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文档简介

动物实验技术脓毒症什么是脓毒症?脓毒症是一种由感染引起全身炎症反应综合症,常见于严重创伤或感染性疾病的患者。发病原因包括细菌、真菌、病毒及寄生虫等引起的感染,导致机体炎症反应及免疫调节失衡。疾病类型分为脓毒症、严重脓毒症和脓毒性休克。脓毒症(Sepsis)脓毒症发生率很高,在我国约有568万脓毒症病例,其中约有58万人属于脓毒症急性肾损伤患者,死亡率达28.6%-70.2%,脓毒症的病死率已经超过心肌梗死,严重威胁患者生命。2023年,中国最新脓毒症流行病学研究显示,2017—2019年发生的近600余万例死亡中,脓毒症相关死亡占比13.1%。在脓毒症相关死亡中,228852例(28.4%)发生在住院期间,且院内死亡比例逐年上升。因此脓毒症模型的建立有助于人们更好的研究脓毒症治疗方法,便于获得更早的诊断并采取干预措施,降低死亡率并改善脓毒症患者的预后。目前脓毒症动物模型的建立方法主要有:内毒素(lipopolysaccharide,LPS)注射法,静脉、皮下、肌肉、气管内、腹腔内注射病原体法与盲肠结扎穿刺法(cecalligationandpuncture,CLP)等CLP模型是最接近于人类脓毒症机制的模型,被称为脓毒症模型的“金标准”。CLP模型较为成熟,是脓毒症动物模型建立的最常用方法,非常适宜用于防治脓毒症或脓毒性休克新药的临床前观察。94%的脓毒症模型相关研究使用了啮齿类动物,其中小鼠模型占79%,在制作动物模型时多选用雄性小鼠。脓毒症动物模型的建立CLP造模原理CLP脓毒症模型的建立主要分为两个阶段:盲肠远端结扎和盲肠穿刺首先是手术引发的结扎部位组织变性坏死引起局部炎症反应;01其次是穿孔后使粪便内容物漏入腹膜引起混合性细菌感染及坏死组织处的炎症反应,动物出现典型脓毒症及脓毒症休克的表现。02(1)结扎25%或以下的盲肠死亡率几乎为零,为轻度脓毒症;

盲肠结扎位置是CLP模型中死亡率和疾病严重程度的最主要决定因素。(2)结扎50%~60%的盲肠导致术后死亡率为60%,为中度脓毒症;(3)结扎75%或以上的盲肠导致小鼠在术后2~3d内全部死亡,为重度脓毒症。学习目标知识目标:01在了解脓毒症严重危害的基础上,明确脓毒症动物模型建立的重要意义;了解脓毒症动物模型建立方法,掌握CLP造模原理及其重要性。能力目标:02能熟练完成实验前准备、术中与术后实验动物护理任务;掌握CLP模型建立流程与注意事项;素质目标:03关心关爱实验动物;树立严谨的科研思维,根据任务需求,完成动物疾病模型建立的设计与实施。任务清单01

以班级为单位,每组选派1-2名同学为代表,分享交流CLP模型建立的对照组、实验组设计思路;02依据班级整体设计方案,以组为单位,梳理CLP造模流程,确定本组的实验方案,重点明确盲肠结扎位置与针头型号的选择;明确个人分工;03完成本组CLP模型手术操作,填写实训项目单;04上传本组模型鼠状态,为下一任

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