生物达标训练：专题课题血红蛋白的提取和分离

学必求其心得，业必贵于专精学必求其心得，业必贵于专精学必求其心得，业必贵于专精更上一层楼基础•巩固1。在蛋白质的提取和分离中,对于样品的处理过程的分析正确的是()A.洗涤时离心速度过高，时间过长，白细胞等会沉淀，达不到分离的效果B.洗涤红细胞的目的是除去血浆中的葡萄糖、无机盐C。洗涤过程中用0.1％的生理盐水D。透析的目的是去除样品中相对分子质量较大的杂质解析：洗涤红细胞的目的是去除表面的蛋白质，过程中要用0。9%的生理盐水,而透析的目的是去除样品中相对分子质量较小的杂质.答案：A2。蛋白质的各种特性的差异,可以用来分离不同种的蛋白质，下列正确的是（)A。分子的大小、形状和溶解度B.所带电荷的性质和多少、吸附性质C.对其他分子的亲和力D。以上三项都是解析：本题考查的是蛋白质分离的原理,可根据分子的大小、形状和溶解度、所带电荷的性质和多少、吸附性质以及对其他分子的亲和力来分开.答案：D3。蛋白质的提取和分离一般分为四步，符合要求的一项是(）A.粗分离→样品处理→纯化→纯度鉴定B。粗分离→纯化→样品处理→纯度鉴定C.样品处理→粗分离→纯化→纯度鉴定D.纯化→纯度鉴定→粗分离→样品处理答案：B4。将新鲜的血液加入少量柠檬酸钠，静置一段时间后，会观察到（）A.容器上方是血清，下方是血块B。容器上方是血浆,下方是血块C。容器上方是血浆，下方是血细胞D。容器上方是血清，下方是血细胞解析:柠檬酸钠有防止凝血的作用，在重力作用下沉积,血细胞密度大，沉积到下方。答案:C5。下列试剂可用于血红蛋白释放的是（）①0.9%的生理盐水②甲苯③磷酸缓冲液④蒸馏水⑤柠檬酸钠A.②④ B。①④ C。④⑤ D。①③答案：A6.下列对凝胶电泳的相关认识，错误的是(）A。蛋白质在聚丙烯酰胺凝胶电泳中的迁移率只取决于分子的大小B.蛋白质在SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳中的迁移率完全取决于分子的大小C。SDS—聚丙烯酰胺凝胶电泳不仅用于蛋白质相对分子质量的测定，还可用于蛋白质混合组分的分离D。凝胶中加入SDS可以消除净电荷对迁移率的影响解析：电泳技术就是在电场的作用下,利用待分离样品中各种分子的带电性质以及分子本身大小、形状等性质的差异，使带电分子产生不同的迁移速度，而SDS聚丙烯酰胺凝胶电泳测定蛋白质分子量，是根据大多数蛋白质都能与阳离子表面活性剂十二烷基硫酸钠（SDS）按重量比结合成复合物，使蛋白质分子所带的负电荷远远超过天然蛋白质分子的负电荷，消除了不同蛋白质分子的电荷效应，使蛋白质分子相对迁移率(R'〈［m］〉)的大小完全取决于分子量的高低。答案：A综合•应用7。凝胶色谱法洗脱时加入磷酸缓冲液，下列说法不正确的是（）A。在一定范围内，能对抗外来大量强酸、强碱对pH的影响,维持pH基本不变B。选用磷酸缓冲液(pH=7.0)可用Na2HPO4和NaH2PO4按相应配比配制C.缓冲溶液通常是由一或两种化合物（缓冲剂）溶解于水中制得的，调节缓冲剂的配比就可制得不同pH范围的缓冲液D.缓冲溶液广泛应用于生化实验、微生物培养、组织切片和细菌的染色等的研究解析：缓冲溶液能够抵制外界加入少量酸和碱的影响,不可能对大量酸和碱起缓冲作用。答案:A8。对血红蛋白研究的结果表明，血红蛋白实际上是由珠蛋白、原卟啉和二价铁离子(Fe2+）所组成的结合蛋白质。有4条肽链各结合一个辅基即血红素，O2即结合于Fe2+上,血红蛋白与氧疏松结合形成氧合血红蛋白(HbO2)，这种氧合作用于氧分压高时容易进行，于氧分压低时易于解离。红细胞结合和携带O2的过程并不影响二价铁离子，即不使之氧化为三价铁离子;Fe3+无携带O2能力。CO与Hb的亲和力大于O2，结合成HbCO后不能重新分离致使Hb丧失运输O2和CO2的机能，此过程称为一氧化碳中毒即煤气中毒。（1)用凝胶色谱法分离出血红蛋白时，待__________接近色谱柱底端时，才用试管收集.血红蛋白因含__________而呈现红色。（2)要使血红蛋白从红细胞中释放出来,可选用______________________________的方法。（3）红细胞具有运输氧的功能，是因为具有______________________________的特性.(4）亚硝酸盐为强氧化剂，进入人体后，可使血红蛋白失去运输氧的功能,导致组织缺氧，其可能的原因是______________________________.答案:(1）红色区带血红素（2）将红细胞置于蒸馏水中,加40%体积的甲苯，并搅拌使之破裂（3）红细胞中的血红蛋白与氧在氧分压高时容易结合,在氧分压低时又容易分离（4）亚硝酸盐可使血中低铁血红蛋白氧化成高铁血红蛋白9.以下是有关DNA粗提取实验的阅读材料：A.核酸极不稳定，在较为剧烈的化学、物理因素和酶的作用下很容易降解。在制备DNA时要加入DNA酶(水解DNA的酶）的抑制剂柠檬酸钠，以除去Mg，防止DNA酶的激活.B.核酸中的DNA和RNA在生物体内均以核蛋白（由核酸和蛋白质组成)的形式存在，DNA核蛋白在1mol·L—1的NaCl溶液中溶解度很大，但在0.14mol·L—1NaCl溶液中的溶解度很低；而RNA核蛋白溶于0。14mol·L-1NaCl溶液。C.用苯酚处理，可使蛋白质变性，且留在苯酚层内；在DNA溶液中加入2.5倍体积,浓度为95％的酒精，可将DNA分离出来.此时DNA十分黏稠，可用玻棒搅成团取出。D.DNA在强酸环境下，水解产生脱氧核糖等小分子物质，它与二苯胺酸性溶液反应，能生成蓝色化合物。E.实验材料与器械：柠檬酸钠溶液、石英砂、0.14mol·L-1的NaCl溶液、1mol·L—1的NaCl溶液、蒸馏水、苯酚、95％酒精、二苯胺试剂、浓硫酸、花椰菜、研钵、烧杯、漏斗、玻棒、量筒、石棉网、酒精灯、吸管、试管等.F。实验步骤：研磨得匀浆→过滤得滤液→滤液稀释6倍→离心处理得沉淀物→沉淀物再溶解→加苯酚静置后去上清液→提取出DNA→DNA鉴定请阅读以上材料回答下列问题:(1）研磨时,取10g花椰菜，加适量的石英砂和____________________、____________________.(2)将滤液稀释6倍，其目的是________________________________________。(3）取沉淀物，置于2mL1mol·L-1的NaCl溶液中，使DNA核蛋白再次溶解，再加2mL苯酚充分震荡后静止,待其分层后弃其上层的苯酚。该步骤的目的是除去__________。(4）如何将剩余溶液中的DNA提取出来?_______________________________________________________________________________.(5)如何证明提取物确实是DNA分子？___________________________________________________________________________