第十一章基因结构和重组

第十一章基因结构和重组

SupplementsMutantstrainNothingOrnithineCitrullineArginino-ArginineGrowthresponseifnutrientisaddedtominimalmedium

succinate

WildtypeArg++++++Arg-E--++++Arg-F--

-+++Arg-G----++Arg-H-----+

Neurosporacrassa粗糙链孢霉鸟氨酸瓜氨酸精氨酸琥珀酸精氨酸乙酰鸟氨酸酶乙酰鸟氨酸鸟氨酸瓜氨酸鸟氨酸转氨甲酰基酶精氨酸琥珀酸合成酶精氨酸琥珀酸裂解酶精氨酸琥珀酸精氨酸天冬氨酸氨甲酰磷酸Neurosporacrassa乙酰醋酸尿黑酸氧化酶尿黑酸对羟甲基苯丙酮酸对羟甲基苯丙酮酸氧化酶酪氨酸苯丙氨酸转氨酶苯丙氨酸羟化酶苯丙酮酸黑色素3,4二羟苯丙氨酸延胡索酰乙酰乙酸延胡酸乙酰乙酸苯丙氨酸苯丙氨酸羟化酶转氨酶对羟甲基苯丙酮酸氧化酶acid尿黑酸氧化酶酪氨酸对羟甲基苯丙酮酸尿黑酸乙酰醋酸苯丙酮酸黑色素呆小症甲状腺酪氨酸代谢紊乱尿黑酸症脑损害白内障黄疸肝脏肿大肾损害半乳糖激酶1—磷酸半乳糖尿苷二磷酸葡萄糖葡萄糖—1—磷酸尿苷转移酶尿苷二磷酸半乳糖差向异构酶

onegene–onepolypeptidetheory9大家应该也有点累了，稍作休息大家有疑问的，可以询问和交流GeneStructure

generecombinationandcis-transtestandcistronAspergillusnidulans曲霉菌heterokaryon异核体diploidconidia二倍体分生孢子ad16++ad8ad16++ad8ad16++++ad16ad8ad8++++ad16ad16ad8ad8突变型野生型野生型突变型ad16+ad16+++ad8ad8transciscis-transeffectcistron有缺陷有缺陷有缺陷正常野生型突变型plementationtest

BK()

+-++rIIrII+T4T4突变型rII+在不同菌株上的噬菌斑(大而清晰)(小而模糊)(小而模糊)(E、coli)重组测验:r47+×+r104;B,总数;K(),重组子BenzerrII:rIIAandrIIB(twocistrons)互补m1m2++m1+

+m2

m1m2++m1++m2顺式反式顺式反式同一顺反子不同顺反子野生型突变型野生型野生型__无互补互补实验可确定有同一表型效应得两个突变型就是等位得还就是非等位得。(一)重组机制

1、交叉理论(chiasmatatypehypothesis)1909年Janssens并提出了交叉型理论2、断裂愈合模型1937年Darlington提出3、模板选择学说(copychoice)BellingJ、首先提出得,1933年她又撤回了这一假设。4、1948年Hershey提出模板选择学说断裂重接模型和模板选择复制模型得否定断裂重接模型不能解释基因转变和极化子现象模板选择复制模型存在得问题:(1)违背了半保留复制;(2)DNA复制应在S期,重组应在M期,不应同时发生。(3)不能解释3线和4线交换。基因转变GeneconversionP132单倍体菌丝A单倍体菌丝B二倍体合子基因转变(Geneconversion):将真菌中不规则分离现象解释为减数分裂过程中同源染色体联会时,一个基因使相对位置上得基因发生相应得变化所致,因而称为基因转变。HybridDNAmodelbranchmigrationofHollidaystructure

EMofaHollidayJunctionw/afewmeltedbasepairsaroundjunctionTheMeselson-RaddingModelSincetheHollidaymodelproposestwosimultaneoussinglestrandnickstostarteverythingoff,anothermodelwasproposedbyCharlesRaddingandMatthewMeselson、Inthismodel,onlyonestrandinvasionisrequired、双链断裂起始重组模型(P129)在酵母系统得重组研究中,发现载体DNA双链断裂可大大提高同源重组得效率。TherecBCDPathwayofHomologousRebinationPartI:NickingandExchanging细菌同源重组机制RecBCD:AplexenzymeRecBCDhas:Endonucleasesubunits(recBC)thatcut oneDNAstrandclosetoChisequence、DNAhelicaseactivity(recDsubunit)andDNA-dependentATPaseactivityunwindsDNAtogenerateSSregionsActivity2and3linked

recBCDPathwayofHomologousRebination

PartI:NickingandExchangingAnickiscreatedinonestrandbyrecBCDataChi sequence(GCTGGTGG),foundevery5000bp、UnwindingofDNAcontainingChisequenceby recBCDallowsbindingofSSBandrecA、

recApromotesstrandinvasionintohomologous DNA,displacingonestrand、Thedisplacedstrandbase-pairswiththesingle strandleftbehindontheotherchromosome、Thedisplacedandnowpairedstrandisnicked (byrecBCD?)topletestrandexchange、

recBCDPathwayofHomologousRebination

PartII:BranchMigrationandResolutionrecBCDPathwayofHomologousRec、

PartII:BranchMigrationandResolutionNicksaresealed

HollidayJunctionBranchmigration(ruvA+ruvB)ResolutionofHollidayJunction(