紫外可见光谱分析

紫外可见光谱分析第1页，共69页，星期日，2025年，2月5日本章知识体系：1.紫外－可见吸收光谱法基本原理2.光的吸收定律3.紫外－可见分光光度计5.紫外－可见吸收光谱法的应用4.化合物紫外光谱解析第2页，共69页，星期日，2025年，2月5日导言：光的基本性质

光是一种电磁波，具有波粒二象性。光的波动性可用波长λ、频率ν、光速c、波数（cm-1）等参数来描述：

λν=c；波数=1/λ=ν/c

光是由光子流组成，光子的能量：

E=hν=hc/λ（Planck常数：h=6.626×10-34J•S)

※光的波长越短/频率越高,其能量越大。第3页，共69页，星期日，2025年，2月5日物质对光的选择性吸收及吸收曲线

M+热M+hν→M*M+荧光或磷光基态E1（△E）E2激发态ΔE=E2－E1=hν

选择性吸收产生的原因吸收曲线与最大吸收波长λmax第4页，共69页，星期日，2025年，2月5日一、

紫外-可见吸收光谱法定义第一节紫外－可见吸收光谱法基本原理第5页，共69页，星期日，2025年，2月5日二、

紫外-可见吸收光谱

紫外吸收光谱:200~400nm;可见吸收光谱:400~800nm

6第6页，共69页，星期日，2025年，2月5日吸收光谱讨论：1.同一种物质对不同波长光的吸光度不同。吸光度最大处对应的波长称为最大吸收波长λmax2.不同浓度的同一种物质，其吸收曲线形状相似λmax不变。而对于不同物质，它们的吸收曲线形状和λmax则不同。第7页，共69页，星期日，2025年，2月5日3.吸收曲线可以提供物质的结构信息，并作为物质定性分析的依据之一。a不同浓度的同一种物质，在某一定波长下吸光度A有差异，在λmax处吸光度A的差异最大。此特性可作为物质定量分析的依据。b在λmax处吸光度随浓度变化的幅度最大，所以测定最灵敏。吸收曲线是定量分析中选择入射光波长的重要依据。第8页，共69页，星期日，2025年，2月5日4.吸收谱带的强度与分子偶极矩变化、跃迁几率有关，也提供分子结构的信息。5.吸收谱带强度与该物质分子吸收的光子数成正比，定量分析的依据。第9页，共69页，星期日，2025年，2月5日（一）物质分子内部三种运动形式：1、电子相对于原子核的运动2、原子核在其平衡位置附近的相对振动3、分子本身绕其重心的转动。

与这3种运动相对应，分子存在3种能级三、有机化合物的紫外-可见吸收产生的机制第10页，共69页，星期日，2025年，2月5日§分子具有三种不同能级：电子能级、振动能级和转动能级。§三种能级都是量子化的，且各自具有相应的能量。§分子的内能：电子能量Ee、振动能量Ev、转动能量Er

即Ｅ＝Ｅe+Ｅv+ＥrΔΕe>ΔΕv>ΔΕr第11页，共69页，星期日，2025年，2月5日（二）能级跃迁：电子能级间跃迁的同时，总伴随有振动和转动能级间的跃迁。即电子光谱中总包含有振动能级和转动能级间跃迁产生的若干谱线而呈现宽谱带。第12页，共69页，星期日，2025年，2月5日讨论：（1）转动能级间的能量差ΔΕr：0.005～0.050eV，跃迁产生吸收光谱位于远红外区。远红外光谱或分子转动光谱；（2）振动能级的能量差ΔΕv约为：0.05～１eV，跃迁产生的吸收光谱位于红外区，红外光谱或分子振动光谱；（3）电子能级的能量差ΔΕe较大1～20eV。电子跃迁产生的吸收光谱在紫外—可见光区，紫外—可见光谱或分子的电子光谱（4）吸收光谱的波长分布是由产生谱带的跃迁能级间的能量差所决定，反映了分子内部能级分布状况，是物质定性的依据。第13页，共69页，星期日，2025年，2月5日（三）有机化合物分子外层价电子跃迁——吸收光谱产生机制外层价电子：σ电子、π电子、n电子。外层电子吸收紫外或可见辐射后，就从基态向激发态(反键轨道)跃迁。主要有四种跃迁所需能量ΔΕ大小顺序为n→π＊

<π→π＊

<n→σ＊

<σ→σ＊

14第14页，共69页，星期日，2025年，2月5日A.σ→σ*

跃迁主要发生在真空紫外区（又称远紫外区，波长10nm~200nm范围），如饱和脂肪烃类物质，因其只能发生σ→σ*

跃迁，故在200~1000nm无吸收，长作溶剂。B.n→σ*

跃迁吸收波长仍然在（150~250nm）范围，因此在紫外区不易观察到这类跃迁。C.π→π*

跃迁吸收的波长较长，孤立的跃迁一般在170~400nm之间。D.

n→π*

跃迁一般在可见光区（400~

800nm），吸光强度较小。15第15页，共69页，星期日，2025年，2月5日四.常用术语1.生色团：.

指分子中能吸收紫外或可见光的基团，它实际上是一些具有不饱和键和含有孤对电子的基团。

同一个化合物的数个生色团，若不共轭，则吸收光谱包含这些生色团原有的吸收带，且位置及强度相互影响不大。若彼此共轭体系，原来各自生色团的吸收带消失，同时出现新的吸收带，位置在较长的波长处，且吸收强度显著增加，这一现象称为生色团的共轭效应。16第16页，共69页，星期日，2025年，2月5日2.助色团：本身不产生吸收峰，但与生色团相连时，能使生色团的吸收峰向长波方向移动，且使其吸收强度增强的基团。例如OH、OR、NH2、SH、Cl、Br、I等3.红移和蓝移：因取代基的变更或溶剂的改变，使吸收带的最大吸收波长max向长波方向移动称为红移，向短波方向移动称为蓝移。4.增色效应和减色效应：最大吸收带的摩尔吸光系数max增加时称为增色效应;反之称为减色效应。5.强带和弱带：

max104的吸收带称为强带；

max103的吸收带称为弱带。17第17页，共69页，星期日，2025年，2月5日1.共轭效应：共轭效应使共轭体系形成大

键，结果使各能级间的能量差减小，从而跃迁所需能量也就相应减小，因此共轭效应使吸收波长产生红移。共轭不饱和键越多，红移越明显，同时吸收强度也随之加强。五.影响紫外-可见吸收光谱的因素18第18页，共69页，星期日，2025年，2月5日2.溶剂效应：（1）溶剂极性对光谱精细结构的影响溶剂化限制了溶质分子的自由转动，使转动光谱表现不出来。如果溶剂的极性越大，溶剂与溶质分子间产生的相互作用就越强，溶质分子的振动也越受到限制，因而由振动而引起的精细结构也损失越多。19第19页，共69页，星期日，2025年，2月5日（2）溶剂极性对

*和n

*跃迁谱带的影响当溶剂极性增大时，由

*跃迁产生的吸收带发生红移，n

*跃迁产生的吸收带发生蓝移20第20页，共69页，星期日，2025年，2月5日3.溶剂的选择：尽量选用非极性溶剂或低极性溶剂；溶剂能很好地溶解被测物，且形成的溶液具有良好的化学和光化学稳定性；溶剂在样品的吸收光谱区无明显吸收。pH值的影响：如果化合物在不同的pH值下存在的型体不同，则其吸收峰的位置会随pH值的改变而改变。

21第21页，共69页，星期日，2025年，2月5日第二节光的吸收定律22第22页，共69页，星期日，2025年，2月5日（一）定义

布格(Bouguer)和朗伯(Lambert)先后于1729年和1760年阐明了光的吸收程度和吸收层厚度的关系。A∝b

1852年比耳(Beer)又提出了光的吸收程度和吸收物浓度之间也具有类似的关系。A∝c

二者的结合称为朗伯—比耳定律，其数学表达式为：A＝lg（I0/It）=εbc一、朗伯—比耳定律第23页，共69页，星期日，2025年，2月5日式中A：吸光度，描述溶液对光的吸收程度；

b：液层厚度(光程长度)，通常以cm为单位；c：溶液的物质的量浓度，单位mol·L－１；ε：摩尔吸光系数，单位L·mol－１·cm－１；透光度（透光率）T透过度T：描述入射光透过溶液的程度，

T=It/I0吸光度A与透光度T的关系:

A＝－lgTA＝lg（I0/It）=εbc第24页，共69页，星期日，2025年，2月5日朗伯—比耳定律是吸光光度法的理论基础和定量测定的依据。应用于各种光度法的吸收测量。

摩尔吸光系数ε在数值上等于浓度为1mol/L、液层厚度为1cm时该溶液在某一波长下的吸光度。第25页，共69页，星期日，2025年，2月5日（二）摩尔吸光系数ε的讨论1、吸光物质的ε在一定波长和溶剂条件下的特征常数，不随浓度c和光程长度b的改变而改变。在温度和波长等条件一定时，ε仅与吸光物质本身的性质有关，可作为定性鉴定的参数。第26页，共69页，星期日，2025年，2月5日2、同一吸光物质在不同波长下的ε值是不同的。在最大吸收波长λmax处的摩尔吸光系数，常以εmax表示。εmax表明了该吸光物质最大限度的吸光能力，也反映了光度法测定该物质可能达到的最大灵敏度。3、εmax越大表明该物质的吸光能力越强，用光度法测定该物质的灵敏度越高。ε>105：超高灵敏；ε=(6～10)×104：高灵敏；ε<2×104：不灵敏。第27页，共69页，星期日，2025年，2月5日（三）偏离朗伯－比耳定律的原因标准曲线法测定未知溶液的浓度时，发现：标准曲线常发生弯曲（尤其当溶液浓度较高时），这种现象称为对朗伯—比耳定律的偏离。引起这种偏离的因素（两大类）：一类是物理性因素，即仪器的非理想引起的；另一类是化学性因素。

第28页，共69页，星期日，2025年，2月5日1、物理性因素朗伯—比耳定律的前提条件之一是入射光为单色光。难以获得真正的纯单色光。分光光度计只能获得近乎单色的狭窄光带。复合光可导致对朗伯—比耳定律的正或负偏离。非单色光、杂散光、非平行入射光都会引起对朗伯—比耳定律的偏离，最主要的是非单色光作为入射光引起的偏离。第29页，共69页，星期日，2025年，2月5日在图上则表现为A—c曲线上部(高浓度区)弯曲愈严重。故朗伯—比耳定律只适用于稀溶液。为克服非单色光引起的偏离，首先应选择比较好的单色器。此外还应将入射波长选定在待测物质的最大吸收波长且吸收曲线较平坦处。第30页，共69页，星期日，2025年，2月5日2、化学性因素朗伯—比耳定律的假定：所有的吸光质点之间不发生相互作用。这种假定只有在稀溶液(c<10-2mol/L)时才基本符合。当溶液浓度c>10－2mol/L时，吸光质点间可能发生缔合等相互作用，直接影响了对光的吸收。故：朗伯—比耳定律只适用于稀溶液。溶液中存在着离解、聚合、互变异构、配合物的形成等化学平衡时。使吸光质点的浓度发生变化，影响吸光度。第31页，共69页，星期日，2025年，2月5日光源→单色器→吸收池→检测器→显示装置

1.光源在整个紫外光区或可见光谱区可以发射连续光谱，具有足够的辐射强度、较好的稳定性、较长的使用寿命。可见光区：钨灯作为光源，其辐射波长范围在320～2500nm。

紫外区：氢、氘灯。发射185～400nm的连续光谱。一、基本组成

第三节紫外－可见分光光度计

第32页，共69页，星期日，2025年，2月5日将光源发射的复合光分解成单色光并可从中选出任一波长单色光的光学系统。①入射狭缝：光源的光由此进入单色器；②准光装置：透镜或返射镜使入射光成为平行光束；③色散元件：将复合光分解成单色光；棱镜或光栅；④聚焦装置：透镜或凹面反射镜，将分光后所得单色光聚焦至出射狭缝；⑤出射狭缝。2．单色器第33页，共69页，星期日，2025年，2月5日3.样品室样品室放置各种类型的吸收池（比色皿）和相应的池架附件。吸收池主要有石英池和玻璃池两种。在紫外区须采用石英池，可见区一般用玻璃池。4.检测器利用光电效应将透过吸收池的光信号变成可测的电信号，常用的有光电池、光电管或光电倍增管。5.结果显示记录系统检流计、数字显示、微机进行仪器自动控制和结果处理。第34页，共69页，星期日，2025年，2月5日1．单光束型简单，价廉，适于在给定波长处测量吸光度或透光度，一般不能作全波段光谱扫描，要求光源和检测器具有很高的稳定性。

2．双光束型自动记录，快速全波段扫描。可消除光源不稳定、检测器灵敏度变化等因素的影响，特别适合于结构分析。仪器复杂，价格较高。二、分光光度计的类型第35页，共69页，星期日，2025年，2月5日将不同波长的两束单色光(λ1、λ2)快束交替通过同一吸收池而后到达检测器。产生交流信号。无需参比池。△

=1～2nm。两波长同时扫描即可获得导数光谱。3.双波长第36页，共69页，星期日，2025年，2月5日第四节化合物紫外光谱解析饱和烃只含有C－H和C－C单键，只有σ键电子，电子结合牢固，σ电子最不易激发，σ电子只有吸收远紫外光的能量才能发生σ→σ*跃迁。饱和烷烃的分子吸收光谱出现在远紫外区(吸收波长λ<150nm，只能被真空紫外分光光度计检测到)。如甲烷的λmax为125nm,乙烷λmax为135nm。所以在紫外吸收光谱分析中常用它作溶剂。如己烷，环己烷，庚烷，异辛烷，乙醇，甲醇等。一、饱和烃及其取代衍生物第37页，共69页，星期日，2025年，2月5日当饱和单键碳氢化合物中的H被O、N、S、卤素等杂原子取代时，这类原子中的n电子较σ电子易激发，电子跃迁所需能量减低，产生n→σ*跃迁，吸收波长向长波方向移动。如：甲烷的λmax为125nm（远紫外区），碘甲烷（CH3I）的吸收峰在150～210nm(σ→σ*跃迁)及259nm（n→σ*跃迁），CH2I2---292nm,CHI3---349nm。助色团，如-NH2，-NR2，-OH，-OR，-SR，-X等产生红移。

第38页，共69页，星期日，2025年，2月5日不饱和烃类分子中，含有σ键和π键电子，它可以产生σ→σ*跃迁和π→π*跃迁。π→π*跃迁所需能量较小，吸收波长处于远紫外区的近紫外端或近紫外区，摩尔吸光系数εmax一般在104L·mol－1·cm－1以上，属于强吸收。如乙烯π→π*跃迁的λmax为162nm，εmax为1×104L·mol-1·cm－1。二、不饱和烃及共轭烯烃第39页，共69页，星期日，2025年，2月5日共轭烯烃（两个双键被一个单键隔开），相间的π键与π键相互作用（π-π共轭效应），生成大π键，由于大π键各能级间的距离较近（键的平均化），电子易激发，电子跃迁所需能量降低，所以吸收峰向长波移动，吸收带的强度较强，且随着共轭体系的增加，吸收波长也随之增长。第40页，共69页，星期日，2025年，2月5日在共轭体系中，π→π*跃迁所产生的吸收带又称为K（Konjugation共轭作用）带。如:CH2=CH2λmax=162nm，εmax=1×104L·mol-1·cm－1;CH2=CH2－CH2=CH2λmax=217εmax=21000第41页，共69页，星期日，2025年，2月5日醛、酮中含有羰基(-C=O),存在σ、π、n三种电子，能实现四种跃迁：n→π*λmax=270～300nm，εmax=10～20L·mol-1·cm－1n→σ*180nm左右π→π*180nm左右σ→σ*n→π*跃迁所产生的吸收带又称为R（Radikal基团）带。三、羰基化合物第42页，共69页，星期日，2025年，2月5日当羰基双键与乙烯基双键共轭时，形成α，β-不饱和醛酮。由于共轭效应使乙烯基的π→π*跃迁吸收带红移到220～260nm成为K带，羰基双键n→π*跃迁的R带红移至310～330nm，K带强度高（εmax为104L·mol-1·cm－1左右），R带强度低（εmax<100L·mol-1·cm－1）。这一特征可以识别α，β-不饱和醛酮。第43页，共69页，星期日，2025年，2月5日羧酸及其衍生物也有n→π*跃迁吸收带，但其羰基上的碳原子直接连接含有未共用电子对的助色团，产生n→π共轭，导致π*轨道的能级提高，但这种共轭作用不能改变n轨道的能级，因此n→π*跃迁所需的能量变大，n→π*吸收带紫移至210nm左右。第44页，共69页，星期日，2025年，2月5日芳香族化合物为环状共轭体系。苯有三个吸收带，都是由π→π*跃迁所引起的。E1(三个乙烯基共轭发生的π→π*跃迁)带在180nm（εmax＝80000L·mol-1·cm－1），强吸收，因在远紫外区，实用意义不大。E2带在204nm（εmax＝8000L·mol-1·cm－1），中强吸收，在末端吸收范围，也不常用。四、苯及其衍生物第45页，共69页，星期日，2025年，2月5日B（Benzenoid）带在230～270nm（εmax＝200L·mol-1·cm－1）范围内有弱吸收，这是苯环的精细吸收带或苯带，在蒸气状态或非极性溶剂中精细结构极为明显。这是由于振动跃迁在基态电子跃迁上的叠加，在极性溶剂中精细结构消失。第46页，共69页，星期日，2025年，2月5日当苯环上有取代基时，苯的三个特征谱带都将发生显著的变化，其中影响较大的是E2带和B带。当苯环上引入-NH2、-OH、-CHO、-NO2等基团时，使B带简单化，向长波移动，同时吸收强度增加。这些基团上有n电子，可产生n→π*跃迁。如：硝基苯、苯甲醛的n→π*吸收带为330和328nm。第47页，共69页，星期日，2025年，2月5日稠环芳香烃，其紫外吸收光谱的最大特征是共轭体系增加，使吸收带红移，吸收强度增强。杂环化合物，与相应的碳环化合物相似，如吡啶与苯相似，喹啉与萘相似等。杂环化合物还有n→π*吸收带。吡啶在非极性溶剂中吸收带出现在270nm处（εmax＝450L·mol-1·cm－1）。

第48页，共69页，星期日，2025年，2月5日金属离子与配位体反应生成配合物的颜色一般不同于游离金属离子(水合离子)和配位体本身的颜色。金属配合物的生色机理主要有三种类型：⑴配位体微扰的金属离子d一d电子跃迁和f-f电子跃迁，摩尔吸收系数ε很小，对定量分析意义不大。五．金属配合物的紫外—可见吸收光谱第49页，共69页，星期日，2025年，2月5日⑵金属离子微扰的配位体内电子跃迁金属离子的微扰，将引起配位体吸收波长和强度的变化。变化与成键性质有关，若静电引力结合，变化一般很小。若共价键和配位键结合，则变化非常明显。⑶电荷转移吸收光谱在分光光度法中具有重要意义。第50页，共69页，星期日，2025年，2月5日电荷转移吸收光谱当吸收紫外可见辐射后，分子中原定域在金属M轨道上电荷的转移到配位体L的轨道，或按相反方向转移，这种跃迁称为电荷转移跃迁，所产生的吸收光谱称为荷移光谱。电荷转移跃迁本质上属于分子内氧化还原反应，因此呈现荷移光谱的必要条件是构成分子的二组分，一个为电子给予体，另一个应为电子接受体。第51页，共69页，星期日，2025年，2月5日电荷转移跃迁在跃迁选律上属于允许跃迁，其摩尔吸光系数一般都较大(104左右)，适宜于微量金属的检出和测定。电荷转移跃迁在紫外区或可见光区呈现荷移光谱，荷移光谱的最大吸收波长及吸收强度与电荷转移的难易程度有关。例：Fe3＋与SCN－形成血红色配合物，在490nm处有强吸收峰。其实质是发生了如下反应：[Fe3＋SCN－]＋hν=[FeSCN]2＋

第52页，共69页，星期日，2025年，2月5日溶剂的极性对溶质吸收峰的波长、强度和形状都有影响。（1）当溶剂的极性由非极性改变到极性时，精细结构消失，吸收带变向平滑。（2）改变溶剂的极性，使吸收带的λmax发生变化：当溶剂的极性增大时，由n→π*跃迁产生的吸收带发生紫移，而由π→π*跃迁产生的吸收带发生红移。由于未成键电子对的溶剂化作用增加，降低了n轨道的能量，使n→π*跃迁紫移。所以在测定紫外吸收光谱数据时，应注明所使用的溶剂。六、溶剂对电子光谱的影响第53页，共69页，星期日，2025年，2月5日（3）溶剂选择的原则：①尽量选用低极性溶剂；②能很好地溶解被测物，并且形成的溶液具有良好的化学和光化学稳定性；③溶剂在样品的吸收光谱区无明显的吸收。第54页，共69页，星期日，2025年，2月5日第五节紫外－可见吸收光谱法的应用

一、有机化合物紫外光谱解析了解共轭程度、空间效应、氢键等；可对饱和与不饱和化合物、异构体及构象进行判别。

紫外—可见吸收光谱中有机物发色体系信息分析的一般规律是：⑴若在200～750nm波长范围内无吸收峰，则可能是直链烷烃、环烷烃、饱和脂肪族化合物或仅含一个双键的烯烃等。第55页，共69页，星期日，2025年，2月5日⑵若在270～350nm波长范围内有低强度吸收峰(ε＝10～100L·mol-1·cm-1),（n→π跃迁），则可能含有一个简单非共轭且含有n电子的生色团，如羰基。⑶若在2５0～300nm波长范围内有中等强度的吸收峰则可能含苯环。

⑷若在210～250nm波长范围内有强吸收峰，则可能含有2个共轭双键；若在260～300nm波长范围内有强吸收峰，则说明该有机物含有3个或3个以上共轭双键。⑸若该有机物的吸收峰延伸至可见光区，则该有机物可能是长链共轭或稠环化合物。第56页，共69页，星期日，2025年，2月5日1．定性方法利用紫外－可见分光光度法确定未知不饱和化合物结构的结构骨架时，一般有两种方法：（1）比较吸收光谱曲线：（2）用经验规则计算最大吸收波长λmax，然后与实测值比较。

二、定性分析57第57页，共69页，星期日，2025年，2月5日紫外光谱曲线的形状、吸收峰的数目以及最大吸收波长的位置和相应的摩尔吸收系数，是进行定性鉴定的依据。其中λmax和相应εmax的是定性的主要参数。比较法是在相同的测定条件下，比较未知物与已知标准物的吸收光谱曲线，如果他们的吸收光谱曲线完全等同，则可以认为待测试样与已知化合物有相同的生色团。可以借助前人汇编的以实验结果为基础的各种有机化合物的紫外可见光谱标准谱图或有关电子光谱数据表。第58页，共69页，星期日，2025年，2月5日2．计算不饱和有机化合物吸收波长的经验规则当采用物理和化学方法判断某化合物的几种可能结构时，可用经验规则计算λmax并与实验值进行比较，然后确认物质的结构。常用的经验规则是由伍德沃德提出的计算共轭二烯、多烯烃及共轭烯酮类化合物π→π*跃迁λmax的伍德沃德（Woodword）规则。计算时，首先从母体得到一个最大吸收的基数，然后对连接在母体π电子体系上的不同取代基以及其它结构因素加以修正。第59页，共69页，星期日，2025年，2月5日采用紫外光谱法，可以确定一些化合物的构型和构象。一般，顺式异构体的最大吸收波长比反式异构体为小，因此有可能用紫外光谱法进行区别。采用紫外光谱法，可以测定某些化合物的互变异构现象。采用紫外光谱法，还可以进行化合物纯度的检验。如果某一化合物在紫外光区没有吸收峰，而其中的杂质有较强的吸收峰，就可以通过绘制试样的紫外吸收光谱图的方法来检出该化合物中的痕量杂质。

三、有机化合物构型的确定第60页，共69页，星期日，2025年，2月5日如：甲醇或乙醇中的杂质苯，苯的λmax为256nm的B吸收带，而甲醇或乙醇无吸收；CCl4中有无CS2杂质，CS2在318nm处有吸收峰。如果某一化合物在紫外光区有较强的吸收峰，可用摩尔吸光系数来检查其纯度。如：菲的氯仿溶液在296nm有强吸收（lgεmax=4.10），用某种方法精制的菲，测得其lgεmax比标准值低10％，这说明精制品的菲含量只有90％，其余的很可能是蒽等杂质。第61页，共69页，星期日，2025年，2月5日1．普通分光光度法（1）单组分的测定通常采用A-C标准曲线法定量测定。（2）多组分的同时测定⑴若各组分的吸收曲线互不重叠，则可在各自最大吸收波长处分别进行测定。这本质上与单组分测定没有区别。

四、定量分析第62页，共69页，星期日，2025年，2月5日

⑵若各组分的吸收曲线互有重叠，则可根据吸光度的加合性求解联立方程组得出各组分的含量。