盐烟草植株，依据的原理是高度分化的植物细胞具有发育成完整植株的能力29．微生物在食品和饮料生产中发挥了重要作用。下表中叙述正确的是（）选项应用主要菌种发酵说明A味精谷氨酸棒状杆菌发酵得到的谷氨酸就是提味增鲜的味精B酱油霉菌（黑曲霉）将原料中的蛋白质分解成多肽和氨基酸，经淋洗调制而成C醋醋酸菌O2和糖类都充足时分解糖类产生乙酸，缺少糖源则不能产生乙酸D啤酒酵母菌主发酵阶段糖分解和代谢物生成后，需低温、通气环境进行后发酵A．A B．B C．C D．D30．下列关于PCR扩增DNA片段及电泳鉴定的叙述，错误的是（）A．在凝胶中DNA分子的迁移速率主要和DNA分子的大小、构象等有关B．耐高温的DNA聚合酶只能从引物的5'C．作为引物的脱氧核苷酸序列必须不断的加进每一次的扩增当中D．PCR扩增产物一般可通过琼脂糖凝胶电泳来进行鉴定二、综合题31．为提高作物产量，种植业往往使用大量的氮素化肥，既增加了生产成本，又易造成环境污染。自生固氮菌营独立生活，为改变这种现状带来了希望。科研人员进行了土壤中自生固氮菌的分离和固氮能力测定的研究，部分实验流程如下图。回答下列问题：（1）土壤是微生物的天然培养基，该培养基能为微生物的生长提供的四大营养物质分别是。步骤④所用的接种工具是。（2）下表为两种培养基的配方，步骤④应选其中的培养基。培养基类型培养基组分培养基甲甘露醇、KH2PO4、MgS培养基乙甘露醇、KH2PO4、MgS（3）纯化培养时，需同时进行未接种培养基的培养，目的是。（4）④的平板上统计结果数一般用表示（“菌落数”或者“活菌数”），一般选择数目在范围的平板上计数。若甲、乙研究员同时做这个实验，甲统计的菌落数分别是90、178、259、390；乙统计的菌落数分别是125、132、135、128，则每克土壤中含有的固氮菌为个，运用这种方法统计的结果往往较实际值。原因是。三、非选择题组32．细胞工程根据操作对象的不同，可分为植物细胞工程和动物细胞工程两大领域。请回答以下相关问题：Ⅰ.科学家利用植物体细胞杂交技术成功获得了番茄-马铃薯杂种植株，其培育过程如下图所示：（1）番茄细胞和马铃薯细胞融合成功的标志是，与图示过程相比，诱导动物细胞融合所特有的方法是。（2）图示步骤③④利用的细胞工程技术是，该技术的原理是。（3）从步骤③到步骤④需要更换新的培养基，其原因是。（4）实验前必须给小鼠甲注射病毒A，该处理的目的是。（5）为了得到能产生抗病毒A的单克隆抗体的杂交瘤细胞，需要进行筛选。图中筛选1所采用的培养基属于，使用该培养基进行细胞培养的结果是，图中筛选2所依据的基本原理是。（6）若要使能产生抗病毒A的单克隆抗体的杂交瘤细胞大量增殖，可采用的方法有和。四、综合题33．我国科学家已经成功建立了小鼠单倍体胚胎干细胞系。相比传统的胚胎干细胞，其具有纯合子的特色，即能够从基因型直接显示表型。如下图是获得孤雄单倍体胚胎干细胞系的两种方式，请回答下列相关问题：（1）方法一中，研究人员需对实验小鼠注射促性腺激素，使其，从而获得更多的卵母细胞。从卵巢中采集到的卵母细胞需在体外培养到期，然后通过去核。（2）方式二是通过精子与卵子的受精作用“替代”核移植技术，受精作用过程中和会发生生理反应防止多精入卵。在核融合之前，剔除卵细胞的，然后就得到了只含来自精子的染色体组的胚胎干细胞，再通过相同的体外培养技术获得单倍体胚胎干细胞系，单倍体胚胎干细胞在体外培养时需要的气体条件是。（3）我国科研人员通过细胞融合技术将小鼠孤雌单倍体干细胞和大鼠孤雄单倍体干细胞融合，创造出一种新型的干细胞-异种杂合胚胎干细胞。此小鼠—大鼠杂交细胞中通常含有个染色体组，该技术突破了有性杂交的局限，使成为可能。34．赖氨酸是人体细胞不能合成的必需氨基酸。科学家把某种必需氨基酸含量多的蛋白质编码基因（R）导入玉米中，使玉米中赖氨酸的含量提高30%。据下图回答下列问题。（1）利用PCR技术扩增R基因时，需要在一定的缓冲液中才能进行，其中需要加入酶和激活该酶所需的。为了特异性扩增R基因序列，需根据设计特异性引物。（2）在构建基因表达载体时，若为了避免R基因和质粒的自连或反向连接，提高重组效率，应该选择的限制酶是。（3）随着转化方法的突破，农杆菌侵染玉米这种单子叶植物也取得了成功。科研人员从新鲜的玉米叶片上取下的圆形小片与农杆菌共培养，当农杆菌侵染玉米细胞后，能将上的T-DNA转移到被侵染的细胞，并且将其整合到。（4）检测R基因是否表达的方法是。（5）在基因工程中若要培养转基因小鼠，将基因表达载体导入受体细胞常用的方法是，常用的受体细胞是。

答案解析部分1．【答案】D【解析】【解答】A、淀粉属于生物大分子物质，水解为小分子糖有利于发酵过程中酵母菌对糖类的利用，A正确；B、煎煮是进行消毒，除去发酵产品中的酵母菌等微生物，利于储藏，B正确；C、“开耙”（搅摔）是为了让酵母菌进行有氧呼吸，增加酵母菌的数量，有利于活化酵母，C正确；D、黄酒酿制过程中不产生亚硝酸盐，不需要检测亚硝酸盐含量，D错误。故答案为：D。

【分析】果酒的制作离不开酵母菌，酵母菌是兼性厌氧微生物，在有氧条件下，酵母菌进行有氧呼吸，大量繁殖，把糖分解成二氧化碳和水；在无氧条件下，酵母菌能进行酒精发酵。故果酒的制作原理是酵母菌无氧呼吸产生酒精，酵母菌最适宜生长繁殖的温度范围是18～30℃；生产中是否有酒精的产生，可用酸性重铬酸钾来检验，该物质与酒精反应呈现灰绿色。2．【答案】C【解析】【解答】A、制作果酒过程中产生的二氧化碳和制作果醋过程中产生的醋酸都会使发酵液的pH下降，A正确；B、加水的目的是对酒进行稀释，避免高浓度酒精导致醋酸菌失水过多死亡，B正确；C、“衣”位于变酸的酒表面，是由原酒中的醋酸菌大量繁殖形成的，C错误；D、搅拌有利于酒精与醋酸菌充分接触，还可以增加溶液中的溶解氧，利于醋酸菌进行醋酸发酵，D正确。故答案为：C。

【分析】1、果酒的制作离不开酵母菌，酵母菌是兼性厌氧微生物，在有氧条件下，酵母菌进行有氧呼吸，大量繁殖，把糖分解成二氧化碳和水；在无氧条件下，酵母菌能进行酒精发酵。故果酒的制作原理是酵母菌无氧呼吸产生酒精，酵母菌最适宜生长繁殖的温度范围是18～30℃；生产中是否有酒精的产生，可用酸性重铬酸钾来检验，该物质与酒精反应呈现灰绿色。

2、果醋制作中起到主要作用的微生物是醋酸菌，醋酸菌是一种好氧细菌，只有当氧气充足时，才能进行旺盛的生理活动，其代谢类型属于异养需氧型。当氧气、糖源都充足时，醋酸菌将葡萄汁中的糖分解为醋酸；当缺少糖源时，醋酸菌将乙醇变为乙醛，再将乙醛变为醋酸。醋酸菌的最适生长温度为30～35℃。3．【答案】B【解析】【解答】A、毛霉能够产生蛋白酶，该蛋白酶能够将豆腐中的蛋白质分解成小分子肽和氨基酸，A正确；B、腐乳外部的“皮”是前期发酵时毛霉等微生物在豆腐表面上生长的菌丝（匍匐菌丝)，对人体无害，B错误；C、用盐腌制腐乳的过程中，要控制盐的用量，盐的浓度过高会影响口味，过低则不足以抑制杂菌的生长，导致豆腐腐败，C正确；D、腐乳的制作过程主要是：让豆腐上长出毛霉→加盐腌制→加卤汤装瓶→密封腌制，整个过程中应注意避免杂菌污染，D正确。故答案为：B。

【分析】参与腐乳制作的微生物主要是毛霉，其新陈代谢类型是异养需氧型。腐乳制作的原理：毛霉等微生物产生的蛋白酶能将豆腐中的蛋白质分解成小分子的肽和氨基酸；脂肪酶可将脂肪分解成甘油和脂肪酸。4．【答案】C【解析】【解答】A、制作泡菜时，通常用白酒擦拭泡菜坛，以达到消毒的目的，A正确；B、陈泡菜水中有乳酸菌，因此，加入“陈泡菜水”的作用是提供乳酸菌菌种，从而缩短发酵的时间，B正确；C、温度过高、食盐用量过低、腌制时间过短，容易造成细菌大量繁殖，亚硝酸盐含量增加，C错误；D、若制作的泡菜咸而不酸，是因为大量的食盐抑制了乳酸菌的发酵过程，从而导致酸味无法产生，D正确。故答案为：C。

【分析】1、泡菜发酵的实验原理：（1）乳酸菌在无氧条件下，将糖分解为乳酸。（2）利用乳酸菌制作泡菜的过程中会引起亚硝酸盐的含量的变化。温度过高，食盐用量不足10%、腌制时间过短，容易造成细菌大量繁殖，亚硝酸盐含量增加。一般在腌制10天后，亚硝酸盐的含量开始下降。

2、泡菜的制作过程：按照清水与盐的质量比为10：1的比例配制盐水，将盐、水煮沸冷却。将经过预处理的新鲜蔬菜混合均匀，装入泡莱坛内，装至半坛时，放入蒜瓣、生姜及其他香辛料，继续装至八成满，再徐徐注入配制好的盐水，使盐水没过全部菜料，盖好坛盖。向坛盖边沿的水槽中注满水，以保证坛内乳酸菌发酵所需的无氧环境。在发酵过程中要注意经常向水槽中补充水。发酵时间长短受室内温度的影响。5．【答案】D【解析】【解答】A、为了防止杂菌污染，应将配制好的选择培养基分装到锥形瓶中再进行高压蒸汽灭菌，A错误；B、倒平板、接种均需要在酒精灯火焰旁进行，配制培养基不需要在酒精灯火焰旁进行，B错误；C、牛肉膏蛋白胨培养基需要利用湿热灭菌法（例如高压蒸汽灭菌法）进行灭菌，C错误；D、实验中所使用的微量离心管、细胞培养瓶等可以使用干热灭菌法进行灭菌，以防止杂菌污染，D正确。故答案为：D。

【分析】实验室常用的灭菌方法：

（1）灼烧灭菌：将微生物的接种工具，如接种环、接种针或其他金属工具，直接在酒精灯火焰的充分燃烧层灼烧，可以迅速彻底地灭菌，此外，在接种过程中，试管口或瓶口等容易被污染的部位，也可以通过火焰燃烧来灭菌。

（2）干热灭菌：能耐高温的，需要保持干燥的物品，如玻璃器皿（吸管、培养皿）和金属用具等，可以采用这种方法灭菌。

（3）高压蒸汽灭菌：将灭菌物品放置在盛有适量水的高压蒸汽灭菌锅内，为达到良好的灭菌效果，一般在压力为100kPa，温度为121℃的条件下，维持15～30min。6．【答案】B【解析】【解答】A、过程①紫外线照射的作用是利用物理因素诱导发生基因突变，由于突变的不定向性，被照射的三孢布拉霉负菌可能有少数能在含β－紫罗酮的培养基上生长，A正确；B、橙红色的菌体为高产菌，进行③操作时，应选择较大的橙红色菌落中的菌株继续接种培养，B错误；C、图乙中的菌落均匀分布于平板，说明接种方法是稀释涂布平板法，C正确；D、由题意“未突变菌不能在含有β-紫罗酮的培养基上生长”可知，含β-紫罗酮的培养基属于选择培养基，D正确。故答案为：B。

【分析】图中过程①表示利用紫外线诱导基因突变，过程②表示微生物接种（结合图乙可知，平板中的菌落均匀分布，应采用了稀释涂布平板法），过程③④表示选择培养，过程⑥表示浓缩。7．【答案】C【解析】【解答】A、若要判断选择培养基是否起到了选择作用，需设置接种了的没有选择作用的细菌通用的牛肉膏蛋白胨培养基作对照，A错误；B、将土样进行10倍稀释后，取1mL上清液加入盛有9mL无菌水的试管中依次等比稀释，B错误；C、将涂布器在火焰上灼烧，待其上的酒精燃尽后，必须先冷却再进行涂布平板操作，防止高温杀死菌种，C正确；D、待长成的菌落稳定后，可直接观察，无需在无菌条件下进行尿素分解菌菌落的观察和计数，D错误。故答案为：C。

【分析】1、培养基选择分解尿素的微生物的原理：培养基的氮源为尿素，只有能合成脲酶的微生物才能分解尿素，以尿素作为氮源。缺乏脲酶的微生物由于不能分解尿素，缺乏氮源而不能生长发育繁殖，而受到抑制，所以用此培养基就能够选择出分解尿素的微生物。

2、分解尿素的细菌的鉴定细菌合成的脲酶将尿素分解成氨，氨会使培养基的碱性增强。在以尿素为唯一氮源的培养基中加入酚红指示剂培养细菌，若指示剂变红，可确定该种细菌能够分解尿素。8．【答案】D【解析】【解答】A、划线接种不能用于菌落的计数，A错误；B、刚果红相当于指示剂，要用以纤维素为唯一碳源的选择培养基，B错误；C、由于刚果红染料与纤维素形成红色复合物，因此出现以因纤维素降解菌为中心的透明圈，菌落直径与透明圈直径比值越小，分解纤维素的能力越强，故答案为：菌落直径与周围透明圈直径比值小的菌落进行纯化，C错误；D、滤纸的主要成分是纤维素，可以通过此操作获得能够分解纤维素的微生物，D正确。故答案为：D。

【分析】实验过程：

①土壤取样：采集土样时，应选择富含纤维素的环境。

②梯度稀释：用选择培养基培养，以增加纤维素分解菌的浓度。

③涂布平板：将样品涂布于含刚果红的鉴别纤维素分解菌的固体培养基上。

④挑选产生中心透明圈的菌落：产生纤维素酶的菌落周围出现透明圈，从产生明显的透明圈的菌落上挑取部分细菌，并接种到纤维素分解菌的选择培养基上，在30～37℃条件下培养，可获得较纯的菌种。9．【答案】A【解析】【解答】A、发酵罐内发酵是发酵工程的中心环节，发酵罐培养的环境条件会影响微生物的生长繁殖，也会影响微生物代谢产物的形成，A错误；B、可通过诱变育种、细胞工程、基因工程等方法选育出性状优良的工程菌并进行扩大培养，从而获得人类有用的产品，B正确；C、在发酵工程的发酵环节中，发酵条件不仅影响微生物的生长繁殖，也会通过影响酶的活性影响微生物的代谢途径，C正确；D、单细胞蛋白是指利用发酵工程获得的大量的微生物菌体，可作为食品添加剂，例如用酵母菌生产的单细胞蛋白可作为食品添加剂，甚至制成“人造肉”供人们直接使用；也可制成微生物饲料，例如在青贮饲料中添加乳酸菌，可以提高饲料的品质，动物食用后能提高免疫力，D正确。故答案为：A。

【分析】发酵工程的基本环节：

（1）菌种的选育：性状优良的菌种可以从自然界中筛选出来，也可以通过诱变育种或基因工程育种获得。

（2）扩大培养：在发酵之前还需要对菌种进行扩大培养。

（3）培养基的配制：在菌种确定之后，要选择原料制备培养基。在生产实践中，培养基的配方要经过反复试验才能确定。

（4）灭菌：培养基和发酵设备都必须经过严格的灭菌。

（5）接种：将菌种接种到发酵罐培养液中。

（6）发酵：这是发酵工程的中心环节。①在发酵过程中，要随时检测培养波中的微生物数量、产物浓度等，以了解发酵进程。②要及时添加必需的营养组分，要严格控制温度、pH和溶解氧等发酵条件。

（7）产品的分离、提纯：①如果发酵产品是微生物细胞本身，可在发酵结束之后采用过滤沉淀等方法将菌体分离和干燥，即得到产品。②如果产品是代谢物，可根据产物的性质采取适当的提取、分离和纯化措施来获得产品。10．【答案】C【解析】【解答】A、酵母菌一般不能直接将淀粉转化为酒精，酿酒的原理是酵母菌可以将葡萄糖转化为酒精和CO2，A错误；B、脱落酸抑制细胞分裂、抑制植物的生长、也能抑制种子萌发，故用脱落酸溶液浸泡大麦种子不能促进α-淀粉酶的合成，用赤霉素溶液浸泡大麦种子可以有效促进α-淀粉酶合成，增加麦芽汁中可发酵糖的含量，B错误；C、泡盖的形成是由于向发酵池中通入无菌空气后，酵母菌有氧呼吸产生大量的CO2，形成的25～30cm厚气泡层，能将麦芽汁与空气隔绝，C正确；D、可以用稀释涂布法调查发酵液中酵母菌的数量，不能用平板划线法调查酵母菌的数量，D错误。故答案为：C。

【分析】1、果酒的制作离不开酵母菌，酵母菌是兼性厌氧微生物，在有氧条件下，酵母菌进行有氧呼吸，大量繁殖，把糖分解成二氧化碳和水；在无氧条件下，酵母菌能进行酒精发酵。故果酒的制作原理是酵母菌无氧呼吸产生酒精，酵母菌最适宜生长繁殖的温度范围是18～30℃；生产中是否有酒精的产生，可用酸性重铬酸钾来检验，该物质与酒精反应呈现灰绿色。

2、稀释涂布平板法常用来统计样品中活菌的数目，当样品的稀释度足够高时，培养基表面生长的个单菌落，来源于样品稀释液中的一个活菌。通过统计平板上的菌落数，就能推测出样品中大约含有多少活菌。为了保证结果准确，一般选择菌落数为30～300的平板进行计数。11．【答案】C【解析】【解答】A、甲、乙是二倍体植株，通过体细胞杂交技术获得的目的植株是四倍体，故目的植株相对于甲、乙而言发生了染色体数目变异，A正确；B、④是筛选获得的具有耐盐特性的胚状体，但不能确定其是高产还是低产，故需要进一步筛选，B正确；C、①过程利用了酶的专一性，即利用纤维素酶和果胶酶获取原生质体的过程，②过程诱导原生质体的融合应用了细胞膜具有流动性原理，C错误；D、①过程的目的是破坏细胞壁，将植物细胞置于适当浓度的低渗溶液中，有利于提高纤维素酶和果胶酶的处理效果，使细胞壁因吸水而被涨破，D错误。故答案为：C。

【分析】植物体细胞杂交技术：

1、植物体细胞杂交技术：就是将不同种的植物体细胞原生质体在一定条件下融合成杂种细胞，并把杂种细胞培育成完整植物体的技术。

2、过程：

（1）诱导融合的方法：物理法包括离心、振动、电刺激等。化学法一般是用聚乙二醇（PEG）作为诱导剂。

（2）细胞融合完成的标志是新的细胞壁的生成。

（3）植物体细胞杂交的终点是培育成杂种植株，而不是形成杂种细胞就结束。

（4）杂种植株的特征：具备两种植物的遗传特征，原因是杂种植株中含有两种植物的遗传物质。

3、意义：克服了远缘杂交不亲和的障碍。

4、题图分析：①是酶解法去除细胞壁，②是诱导原生质体融合，③是杂种细胞，④是经过耐盐培养筛选获得的具有耐盐特性的胚状体。12．【答案】C【解析】【解答】A、在黄花蒿组织培养过程中的再分化阶段必须给予光照，以形成叶绿素，A正确；B、培养基中添加的生长素和细胞分裂素的作用用诱导分裂、分化，启动脱分化、再分化，B正确；C、愈伤组织是一团大而无定形状态的薄壁细胞，C错误；D、青蒿素是从植物黄花蒿的叶片中所提取的一种代谢产物，可大规模栽培组织培养苗以获取药用成分，D正确。故答案为：C。

【分析】1、植物组织培养过程是：离体的植物器官、组织或细胞脱分化形成愈伤组织，然后再分化生成根、芽，最终形成植物体。植物组织培养依据的原理是植物细胞的全能性。愈伤组织的细胞排列疏松而无规则，是一种高度液泡化的呈无定形状态的薄壁细胞。

2、植物细胞工程技术的应用：植物繁殖的新途径（包括微型繁殖，作物脱毒、人工种子等）、作物新品种的培育（单倍体育种、突变体的利用）、细胞产物的工厂化生产。13．【答案】B【解析】【解答】A、蜗牛消化道提取液可用来处理植物细胞的细胞壁，植物细胞壁的主要成分是纤维素和果胶，蜗牛消化道提取液含有纤维素酶和果胶酶，可以去除植物的细胞壁，A正确；B、诱导原生质体融合最常用的方法是聚乙二醇，秋水仙素不能诱导融合，B错误；C、诱导原生质体融合后，只考虑两两融合，会产生三种融合细胞，例如A、B两种细胞的融合，会产生A-A、B-B及A-B三种融合细胞，C正确；D、原生质体融合依靠细胞膜与细胞膜的融合，体现了细胞膜的流动性，D正确。故答案为：B。

【分析】植物体细胞杂交技术：

1、植物体细胞杂交技术：就是将不同种的植物体细胞原生质体在一定条件下融合成杂种细胞，并把杂种细胞培育成完整植物体的技术。

2、过程：

（1）诱导融合的方法：物理法包括离心、振动、电刺激等。化学法一般是用聚乙二醇（PEG）作为诱导剂。

（2）细胞融合完成的标志是新的细胞壁的生成。

（3）植物体细胞杂交的终点是培育成杂种植株，而不是形成杂种细胞就结束。

（4）杂种植株的特征：具备两种植物的遗传特征，原因是杂种植株中含有两种植物的遗传物质。14．【答案】A【解析】【解答】A、若该模型表示核移植技术，A和B表示供体细胞核和去核的卵细胞，则C→D过程表示胚胎体外培养和胚胎移植技术，A错误；B、若此图表示植物体细胞杂交过程，则从A、B原生质体到C融合的原生质体的过程可以用电融合法诱导，B正确；C、若此图为试管牛生产的流程图，则A、B表示获能的精子和MⅡ的卵母细胞，C正确；D、若A、B表示培养液和胚胎干细胞，若在培养液中加入分化诱导因子，则C→D的传代培养过程中有可能出现分化现象，D正确。故答案为：A。

【分析】1、动物体细胞核移植：将动物的一个细胞的细胞核移入一个去掉细胞核的卵母细胞中，使其重组并发育成一个新的胚胎，这个新的胚胎最终发育为克隆动物。

2、植物体细胞杂交技术：就是将不同种的植物体细胞原生质体在一定条件下融合成杂种细胞，并把杂种细胞培育成完整植物体的技术。

15．【答案】B【解析】【解答】A、植物组织培养过程中，需要更换培养基，提高生长素的比例有利于生根，提高细胞分裂素的比例有利于芽的生长，A正确；B、细胞产物的工厂化生产主要是利用促进细胞生长的培养条件，提高总的细胞次生代谢物的含量，但不是提高单个细胞中次生代谢物的含量，B错误；C、由于植物组织培养容易受到培养条件和外界压力（如射线、化学物质等)的影响而产生突变，所以常利用植物组织培养过程中产生的突变体培育新品种，C正确；D、植物微型繁殖具有高效、快速的特点，且为无性繁殖，因而能保持亲本的优良性状，D正确。故答案为：B。

【分析】1、植物组织培养就是在无菌和人工控制的条件下，将离体的植物器官、组织、细胞，培养在人工配制的培养基上，给予适宜的培养条件，诱导其产生愈伤组织、丛芽，最终形成完整的植株。

2、植物细胞工程技术的应用：植物繁殖的新途径（包括微型繁殖，作物脱毒、人工种子等）、作物新品种的培育（单倍体育种、突变体的利用）、细胞产物的工厂化生产。16．【答案】D【解析】【解答】A、基因突变具有不定向，因此对植物的愈伤组织进行诱变处理后，需要进行检测和筛选才能培育出符合要求的作物新品种，A错误；B、将鼠的骨髓瘤细胞与B淋巴细胞融合，需要用选择培养基筛选出杂交瘤细胞，还需进行抗体阳性检测，得出能产生单克隆抗体的杂交瘤细胞，B错误；C、利用植物细胞工程技术培育“萝卜-甘蓝”时，需要筛选出“萝卜-甘蓝”杂种细胞进行培养，C错误；D、植物的快速繁殖往往是无性繁殖，即通过使外植体细胞经历脱分化与再分化过程成为试管苗，不需要进行检测与筛选，D正确。故答案为：D。

【分析】1、单克隆抗体制备流程：先给小鼠注射特定抗原使之发生免疫反应，之后从小鼠脾脏中获取已经免疫的B淋巴细胞；诱导B细胞和骨髓瘤细胞融合，利用选择培养基筛选出杂交瘤细胞；进行抗体检测，筛选出能产生特定抗体的杂交瘤细胞；进行克隆化培养，即用培养基培养和注入小鼠腹腔中培养；最后从培养液或小鼠腹水中获取单克隆抗体。

2、植物体细胞杂交是将不同植物的细胞通过细胞融合技术形成杂种细胞，进而利用植物的组织培养将杂种细胞培育成多倍体的杂种植株。植物体细胞杂交是首先用纤维素酶和果胶酶去除细胞壁，获得原生质体；用物理法（离心、振动、电刺激）或者化学法（聚乙二醇）诱导细胞融合，获得融合的原生质体；原生质体再生出细胞壁，获得杂种细胞；杂种细胞经过脱分化和再分化获得杂种植株。17．【答案】D【解析】【解答】A、诱导动物细胞融合的常用方法之一是灭活病毒诱导法，可见，用灭活的病毒处理供体细胞的目的是促进两细胞融合，A正确；B、克隆猴是非人灵长类，与人类亲缘关系非常接近，研发出的药物用于人类患者出现无效或副作用的几率大大降低，可有缩短药物研发进程，B正确；C、题干中“将组蛋白去甲基化酶的mRNA和组蛋白脱乙酰酶抑制剂注入重构胚”，说明降低组蛋白的甲基化水平，提高组蛋白的乙酰化水平，从而激活重构胚的发育，C正确；D、胚胎移植时进行同期发情处理，是为胚胎移入受体提供相同的生理环境，此时代孕母猴对外来胚胎基本不存在免疫排斥，D错误。故答案为：D。

【分析】1、采集牛卵巢中的卵母细胞，在体外培养到减数第二次分裂中期→通过显微操作去核→去核的卵母细胞高奶牛（供体）→从供体身体某一部位上取体细胞→供体细胞培养→将供体细胞注入去核的卵母细胞→通过电融合法使两细胞融合，供体核进入卵母细胞→得到重构胚→用物理或化学方法激活重构胚，使其完成细胞分裂和发育过程→早期胚胎→将胚胎移入受体（代孕）母牛体内→生出与供体奶牛遗传物质基本相同的犊牛。

2、胚胎移植的生理学基础：

①动物发情排卵后，同种动物的供、受体生殖器官的生理变化是相同的。这就为供体的胚胎移入受体提供了相同的生理环境。

②早期胚胎在一定时间内处于游离状态。这就为胚胎的收集提供了可能。

③受体对移入子宫的外来胚胎不发生免疫排斥反应。这为胚胎在受体的存活提供了可能。

④供体胚胎可与受体子宫建立正常的生理和组织联系，但供体胚胎的遗传特性在孕育过程中不受影响。18．【答案】A【解析】【解答】A、单克隆抗体具有特异性强、灵敏度高的特点，因此利用p30的单克隆抗体与病毒蛋白p30蛋白特异性结合的方法可诊断出病毒感染者，故针对p30的单克隆抗体可用于ASFV早期诊断试剂盒的研发，A正确；B、B淋巴细胞与骨髓瘤细胞的融合除了可以用化学方法诱导外，还可用灭活的病毒进行促进细胞融合，B错误；C、将小鼠B淋巴细胞和骨髓瘤细胞混合，经诱导融合后的细胞不都是杂交瘤细胞，还有B细胞自身融合的细胞、骨髓瘤细胞自身融合的细胞等，C错误；D、动物细胞的体细胞全能性不易体现，在单克隆抗体的制备过程中，需要对杂交瘤细胞进行克隆化培养，D错误。故答案为：A。

【分析】1、单克隆抗体的制备：（1）制备产生特异性抗体的B淋巴细胞：向免疫小鼠体内注射特定的抗原，然后从小鼠脾内获得相应的B淋巴细胞。（2）获得杂交瘤细胞：①将鼠的骨髓瘤细胞与脾细胞中形成的B淋巴细胞融合；②用特定的选择培养基筛选出杂交瘤细胞，该杂种细胞既能够增殖又能产生抗体。（3）克隆化培养和抗体检测。（4）将杂交瘤细胞在体外培养或注射到小鼠腹腔内增殖。（5）提取单克隆抗体：从细胞培养液或小鼠的腹水中提取。

2、单克隆抗体的作用：①作为诊断试剂：（最广泛的用途）具有准确、高效、简易、快速的优点。②用于治疗疾病和运载药物：主要用于治疗癌症，可制成“生物导弹”。

由于单克隆抗体的特异性强，能特异性识别抗原，因此可以把抗癌细胞的单克隆抗体跟放射性同位素、药物等相结合，制成“生物导弹”，借助单克隆抗体的定位导向作用将药物定向带到癌细胞，在原位杀死癌细胞，疗效高，副作用小，位置准确。19．【答案】C【解析】【解答】A、由题干可知，培养消化道上皮细胞是贴壁生长的细胞，因此更易观察判断细胞是否具有接触抑制现象，A正确；B、动物细胞培养常在含有95%空气和5%的CO2混合气体的恒温培养箱中进行，CO2作用是维持培养液的pH值，B正确；C、动物细胞培养过程中，为营造无菌、无毒的培养环境，需要对培养液和所有培养用具进行灭菌处理，以及在无菌环境下操作，并且要定期更换培养液，C错误；D、出现接触抑制时，用胰蛋白酶处理，使之分散成单个细胞，再用离心法收集细胞，制成细胞悬液后，分瓶培养，D正确。故答案为：C。

【分析】动物培养条件：

（1）无菌无毒环境：无菌--对培养液和所有培养用具进行无菌处理；在细胞培养液中添加一定量的抗生素；无毒-一定期更换培养液，防止细胞代谢产物积累对自身造成危害。

（2）营养成分：所需营养物质与体内基本相同，例如需要有糖、氨基酸、促生长因子、无机盐、微量元素等，还需加入血清、血浆等天然成分。

培养基类型：合成培养基（将细胞所需的营养物质按其种类和所需数量严格配制而成的培养基）

（3）温度和pH值：哺乳动物多以36.5±0.5℃为宜，多数细胞生存的适宜pH为7.2～7.4。

（4）气体环境：通常采用培养皿或松盖培养瓶，将其置于含95%空气加5%CO2的混合气体的培养箱中进行培养。O2：是细胞代谢所必需的CO2主要作用是维持培养液的pH。20．【答案】A【解析】【解答】A、小鼠体细胞诱导成CiPS细胞是形态、结构和功能发生稳定性差异的过程，而遗传物质不变，A错误；B、与小鼠成体细胞相比，诱导形成的Cips细胞分化程度较低，全能性较高，B正确；C、这一过程类似于植物细胞的脱分化过程，C正确；D、体细胞转化成CiPS细胞时，类似于脱分化过程，即细胞内部分不表达的基因又恢复为表达状态，D正确。故答案为：A。

【分析】胚胎干细胞

（1）胚胎干细胞简称ES或EK细胞，来源于早期胚胎或原始性腺（即囊胚期的内细胞团）。

（2）特点：具有胚胎细胞的特性，体积较小，细胞核大，核仁明显；在功能上，具有发育的全能性，可分化为成年动物任何一种组织细胞。另一方面，在体外培养条件下，ES细胞可不断增殖而不发生分化，可进行冷冻保存，也可以进行某些遗传改造。

（3）胚胎干细胞的主要用途是：

①可用于研究哺乳动物个体发生和发育规律；

②是在体外条件下研究细胞分化的理想材料。ES细胞在饲养层细胞上或在添加抑制因子的培养液中，能够维持不分化的状态。在培养液中加入分化诱导因子，如牛黄酸、丁酰环腺苷酸等化学物质时，就可以诱导ES细胞向分化，这为揭示细胞分化和细胞凋亡机理提供了有效的手段；

③可以用于治疗人类的某些顽疾，如帕金森综合征、糖尿病、老年痴呆症、肝衰竭、新衰竭、成骨不良；

④培育各种组织器官，用于器官移植，解决供体器官不足和器官移植后免疫排斥的问题。21．【答案】D【解析】【解答】A、如果a是核移植技术，b的产生说明了动物细胞的细胞核具有全能性，A错误；B、如果a是体外受精技术，则形成的b属于有性生殖产生的动物，B错误；C、如果a是胚胎分割技术，b中个体的基因型一定相同，表型由于受到环境影响不一定相同，C错误；D、如果a是基因工程，b是乳腺生物反应器，目的基因表达的产物在雌性动物的乳汁中提取，则需对移植的胚胎进行性别选择，D正确。故答案为：D。

【分析】1、动物细胞核移植技术

（1）动物细胞核移植技术是将动物的一个细胞的细胞核移入一个已经去掉细胞核的卵母细胞中，使其重组并发育成一个新的胚胎，这个新的胚胎最终发育成动物个体．用核移植的方法得到的动物称为克隆动物；其原理是动物细胞核的全能性。

（2）动物细胞核移植可分为胚胎细胞核移植和体细胞核移植：体细胞核移植的难度明显高于胚胎细胞核移植。原因：动物胚胎细胞分化程度低，恢复其全能性相对容易，动物体细胞分化程度高，恢复其全能性十分困难。

2、胚胎移植的基本程序主要包括：①对供、受体的选择和处理（选择遗传特性和生产性能优秀的供体，有健康的体质和正常繁殖能力的受体。用激素进行同期发情处理，用促性腺激素对供体母牛做超数排卵处理）；②配种或人工授精；③对胚胎的收集、检查、培养或保存（对胚胎进行质量检查，此时的胚胎应发育到桑椹或胚囊胚阶段）；④对胚胎进行移植；⑤移植后的检查。22．【答案】D【解析】【解答】A、在自然条件下，受精在输卵管中完成，A错误；B、精子需要获能才能与卵子结合，而卵子排出后要在输卵管内进一步成熟到MII期，才具备与精子受精能力，B错误；C、在囊胚阶段，胚胎的内部开始出现含液体的腔，即囊胚腔，C错误；D、囊胚期的内细胞团将来发育成胎儿的各种组织，滋养层细胞发育成胎膜和胎盘，D正确。故答案为：D。

【分析】胚胎发育的过程：受精卵→卵裂期→桑葚胚→囊胚→原肠胚→幼体。

①卵裂期：细胞进行有丝分裂，数量增加，胚胎总体积不增加。

②桑葚胚：32个细胞左右的胚胎（之前所有细胞都能发育成完整胚胎的潜能属全能细胞）。

③囊胚：细胞开始分化，其中个体较大的细胞叫内细胞团将来发育成胎儿的各种组织；而滋养层细胞将来发育成胎膜和胎盘；胚胎内部逐渐出现囊胚腔（注：囊胚的扩大会导致透明带的破裂，胚胎伸展出来，这一过程叫孵化）。

④原肠胚：内细胞团表层形成外胚层，下方细胞形成内胚层，由内胚层包围的囊腔叫原肠腔（细胞分化在胚胎期达到最大限度）。23．【答案】B【解析】【解答】A、胚胎移植后，经受体孕育的后代的遗传特性与供体保持一致，因为供体胚胎与受体子宫建立的仅是生理和组织上的联系，其遗传物质在孕育过程中不会发生任何变化，A错误；B、采用胚胎分割技术可以获得同卵双胎或多胎，来自同一胚胎的后代具有相同的遗传物质，可以看作动物的无性繁殖，B正确；C、胚胎移植时要求供体母畜必须具备优秀的遗传性能，受体需要身体健康且繁殖能力强，C错误；D、试管牛是采用体外受精、胚胎移植等技术形成的，属于有性生殖的范畴，会发生基因重组，不能保持优良品种的遗传特性，D错误。故答案为：B。

【分析】1、胚胎工程指对动物早期胚胎或配子所进行的多种显微操作和处理技术，如体外受精、胚胎移植、胚胎分割、胚胎干细胞培养等技术。经过处理后获得的胚胎，还需移植到雌性动物体内产生后代，以满足人类的各种需求。

2、胚胎移植的基本程序主要包括：①对供、受体的选择和处理．选择遗传特性和生产性能优秀的供体，有健康的体质和正常繁殖能力的受体，供体和受体是同一物种．并用激素进行同期发情处理，用促性腺激素对供体母牛做超数排卵处理．②配种或人工授精．③对胚胎的收集、检查、培养或保存．配种或输精后第7天，用特制的冲卵装置，把供体母牛子宫内的胚胎冲洗出来（也叫冲卵）．对胚胎进行质量检查，此时的胚胎应发育到桑椹或胚囊胚阶段．直接向受体移植或放入-196℃的液氮中保存．④对胚胎进行移植．⑤移植后的检查．对受体母牛进行是否妊娠的检查。24．【答案】C【解析】【解答】A、“三亲婴儿”的培育过程包括体外受精、早期胚胎培养和胚胎移植等技术，A正确；B、在核移植过程中，需要用物理或化学方法激活核移植产生的重构胚，使其完成发育进程，B正确；C、捐献者携带的红绿色盲基因位于其细胞核内，而捐献者给三亲婴儿提供的是卵母细胞的细胞质，故捐献者携带的红绿色盲基因不能遗传给“三亲婴儿”，C错误；D、该婴儿细胞的核基因由形成受精卵的夫妇提供，质基因由提供去核卵母细胞的妇女提供，D正确。故答案为：C。

【分析】1、动物细胞核移植技术是将动物的一个细胞的细胞核移入一个已经去掉细胞核的卵母细胞中，使其重组并发育成一个新的胚胎，这个新的胚胎最终发育成动物个体．用核移植的方法得到的动物称为克隆动物；其原理是动物细胞核的全能性。

2、线粒体中遗传物质的遗传方式为细胞质遗传（母系遗传）。

25．【答案】D【解析】【解答】A、干细胞是由早期胚胎或原始性腺中分离出来的一类细胞，正常状态下，不具有发育成完整个体的能力，需要核移植，A错误；B、胚胎移植的生理学基础之一是母体子宫对植入胚胎基本无免疫排斥反应，这为胚胎在受体的存活提供了可能，能保证胚胎正常发育，因此进行胚胎移植前，供体和受体不需要进行免疫检查，B错误；C、用纯化的病毒抗原蛋白反复注射到小鼠体内，使其产生免疫反应，以获得相应的B细胞，从小鼠血清中分离的抗体数量少，不是单克隆抗体，C错误；D、滋养层细胞将来发育成胎膜胎盘，胚胎移植前，可取囊胚的滋养层细胞进行性别鉴定，不会影响胚胎的发育，D正确。故答案为：D。

【分析】1、胚胎工程指对动物早期胚胎或配子所进行的多种显微操作和处理技术，如体外受精、胚胎移植、胚胎分割、胚胎干细胞培养等技术。经过处理后获得的胚胎，还需移植到雌性动物体内产生后代，以满足人类的各种需求。

2、胚胎发育过程：（1）卵裂期：细胞进行有丝分裂，数量增加，胚胎总体积不增加；（2）桑椹胚：32个细胞左右的胚胎，之前所有细胞都能发育成完整胚胎的潜能，属全能细胞；（3）囊胚：细胞开始分化，其中个体较大的细胞叫内细胞团，将来发育成胎儿的各种组织；而滋养层细胞将来发育成胎膜和胎盘；胚胎内部逐渐出现囊胚腔。注：囊胚的扩大会导致透明带的破裂，胚胎伸展出来，这一过程叫孵化；（4）原肠胚：内细胞团表层形成外胚层，下方细胞形成内胚层，由内胚层包围的囊腔叫原肠腔。

3、胚胎移植的生理学基础：

①动物发情排卵后，同种动物的供、受体生殖器官的生理变化是相同的。这就为供体的胚胎移入受体提供了相同的生理环境。

②早期胚胎在一定时间内处于游离状态。这就为胚胎的收集提供了可能。

③受体对移入子宫的外来胚胎不发生免疫排斥反应。这为胚胎在受体的存活提供了可能。

④供体胚胎可与受体子宫建立正常的生理和组织联系，但供体胚胎的遗传特性在孕育过程中不受影响。26．【答案】B【解析】【解答】A、DNA不溶于酒精溶液，但细胞中的某些蛋白质溶于酒精，可利用这个特性将DNA与蛋白质分离，A正确；B、高温能使蛋白质、DNA变性，蛋白质在60～80℃发生变性，DNA在80℃以上变性，B错误；C、在用预冷的酒精沉淀DNA时，要用玻璃棒沿一个方向搅拌，为了防止丝状的DNA搅碎，有利于DNA絮状物的挑出，C正确；D、DNA在不同浓度NaCl溶液中溶解度不同，DNA在2mol/L的NaCl溶液中的溶解度最大，可利用此特性将提取的丝状物或沉淀物溶解于NaCl溶液中，D正确。故答案为：B。

【分析】DNA粗提取和鉴定的过程：

（1）实验材料的选取：凡是含有DNA的生物材料都可以考虑，但是使用DNA含量相对较高的生物组织，成功的可能性更大。

（2）破碎细胞，获取含DNA的滤液：

动物细胞的破碎比较容易，以鸡血细胞为例，在鸡血细胞液中加入一定量的蒸馏水，同时用玻璃棒搅拌，过滤后收集滤液即可。如果实验材料是植物细胞，需要先用洗涤剂溶解细胞膜。例如，提取洋葱的DNA时，在切碎的洋葱中加入一定的洗涤剂和食盐，进行充分的搅拌和研磨，过滤后收集研磨液。

（3）去除滤液中的杂质：

方案一的原理是DNA在不同浓度NaCl溶液中溶解度不同；

方案二的原理是蛋白酶分解蛋白质，不分解DNA；

方案三的原理是蛋白质和DNA的变性温度不同。

（4）DNA的析出与鉴定

①将处理后的溶液过滤，加入与滤液体积相等、冷却的酒精溶液，静置2～3min，溶液中会出现白色丝状物，这就是粗提取的DNA．用玻璃棒沿一个方向搅拌，卷起丝状物，并用滤纸吸取上面的水分。

②取两支20mL的试管，各加入物质的量浓度为2mol/L的NaCl溶液5mL，将丝状物放入其中一支试管中，用玻璃棒搅拌，使丝状物溶解。然后，向两支试管中各加入4mL的二苯胺试剂。混合均匀后，将试管置于沸水中加热5min，待试管冷却后，比较两支试管溶液颜色的变化，看看溶解有DNA的溶液是否变蓝。27．【答案】B【解析】【解答】A、酶具有专一性，限制酶是专门切割DNA序列中一定部位的酶，所以图示4种限制性核酸内切酶均不能够识别和切割RNA分子内的核苷酸序列，A正确；B、由于NotI限制性核酸内切酶识别的序列比其他三种酶的序列长，若DNA上的碱基随机排列，NotI限制性核酸内切酶切割位点出现频率较其他三种限制性核酸内切酶低，B错误；C、两种不同的限制酶可产生不同的黏性末端，所以使用两种限制酶同时处理是为了防止质粒和含目的基因的外源DNA片段自身环化，C正确；D、用酶BglⅡ切出的目的基因与酶BamHⅠ切割的质粒重组后，重组DNA分子序列为，6个脱氧核苷酸对序列既不能被限制酶BglⅡ识别，也不能被BamHⅠ识别，所以不可能被这两种酶切开，D正确。故答案为：B。

【分析】基因工程的工具：

（1）限制酶：能够识别双链DNA分子的某种特定核苷酸序列，并且使每一条链中特定部位的两个核苷酸之间的磷酸二酯键断裂。

（2）DNA连接酶：连接的是两个核苷酸之间的磷酸二酯键。

（3）运载体：常用的运载体：质粒、噬菌体的衍生物、动植物病毒。28．【答案】C【解析】【解答】A、在构建重组质粒时，选用HindⅢ和Sall两种不同的限制酶切割目的基因的两端及质粒可防止目的基因和质粒的自我环化，A正确；B、若转基因抗盐烟草幼苗中检测出现了抗盐基因的DNA，只能说明烟草幼苗细胞中含有抗盐基因，该基因正确表达为相关蛋白，可能使烟草幼苗表现出抗盐特性，B正确；C、所给的限制酶在质粒上的切割位点都位于抗四环素基因的部位，如果目的基因插入到质粒中，得到重组质粒，则含重组质粒的农杆菌只含有完整的抗氨苄青霉素基因，不含完整的抗四环素基因（被目的基因破坏)，则含有目的基因的农杆菌不能在含四环素的培养基上生长，C错误；D、植物组织培养技术依据的原理是植物细胞的全能性，D正确。故答案为：C。

【分析】农杆菌转化法（约80%的转基因植物都是用这种方法获得的）

1、农杆菌转化法的具体过程：

（1）利用土壤的Ti质粒构建基因表达载体，即将目的基因整合到土壤农杆菌的Ti质粒上。

（2）将整合了目的基因的Ti质粒导入土壤农杆菌细胞内。

（3）利用土壤农杆菌感染植物细胞，该过程实际上是将含有目的基因的土壤农杆菌Ti质粒导入植物细胞内。

（4）含有目的基因的土壤农杆菌Ti质粒进入植物细胞后，可以把自己的一段基因整合到细胞核中的染色体上，这段基因中包含了目的基因。

2、原理：农杆菌中的Ti质粒上的T-DNA可转移至受体细胞，并且整合到受体细胞染色体的DNA上。根据农杆菌的这一特点，如果将目的基因插入到Ti质粒的T-DNA上，通过农杆菌的转化作用，就可以把目的基因整合到植物细胞中染色体的DNA上。

3、农杆菌特点：易感染双子叶植物和裸子植物，对单子叶植物没有感染力；Ti质粒的T-DNA可转移至受体细胞，并整合到受体细胞的染色体上。

4、转化：目的基因插入Ti质粒的T-DNA上农杆菌→导入植物细胞→目的基因整合到植物细胞染色体上→目的基因的遗传特性得以稳定维持和表达。29．【答案】B【解析】【解答】A、发酵得到谷氨酸经过一系列处理制成谷氨酸钠是味精，A错误；B、酱油由霉菌（黑曲霉）将原料中的蛋白质分解成多肽和氨基酸，经淋洗调制而成，B正确；C、醋酸菌在缺少糖源时，可以直接将乙醇转化为乙醛，再将乙醛变为乙酸，C错误；D、啤酒发酵过程中，主发酵阶段糖分解和代谢物生成后，需低温、密闭环境进行后发酵，D错误。故答案为：B。

【分析】1、酿酒，选用异养厌氧型（酒精发酵型）微生物，利用无氧呼吸，获取代谢产物；

2、制醋，选用醋酸杆菌（异养需氧型），在有氧条件下将酒精氧化成醋酸；

3、做腐乳选用霉菌（毛霉、根霉），利用毛霉或根霉中的淀粉酶和蛋白酶将豆腐中的淀粉、蛋白质水解为糖、多肽和氨基酸；

4、做泡菜，选用乳酸菌（异养厌氧型）在密闭条件下，利用乳酸菌的发酵作用，发酵产物乳酸不断积累，抑制其他菌的活动；

5、利用放线菌、霉菌生产抗生素；

6、转基因工程菌的培养，获得特殊代谢产物或菌体、治理环境污染。30．【答案】B【解析】【解答】A、DNA分子在凝胶中的迁移速率与凝胶的浓度、DNA分子的大小和构象有关，一般DNA分子越大，迁移速度越慢，A正确；B、耐高温的DNA聚合酶只能从引物的3′端开始连接脱氧核苷酸，B错误；C、模板链只要加入一次，引物片段必须不断加入，DNA聚合酶、DNA连接酶也可以反复使用，C正确；D、PCR扩增产物，需要进行鉴定，一般选用琼脂糖凝胶电泳，D正确；故答案为：B。

【分析】1、PCR原理：在高温作用下，打开DNA双链，每条DNA单链作为母链，以4中游离脱氧核苷酸为原料，合成子链，在引物作用下，DNA聚合酶从引物3'端开始延伸DNA链，即DNA的合成方向是从子链的5'端自3'端延伸的。实际上就是在体外模拟细胞内DNA的复制过程。DNA的复制需要引物，其主要原因是DNA聚合酶只能从3′端延伸DNA链。

2、DNA分子具有可解离的基团，在一定的pH下，这些基团可以带上正电荷或负电荷。在电场的作用下，这些带电分子会向着与它所带电荷相反的电极移动，这个过程就是电泳。PCR的产物一般通过琼脂糖凝胶电泳来鉴定。在凝胶中DNA分子的迁移速率与凝胶的浓度、DNA分子的大小和构象等有关。31．【答案】（1）水、碳源、氮源、无机盐；涂布器（2）乙（3）检测培养过程中培养基是否被杂菌污染（4）菌落数；1.3×107；小；当两个或多个细胞连在一起时，只能观察计数为一个菌落【解析】【解答】（1）培养基的主要成分是水、碳源、氮源、无机盐，土壤是微生物的天然培养基，也能为微生物的生长提供这些营养物质。步骤④的涂布方法是稀释涂布平板法，所用的接种工具是涂布器。（2）培养基甲不含琼脂，为液体培养基，不能用于涂布平板，故步骤④应选其中的培养基乙。（3）纯化培养时，需同时进行未接种培养基的培养，目的是检测培养过程中培养基是否被杂菌污染。（4）稀释涂布平板法是将待分离的菌液经过大量稀释后，均匀涂布在培养皿表面，经培养后可形成单个菌落，在统计结果数一般用菌落数表示。甲研究员的4个平板菌落数差别较大，可能操作出现问题，乙研究员的4个平板菌落数据差别不大，且均符合计数要求。将土壤10g加入90mL无菌水中，稀释了10倍，步骤③中的稀释梯度分别为10、100、1000倍，故步骤③将土壤悬浮液稀释了1000倍，整个过程共稀释了10000倍，因此每克土壤中含有的固氮菌为（125+132+135+128）÷4÷0.1×104=1.3×107个，运用稀释涂布平板法统计的结果往往较实际值偏小的原因是当两个或多个细胞连在一起时，只能观察计数为一个菌落。

【分析】释涂布平板计